CC BY
15
УДК 577.118:577.114.7+577.151.03 © Коллектив авторов, 2018
О.А. Князева1, С.И. Уразаева1, И.Г. Конкина2, Ю.И. Муринов2 ВЛИЯНИЕ ГЛЮКОНАТОВ 3D-МЕТАЛЛОВ НА АКТИВНОСТЬ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ И ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ INVIVO ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ИММУНОДЕФИЦИТЕ
ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет»
Минздрава России, г. Уфа 2 ОСП ФГБНУ «Уфимский институт химии» УфИЦРАН, г. Уфа
Проведен сравнительный анализ показателей оксидантной системы в гомогенате печени трех групп лабораторных мышей. Первая -интактные, вторая - с иммунодефицитом, индуцированным путем внутрибрюшинного введения цитоста-тикациклофосфамида, третья - с иммунодефицитом на фоне введения глюконатов 3d-металлов (3dMeGl). Во второй группе наблюдалась значительная (в 4,2 раза) активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и окислительной модификации белка (ОМБ). Активность антиоксидантных ферментов понижалась следующим образом: глутатионпероксида-зы (ГПО) - в 10,4 раза, супероксидисмутазы (СОД) - в 3,5 раза, каталазы (КТ) и глутатионтрансферазы (ГТ) - в 1,7 раза.
При сочетании иммунодефицита с введением 3dMeGl (где Me - Mn, Fe, Co, Cu или Zn) интенсивность ПОЛ снижалась на 36-91%, а активность антиоксидантных ферментов имела тенденцию к повышению в различной степени в зависимости от применяемого соединения. После терапии ZnGl было зарегистрировано увеличение активности всех оцениваемых антиоксидантных ферментов; CuGl - КТ, ГТ, ГПО; CoGl - ГТ и ГПО; MnGl и FeGl -ГПО. Причем при использовании CuGl и ZnGl показатели активности ферментов КТ и ГТ достоверно превышали аналогичные величины уинтактных животных. Полученные результаты свидетельствуют о корригирующем действии глюконатов З^металлов, наиболее выраженном при использовании ZnGl и CuGl, на изменение оксидантно-антиоксидантного гомеостаза при индуцированном иммунодефиците.
Ключевые слова: глюконаты 3d-металлов, иммунодефицит, перекисное окисление липидов, окислительная модификация белка, антиоксидантные ферменты.
O.A. Knyazeva, S.I. Urazaeva, I.G. Konkina, Yu.I. Murinov INFLUENCE OF GLUCONATES OF 3D METALS ON THE ACTIVITY OF ENZYMES AND OXIDATIVE PROCESSES IN VIVO AGAINST EXPERIMENTAL IMMUNODEFICIENT
A comparative analysis of the oxidant system parameters in the liver homogenate of laboratory mice was carried out: the first group isintact, the second one with immunodeficiency induced by intraperitonealadministration of cytostatic cyclophosphamide, the third oneis characterized by having immunodeficiency after addinggluconatesof 3d-metals (3dMeGl). In the second group, there was a significant (4.2 times) activation of lipid peroxidation (LPO) and protein oxidative modification (POM). Therefore, the decrease in the activity of antioxidant enzymes was: glutathione peroxidase (GPX) by 10.4 times, superoxide dismutase (SOD) - 3.5 times, catalase (CT) and glutathione transferase (GT) - 1.7 times, respectively.
The combinationof immunodeficiency and3dMeGl(where Me - Mn, Fe, Co, Cu or Zn) has led to the decreased intensity of LPO by 36-91%. Also, the activity of antioxidant enzymes increased depending on the compound used. After treatment withZnGl an increased activity was recorded in all evaluated antioxidant enzymes; CuGl - CT, GT, GPX; CoGl - GT and GPX; MnGl and FeGl -GPX. Moreover, when using CuGl and ZnGl, the values for CT and GT enzymes were significantlyhigherthan in the intact animals. The obtained results showed the corrective action of 3d- metal gluconates, that is the most active while using ZnGl and CuGlon,on the change of oxidant-antioxidant homeostasis during induced immunodeficiency.
Key worafc.gluconatesof 3d-metals, immunodeficiency, lipid peroxidation, oxidative protein modification, antioxidant enzymes.
Изучение биохимических основ имму-нодефицитных состояний, а также возможностей их коррекции является одной из актуальных проблем биомедицины. В связи с этим большой интерес представляет исследование веществ, которые обладают иммунокорриги-рующими свойствами. Особое место среди иммунокорректоров занимают соединения 3ё-металлов (Мп, Fe, Со, Си и 2п) [11,21], дисбаланс которых отмечается при различных им-мунодефицитных состояниях [2,5]. Известно, что эффективность их действия может возрастать при введении в организм в виде координационных соединений [3]. Внутримолекулярное взаимодействие между ионом металла и входящими во внутреннюю координационную сферу лигандами, связанное с перераспределением электронной плотности в молекулах компонентов, приводит к модуляции их свойств, что часто сопровождается синергическим дей-
ствием составляющих комплекса. Среди ли-гандов, способных снизить токсичность ионов металлов, вызывает интерес D-глюконовая кислота ^1), которая обладает детоксицирую-щими свойствами и используется в фармацевтической и пищевой промышленности [17]. Ранее нами были проведены синтез и исследование физико-химических свойств глюконатов ряда 3d-элементов [14] и была показана их им-мунокорригирующая способность [8]. Представляет интерес в оценке их действия на уровни показателей оксидантной и антиокси-дантной систем организма при иммунодефи-цитных состояниях, которые, как правило, сопровождаются нарушением окислительно-восстановительного гомеостаза [10].
Целью настоящей работы явилось исследование влияния глюконатов З^металлов на уровни перекисного окисления липидов и окислительной модификации белка, а также
активности антиоксидантных ферментов (су-пероксиддисмутаза, каталаза, глутатионперок-сидаза, глутатионтрансфераза) в печени мышей с индуцированным иммунодефицитом.
Материал и методы
Работа проводилась на 84 половозрелых (трехмесячных) лабораторных мышах - самцах массой 25-28 г. Животные были разделены на 3 группы, они содержались на стандартном пищевом рационе и неограниченно потребляли воду местных источников. В 1-ю группу (п=12) входили интактные животные, во 2-ю (п=12) - животные с моделированным иммунодефицитом без лечения. Третья группа состояла из 5-ти подгрупп мышей (по числу исследуемых глюконатов 3d-металлов (3dMeGl), в каждой из них по 12 животных), которым на фоне экспериментального иммунодефицита в течение 2-х недель ежедневно перорально в дозе 0,2 мл вводились водные растворы3dMeGl в концентрации 10-2 моль/л. Мыши 1-й и 2-й групп получали дистиллированную воду в том же объеме.
3dMeGl были синтезированы по методике, описанной И.Г. Конкиной [14], физико-химические свойства их были изучены методами инфракрасной и электронной спектро-скопий, термического разложения, молярной электропроводности, измерения эффективных магнитных моментов [12].
Иммунодефицит индуцировали путем однократного внутрибрюшинного введения циклофосфамида (50 мг/кг) («Бакстер АГ», Швейцария).
По окончании эксперимента животных под эфирным рауш-наркозом декапитировали в соответствии с этическими нормамии рекомендациями положения Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным, что полностью соответствует аналогичным положениям в России (приказ МЗ РФ от 19 июня 2003 г. №267).
Ткань печени гомогенизировали при температуре 4°С, гомогенат центрифугировали при 500 G для осаждения неразрушенных клеток и фрагментов тканей. В супернатанте определяли показатели антиоксидантной системы по активности ее ключевых ферментов: СОД по методике, представленной С. Чевари с авт. [15], КТ - по М.А. Королюк [9], ГПО и ГТ - по С.Н. Власовой [1].
Интенсивность процессов ПОЛ была охарактеризована по содержанию ТБК-активных продуктов (ТБК-АП) в реакции с ти-обарбитуровой кислотой (ТБК) по методике, описанной А.И. Уразаевой [13]. Для этого гомогенат печени разводили 0,04 М№-
фосфатным буферным раствором до 1% содержания белка, затем добавляли 28% ТХУ (2:1) и центрифугировали 10 мин при 1500 g; 2 мл депротеинатасмешивали с 1 мл ТБК и инкубировали 15 мин на водяной бане. Экстинк-цию измеряли при 532 нм в кювете (1=1см) по сравнению с контрольной пробой. Расчет проводили по формуле:
С = (Ех106хВ)/1,5бх105ху, где Е - оптическая плотность; В - объем водной фазы (мл), 106- коэффициент пересчета в мкмоль; 1,56х105- коэффициент молярной экстинкции (лхмоль"1хсм"1); V - исходный объем образца (мл).
Определение уровня спонтанной и ме-таллиндуцируемой (Fe^-зависимой) ОМБ проводили по методу Е.Е. Дубининой [4], оценивая спонтанное (КБ сп) и индуцированное (КБ инд) карбонилирование белка по уровню 2,4-динитрофенилгидразонов, образующихся в результате взаимодействия продуктов свободнорадикального окисления белков с 2,4-динитрофенилгидразином (2,4-ДНФГ). Для этого после осаждения белков ТХУ в опытную пробу добавляли 0,1 мл 0,1М раствора 2,4-ДНФГ, в контрольную - 0,1мл 2М раствора HCl. Через час инкубации смесь центрифугировали при 1500 g в течение 10 мин, затем промывали этанолом, смешанным с этилацетатом (1:1) и 2,4-ДНФГ. Очищенный осадок растворяли в 2,5 мл 8М раствора мочевины. Экстинкцию полученных растворов измеряли при 270 и 370 нм. Расчет проводили исходя из коэффициента молярной экстинк-ции динитрофенилгидразонов.
Статистическую обработку результатов проводили непараметрическими методами с применением программ «MicrosoftExcel» и «Statistica 10.0». Статистически значимыми принималипоказатели при р<0,05.
Результаты и обсуждение
Представленные в таблицеданные свидетельствуют о том, что в печени иммуносупрес-сированных мышей наряду со значительной активацией процессов ПОЛ (увеличение уровня ТБК-АП в 4,2 раза) и окислительной модификации белков (увеличение КБсп в 1,4 иК-Бинд - в 1,1 раза) происходило подавление активности антиоксидантных ферментов. Особенно глубокое снижение активности наблюдалось у ГПО - в 10,4 и СОД - в 3,5 раза. Активность КТ и ГТ снижалась примерно в 1,7 раза. Такие результаты могут свидетельствовать о том, что данный способ моделирования иммунодефицита сопровождается нарастанием выработки активных форм кислорода (АФК), так как повреждение антиоксидантных ферментов образующимися свободными радика-
лами является основной причиной снижения их активности. Накопление АФК инициирует также процессы ПОЛ и ОМБ.
При сочетании индуцированного иммунодефицита с введением соединений 3d Ме01 интенсивность процессов ПОЛ снижалась на 36-91% по сравнению с результатами во 2-й группе (р<0,05). Уровень ОМБ в печени экспериментальных животных 3-й группы не имел статистически значимых отличий от показателей ОМБ во 2-й группе.
Активность исследуемых антиокси-дантных ферментов изменялась различным образом в зависимости от применяемого 3d-металла.Влияние микроэлементов на СОД, за исключением ZnGl, оказалось негативным.
Очевидно, что наличие элементов, обладающих способностью к редокс-взаимодействию, инактивирует реактивные центры в молекулах СОД, имеющих в своем составе металлы переменной валентности Мп, Fe, Си, которые способны инициировать новые АФК. Такой результат может быть связан также с дополнительной координацией иона металла в координационном центре СОД глюконат-ионами, образующимися при диссоциации экспериментальных комплексов Мп, Fe, Со, менее устойчивых в соответствии с рядом Ир-винга-Вильямса по сравнению с Си01 и 2и01. Для Си01 активность СОД не снижалась, а после терапии ZnGl повышалась на 36% по отношению к уровню во 2-й группе(р<0,05).
Таблица 1
Влияние 3dMeG1 на показатели ПОЛ, ОМБ (КБсп, КБинд) и антиоксидантных ферментов (СОД, КТ, ГПО, ГТ) в гомогенате печени иммунодефицитных мышей_
Группы и (подгруппы) мышей Стат. показатель ТБК-АП, мкмоль/г ткани КБсп, Ед/г белка КБинд, Ед/г белка СОД, Ед/мг белка КТ, мкмоль/с/мг белка ГПО, мкмоль/ мин/ мг белка ГТ, мкмоль/ мин/г белка
1-я группа. Контроль интактные (п=12) Me 11 [9,9-12,4] 162 [146-174] 744 [671-799] 26,3 [24,8-28,7] 15,9 [14,1-17,4] 25,9 [22,8-28,3] 7,7 [6,6-8,6]
2-я группа. Контроль ИД без леч. (п=12) Me р-знач. 46 [43-50] р1-2=0,00003 227 [195-232] р1-2=0,00003 821 [741-882] р1-2=0,033 7,5 [6,5-8,2] р1-2=0,00003 9,1 [7,9-9,9] р1-2=0,00003 2,5 [2-2,8] р1-2=0,00003 4,6 [3,9-5,1] р1-2=0,00003
3-я группа (1) ИД+MnG1 (п=12) Me р-знач. 41 [37,3-42,4] р=0,00003 215 [1930-232] 805 [726-865] 2,5 [2,0-2,8] р=0,00003 10,4 [9,0-11,4] р=0,038 6,8 [5,7-7,5] р=0,00003 4,6 [4,2-5,3]
3-я группа (2) ИД+FeG1 (п=12) Me р-знач. 42 [39-46] р=0,00003 226 [203-245] 825 [742-886] 4,9 [4,2-5,6] р=0,00008 8,5 [7,4-9,4] 18,6 [16,5-20,2] р=0,00003 1,5 [1,3-1,9] р=0,00003
3-я группа (3) ИД+CoG1 (п=12) Me р-знач. 42 [37-44] р=0,00003 220 [202-243] 819 [738-809] 3,9 [3,2-4,4] р=0,00003 10,3 [9,0-11,3] р=0,038 10,8 [9,4-11,8] р=0,00003 9,0 [7,8-9,8] р=0,00003
3-я группа (4) ИД+ОЮ1 (п=12) Me р-знач. 38 [36-40] р=0,00003 217 [195-235] 810 [730-871] 7,4 [6,4-8,08] 19,0 [16,8-20,7] р=0,00003 18,1 [16,05-19,7] р=0,00003 9,7 [8,5-10,5] р=0,00003
3-я группа (5) ИД+ZnG1 (п=12) Me р-знач. 36 [33-39] р2-7=0,00003 212 [190-229] 805 [726-865] 11,7 [10,4-12,7] р2-7=0,00003 17,9 [15,8-19,5] р2-7=0,00003 15,4 [13,7-16,8] р2-7=0,00003 9,9 [8,5-10,9] р2-7=0,00003
Примечание. 3dMeG1 - глюконаты 3d-металлов; ПОЛ - перекисное окисление липидов; ТБК-АП - ТБК-активные продукты в реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК); ОМБ - окислительная модификация белка; КБсп - карбонилирование белка спонтанное; КБинд-карбонилирование белка индуцированное; СОД -супероксиддисмутаза; КТ - каталаза; ГПО -глутатионпероксидаза; ГТ -глутатионтрансфераза; ИД - индуцированныйиммунодефицит; р1_2 < 0,05 -статистически значимые отличия по сравнению с группой «интактные»; р< 0,05 -статистически значимые отличия по сравнению с группой «ИД без лечения».
Из литературных данных известно, что комплексы меди с координационным центром, имеющим квадратно-пирамидальную или плоскоквадратную конфигурации, имеющие вакантные места для дополнительной координации, способны проявлять подобную СОД-активность [20], однако атом меди в CuGl находится в октаэдрическомокружении и, возможно, что это является одной из причин невыраженного влияния CuG1 на активность СОД [12]. Кажущееся противоречие между одновременным снижением активности СОД и уменьшением содержания ТБК-АП, вероятно может быть объяснено наблюдающимся ростом активности ГПО (см. таблицу).
ГПО относится к группе ферментов, содержащих селен, которые способны катализировать не только процесс разложения перок-сида водорода, но и восстановление гидропе-роксидов липидов, что и придает ему первоочередное значение в антиоксидантной защите организма [7,16]. Восстановление активности ГТ, наблюдающееся в данном эксперименте под воздействием 3d MeG1 (за исключением FeGl), очевидно, также способствует снижению ПОЛ, поскольку ГТ катализирует конъюгацию восстановленного глутатиона через сульфгидрильную группу, создавая электрофильные центры, участвующие в де-токсикации перекисей липидов. Способность
цинка связываться с тиольными группами является важным механизмом, который способствует антиоксидантному действию. Стабилизация сульфгидрильных групп может происходить при непосредственном связывании иона металла с данными группами и сайтом белка, в результате которого образуется трех-компонентный комплекс и создаются препятствия для аминокислотных радикалов или конформационного изменения белка [6, 19]. В представленном эксперименте также отмечено позитивное влияние на активность ГТ соединения цинка, при использовании которого показатели активности фермента превышают результаты, полученные не только для 2-йгруппы, но и для интактных животных (1-я группа). Понижение активности ГТ при использовании FeGl в данном случае, возможно,
обусловлено инициацией под влиянием ионов железа известной реакции Фентона, являющейся дополнительным источником АФК [18], что, вероятно, оказывает влияние и на снижение активности СОД и КТ при использовании глюконата железа.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что соединения 3^ металлов с глюконовой кислотой оказывают корригирующее действие, наиболее выраженное при использовании глюконата цинка и меди, на сдвиги оксидантно-антиоксидантного гомеостаза в печени экспериментальных животных (уровень ТБК-АП, активность анти-оксидантных ферментов глутатионпероксида-зы, каталазы и глутатионтрансферазы), вызванные моделированием вторичного иммунодефицита.
Сведения об авторах статьи: Князева Ольга Александровна - д.б.н., профессор кафедры биологической химии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес:450008, г. Уфа, Ленина, 3. E-mail: olga_knyazeva@list.ru.
Уразаева Сабина Ильясовна - ассистент кафедры биологической химии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, Ленина, 3. E-mail: urazaeva2010@yandex.ru.
Конкина Ирина Григорьевна - к.х.н., с.н.с. ОСП ФГБНУ «Уфимский институт химии» УфИЦ РАН. Адрес:450054, г. Уфа, пр. Октября, 69. E-mail: irkonk@anrb.ru.
Муринов Юрий Ильич - д.х.н., профессор, зав. Лабораторией ОСП ФГБНУ «Уфимский институт химии» УфИЦ РАН. Адрес: 450054, г. Уфа, пр. Октября, 69. Тел./факс:8(347)235-54-00. E-mail: murinov@anrb.ru.
ЛИТЕРАТУРА
1. Власова, С.Н. Активность глутатионзависимых ферментов эритроцитов при хронических заболеваниях печени у детей / С.Н. Власова, Е.И. Шабунина, И.А. Переслегина // Лабораторное дело. - 1990. - № 8. - С. 19-22.
2. Влияние рекомбинантной марганец-супероксиддисмутазы (rMnSOD) на гематологический статус мышей, облученных протонами / Ф.С. Амбеси-Импиомбато [и др.] // Медицинская радиология и радиационная безопасность. - 2014. - Т. 59, N° 6. - С. 511.
3. Григорьева, А.С. Оптимизация фармакотерапевтической активности биометаллов при комплексообразовании с НПВС/А.С. Григорьева // Микроэлементы в медицине. - 2001. - №. 1. - С. 17-22.
4. Дубинина, Е.Е.Окислительная модификация белков крови человека. Метод выделения /Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров // Вопросы медицинской химии. - 1995. - Т. 41, № 1. - С. 24-26.
5. Иммунологические и иммуногенетические маркеры хронической обструктивной болезни легких в условиях естественного дефицита цинка/Л.М. Карзакова [и др.] // Медицинская иммунология. - 2008. - Т. 10, № 6. - С. 513-518.
6. Иммуномодулирующее действие глюконата цинка /О.А. Князева [и др.] //Научный взгляд в будущее. - 2017. - Т. 6, № 5. - С. 24-26.
7. Исследование физико-химических свойств фермента глутатионпероксидазы типа I и его комплексов с полиэлектролитами как перспективных агентов для лечения заболеваний центральной нервной системы / И.С. Панина [и др.] // Вестник Московского университета сер. 2. Химия. - 2014. - Т. 55, № 3. - С. 153-157.
8. Князева, О.А. Роль соединений глюконовой кислоты с Зd-металлами в коррекции индуцированного иммунодефицита у мышей/ О.А. Князева, С.А. Усачев, С.И. Уразаева// Здоровье и образование в XXI веке. - 2016. - Т.18, № 4. - С. 88-93.
9. Королюк, М.А.Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова// Лабораторное дело. -1988. - № 1. - С. 16-17.
10. Костюшов, В.В. Изучение активности ферментов антиоксидантной системы крови при ВИЧ-инфекции / В.В. Костюшов, И.И. Бокал, С.А. Петров// Биомедицинская химия. - 2010. - Т.56, № 5. - С. 596-601.
11. Кудрин, А.В. Микроэлементы в иммунологии и онкологии / А.В. Кудрин, О.А. Громова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 544с.
12. Синтез и свойства глюконатов марганца(П) и меди(П) / Физические методы исследования / И.Г. Конкина [и др.] // Журнал неорганической химии. - 2003. - Т.48, № 6. - С. 979-983.
13. Уразаева, А.И. Влияние эфирных масел на метаболические изменения в эритроцитах у мышей с привитой миеломой / А.И. Уразаева, О.А. Князева, Э.Ф. Аглетдинов// Фармация. - 2014. - № 1. - С. 42-44.
14. Физико-химические свойства и фармакологическая активность глюконатов Mn (II), Fe (II), Co (II), Cu (II) и Zn (II) / И.Г. Конкина [и др.]// Химико-фармацевтический журнал. - 2002. - Т. 36, № 1. - С. 18-21.
15. Чевари, С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах / С. Чевари, И. Чаба, Й. Секей// Лабораторное дело. - 1981. - № 11. - С. 678-680.
16. Correlation of Oxidative Stress with Serum Trace Element Levels and Antioxidant Enzyme Status in Beta Thalassemia Major Patients: A Review of the Literature / Q. Shazia [et al.]// Anemia. - 2012. - 7 p. 270923. DOI:10.1155/2012/270923.
17. Gluconic Acid: Properties, Applications and Microbial Production / S. Ramachandran [et al.] // Food Technol. Biotechnol. - 2006.- Vol. 44, № 2.- P. 185-195.
18. Goldstein, S.The Fenton Reagents / S. Goldstein, D. Meyerstein, G.Czapski // Free Radical Biology and Medicine. -1993. - Vol. 15, № 4. -P. 435-445. DOI: 10.1016/0891-5 849(93)90043-T.
19. Oteiza, P.I. Zinc and the modulation of redox homeostasis / P.I. Oteiza // Free RadicBiol Med. - 2012. - Vol. 53, № 9. - P. 1748-1759. DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2012.08.568.
20. Patel, M.N. Square pyramidal copper(II) complexes with forth generation fluoroquinolone and neutral bidentate ligand: structure, antibacterial, SOD mimic and DNA-interaction studies / M.N. Patel, P.A. Parmar, D.S. Gandhi // Bioorganic & medicinal chemistry. -2010. -Vol. 18, № 3. - P. 1227-1235. DOI: 10.1016/j.bmc.2009.12.037.
21. Pocusa, M. The Central Role of Biometals Maintains Oxidative Balance in the Context of Metabolic and Neurodegenerative Disorders / M. Pocusa, A.K. Tranchikova // Oxid. Med. Cell. Longev. - 2017. - P. 18. Article ID 8210734. https://doi.org/10.1155/2017/8210734.
REFERENCES
1. Vlasova SN, SHabunina EI, Pereslegina IA. Aktivnost' glutationzavisimyh fermentov ehritrocitov pri hronicheskih zabolevaniyah pecheni u detej. Laboratornoe delo. 1990;8:19-22. (In Russ.)
2. Ambesi-Impiombato F.S. i dr. Vliyanie rekombinantnoj marganec-superoksiddismutazy (rMnSOD) na gematologicheskij status myshej, obluchennyh protonami. Medicinskaya radiologiya i radiacionnaya bezopasnost'. 2014;59(6):5-11. (In Russ.)
3. Grigor'eva AS. Optimizaciya farmakoterapevticheskoj aktivnosti biometallov pri kompleksoobrazovanii s NPVS. Mikroehlementy v medicine. 2001;1:17-22. (In Russ.)
4. Dubinina EE, Burmistrov SO. Okislitel'naya modifikaciya belkov krovi cheloveka. Metod vydeleniya. Voprosy medicinskoj himii. 1995;41(1):24-26. (In Russ.)
5. Karzakova LM i dr. Immunologicheskie i immunogeneticheskie markery hronicheskoj obstruktivnoj bolezni legkih v usloviyah estestvennogo deficita cinka. Medicinskaya Immunologiya. 2008; 10(6):513-518. (In Russ.)
6. Knyazeva OA i dr. Immunomoduliruyushchee dejstvie glyukonata cinka. Nauchnyj vzglyad v budushchee. 2017;6(5):24-26. (In Russ.)
7. Panina IS i dr. Issledovanie fiziko-himicheskih svojstv fermenta glutationperoksidazy tipa I i ego kompleksov s poliehlektrolitami kak perspektivnyh agentov dlya lecheniya zabolevanij central'noj nervnoj sistemy. Vestnik Moskovskogo universiteta ser. 2. Himiya.2014;55(3):153-157. (In Russ.)
8. Knyazeva OA, Usachev SA, Urazaeva SI. Rol' soedinenij glyukonovoj kisloty s 3d-metallami v korrekcii inducirovannogo immunodeficita u myshej. Zdorov'e i obrazovanie v XXI veke. 2016;18(4):88-93. (In Russ.)
9. Korolyuk MA, Ivanova LI, Majorova IG. Metod opredeleniya aktivnosti katalazy. Laboratornoe delo. 1988;1:16-17. (In Russ.)
10. Kostyushov VV, Bokal II, Petrov SA. Izuchenie aktivnosti fermentov antioksidantnoj sistemy krovi pri VICH-infekcii. Biomedicinskaya himiya. 2010;56(5):596-601. (In Russ.)
11. Kudrin AV, Gromova OA. Mikroehlementy v immunologii i onkologii M.: GEHOTAR-Media, 2007; 544. (In Russ.)
12. Konkina IG i dr. Sintez i svojstva glyukonatov marganca(II) i medi(II). Fizicheskie metody issledovaniya. ZHurnal neorganicheskoj himii. 2003;48(6):979-983. (In Russ.)
13. Urazaeva AI, Knyazeva OA, Agletdinov EHF. Vliyanie ehfirnyh masel na metabolicheskie izmeneniya v ehritrocitah u myshej s privitoj mielomoj. Farmaciya. 2014;1:42-44. (In Russ.)
14. Konkina IG i dr. Fiziko-himicheskie svojstva i farmakologicheskaya aktivnost' glyukonatov Mn (II), Fe (II), Co (II), Cu (II) i Zn (II). Himiko-farmacevticheskij zhurnal. 2002;36(1):18-21. (In Russ.)
15. CHevari S, CHaba I, Sekej J. Rol' superoksiddismutazy v okislitel'nyh processah kletki i metod opredeleniya ee v biologicheskih materialah. Laboratornoe delo. 1981;11:678-680. (In Russ.)
16. Shazia Q et al. Correlation of Oxidative Stress with Serum Trace Element Levels and Antioxidant Enzyme Status in Beta Thalassemia Major Patients: A Review of the Literature. Anemia. 2012;7. 270923. DOI:10.1155/2012/270923.
17. Ramachandran S et al. Gluconic Acid: Properties, Applications and Microbial Production. Food Technol. Biotechnol. 2006;44(2):185-195.
18. Goldstein S, Meyerstein D, Czapski G. The Fenton Reagents. Free Radical Biol. Med. 1993;15(4):435-445. DOI:10.1016/0891-5849(93)90043-T.
19. Oteiza PI. Zinc and the modulation of redox homeostasis. Free RadicBiol Med. 2012;53(9):1748-1759. DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2012.08.568.
20. Patel MN, Parmar PA, Gandhi DS. Square pyramidal copper(II) complexes with for the generation fluoroquinolone and neutral bidentate ligand: structure, antibacterial, SOD mimic and DNA-interaction studies/ Bioorg. Med. Chem. 2010;18(3):1227-1235. DOI: 10.1016/j.bmc.2009.12.037.
21. Pocusa M, Tranchikova AK. The Central Role of Biometals Maintains Oxidative Balance in the Context of Metabolic and Neurodegenerative Disorders. Oxid. Med. Cell. Longev. 2017;18. Article ID 8210734. https: // doi.org/10.1155/2017/8210734.
