CC BY
87
третьих родов (прижизненно генетическое исследование не проводилось). Необходимо отметить, что, несмотря на характерные фенотипические признаки синдрома и пороки развития внутренних органов, решающим фактором в диагностике хромосомных болезней является цитогенетическое исследование, которое необходимо, прежде всего, для прогноза здоровья будущих детей.
литература
1. Асанов А.Ю. Основы генетики и наследственные нарушения развития у детей / А.Ю. Асанов, Н.С. Демикова, С.А. Морозов. — М.: Академия, 2005. — С. 224.
2. Литвицкий П.Ф. Патофизиология / П.Ф. Литвицкий. — М.: Медицина, 1997. — С. 20.
И.К. Иванова, К.С. Лоншакова, Л.Н. Шантанова
влияние иммобилизационного стресса на гистологическую структуру надпочечников белых крыс
Бурятский государственный университет (Улан-Удэ)
Надпочечники являются одним из ведущих звеньев гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной системы (ГГАС), отвечающей за поддержание гомеостаза организма и играющей важную роль в адаптации организма к изменениям среды. Исследование микростроения надпочечников белых крыс при иммобилизационном стрессе разной экспозиции дает возможность проследить за изменениями, происходящими в этом органе в результате сильных внешних воздействий.
Модель иммобилизационного стресса воспроизводили общепринятым методом путем фиксации животных в положении лежа на спине в течение 6, 12 и 24 ч. «Тантон» вводили внутрижелудочно в объеме 3,0 мл/кг многократно в течение 7 дней 1 раз в день за 1 ч до приема пищи. Животным контрольной группы вводили в эквивалентном объеме дистиллированную воду по аналогичной схеме. На 8-е сутки эксперимента крыс подвергали иммобилизационному стрессу, после чего животных декапитировали под легким эфирным наркозом. Правый надпочечник фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Депарафинированные гистологические срезы органа для оценки морфологической картины окрашивали по общепринятой методике гематоксилин-эозином. В замороженных срезах органов, полученных на микротом-криостате МК-25, выявляли содержание нейтральных жиров суданом черным «В» по Беренбауму. Об угнетающем действии иммобилизационного стресса судили по результатам гистологического исследования структуры надпочечника. Достоверность различий оценивали с помощью ^критерия Стьюдента.
При микроскопическом исследовании надпочечников крыс, подвергнутых 6-часовому иммобилизационному стрессу, обнаружили полнокровие всех звеньев кровеносного русла, особенно резко выраженное в клубочковой зоне. Вокруг мелких артерий и капилляров наблюдали мелкие диапедезные кровоизлияния. В капсуле, покрывающей клубочковый слой, наблюдали разрыхление ее с плазматическим пропитыванием и набуханием. Кроме того, отмечали выраженные изменения архитектоники клеток клубочковой зоны. Клетки дискомплексированы, расположены беспорядочно, тогда как в норме они образуют гроздевидные образования. Ядра клеток вместо овально-круглой формы принимают угловатый ориентир, выражен полиморфизм клеток. В пучковой зоне выявлялись дистрофические изменения, вакуолизация и дискомплексация клеток.
Сетчатая зона имела компактное строение, с явлениями выраженного полнокровия, отека разной степени.
Результаты морфометрического анализа показали, что ширина пучковой зоны под влиянием 6-часового иммобилизационного стресса увеличилась на 13 % по сравнению с нормой (табл. 1).
Таблица 1
Влияние 6-часового иммобилизационного стресса на морфометрические параметры коры надпочечников
белых крыс и их коррекция фитосредством « Тантон»
Группы животных п Клубочковая зона, мкм Пучковая зона, мкм Сетчатая зона, мкм
Интактная 10 38,6 ± 2,4 354,5 ± 15,3 228,6 ± 10,5
Контрольная (стресс + Н20) 9 40,2 ± 2,9 400,9 ± 21,2* 234,3 ± 17,8
примечание: здесь и далее * - значения достоверны по сравнению с данными у животных интактной группы при р < 0,05.
Как видно из таблицы 1, в изменениях, происходящих при 6-часовой иммобилизации животных, обращает на себя внимание гипертрофия клеток пучковой зоны.
При оценке морфологических критериев состояния функциональной активности коры степень насыщения коры надпочечников липидами имеет существенное значение. Результаты изучения изменений коры, а также заполнения ее клеток липидами, показали, что 6-часовой иммобилизационный стресс приводил к обеднению коры надпочечников липидами.
При 12-часовом иммобилизационном стрессе гипертрофии подвергались пучковая и сетчатая зоны коры надпочечника, о чем свидетельствует увеличение этих зон соответственно на 20 и 17 % по сравнению с показателями интактной группы животных (табл. 2).
Таблица 2
Влияние 12-часового иммобилизационного стресса на морфометрические параметры коры надпочечников
белых крыс их коррекция фитосредством «Тантон»
Группы животных n Клубочковая зона, мкм Пучковая зона, мкм Сетчатая зона, мкм
Интактная 10 38,6 ± 2,4 354,5 ± 15,3 228,6 ± 10,5
Контрольная (стресс + Н20) 8 41,2 ± 2,2 420,6 ± 20,6* 280,4 ± 14,4*
Гипертрофия, в основном, осуществлялась за счет усиления кровенаполнения, отека и увеличения паренхиматозной массы коркового вещества.
В пучковой зоне в результате отечных явлений и резкого расширения кровеносных капилляров возникала дискомплексация рядов клеток. В сетчатой зоне кровеносные капилляры формировали крупные магистральные капилляры. Сгущение капиллярной решетки в сетчатой зоне можно отнести на счет увеличения связи капилляров этого участка с пучковой зоной и мозговым веществом.
Окраска срезов надпочечников на жиры выявляла во всех сериях опытов однотипную картину, свидетельствовавшую о значительном снижении содержания липидов в результате стрессорного воздействия. При 12-часовом стрессе жир определялся в виде мелких гранул, неравномерно распределенных в цитоплазме клеток. В то же время, окраска суданом черным выявляла большое количество суданофильных включений в клетках пучковой и сетчатой зон.
При 24-часовом иммобилизационном стрессе в надпочечниках крыс наблюдали дальнейшую гипертрофию корковой зоны. Границы перехода одной зоны в другую становятся трудно различимыми. При этом ширина пучковой и сетчатой зон увеличилась соответственно в среднем на 30 и 23 % по сравнению с таковыми в контрольной группе животных (табл. 3)
Таблица 3
Влияние 24-часового иммобилизационного стресса на морфометрические параметры коры надпочечников
белых крыс и их коррекция фитосредством «Тантон»
Группы животных n Клубочковая зона, мкм Пучковая зона, мкм Сетчатая зона, мкм
Интактная 10 38,6 ± 2,4 354,5 ± 15,3 228,6 ± 10,5
Контрольная (стресс + Н20) 9 42,0 ± 2,1 460,7 ± 18,6* 282,0 ± 17,5*
В пучковой и сетчатой зонах наряду с дистрофическими изменениями наблюдалась картина, характерная для стресс-реакции, главным образом в виде очагового или полного исчезновения липидов. В пучковой зоне сохранялись небольшие тяжи с мелкокапельной и пылевидной концентрацией жировых включений.
Морфология сетчатой зоны при 24-часовом иммобилизационном стрессе отличалась выраженной разреженностью клеток. Среди них одни клетки содержали небольшое темное ядро и ацидофильную цитоплазму, что свидетельствует, по-видимому, о дегенерации клеток. У других ядро и цитоплазма выглядели более светлыми. Некоторые клетки этой зоны содержали пигмент липофусцин.
Клетки мозгового слоя образуют как бы гроздья и неправильной формы тяжи, располагаясь вокруг кровеносных сосудов. При 24-часовом стрессорном воздействии наблюдались группы клеток с дистрофическими изменениями, некробиозами. Часто капилляры сливались между собой в результате нарушения стенок, образуя диапедезные кровоизлияния.
Таким образом, при сравнительно непродолжительном стрессорном воздействии (6, 12 и 24 часа) наблюдали изменения паренхимы надпочечников у крыс. Структурные нарушения сопровождались дистрофическими изменениями и дискомплексацией, обеднением клеток коры липидами.
