CC BY
16
ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА
УДК 619:615.32:619:612.017.1-052.2
Влияние «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета телят в критический период выращивания
Сисягин Павел Николаевич, доктор вет. наук, чл.-корр. РАН, директор института, Сисягина Елена Павловна, доктор вет. наук, вед. научный сотрудник, Реджепова Гуля Реджеповна, кандидат вет. наук, вед. научный сотрудник, Убитина Ирина Васильевна, ведущий инженер-биохимик ФГБНУ «НИВИ НЗ России», г. Нижний Новгород, Россия
E-mail: nivinzrf@yandex.ru
Смешанные вирусно-бактериальные респираторные инфекции телят на сегодняшний день остаются одной из чрезвычайно актуальных проблем ветеринарной медицины. В современных условиях ведения животноводства резко возрос уровень заболеваемости телят респираторными инфекциями, достигающий 90-100%. В 20-30-дневном возрасте у телят наступает критический период, обусловленный расходованием и естественным разрушением колостральных факторов защиты при недостаточности собственного иммунопоэза В этот период осуществляется смена кормления и перевод телят от индивидуального к групповому содержанию, что приводит к стрессовому состоянию. Респираторные инфекции телят чаще протекают по типу микст-инфекции с участием различных сочетаний вирусов, в большинстве случаев, осложняющихся бактериальными возбудителями. Изучено влияние лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета у клинически здоровых телят в критический период выращивания в ОПХ "Центральное" Кстовского района Нижегородской области. Установлено, что применение лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» в форме аэрозоля в дозах соответственно 4,0 (наиболее оптимальная для телят) и 5,0 мл/м3 помещения способствовало оптимизации исходно-сниженных иммунологических параметров клинически здоровых телят, характеризующихся повышением относительного числа Т- и В-лимфоцитов на 38, 32% и 45, 41% соответственно, абсолютного содержания Т- и В-лимфоцитов на 47 и 50%, функциональной активности нейтрофилов крови в спонтанном и индуцированном тестах на 23, 21% и 38, 18% соответственно, уровня иммуноглобулинов G - на 30 и 27%, M - на 22 и 11% соответственно, лизоцимной активности сыворотки крови на 73 и 64% в сравнении с фоновым исследованием. Таким образом, установлено стимулирующее влияние аэрозоля лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета у клинически здоровых телят в критический период их выращивания в условиях стационарного неблагополучия по смешанным вирусно-бактериальным респираторным инфекциям.
Ключевые слова: телята, смешанные вирусно-бактериальные респираторные инфекции, иммунодефицит, «Иммоветон-Аэро»
Смешанные вирусно-бактериальные респираторные инфекции телят на протяжении ряда десятилетий остаются основной причиной экономических потерь в животноводстве многих стран мира. Они проявляются преимущественно в первые три месяца после рождения, но массовые вспышки возникают среди телят 3045-дневного возраста. В 20-30-дневном возрасте у телят наступает критический период, обусловленный расходованием и естественным разрушением колостральных факторов защиты при недостаточности собственного иммунопоэза. В этот период осуществляется смена кормления и перевод телят от индивидуального содержания к групповому, что приводит к стрессовому состоянию. Респираторные инфекции телят чаще протекают по типу микст-инфекции с участием различных сочетаний вирусов, в большинстве случаев, осложняющихся бактериальными возбудителями.
Специфика сложившегося технологического цикла получения и выращивания молодняка, многочисленные стрессогенные факто-
ры, неадекватные условия содержания, кормления, а также постоянное иммуносупрессив-ное воздействие вирусных возбудителей препятствуют полноценному развитию иммунитета и приводят к формированию вторичных иммунодефицитных состояний. Развитие смешанных респираторных инфекций на фоне иммунологического дисбаланса неизменно приводит к различным осложнениям, повышающим уровень заболеваемости и летальности животных, что определяет перспективность проведения исследований, направленных на коррекцию дефектов иммунного ответа [1, 2, 3]. Несмотря на накопленный в последние десятилетия обширный арсенал иммуномоду-ляторов природного и синтетического происхождения, до сих пор актуальным остаётся вопрос изыскания и использования наиболее активных, экологически безопасных средств, сочетающих в себе как иммуномодулирую-щие, так и антимикробные свойства [4, 5].
Цель исследований - изучить влияние лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на
параметры иммунитета у клинически здоровых телят в критический период выращивания.
Материал и методы. Исследования проводили в условиях стационарно неблагополучного хозяйства (по данным Государственного бюджетного учреждения Нижегородской области "Облветлаборатория") по смешанным респираторным инфекциям телят (ОПХ "Центральное" Кстовского района Нижегородской области), где установлена этиологическая роль ассоциаций вирусов пара-гриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи - болезни слизистых, аденовирусов, респираторно-синцитиальных вирусов и бактериальной микрофлоры (пастереллы, протеи, сальмонеллы).
В опытах использовали лекарственную смесь «Иммоветон-Аэро», включающую кси-медон гидрохлорид и фитопрепарат фитадез. Ксимедон гидрохлорид обладает репаратив-ными, иммуностимулирующими и десенсибилизирующими свойствами, не обладает токсичностью, раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки, не оказывает отрицательного воздействия на репродуктивные функции животных.
Фитадез - разработанное нами экологи-чеки безопасное средство, представляющее собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси почек сосны, травы и соцветий эхинацеи пурпурной, корневищ и корней девясила в соотношении 2:1:1. Препарат обладает бактерицидным, антивирусным, противовоспалительным, иммуномодулирующим и антисептическим действиями, относится к нетоксичным препаратам, не обладает кумулятивными, эмбриотоксическими и аллергенными свойствами, совместим с химиотерапевти-ческими и биологическими средствами.
Изучение влияния лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета в зависимости от дозы определяли на 80 клинически здоровых телятах 20-30-дневного возраста. Подобранных по принципу аналогов телят распределили на четыре группы (3 опытные и 1 контрольная по 20 голов в каждой).
Для аэрозольной обработки телят готовили лекарственную смесь «Иммоветон-Аэро», содержащую 4,0 г ксимедона гидрохлорида в 100 мл 3,5% водного раствора фита-деза. Клинически здоровых телят всех опытных групп обрабатывали путем распыления лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» при 6 атм. в специально оборудованной герметичной камере (боксе) из расчёта 3,0, 4,0, 5,0 мл/м3 помещения трёхкратно с интервалом 3 дня при
экспозиции 40 минут. Животных контрольной группы обрабатывали аэрозолем 4% водного раствора ксимедона гидрохлорида из расчёта 4,0 мл/м3 помещения в том же режиме. Для получения высокодисперсных аэрозолей препаратов использовали сверхзвуковую аэрозольную форсунку САФ производительностью не менее 200 мл/мин при дисперсности генерируемого аэрозоля от 5 до 25 мкм. Обработку осуществляли при температуре воздуха 14°С и относительной влажности не ниже 70%. Стабильность аэрозолей достигали добавлением 10-20% стерильного глицерина или 10% глюкозы в порошке к общему объему рабочего раствора.
Взятие крови у подопытных животных (по 10 голов из каждой группы) для иммунологических исследований проводили до применения препаратов (фоновое исследование) и спустя 7-10 дней после завершения опытов. Влияние аэрозоля лекарственной смеси «Им-моветон-Аэро» на параметры иммунитета телят оценивали по относительному и абсолютному числу Т- и В-лимфоцитов крови по методу Н.И. Блинова [6], функциональной активности нейтрофилов крови (НСТ-тест) по методу М.Е. Виксмана и А.М. Маянского [7], уровню иммуноглобулинов отдельных изотипов (G и M) по методу Manchini [8], лизоцимной активности сыворотки крови по методу В.Г. До-рофейчук [9]. Статистическую обработку результатов исследований проводили по Н.А. Плохинскому [10].
Результаты и их обсуждение. Результаты исследований по определению влияния аэрозоля «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета клинически здоровых телят в зависимости от дозы представлены в таблице. Полученные данные свидетельствуют о стимулирующем влиянии аэрозоля лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на исходно-сниженные иммунологические показатели клинически здоровых телят в критический период выращивания. Анализ экспериментальных данных свидетельствует о том, что более выраженные позитивные изменения, характеризующие стимулирующий эффект на механизмы клеточного и гуморального звеньев иммунитета, установлены у телят второй и третьей опытных групп при использовании лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» в дозах 4,0 и 5,0 мл/м3 помещения. Так, относительное содержание Т- и В-лимфоцитов у телят данных групп увеличилось на 38, 32% и 45, 41% соответственно, абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов на 47 и 50%, функциональная активность нейтрофилов крови в спонтанном
и индуцированном тестах на 23, 21% и 38, 18% соответственно, уровень иммуноглобулинов О на 30 и 27%, иммуноглобулинов М - на 22 и 11% соответственно, лизоцимная активность сыворотки крови на 73 и 64% в сравнении с фоновым исследованием. Оптимальной следует считать дозу лекарственной смеси 4,0 мл/м3 помещения, поскольку повы-
шение дозы до 5,0 мл/м3 является экономически нецелесообразным из-за отсутствия достоверной разницы в показателях иммунного статуса у клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста. У животных контрольной группы отмечалось незначительное или недостоверное изменение данных иммунологических показателей.
Таблица
Влияние лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета клинически здоровых телят в зависимости от дозы (п = 10)
1-я опытная ±% 2-я опытная ± % 3-я опытная ± % Контрольная ± %
Т-лимфоциты, % 24,2±0,4 31,5±0,2* 30 24,5±0,5 33,9±0,7* 38 24,8±0,7 32,7 ±0,7* 32 24,4±0,4 27,9±0,8** 14
Т-лимфоциты 109/л 1,5±0,05 2,0±0,2* 33 1,5±0,06 2,2±0,07* 47 1,5±0,06 2,2±0,07* 47 1,4±0,04 1,7±0,08** 21
В-лимфоциты, % 6,6±0,2 8,5±0,6** 29 6,5±0,3 9,4±0,6* 45 6,8±0,3 9,6±0,5* 41 6,6±0,4 7,5 ±0,4 -
В-лимфоциты 109/л 0,4±0,02 0,6±0,03* 50 0,4±0,02 0,6±0,04* 50 0,4±0,02 0,6±0,05*** 50 0,4±0,02 0,5±0,03*** 25
Функциональная активность нейтро-филов крови, % - спонтанный тест 7,7 ±0,5 9,0± 0,4 7,5±0,4 9,2± 0,4** 23 7,6±0,4 9,2±0,4*** 21 7,6±0,5 7,8± 0,4
- индуцированный тест 21,1± 0,8 26,7± 0,7* 27 20,9±0,7 28,9±0,8* 38 20,8±0,8 28,7± 0,6* 38 20,9±0,7 24,7±0,8 ** 18
Иммуноглобулины, мг/мл - в 14,0 ±0,1 17,6 ±0,3* 14,0±0,1 18,2± 0,2* 30 14,0±0,1 17,8 ±0,4* 27 14,0±0,1 15,8±0,4* 13
- М 1,0±0,1 1,0±0,2 - 0,9±0,02 1,1 ±0,01** 22 1,0±0,03 1,1±0,02*** 11 0,9±0,1 1,0 ±0,1 -
Лизоцимная активность сыворотки крови, % 2,2±0,1 2,8±0,2*** 27 2,2±0,1 3,8± 0,2* 73 2,2±0,2 3,6±0,2* 64 2,2±0,1 2,5±0,1 -
Примечание: в числителе - фоновые исследования, в знаменателе - показатели после применения препаратов. Достоверность различий по сравнению с фоновыми исследованиями * - р < 0,001, **р < 0,01, ***р < 0,02
Заключение. В результате проведённых исследований установлено, что применение лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» в форме аэрозоля из расчёта 4,0 (наиболее оптимальной для телят) и 5,0 мл/м3 помещения способствовало оптимизации исходно-сниженных иммунологических параметров клинически здоровых телят, характеризующихся повышением относительного абсолютного содержания Т- и В-лимфоцитов, функциональной активности нейтрофилов крови, уровня иммуноглобулинов О и М, лизоцимной активности сыворотки крови. Полученные данные свидетельствуют о стимулирующем влиянии аэрозоля лекарственной смеси «Иммоветон-Аэро» на параметры иммунитета у клинически здоровых телят в критический период их выращивания.
Список литературы
1. Сисягин П.Н., Сисягина Е.П., Реджепова Г.Р., Юлдашов Ю.Б., Убитина И.В. Иммунный статус у клинически здоровых и больных смешанными респираторными болезнями телят в зависимости от ассоциации возбудителей // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2012. № 9. С. 54-59.
2. Фёдоров Ю.Н. Клинико-иммунологическая характеристика и иммунокоррекция иммунодефицитов животных // Ветеринария. 2013. № 2. С. 3-8.
3. Лисицын В.В. Проблемы респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота и пути их решения // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2010. № 5. С. 12-16.
4. Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Сисягина Е.П., Никулин Д.М., Юлдашов Ю.Б. Иммунологический статус телят при респираторных болезнях и способ его коррекции // Аграрная наука Евро-Северо-Востока. 2011. № 1 (20). С. 62-66.
5. Андреева А., Якупова Г.Сочетанное применение антимикробных и иммуностимулирующих пре-
паратов при респираторной патологии телят // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2011. № 11. С. 42-44.
6. Блинов Н.И. Методы выявления и идентификации Т- и В-лимфоцитов // Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии /под. ред. Кондра-хина. М., 1985. С. 215-222.
7. Виксман М.Е., Маянский А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов крови человека по реакции восстановления нитроси-него тетразолия // Методические рекомендации.
Казань, 1979. 13 с.
8. Manchini G., Carbonara A.O., Hereman I.P. Immunochemical guantitation of antigens by single radial Immunodiffusion // Immunochemistry. 1965. V 2. pp. 235-254.
9. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом // Лабораторное дело. 1969. № 1. С. 15-18.
10. Плохинский Н.А. Руководство по биометрии для зоотехников. М.: Колос, 1969. 256 с.
Influence of "Immoveton-aero" on parameters of immunity of calves at the critical period of calf rearing
Sisyagin P.N., DSc in veterinary, corresponding member of the RAS, director, Sisyagina E.P., DSc in veterinary, leading researcher,
Redshepova G.R., PhD in veterinary, leading researcher, Ubitina I.V., leading biochemist Research Veterinary Institute of Non-Chernozem Zone of Russian Federation, Nizhny Novgorod, Russia
Mixed viral-bacterial respiratory infections in calves remain a most actual problem for the veterinary medicine. Conditions due to modern livestock management practices cause rise of morbidity for respiratory infections in calves to 90-100%. In 20-30- day old calves there is a critical period because of expenditure and destruction of natural colostral protective factors in the background of insufficiency of own immunogenesis. In this period the feeding changes and the calves are transferred from individual to group housing. All these changes cause stress. Respiratory infections occur and develop as mixed infections associated with different combinations of viruses complicated by bacterial agents. The effect of drug mix-ture"Immoveton-Aero" on immunological parameters in clinically healthy calves in the critical period of calf-rearing was evaluated. Use of this drug mixture in the form of an aerosol spray at the doses of 4,0 and 5,0 ml/m3 was found to optimize initially reduced immunological parameters in healthy calves characterized by increase of relative number of T- and B-lymphocytes by 38,32% and 45,41% respectively, of absolute number of T- and B-lymphocytes by 47 and 50%, of functional activity of blood neutrophils in spontaneous and induced tests by 23, 21% and 38,18% respectively, of levels of IgG by 30 and 27%, of IgM by 22 and 11% respectively, of lysozyme activity of blood serum by 73 and 64% when compared with the background study. The stimulating influence of drug mixture in the form of an aerosol spray on immunological parameters in clinically healthy calves in the critic period of their rearing in farms with high prevalence of mixed respiratory infections was revealed and confirmed.
Key words: calves, mixed viral-bacterial respiratory infections, immunodeficiency, "Immovetn-Aero "
References
1. Sisyagin P.N., Sisyagina E.P., Redzhepova G.R., Yuldashov Yu.B., Ubitina I.V. Immunnyy status u klinicheski zdorovykh i bol'nykh sme-shannymi respiratornymi boleznyami telyat v zavisimosti ot asso-tsiatsii vozbuditeley. [Immune status in clinically healthy calves and calves with mixed respiratory diseases depending on pathogen associations]. Veterinariya sel'sko-khozyaystvennykh zhivotnykh. 2012. no. 9. pp. 54-59.
2. Fedorov Yu.N. Kliniko-immunologicheskaya kharakteristika i immunokorrektsiya immunodefitsitov zhivotnykh. [Clinical and immunological characteristics and immune correction of immunodeficiency in animals]. Veterinariya. 2013. no.2. pp. 3-8.
3. Lisitsyn V.V. Problemy respiratornykh bolez-ney molodnyaka krupnogo rogatogo skota i puti ikh resheniya. [Problems of respiratory diseases in young cattle and ways of its solution]. Veterinariya sel'sko-khozyaystvennykh zhivotnykh. 2010. no.5. pp. 12-16.
4. Sisyagin P.N., Redzhepova G.R., Sisyagina E.P., Nikulin D.M., Yuldashov Yu.B. Immunologicheskiy status telyat pri respiratornykh boleznyakh i sposob ego korrektsii. [Immune status of calves at respiratory diseases and way of its correction]. Agrarnaya nauka Evro-Severo-Vostoka. 2011. no.1 (20). pp. 62-66.
5. Andreeva A., Yakupova G. Sochetannoe primenenie antimikrobnykh i immunostimuliruyushchikh
preparatov pri respiratornoy patologii telyat. [Combined use of antimicrobic drugs and immunostimulants at respiratory diseases in calves]. Veterinariya sel'sko-khozyaystvennykh zhivotnykh. 2011. no.11. pp. 42-44.
6. Blinov N.I. Metody vyyavleniya i identifikatsii T- i V-limfotsitov. [Methods of detection and identification of T- and B-lymphocytes]. Clinical laboratory diagnostics in veterinary medicine. [pod. red. Kondrakhina]. Moskva, 1985. S. 215-222.
7. Viksman M.E., Mayanskiy A.N. Sposob otsenki funktsional'noy aktivnosti neytrofilov krovi cheloveka po reaktsii vosstanovleniya nitrosinego tetrazoliya. [Method of estimating of functional activity of human blood neu-trophils in the reaction with nitroblue tetrazolium reduction]. Methodical recommendations. Kazan', 1979. 13 p.
8. Manchini G., Carbonara A.O., Hereman I.P. Immunochemical guantitation of antigens by single radial Immunodiffusion // Immunochemistry. 1965. V 2. pp. 235-254.
9. Dorofeychuk V.G. Opredelenie aktivnosti lizotsima nefelomet-richeskim metodom. [Estimation of lysozyme activity by nephelometric method]. Laboratornoe delo. 1969. no.1. pp. 15-18.
10. Plokhinskiy N.A. Rukovodstvo po biometrii dlya zootekhnikov. [Guide on biometrics for livestock specialists]. Moscow: Kolos, 1969. 256 p.
