ВЛИЯНИЕ ГЕНОВ КИЛЛЕРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ НАТУРАЛЬНЫХ КИЛЛЕРНЫХ КЛЕТОК И ИХ HLA-ЛИГАНДОВ НА РЕЗУЛЬТАТЫ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

Конова З.В.; Паровичникова Е.Н.; Гальцева И.В.; Хамаганова Е.Г.

https://dol.org/10.35754/0234-5730-2022-67-4-551-569 | (a:) ]

ВЛИЯНИЕ ГЕНОВ КИЛЛЕРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИН-ПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ НАТУРАЛЬНЫХ КИЛЛЕРНЫХ КЛЕТОК И ИХ НЬА-ЛИГАНДОВ НА РЕЗУЛЬТАТЫ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

Конова З. В.*, Паровичникова Е. Н., Гальцева И. В., Хамаганова Е. Г.

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 125167 Москва, Россия

BY 4.0

Введение. Ключевым направлением развития технологий трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) является разработка стратегий, предотвращающих развитие реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) и уменьшающих риск возникновения инфекционных осложнений при сохранении противоопухолевого эффекта — реакции «трансплантат против лейкоза» (РТПЛ).

Цель — анализ биологических и функциональных свойств натуральных киллеров (НК-клеток) после алло-ТГСК, их реконституции после алло-ТГСК и факторов, влияющих на этот процесс, а также механизмов аллореактивности НК-клеток у больных после алло-ТГСК.

Основные сведения. Функции НК-клеток регулируются различными типами рецепторов, активирующих или инги-бирующих НК-зависимый цитолиз, которые экспрессируются на НК-клетках. Среди них основную роль играют кил-лерные иммуноглобулин-подобные рецепторы (KIR), которые опосредуют развитие толерантности к собственным клеткам и иммунный ответ, как противоопухолевый, так и направленный против инфекционных агентов. НК-клетки могут играть решающую роль в предотвращении ранних рецидивов и инфекционных осложнений, так как восстанавливаются одними из первых после алло-ТГСК. Они также обладают способностью устранять Т-клетки и антиген-презентирующие клетки реципиента, тем самым предотвращая развитие несостоятельности трансплантата и РТПХ. Существует несколько моделей НК-аллореактивности с участием KIR, однако результаты исследований в этой области противоречивы.

Ключевые слова: натуральные киллеры, киллерный иммуноглобулин-подобный рецептор, трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Финансирование: исследование не имело спонсорской поддержки.

Для цитирования: Конова З.В., Паровичникова Е.Н., Гальцева И.В., Хамаганова Е.Г. Влияние генов киллерных иммуноглобулин-подобных рецепторов натуральных киллерных клеток и их HLA-лигандов на результаты трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток. Гематология и трансфузиология. 2022; 67(4): 551-569. https://dol.org/10.35754/0234-5730-2022-67-4-551-569

Introduction. Currently, more and more attention is being paid to possible strategies for preventing the development of graft-versus-host disease (GVHD) and reducing the risk of infections while maintaining the antitumor effect — graft-versus-leukemia effect (GVL). In this context, the study of natural killer cells (NK-cells) seems to be quite promising.

Aim — to analyze the biological and functional properties of NK-cells after allo-HSCT, their reconstitution after transplantation and factors affecting this process, as well as the mechanisms of alloreactivity of NK cells in patients after allo-HSCT. Main findings. Various types of activating or inhibiting receptors, which are expressed on NK-cells, regulate the functions of NK-cells. Among them, the main role is played by the killer immunoglobin-like receptor (KIR-receptor), which mediates tolerance to one's own cells and the immune response, both antitumor and directed against infectious agents. NK-cells can play a decisive role in preventing early relapses and infectious complications, as they are among the first to recover after allo-HSCT. They also have the ability to eliminate the recipient's T-cells and antigen presenting cells (APCs), thereby preventing the development of graft failure and GVHD. There are several models of NK alloreactivity based on KIR; however, the results of studies in this area are contradictory. This review summarizes the available literature data.

Keywords: natural killer cells, killer immunoglobin-like receptor, allogeneic hematopoietic stem cells transplantation Conflict of interest: the authors declare no conflict of interest. Financial disclosure: the study had no sponsorship.

For citation: Konova Z.V., Parovichnikova E.N., Galtseva I.V., Khamaganova E.G. Impact of natural killer cell's functional reconstruction on the results of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Gematologiya i transfuziologiya. 2022; 67(4): 551-569 (in Russian). https://doi.org/10.35754/0234-5730-2022-67-4-551-569

I

IMPACT OF NATURAL KILLER CELL'S FUNCTIONAL RECONSTRUCTION ON THE RESULTS OF ALLOGENEIC HEMATOPOIETIC STEM CELL TRANSPLANTATION

Konova Z. V.*, Parovichnikova E. N., Galtseva I. V., Khamaganova E. G.

National Medical Research Center for Hematology, 125167 Moscow, Russian Federation

ABSTRACT

Введение

Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) является одним из наиболее эффективных методов лечения больных, страдающих злокачественными заболеваниями системы крови. Несостоятельность трансплантата, рецидивы основного заболевания, развитие реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ) и инфекционные осложнения остаются основными причинами неудач алло-ТГСК [1—3]. В настоящее время все больше внимания привлекают возможные стратегии предотвращения развития РТПХ и снижения риска инфекционных осложнений при сохранении противоопухолевого эффекта — реакции «трансплантат против лейкоза» (РТПЛ). С этих позиций перспективным представляется исследование

натуральных киллеров (НК-клеток). НК-клетки являются одним из компонентов системы врожденного иммунитета и обладают способностью к цитотоксиче-скому лизису и секреции цитокинов без предварительной презентации антигена [4]. Их функции регулируются различными типами рецепторов, активирующих или ингибирующих НК-зависимый цитолиз, которые экспрессируются на НК-клетках [5] (табл. 1). Среди них основную роль играет киллерный иммуноглобулин-подобный рецептор (Killer-cell Immunoglobulin-like Receptor, KIR), который опосредует толерантность к собственным клеткам, а также как противоопухолевый иммунный ответ, так и иммунный ответ, направленный против инфекционных агентов.

Таблица 1. Рецепторы НК-клеток Table 1. NK cell receptors

Ингибирующие рецепторы Inhibitory receptors Лиганды ингибирующих рецепторов Ligands for inhibitory receptors Активирующие рецепторы Activating receptors Лиганды активирующих рецепторов Ligands for activating receptors

KIR2DL1 HLA-C2 KIR2DS1 HLA-C2

KIR2DL2 HLA-C1 KIR2DS2 HLA-C1

KIR2DL3 HLA-C1 KIR2DS3 НИ/UK

KIR2DL4 HLA-G KIR2DS4 HLA-A11

KIR2DL5 НИ/UK KIR2DS5 НИ/UK

KIR3DL1 HLA-Bw4 KIR3DS1 HLA-F

KIR3DL2 HLA-A3/A11 NKG2C HLA-E

KIR3DL3 НИ/UK NKG2D MICA, MICB, ULBP1-4

NKG2A HLA-E NKp30 B7-H6, BAT3, CMV pp65

LIR-1 HLA I класса NKp44 Вирусные гемагглютинины Viral hemagglutinins

NKp46 Вирусные гемагглютинины Viral hemagglutinins

CD16 IgG-1, -3, -4

Примечание: НИ — неизвестны.

Note: UK — unknown.

Гены KIR расположены на хромосоме 19q13.4 [6]. На основании структурных различий (количество внеклеточных иммуноглобулин-подобных доменов (D) и наличие длинного (L) или короткого (S) цитоплазма-тического хвоста) 16 генов KIR, включая два псевдогена (P), KIR2DP1 и KIR3DP1, разделены на четыре группы: KIR2DL1-5, KIR3DL1-3, KIR2DS1-5 и KIR3DS1. Шесть

генов с короткими цитоплазматическими хвостами являются активирующими генами KIR (KIR2DS2, KIR2DS3, KIR2DS5, KIR3DS1, KIR2DS1, KIR2DS4),

восемь генов с длинными цитоплазматическими хвостами — ингибирующие гены KIR (KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3, KIR2DL4, KIR2DL5A, KIR2DL5B, KIR3DL1, KIR3DL2) [7]. Пять ингибирующих и три активирующих KIR распознают специфические лиган-ды человеческих лейкоцитарных антигенов (HLA) (A, B или C) I класса. Ингибирующий KIR2DL1 распознает аллели HLA-C 2-й группы (аллели, имеющие лизин в аминокислотной позиции 80 альфа-домена тяжелой цепи HLA-C антигенов), KIR2DL2 и KIR2DL3 распознают аллели HLA-C 1-й группы, несущие аспарагин, KIR3DL1 распознает аллели HLA-Bw4, a KIR3DL2 распознает аллели HLA-A3/-A11. Активирующие KIR2DS1, KIR2DS2 и KIR2DS4, распознают HLA-C2, C1, A11 соответственно [8]. Лиганды остальных KIR остаются неизвестными.

В процессе эволюции дупликация и делеция некоторых локусов привели к формированию двух основных групп KIR-гаплотипов, «А» и «В», в соответствии с активирующими генами на них. Гаплотип «A» имеет только один активирующий ген, KIR2DS4, тогда как гаплотип «В» содержит до пяти активирую-

щих генов KIR, включая KIR2DS1, 2,3, 5 и 3DS1. Таким образом, генотип A/A определяется как гомозиготный по гаплотипам A, а генотип B/x состоит по крайней мере из одного гаплотипа «B».

Структурная организация геномного региона KIR включает в себя центромерную (Cen) и теломерную (Tel) области, разделенные «структурными» генами

KIR3DP1 и KIR2DL4 [7, 9].

По гаплотипам «В» можно выделить 3 группы доноров: нейтральный («neutral») донор — т. е. донор, у которого полностью отсутствует B-мотивы или присутствует только один; лучший («better») донор — донор, у которого присутствует два или более B-мотива в те-ломерной и центромерной частях; наилучший («best») донор — донор с двумя B-мотивами и именно в центромерной части [9].

Поскольку гены KIR и гены лейкоцитарного антигена человека (HLA) расположены на разных хромосомах, возможно аутологичное несоответствие рецептора KIR и его лиганда [10]. Обычно НК-клетки приобретают толерантность к собственным клеткам и функциональную компетентность в процессе «обучения» и «лицензирования», в котором ингибирующие KIR могут подавляться собственными лигандами HLA и активироваться чужеродными HLA. Кроме того, сниженная реакция активации KIR в присутствии родственных им лигандов также предотвращает развитие ауторе-активности [11]. Инфекционные агенты и/или опухолевые клетки могут недостаточно экспрессировать ингибирующие KIR-лиганды или экспрессировать активирующие лиганды, которые, в свою очередь, могут активировать НК-клетки [12].

НК-клетки могут играть решающую роль в предотвращении ранних рецидивов и инфекционных осложнений, так как восстанавливаются одними из первых после алло-ТГСК [13]. Они также обладают способностью устранять Т-клетки реципиента и антигенпрезен-тирующие клетки (АПК), тем самым предотвращая развитие несостоятельности трансплантата и РТПХ [14]. В попытке оптимизировать выбор донора для ал-ло-ТГСК на основе KIR создано несколько моделей (рис. 1) [15]:

• Модель «лиганд—лиганд». Группа исследователей из университета Перуджи в Италии впервые предложила модель, основанную исключительно на HLA-генотипах донора и реципиента: потенциаль-

ная аллореактивность возможна, если у реципиента нет лиганда HLA для ингибирующего KIR донора (рис. 2) [16], но наличие соответствующего ингибирующего KIR у донора только предполагается на основании его HLA. При соблюдении этих условий отмечалось снижение кумулятивной частоты несостоятельности трансплантата и рецидивов заболевания, кроме того, уменьшалась вероятность развития РТПХ у больных острыми миелоидными лейкозами (ОМЛ) [17]. Данная модель применима в случае выполнения ал-ло-ТГСК от неродственных доноров с несовпадением по HLA-B или HLA-C и гаплоидентичных доноров. Для подбора донора по этой модели необходимо только HLA-типирование донора и реципиента.

Рисунок 1. Модели НК-аллореактивности на основе KIR, адаптировано из [15]. Модель «лиганд—лиганд» основывается исключительно на HLA-генотипах донора и реципиента, потенциальная аллореактивность возможна если у реципиента нет лиганда HLA для ингибирующего KIR донора. При этом наличие соответствующего ингибирующего KIR у донора только предполагается на основании HLA. Модель «рецептор—лиганд» несовместимости HLA реципиента и ингибиторного KIR донора, аллореактивность НК-клеток будет возможна в случае наличия у донора KIR, к которому нет лиганда у реципиента, при этом после алло-ТГСК требуется подтверждение экспрессии KIR с помощью иммунофенотипирования (ИФТ). Модель «отсутствующего лиганда» в целом аналогична модели «рецептор—лиганд», базируется на том, что аллореактивность НК-клеток в направлении «трансплантат против хозяина» возможна, когда на клетках реципиента отсутствует экспрессия по крайней мере одного из лигандов HLA (C1, C2 или -Bw4) для ингибирования KIR. Модель «ген—ген» основана на предположении, что НК-аллорективность возможна, когда донор и реципиент отличаются по генам KIR. Частным вариантом является модель, основанная на влиянии наличия отдельных KIR-генов (преимущественно гаплотипа «В»), а также общего количества KIR-генов у донора без учета HLA реципиента и донора

Figure 1. Models of NK alloreactivity based on KIR [15]. The hgand-hgand model is based on the HLA genotypes of the donor and recipient, potential alloreactivity is possible if the recipient does not have an HLA ligand for the donor's inhibitory KIR. In this case, the presence of the corresponding inhibitory KIR in the donor is only assumed on the basis of HLA The "receptor-ligand" model of HLA. incompafibilify of the recipient and inhibitory KIR donor, alloreactivity of NK cells will be possible if the donor has a KIR, to which the recipient does not have a ligand, and after allo-HSCT, confirmation of the KIR expression using immunophenotyping. The "missing ligand" model, in general, is similar to the "receptor-ligand" model, based on the fact that alloreactivity of NK cells in the direction of "graft versus host" is possible when the recipient cells lack the expression of at least one of the HLA. ligands (C1 , C2 or -Bw4) to inhibit KIR. The gene-gene model is based on the assumption that NK-alloreactivity is possible when the donor and recipient differ in KIR genes. A particular variant is с model based on the influence of the presence of individual KIR genes (mainly haplotype "B"), as well as the total number of KIR genes in a donor, without taking into account the HLA. of the recipient and donor

• Модель «рецептор—лиганд». Была предложена W. Leung и соавт. [18] на основе несовместимости HLA реципиента и ингибирующий KIR донора. В этой модели аллореактивность НК-клеток будет возможна в случае наличия у донора KIR, к которому нет лиганда у реципиента, поэтому эта модель может использоваться как в условиях HLA-несовместимых, так и при HLA-идентичных алло-ТГСК. Результаты исследования [18] показали, что модель «рецептор — лиганд» лучше предсказывает риск рецидива заболевания, особенно в отношении лимфоидных вариантов заболевания, по сравнению с моделью «лиганд—лиганд». Для подбора донора на основании этой модели необходимо HLA-типирование реципиента, геноти-пирование KIR донора, а также иммунофенотипиро-вание НК-клеток для подтверждения экспрессии KIR.

• Модель «отсутствующего лиганда» предсказывает аллореактивность НК-клеток в направлении «трансплантат против хозяина», когда на клетках реципиента отсутствует экспрессия по крайней мере одного из лигандов HLA (C1, C2 или -Bw4) для инги-бирования KIR. Требования к подбору донора аналогичны модели «рецептор—лиганд», однако в данном случае не проводится иммунофенотипирование НК-клеток.

• Модель «ген—ген» предсказывает аллореактивность НК-клеток, когда донор и реципиент отличают-

ся по генам KIR, и для подбора донора в соответствии с этой моделью необходимо генотипирование KIR донора и реципиента. Частным вариантом является модель, основанная на влиянии на развитие аллореактивности наличия отдельных KIR-генов, а также общего количества KIR-генов у донора без учета HLA реципиента и донора. S. Cooley и соавт. [19] показали, что в случае выполнения алло-ТГСК от неродственных доноров с гаплотипами «В» отмечается значительное улучшение безрецидивной выживаемости (БРВ) у больных ОМЛ.

Кроме того, существует модель аллореактивности НК-клеток, основанная на том, что 2 рецептора (ингибирующий KIR2DL1 и активирующий KIR2DS1) имеют общую лиганд-специфичность и взаимодействуют с HLA-C антигенами, относящимися к группе С2 [18]. Показано, что НК-клетки доноров, гомозиготные по С1-лиганду и имеющие в своем генотипе KIR2DS1, активируются in vitro клетками В-лимфобластной клеточной линии, экспрес-сирующими на своей поверхности лиганд С2. Такая активация происходит, в частности, благодаря отсутствию распознавания лиганда С1 ингибирующими KIR2DL2/3. При этом, помимо присутствия KIR2DS1, гомозиготность донора по С1 лиганду является главным условием, поскольку при наличии у донора ал-леля из группы С2, его НК-аллореактивность существенно снижается in vitro [20].

ингибирование/ лизис/

Рисунок 2. Схематичное изображение развития или ингибирования аллореактивности НК-клеток в направлении «трансплантат против опухоли» при отсутствии или наличии на клетках реципиента экспрессии лигандов HLA (C1, C2 или -Bw4) для ингибирования KIR [16]: так, при наличии на опухолевых клетках реципиента лиганда (например, С1) к ингибирующему KIR донора (например, KIR2DL2/3) развитие аллореактивного иммунного ответа не происходит, что может впоследствии привести к развитию рецидива заболевания. В свою очередь, если на клетках опухоли реципиента нет лиганда к соответствующему KIR донора, то благодаря отсутствию ингибирующего сигнала происходит лизис клетки опухоли НК-клеткой донора

Figure 2. Schematic representation of the development or inhibition of alloreactivity of NK cells in the direction of graft versus tumor in the absence or presence of expression of HLA ligands (C1, C2 or -Bw4) on recipient cells to inhibit KIR [16]: so in the presence of ligand recipient tumor cells ( for example, C1) to an inhibitory donor KIR receptor (for example, KIR2DL2/3), the development of an alloreactive immune response does not occur, which can subsequently lead to the development of a relapse of the disease. In turn, if there is no ligand to the corresponding KIR of the donor on the tumor cells of the recipient, then, due to the absence of an inhibitory signal, the tumor cell is lysed by the NK cell of the donor

Проведено множество клинических исследований, в основу которых легли разные модели потенциальной НК-аллореактивности. Тем не менее результаты этих исследований весьма противоречивы. На настоящий момент остается ряд ключевых вопросов относительно биологии НК-клеток после алло-ТГСК.

Цель данного обзора — анализ биологических и функциональных свойств НК-клеток, их рекон-ституции после алло-ТГСК и факторов, влияющих на этот процесс, а также механизмов аллореактивно-сти НК-клеток у больных после алло-ТГСК.

Реконституция НК-клеток после алло-ТГСК

Созревание и дифференцировка НК-клеток

НК-клетки происходят из гемопоэтических СО34+ стволовых клеток и клеток-предшественников в костном мозге, которые затем мигрируют в периферическую кровь [21]. На основании поверхностной экспрессии СО5б НК-клетки можно разделить на 2 основных подтипа: НК-клетки СОБбЬг^Ы: и СОБб^ш. НК-клетки СОБбЬг^Ы: существуют в основном в лимфатических узлах и миндалинах, тогда как НК-клетки СОБб^ш, более зрелая субпопуляция, доминируют в периферической крови [12, 21]. НК-клетки СОБбЬг^Ы: и СОБб^ш выполняют разные функции. Первая популяция быстро отвечает на интерлейкин-опосредованную стимуляцию пролиферацией и секрецией цитокинов, тогда как вторая

популяция, клетки которой обогащены перфорином и гранзимами, демонстрирует более высокую цито-литическую способность и более низкую пролиферацию [4, 22]. Нормальное количество НК-клеток в периферической крови восстанавливается примерно через 1 мес. после алло-ТГСК, однако требуется несколько месяцев, чтобы приобрести иммунофе-нотипические и функциональные характеристики, присущие НК-клеткам здоровых доноров. В первые 3 мес. после алло-ТГСК CD56bright клетки составляют 40—50 % от всех НК-клеток, тогда как у здоровых доноров таких клеток около 5—10 % [11, 23]. В процессе созревания CD94/NKG2A является первым рецептором, который экспрессируется на незрелых NK-клетках. На ранних сроках после алло-ТГСК НК-клетки также экспрессируют более высокие уровни ингибирующего рецептора, NKG2A, примерно 90 %, тогда как у здоровых доноров экспрессия NKG2A составляет порядка 50 % [11, 24]. Вместе с подавлением экспрессии CD56 НК-клетки усиливают экспрессию CD16, теряют NKG2A и приобретают KIR. Наконец, часть клеток CD56dim продолжает дифференцироваться и экспрессировать CD57 вместе с повышенной экспрессией KIR и характеризуется полным отсутствием пролиферативной способности [25]. Приобретение зрелого фенотипа занимает 3—6 мес., иногда дольше [11, 23] (рис. 3). Точно так же полноценная функциональная активность НК-клеток не достигается и спустя 6 мес. после алло-

ТГСК [11, 26].

CD56bright NKG2A+++ CD16- KIR-CD57-Perforin+/-

^ Высокий пролиферативный потенциал /

high proliferative potential

> Крайне низкая цитотоксичность /

low cytotoxicity

CD56dim NKG2A++ CD16+ KIR- CD57-Perforin+

^ Средний пролиферативный потенциал /

average proliferative potential

> Средняя цитотоксичность /

average cytotoxicity

CD56dim NKG2A+CD16+ KIR+/- CD57+/-Perforin++

^ Низкая пролиферация /

low proliferation

> Высокая цитотоксичность /

high cytotoxicity

CD56dim NKG2A- CD16+ KIR+ CD57+ Perforin+++

^ Нет пролиферативной способности/

no proliferative ability

> Высокая цитотоксичность/

high cytotoxicity

Рисунок 3. Созревание и дифференцировка НК-клеток [23] Figure 3. Maturation and differentiation of NK cells [23]

«Лицензирование» НК-клеток после алло-ТГСК

Толерантность НК-клеток к собственным тканям приобретается в ходе «обучения» и «лицензирования», при которых в процессе созревания НК-клетки ее ингибирующие KIR взаимодействуют с лиганда-ми HLA 1-го класса, что исключает развитие ауторе-активности. Напротив, при нарушении экспрессии HLA молекул 1-го класса, например на поврежденных вследствие инфекции клетках или клетках опухоли, сигналы активирующих KIR преобладают, и запускается механизм уничтожения этих клеток. Это свойство НК-клеток легло в основу гипотезы «отсутствия своего» [27].

После алло-ТГСК большинство НК-клеток экспрес-сируют донорский репертуар KIR, который значительно отличается от репертуара НК-клеток реципиента до алло-ТГСК [25]. Следовательно, НК-клетки, экспрессирующие донорские KIR, могут проявлять аллореактивные свойства у реципиентов. S. Rathmann и соавт. [28] выявили увеличение пула аллореактив-ных НК-клеток в периферической крови реципиентов, что дало возможность развиться РТПЛ на ранних сроках после алло-ТГСК. Одно из возможных объяснений этого наблюдения заключается в том, что трансфузия мегадоз донорских CD34+ клеток может создать временную доминантную среду донорских HLA в костном мозге реципиента и НК-клетки донора, экспрессирующие KIR, могут быть «обучены» донорским HLA, что и влияет на их функции [29]. После миграции в среду, в которой доминирует реципиент, НК-клетки могут постепенно терять свою способность реагировать.

Была выдвинута гипотеза о том, что функциональные особенности НК-клеток напрямую зависят от окружения. В исследованиях на мышах обнаружено, что зрелые НК-клетки от мышей с нормальной экспрессией MHC I класса становятся гипореактивными после трансфузии их мышам с дефицитной экспрессией MHC I класса. Напротив, анэргичные НК-клетки мышей с дефицитом MHC I класса приобрели полноценную функциональную активность после взаимодействия с клетками с достаточной экспрессией MHC I класса [30].

X.-Y. Zhao и соавт. [31] показали, что, когда на клетках донора и реципиента экспрессированы 3 основных лиганда HLA (HLA-C1, C2, Bw4), у больных ОМЛ и миелодиспластическим синдромом (ЖДС) была наименьшая частота рецидивов, а НК-клетки, экспрессирующие 3 ингибирующих рецептора, проявляли наибольшую цитотоксичность и цитокиновую реакцию против мишеней K562 (клеточная линия миелоидной опухоли). На основании результатов, описанных выше, предположено, что все 3 фактора (донорский KIR, HLA донора и HLA реципиента) вносят вклад в вариации функциональных особенностей НК-клеток.

Влияние KIR и их лигандов на результаты алло-ТГСК

Аллореактивность НК-клеток и инфекционные осложнения

Инфекции особенно опасны для больных после ТГСК вследствие иммунологической дисфункции, вызванной множеством факторов, включая интенсивность режима кондиционирования, применение иммуносупрессивной терапии, а также развитие осложнений, таких как РТПХ [32]. В нескольких исследованиях сообщалось, что больные, которым была выполнена алло-ТГСК, при отсутствии у реципиента лиганда для ингибирующего KIR донора, то есть больные с потенциально аллореактивными НК-клетками, были более уязвимы к инфекциям. _М. Schaffer и соавт. [33] впервые сообщили, что отсутствие лиганда для ингибирующего KIR связано с увеличением летальности вследствие инфекционных осложнений. Аналогичным образом X.-Y. Zhao и соавт. [34] показали, что реципиенты, у которых не было лиганда для KIR донора, имели значительно более высокую вероятность реактивации цитомегаловируса (Ц-МВ). Более того, доля НК-клеток, экспрессирующих интерферон-гамма (ИФН-у), в периферической крови, была значительно больше у больных, имевших ли-ганд для KIR донора, через 30 и 100 дней после ал-ло-ТГСК, по сравнению больными с потенциально аллореактивными НК-клетками. Большая секреция ИФН-Y НК-клетками может запускать иммунные ответы Т^-клеток, активацию АПК и фагоцитоз [4, 22], что приводит к снижению частоты инфицирования. В то же время при отсутствии у реципиента лиганда для ингибирующего KIR донора риск развития инфекционных осложнений на ранних сроках после алло-ТГСК может увеличиваться за счет элиминации АПК реципиента аллореактивными НК-клетками донора [17].

Многие исследования показали, что гены KIR-B «защищают» больных после алло-ТГСК от инфекционных осложнений [35, 36]. Ж. Cook и соавт. [37] впервые отметили, что у доноров гаплотипа «B» значительно меньше скорость реактивации Ц_МВ после родственной алло-ТГСК. Кроме того, другие исследователи сообщили, что при выполнении алло-ТГСК от доноров, экспрессировавших большее количество активирующих KIR, вероятность реактивации Ц_МВ была ниже [35, 38]. Таким образом, активация KIR2DS2 и KIR2DS4 может играть важную защитную роль [35, 39]. Проведение алло-ТГСК от доноров с KIR2DS1 также ассоциировалось с лучшим контролем над инфекционными осложнениями [40]. A. Mancusi и соавт. [40] показали, что связывание KIR2DS1 с HLA-C2 запускает продукцию провоспалительных цитокинов аллореактивными НК-клетками. Более того, выполнение

алло-ТГСК от донора К1Я2О82 при отсутствии родственного лиганда (НБА-С1) у реципиента было сопряжено с более высокой вероятностью реактивации ЦМВ

[41]. Помимо снижения вероятности реактивации ЦМВ, частота бактериальных инфекций также снижалась, когда алло-ТГСК выполняли от доноров КЖ-В/х [36]. В отличие от предыдущих результатов, при алло-ТГСК с Т-клеточной деплецией от доноров с К1К2О82 и Сеп-В/х была отмечена более высокая частота реактивации ЦМВ и связанная с инфекцией летальность

[42]. Причиной таких разных результатов может быть разный состав трансплантата. Как описано ранее, НК-клетки генерируют больше НФН-у в трансплантатах с Т-клетками, что может в дальнейшем помочь в борьбе с инфекцией на ранних сроках после трансплантации

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

[43]. Активирующие мишени К1К вне НБА в значительной степени неизвестны, и эти клинические наблюдения требуют дальнейших исследований.

Реактивация ЦМВ предполагает состояние, сопряженное с ослабленным иммунитетом, однако у части больных, у которых возникла реактивация ЦМВ, была более низкая частота рецидивов или лучшая выживаемость [44]. Этот защитный эффект может быть объяснен быстрым созреванием НК-клеток. Во время реактивации ЦМВ пул НК-клеток, экспрессирующих ККС2С, быстро разрастается и продолжает увеличиваться в течение года [44]. Количество СЭБб^ш НК-клеток в периферической крови, их экспрессия К1К и продукция ИФН-у в ответ на клетки К562 (клеточная линия миелоидной опухоли) также были повышены у больных, у которых была реактивация ЦМВ [44, 45]. Кроме того, почти 60 % НК-клеток достигли

полной дифференцировки и экспрессировали СО57 после реактивации ЦМВ [21, 46]. Напротив, для больных, которые не сталкивались с ЦМВ-инфекцией, более высокая доля ККС2А+ККС2С-КШ- НК-клеток в периферической крови указывает на медленное созревание НК-клеток. Воздействие антигена ЦМВ на реципиентов также приводит к увеличению пула ^КС2С+ НК-клеток, что сопровождается увеличением экспрессии КШ и снижением экспрессии [47].

Аллореактивность НК-клеток и РТПХ

РТПХ является серьезным осложнением алло-ТГСК и сопряжена с высоким риском инфекционных осложнений и высокой летальностью. При развитии РТПХ аллогенные донорские иммунные клетки активируются АПК реципиента, а затем распознают и атакуют здоровые ткани хозяина [48]. Удаление донорских Т-клеток из трансплантата снижает частоту возникновения РТПХ, но также повышает риск развития несостоятельности трансплантата и рецидива заболевания [49].

В исследовании на мышах было показано, что адоптивный перенос НК-клеток, активированных интер-лейкином (ИЛ)-2, вместе с донорскими клетками

костного мозга способствует эффективному приживлению трансплантата без признаков РТПХ [50]. Позже О. Asai и соавт. [51] сообщили, что мыши, которым вводили несовместимые по главному комплексу гисто-совместимости (ГКГС) клетки костного мозга и селезенки (в качестве источника Т-клеток), быстро умирали от острой РТПХ, в то время как у мышей, которым дополнительно вводили НЛ-2-активированные донорские НК-клетки в день 0, значительно улучшалась выживаемость вследствие меньшей частоты тяжелой РТПХ. Авторы [51] также показали, что такая профилактика РТПХ напрямую зависит от трансформирующего фактора роста-бета (Transforming growth factor beta, TGF-в) и при введении анти-TGF- в антител этот эффект нивелировался. Более того, L. Ruggeri и соавт. [17] показали, что у мышей, имевших Ly49 (рецепторы Ly49 распознают молекулы ГКГС I класса у мышей, что аналогично KIR у людей), трансфузия донорских НК-клеток с несоответствующим лигандом успешно элиминирует остаточные опухолевые клетки хозяина и защищает от РТПХ за счет истощения АПК хозяина. Напротив, мыши, которым выполнялась трансплантация костного мозга без трансфузии НК-клеток, умирали от РТПХ, а трансфузия НК-клеток, несущих на своей поверхности рецепторы соответствующие лиганду Ly49, не обеспечивала защиты от РТПХ. Последующие исследования также показали, что донорские аллореактивные НК-клетки подавляли развитие РТПХ, ингибируя пролиферацию и активацию T-клеток [52, 53]. В пилотном исследовании было показано, что у больных рефрактерной формой ОМЛ, которым была выполнена алло-ТГСК от гаплоиден-тичного донора (гапло-ТГСК) с последующей трансфузией донорских НК-клеток, риск развития РТПХ был ниже, чем у больных без трансфузии НК-клеток [54]. Однако «защитная» роль НК-клеток в патогенезе РТПХ подвергается сомнению. В исследовании N. Shah и соавт. [55] больные, получившие трансфузию донорских HH-15/4-1BBL-aKTHBHpoBaHHbix НК-клеток после гапло-ТГСК с Т-клеточной деплецией, имели более высокий риск РТПХ.

В дополнение к методу адоптивного переноса во многих клинических исследованиях анализировалось влияние аллореактивности НК-клеток на развитие РТПХ. В большинстве исследований не сообщалось о значительной связи между этими параметрами [56, 57], а некоторые исследователи сообщили о защитном эффекте [58, 59]. Более того, в нескольких исследованиях было показано, что отсутствие у реципиента лиганда для ингибирующего KIR донора увеличивает риск РТПХ [60, 61].

Не совсем было понятно, почему аллореактивные НК-клетки, образовавшиеся de novo после алло-ТГСК, в отличие от отдельно заготовленных НК-клеток донора, введенных в ходе адоптивного переноса, были

неспособны предотвратить РТПХ. Исследования показали, что это несоответствие было связано с нарушением функции НК-клеток после алло-ТГСК, поскольку на восстановление нормального репертуара НК-клеток, напоминающего репертуар донора, реципиенту требуется период в несколько месяцев или даже лет [62]. При этом НК-клетки после алло-ТГСК длительное время остаются незрелыми и проявляют пониженную цитотоксичность [24]. Кроме того, на восстановление НК-клеток влияет ряд факторов, в том числе состав трансплантата. У больных, получивших больше Т-клеток в трансплантатах, наблюдается более быстрое восстановление Т-клеточного звена [63], в то время как абсолютное количество НК-клеток и экспрессия ими KIR уменьшалось из-за воздействия «совместно трансплантированных» Т-клеток [64]. Помимо НК-клеток, почти 5 % CD8+ T-клеток, 0,2 % CD4+ T- клеток и 10 % уб T-клеток в периферической крови также экс-прессируют KIR [65]. Следовательно, потенциальные положительные эффекты аллореактивных НК-клеток могут быть подавлены сильным ответом аллореактивных Т-клеток. Кроме того, НК-клетки вырабатывали больше ИФН-Y в присутствии Т-клеток в трансплантатах, что приводило к более частому возникновению острой РТПХ [43]. Иммуносупрессивная терапия после алло-ТГСК также оказывает негативное влияние на восстановление НК-клеток [66].

Что касается конкретных генотипов, то в некоторых исследованиях сообщается, что при выполнении алло-ТГСК от доноров с гаплотипом «B» значительно снижается риск РТПХ [67, 68]. В соответствии с этими выводами S. Sivori и соавт. [69] предположили, что донорские НК-клетки, экспрессирующие KIR2DS1, эффективны в уничтожении аллогенных дендритных клеток в условиях гапло-ТГСК, что приводит к лучшему контролю над РТПХ. Однако в нескольких исследованиях было обнаружено, что выполнение ал-ло-ТГСК от доноров с KIR-B/x приводило к более высокой вероятности развития РТПХ у реципиентов по сравнению с алло-ТГСК от доноров с A/A, вероятно, из-за большей продукции ИФН-у аллореактивными НК-клетками [70]. Другие факторы, такие как несовместимость по HLA, основное заболевание, возраст больного, профилактика РТПХ и источник трансплантата, также влияли на развитие РТПХ в этих исследованиях [71].

Каким образом НК-клетки влияют на риск РТПХ, остается в значительной степени неизвестным, и взаимосвязь между НК и T-клетками при развитии РТПХ требует дальнейшего исследования.

Аллореактивность НК-клеток и рецидив заболевания

Рецидив заболевания остается главной проблемой алло-ТГСК, поскольку влияет на долгосрочные ре-

зультаты лечения опухолевых заболеваний системы крови. Адоптивный перенос аутологичных НК-клеток для больных онкологическими заболеваниями безопасен, но малоэффективен [72]. Вероятно, аутологичные НК-клетки не могут преодолеть ингибирующие сигналы опухолевых клеток, экспрессирующих собственный HLA. Напротив, трансфузии аллогенных [73], особенно гаплоидентичных, донорских НК-клеток открывают широкие перспективы лечения больных гемобластозами [74] и профилактической посттрансплантационной терапии [75].

Ответ на вопрос о том, предотвращают ли ал-лореактивные НК-клетки рецидив заболевания при алло-ТГСК, остается открытым. В отношении HLA-несовместимых алло-ТГСК группа из Перуджи отметила, что при выполнении алло-ТГСК с предшествующей Т-клеточной деплецией с применением высоких доз стволовых клеток без посттрансплантационной иммуносупрессии, отсутствие у реципиента лиганда для ингибирующего KIR донора снижает риск рецидива и заметно улучшает выживаемость больных ОМЛ, но не больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) [17]. Этот «противорецидивный» эффект впоследствии был подтвержден многими клиническими исследованиями [40, 57, 76, 77], особенно при мие-лоидных вариантах заболевания [40, 57, 77] и при ал-ло-ТГСК с Т-клеточной деплецией [40, 57, 76]. Иные данные были получены исследователями, которые не смогли воспроизвести эти результаты [18, 56], а некоторые даже пришли к противоположным выводам [78, 79]. В исследованиях с использованием модели «рецептор—лиганд», включавших HLA-совместимые пары «донор — реципиент», также были получены противоречивые результаты. W. Leung и соавт. [18] сообщили, что модель «рецептор—лиганд» является более точной, чем модель «лиганд—лиганд», при прогнозировании риска рецидива, особенно при лимфоидных вариантах заболевания. Более того, эффективность защиты от рецидива коррелировала с количеством пар несоответствия («мисматчами») в модели «рецептор—лиганд». Впоследствии «противорецидивный» эффект «мисматчей» в модели «рецептор—лиганд» был подтвержден многими исследованиями [80, 81]. Однако в других исследованиях были получены противоположные результаты [82, 83]. В двух исследованиях из -Японии [82, 83] было показано, что отсутствие лиганда HLA-C2 для донорского ингибирующего KIR обеспечивало защиту от рецидивов у больных ОМЛ и хроническим миелолейкозом, но увеличивало частоту рецидивов у больных ОЛЛ. Увеличение частоты рецидивов у больных ОЛЛ может быть обусловлено неспособностью НК-клеток уничтожать бластные клетки при ОЛЛ из-за отсутствия на них экспрессии молекул, обеспечивающих межклеточное взаимодействие, таких как ICAM-1 [84].

В отличие от спорных результатов, описанных выше, в вопросе влияния гаплотипа «B» на результаты ал-ло-ТГСК достигнуто большее согласие. Показано, что больные ОМЛ, которым была выполнена алло-ТГСК от доноров с KIR-B/x, имели на 30 % лучшую БРВ по сравнению с реципиентами аллогенных гемо-поэтических стволовых клеток от доноров A/A [19]. Впоследствии во многих исследованиях подтвердили влияние гаплотипа «B» на рецидив и выживаемость больных гемобластозами [9, 68, 71, 85—88]. В 5 из этих исследований сообщено, что противорецидивный эффект проявлялся при выполнении алло-ТГСК от донора с KIR Cen-B [9, 68, 71, 87, 88]. F. Babor И соавт. [89] предположили, что присутствие Cen-B в отсутствии Tel-B улучшает контроль ОЛЛ у детей. Ген KIR2DS2, расположенный на мотиве Cen-B [71, 90], и ген KIR2DS1, расположенный на мотиве Tel-B [40, 91], были связаны с уменьшением частоты рецидивов или улучшением выживаемости. Однако M.R. Verneris и соавт. [56] не обнаружили связи между результатами алло-ТГСК и аллореактивностью НК-клеток у детей с острыми лейкозам. Схожие данные были получены исследователями из НМИЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева. Авторы [92] проанализировали влияние аллореактивности НК-клеток в соответствии с тремя моделями («лиганд—лиганд», «рецептор—лиганд» и влияние отдельных KIR-генов, в данном случае гаплотипа «В») у детей, больных острыми лейкозами, которым была выполнена га-пло-ТГСК с деплецией a/ß TCR/CD19+ лимфоцитов. При анализе влияния предсказанной по описанным моделям НК-аллореактивности не выявлено значимых различий риска развития рецидива, общей выживаемости (OB) и БРВ, однако отмечена тенденция к улучшению OB при анализе по модели «рецептор—лиганд» в случае потенциальной НК-аллореактивности донора, и у больных, чьи доноры имели наилучший («best») B-контент.

Е.Г. Хамаганова и соавт. [93] суммировали данные системы KIR/HLA в один показатель, который позволил оценить влияние KIR/HLA на вероятность развития рецидива после алло-ТГСК у больных ОМЛ. Авторы [93] разработали систему оценок, основанную на факторах, ассоциировавшихся с тенденцией к увеличению БСВ. Ими показано, что среди больных ОМЛ из группы стандартного риска 3-летняя БСВ достоверно выше была у тех, у кого суммарный показатель KIR/HLA был не менее 3 баллов, по сравнению с теми, у кого суммарный показатель составлял 0—2 балла (87,5 % против 40 %, p = 0,05). Е. Krieger и соавт. [94] также разработали систему оценок, в которой количественно анализировались взаимодействия нескольких генов KIR и лигандов HLA. Этот комплексный метод позволил усовершенствовать стратегию выбора донора и может иметь большой потенциал в будущем.

Кроме того, адоптивная терапия, как, например, трансфузии лимфоцитов донора, после алло-ТГСК обладает значительным потенциалом в предотвращении рецидива заболевания. Иммунотерапия на основе НК-клеток также может быть включена в терапевтический арсенал после алло-ТГСК. В исследованиях по применению иммунотерапии на основе НК-клеток в сочетании с цитокинами и без них была показана ее противоопухолевая активность. В работе I. Choi и соавт. [95] больным гемобластозами, которым была выполнена гапло-ТГСК, дважды через 2 и 3 недели после трансплантации вводили НК-клетки донора. При сравнении с историческим контролем не было значимых различий в развитии несостоятельности трансплантата, острой и хронической РТПХ, а также в смертности, не связанной с рецидивом заболевания. Однако наблюдали значительное уменьшение вероятности развития рецидива (с 74 до 46 %). При многофакторном анализе трансфузии НК-клеток после трансплантации были независимыми предикторами меньшей вероятности развития рецидива (отношение рисков — 0,527). Положительные эффекты могут лимитироваться временной функцией адоптивно перенесенных НК-клеток. Однако в исследовании, выполненном в экспериментальной модели на мышах, было показано, что предварительно активированные ИЛ-12/18 НК-клетки более устойчивы, при этом не только стимулировали РТПЛ, но и уменьшали вероятность развития острой РТПХ. Таким образом, трансфузии донорских НК-клеток, предварительно активированных ИЛ-12/18, могут рассматриваться в качестве эффективной и безопасной адоптивной терапии после алло-ТГСК [96]. Опубликованы результаты клинического исследования I/II фазы по применению трансфузий донорских НК-клеток, активированных ИЛ-21, с целью уменьшения вероятности развития рецидива после гапло-ТГСК у больных миелоидными лейкозами (NCT01904136) [97]. В исследование было включено 25 больных, которым были выполнены трансфузии донорских НК-клеток (1х105 — 1х108 клеток/кг) в —2, +7 и +28 дни после гапло-ТГСК. Результаты трансплантации в исследуемой группе сравнивали с независимой когортой больных из базы данных CIBMTR. Частота рецидивов в течение 2 лет после гапло-ТГСК в исследуемой группе по сравнению с контрольной составила 4 % против 38 % (p = 0,014), БРВ — 66 % против 44 % (p = 0,1). В исследуемой группе рецидив возник только у одного больного с большим количеством донор-специфических aHTH-HLA-антител до трансплантации. Частота рецидивов через 2 года и БРВ у больных без донор-специфических aHTH-HLA-антител составили 0 % против 40 % и 72 % против 44 %, соответственно, отношение рисков для БРВ — 2,64 (p = 0,029) в контрольной группе. Авторы позиционируют данную методику как безопасную терапевтическую опцию, способную

снизить вероятность развития рецидива благодаря быстрой иммунной реконституции с преобладанием зрелых НК-клеток в раннем посттрансплантационном периоде [97].

Альтернативой адоптивной терапии может являться применение ингибиторов иммунных контрольных точек (ИКТ). Помимо К1К, НК-клетки экспрессиру-ют различные ко-ингибирующие рецепторы, включая КК02А, РО-1, СТЬА-4, которые являются иммунными контрольными точками (рис. 4). Применение ингибиторов СТЬА-4 (ипилимумаб) и РО-1 (ниво-лумаб) после алло-ТГСК при гемобластозах существенно усиливало эффект РТПЛ, но сопровождалось развитием тяжелой РТПХ [98]. Однако увеличение вероятности РПТХ было обусловлено скорее активацией Т-лимфоцитов, которые также экспрессируют РО-1 и СТЬА-4, нежели с НК-клетками. Возникает вопрос: может ли использование ИКТ, специфичных для НК-клеток, улучшить БРВ больных после алло-ТГСК без увеличения вероятности развития РТПХ? 1РН2101 — моноклон а льное антитело, направленное против К1Я1-7Р9 (лирилумаб), блокирует ингибирую-щие К1Я (К1Я2ВЬЮ8-1, -2 и -3) использовали для терапии множественной миеломы, и, хотя в испытании 2-й фазы при «тлеющей» множественной миеломе (КСТ01248455) его применение не показало клинической эффективности, однако адоптивный перенос НК-клеток в сочетании с 1РН2101 после алло-ТГСК может иметь терапевтический эффект. Применение анти-КК02А моноклонального антитела (монализумаб) может индуцировать цитолитическую активность

NKG2A+ НК-клеток против HLA-E-экспрессирующих лейкемических клеток in vitro и in vivo [85, 99]. Кроме того, уменьшение количества NKG2A+ НК-клеток после алло-ТГСК сопряжено с развитием тяжелой РТПХ [100], так как именно NKG2A+ НК-клетки ингибиру-ют пролиферацию и активацию Т-клеток и могут предотвращать РТПХ [100]. Следовательно, применение монализумаба после алло-ТГСК имеет большой клинический потенциал и может не только усилить противорецидивный эффект НК-клеток, но и снизить вероятность РТПХ.

Таким образом, исследования показали, что наличие аллореактивных НК-клеток влияет на результаты алло-ТГСК. Однако протективная роль аллореактивных НК-клеток в защите от рецидива, в основном, описана при миелоидных опухолях, при этом аллореактивность НК-клеток увеличивает риск рецидива у больных ОЛЛ. Поэтому остается открытым вопрос, каким именно больным будет полезен выбор донора на основе KIR. Да и само определение оптимального донора, который потенциально имеет лучшую функциональную активность НК-клеток, с использованием установленных моделей KIR, все еще вызывает споры. Знание особенностей восстановления НК-клеток после алло-ТГСК может способствовать лучшему пониманию того, как НК-клетки влияют на результаты трансплантации у больных гемобластозами. В целом потенциальная аллореактивность на основе KIR возможна лишь при функциональной реконституции НК-клеточного звена, на скорость которой влияет большое количество факторов. На функциональ-

Рисунок 4. Рецепторы иммунных контрольных точек и их лиганды, возможности применения ингибиторов контрольных точек с целью стимуляции функции НК-клеток [16] Figure 4. Immune checkpoint receptors and their ligands, possible use of checkpoint inhibitors to stimulate NK cell function [16]

ную активность НК-клеток могут отрицательно влиять Т-клетки в трансплантате. Однако функция НК-клеток также может стимулироваться посредством активации, опосредованной Т-клетками. Механизмы взаимодействия между НК-клетками и T-клетками, а также стратегию «запуска» потенциального синер-гетического эффекта НК-клеток и T-клеток еще предстоит изучить. Выполнение иммунофенотипических исследований в контрольные сроки после алло-ТГСК с оценкой созревания и дифференцировки НК-клеток

Литература

1. Савченко В.Г., Менделеева Л.П., Клясова Г.А. и др. Эффективность трансплантации аллогенного костного мозга у больных острыми лейкозами в фазе полной ремиссии и у больных хроническим миелолейкозом в хронической фазе. Терапевтический архив. 1999; 71 (7): 27-32.

2. Holmqvist A.S., Chen Y., Wu J., et al. Assessment of late mortality risk after allogeneic blood or marrow transplantation performed in childhood. JAMA Oncol. 2018; 4(12): e182453. DOI: 10.1001/jamaoncol.2018.2453.

3. Styczynski J., Tridello G., Koster L., et al. Death after hematopoietic stem cell transplantation: Changes over calendar year time, infections and associated factors. Bone Marrow Transplant. 2020; 55(1): 126-36. DOI: 10.1038/s41409-019-0624-z.

4. Vivier E., Tomasello E., Baratin M., et al. Functions of natural killer cells. Nat Immunol. 2008; 9(5): 503-10. DOI: 10. 1038/n i 1582.

5. Pegram H.J., Andrews D.M., Smyth M.J., et al. Activating and inhibitory receptors of natural killer cells. Immunol Cell Biol. 2011; 89(2): 216-24. DOI: 10.1038/ icb.2010.78.

6. Wilson M.J., Torkar M., Trowsdale J. Genomic organization of a human killer cell inhibitory receptor gene. Tissue Antigens. 1997; 49(6): 574-9. DOI: 10.1111/ j.1399-0039.1997.tb02804.x.

7. Hsu K.C., Chida S., Geraghty D.E., Dupont B. The killer cell immunoglobulin-like receptor (KIR) genomic region: Gene-order, haplotypes and allelic polymorphism. Immunol Rev. 2002; 190: 40-52. DOI: 10.1034/j.1600-065X.2002.19004.x.

8. Manser A.R., Weinhold S., Uhrberg M. Human KIR repertoires: Shaped by genetic diversity and evolution. Immunol Rev. 2015; 267(1): 178-96. DOI: 101111/imr12316.

9. Cooley S., Weisdorf D.J., Guethlein L.A., et al. Donor selection for natural killer cell receptor genes leads to superior survival after unrelated transplantation for acute myelogenous leukemia. Blood. 2010; 116(14): 2411-9. DOI: 10.1182/ blood-2010-05-283051.

10. Leung W. Use of NK cell activity in cure by transplant. Br J Haematol. 2011; 155(1): 14-29. DOI: 10.1111Д1365-2141.2011.08823.Х.

11. Bjorklund A.T., Schaffer M., Fauriat C., et al. NK cells expressing inhibitory KIR for non-self-ligands remain tolerant in HLA-matched sibling stem cell transplantation. Blood. 2010; 115(13): 2686-94. DOI: 10.1182/blood-2009-07-229740.

12. Pende D., Marcenaro S., Falco M., et al. Anti-leukemia activity of allo-reactive NK cells in KIR ligand-mismatched haploidentical HSCT for pediat-ric patients: Evaluation of the functional role of activating KIR and redefinition of inhibitory KIR specificity. Blood. 2009; 113(13): 3119-29. DOI: 10.1182/ blood-2008-06-164103.

13. Ogonek J., Kralj Juric M., Ghimire S., et al. Immune reconstitution after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Front Immunol. 2016; 7: 507. DOI: 10.3389/fimmu.2016.00507.

14. Hu B., Bao G., Zhang Y., et al. Donor NK cells and IL-15 promoted engraft-ment in nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation. J Immunol. 2012; 189(4): 1661-70. DOI: 10.4049/jimmunol.1103199.

может помочь выявить больных, которым могут быть необходимы трансфузии НК-клеток донора с целью предотвращения рецидива заболевания. Более глубокие исследования, сфокусированные на «функциональных изменениях в НК-клетках», а не на «совпадении или несовпадении» в рамках существующих моделей аллореактивности по KIR, могут помочь нам действительно приблизиться к выбору оптимального донора и стратегии посттрансплантационной профилактической терапии.

References

1. Savchenko V.G., Mendeleeva L.P., Klyasova G.A., et al. Efficiency of alloge-neous bone marrow transplantation in patients with acute leukemia in the phase of complete remission and in patients with chronic myelukemia in the chronic phase. Therapevticheskii arkhiv. 1999; 71 (7): 27-32. (In Russian).

2. Holmqvist A.S., Chen Y., Wu J., et al. Assessment of late mortality risk after allogeneic blood or marrow transplantation performed in childhood. JAMA Oncol. 2018; 4(12): e182453. DOI: 10.1001/jamaoncol.2018.2453.

3. Styczynski J., Tridello G., Koster L., et al. Death after hematopoietic stem cell transplantation: Changes over calendar year time, infections and associated factors. Bone Marrow Transplant. 2020; 55(1): 126-36. DOI: 10.1038/s41409-019-0624-z.

4. Vivier E., Tomasello E., Baratin M., et al. Functions of natural killer cells. Nat Immunol. 2008; 9(5): 503-10. DOI: 10.1038/n i 1582.

5. Pegram H.J., Andrews D.M., Smyth M.J., et al. Activating and inhibitory receptors of natural killer cells. Immunol Cell Biol. 2011; 89(2): 216-24. DOI: 10.1038/ icb.2010.78.

6. Wilson M.J., Torkar M., Trowsdale J. Genomic organization of a human killer cell inhibitory receptor gene. Tissue Antigens. 1997; 49(6): 574-9. DOI: 101111/ j.1399-0039.1997.tb02804.x.

7. Hsu K.C., Chida S., Geraghty D.E., Dupont B. The killer cell immunoglobulin-like receptor (KIR) genomic region: Gene-order, haplotypes and allelic polymorphism. Immunol Rev. 2002; 190: 40-52. DOI: 10.1034/j.1600-065X.2002.19004.x.

8. Manser A.R., Weinhold S., Uhrberg M. Human KIR repertoires: Shaped by genetic diversity and evolution. Immunol Rev. 2015; 267(1): 178-96. DOI: 10.1111/imr12316.

9. Cooley S., Weisdorf D.J., Guethlein L.A., et al. Donor selection for natural killer cell receptor genes leads to superior survival after unrelated transplantation for acute myelogenous leukemia. Blood. 2010; 116(14): 2411-9. DOI: 10.1182/ blood-2010-05-283051.

10. Leung W. Use of NK cell activity in cure by transplant. Br J Haematol. 2011; 155(1): 14-29. DOI: 101111/1.1365-2141.2011.08823.x.

11. Bjorklund A.T., Schaffer M., Fauriat C., et al. NK cells expressing inhibitory KIR for non-self-ligands remain tolerant in HLA-matched sibling stem cell transplantation. Blood. 2010; 115(13): 2686-94. DOI: 10.1182/blood-2009-07-229740.

12. Pende D., Marcenaro S., Falco M., et al. Anti-leukemia activity of allo-reactive NK cells in KIR ligand-mismatched haploidentical HSCT for pediat-ric patients: Evaluation of the functional role of activating KIR and redefinition of inhibitory KIR specificity. Blood. 2009; 113(13): 3119-29. DOI: 10.1182/ blood-2008-06-164103.

13. Ogonek J., Kralj Juric M., Ghimire S., et al. Immune reconstitution after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Front Immunol. 2016; 7: 507. DOI: 10.3389/fimmu.2016.00507.

14. Hu B., Bao G., Zhang Y., et al. Donor NK cells and IL-15 promoted engraft-ment in nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation. J Immunol. 2012; 189(4): 1661-70. DOI: 10.4049/jimmunol.1103199.

15. Moretta L., Monlaldo E., Vacca P., et al. Human natural killer cells: Origin, receptors, function, and clinical applications. Int Arch Allergy Immunol. 2014; 164(4): 253-64. DOI: 10.1159/000365632.

16. Hattori N., Nakamaki T. Natural killer immunotherapy for minimal residual disease eradication following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation in acute myeloid leukemia. Int J Mol Sci. 2019; 20(9): 2057. DOI: 10.3390/ ijms20092057.

17. Ruggeri L., Capanni M., Urbani E., et al. Effectiveness of donor natural killer cell alloreactivity in mismatched hematopoietic transplants. Science. 2002; 295(5562): 2097-100. DOI: 10.1126/science.1068440.

18. Leung W., Iyengar R., Turner V., et al. Determinants of antileukemia effects of allogeneic NK cells. J Immunol. 2004; 172(1): 644-50. DOI: 10.4049/jim-munol.172.1.644.

19. Cooley S., Trachtenberg E., Bergemann T.L., et al. Donors with group B KIR haplotypes improve relapse-free survival after unrelated hematopoietic cell transplantation for acute myelogenous leukemia. Blood. 2009; 113(3): 726-32. DOI: 10.1182/blood-2008-07-171926.

20. Chewning J.H., Gudme C.N., Hsu K.C., et al. KIR2DS1-positive NK cells mediate alloresponse against the C2 HLA-KIR ligand group in vitro. J Immunol. 2007; 179(2): 854-68. DOI: 10.4049/jimmunol. 179.2.854.

21. Montaldo E., Del Zotto G., Della Chiesa M., et al. Human NK cell receptors/ markers: A tool to analyze NK cell development, subsets and function. Cytometry A. 2013; 83(8): 702-13. DOI: 10.1002/cyto.a.22302.

22. Caligiuri M.A. Human natural killer cells. Blood. 2008; 112(3): 461-9. DOI: 10.1182/blood-2007-09-077438.

23. Locatelli F., Pende D., Falco M., et al. NK cells mediate a crucial graft-versus-leukemia effect in haploidentical-HSCT to cure high-risk acute leukemia. Trends Immunol. 2018; 39(7): 577-90. DOI: 10.1016/J.IT.2018.04.009.

24. Vago L., Forno B., Sormani M.P., et al. Temporal, quantitative, and functional characteristics of single-KIR-positive alloreactive natural killer cell recovery account for impaired graft-versus-leukemia activity after haploidentical hematopoi-etic stem cell transplantation. Blood. 2008; 112(8): 3488-99. DOI: 10.1182/ blood-2007-07-103325.

25. Abel A.M., Yang C., Thakar M.S., et al. Natural killer cells: Development, maturation, and clinical utilization. Front Immunol. 2018; 9: 1869. DOI: 10.3389/ fimmu.2018.01869.

26. Foley B., Cooley S., Verneris M.R., et al. NK cell education after allogeneic transplantation: Dissociation between recovery of cytokine-producing and cytotoxic functions. Blood. 2011; 118(10): 2784-92. DOI: 10.1182/blood-2011 -04-347070.

27. Schönberg K., Fischer J.C., Kögler G., Uhrberg M. Neonatal NK-cell repertoires are functionally, but not structurally, biased toward recognition of self HLA class I. Blood. 2011; 117(19): 5152-6. DOI: 10.1182/blood-2011-02-334441.

28. Rathmann S., Glatzel S., Schönberg K., et al. Expansion of NKG2A-LIR1- natural killer cells in HLA-matched, killer cell immunoglobulin-like receptors/HLA-li-gand mismatched patients following hematopoietic cell transplantation. Biol Blood Marrow Transplant. 2010; 16(4): 469-81. DOI: 10.1016/j.bbmt.2009.12.008.

29. Moretta L., Locatelli F., Pende D., et al. Killer Ig-like receptor-mediated control of natural killer cell alloreactivity in haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Blood. 2011; 117(3): 764-71. DOI: 10.1182/blood-2010-08-264085.

30. Elliott J.M., Yokoyama W.M. Unifying concepts of MHC-dependent natural killer cell education. Trends Immunol. 2011; 32(8): 364-72. DOI: 10.1016/J. IT.2011.06.001.

31. Zhao X.-Y., Yu X.-X., Xu Z.-L., et al. Donor and host coexpressing KIR li-gands promote NK education after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Blood Adv. 2019; 3(24): 4312-25. DOI: 10.1182/bloodadvanc-es.2019000242.

15. Moretta L., Montaldo E., Vacca P., et al. Human natural killer cells: Origin, receptors, function, and clinical applications. Int Arch Allergy Immunol. 2014; 164(4): 253-64. DOI: 10.1159/000365632.

16. Hattori N., Nakamaki T. Natural killer immunotherapy for minimal residual disease eradication following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation in acute myeloid leukemia. Int J Mol Sci. 2019; 20(9): 2057. DOI: 10.3390/ ijms20092057.

17. Ruggeri L., Capanni M., Urbani E., et al. Effectiveness of donor natural killer cell alloreactivity in mismatched hematopoietic transplants. Science. 2002; 295(5562): 2097-100. DOI: 10.1126/science.1068440.

18. Leung W., Iyengar R., Turner V., et al. Determinants of antileukemia effects of allogeneic NK cells. J Immunol. 2004; 172(1): 644-50. DOI: 10.4049/jimmunol.172.1.644.

19. Cooley S., Trachtenberg E., Bergemann T.L., et al. Donors with group B KIR haplotypes improve relapse-free survival after unrelated hematopoietic cell transplantation for acute myelogenous leukemia. Blood. 2009; 113(3): 726-32. DOI: 10.1182/blood-2008-07-171926.

20. Chewning J.H., Gudme C.N., Hsu K.C., et al. KIR2DS1-positive NK cells mediate alloresponse against the C2 HLA-KIR ligand group in vitro. J Immunol. 2007; 179(2): 854-68. DOI: 10.4049/jimmunol.179.2.854.

21. Montaldo E., Del Zotto G., Della Chiesa M., et al. Human NK cell receptors/ markers: A tool to analyze NK cell development, subsets and function. Cytometry A. 2013; 83(8): 702-13. DOI: 10.1002/cyto.a.22302.

22. Caligiuri M.A. Human natural killer cells. Blood. 2008; 112(3): 461-9. DOI: 10.1182/blood-2007-09-077438.

23. Locatelli F., Pende D., Falco M., et al. NK cells mediate a crucial graft-versus-leukemia effect in haploidentical-HSCT to cure high-risk acute leukemia. Trends Immunol. 2018; 39(7): 577-90. DOI: 10.1016/J.IT.2018.04.009.

24. Vago L., Forno B., Sormani M.P., et al. Temporal, quantitative, and functional characteristics of single-KIR-positive alloreactive natural killer cell recovery account for impaired graft-versus-leukemia activity after haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Blood. 2008; 112(8): 3488-99. DOI: 10.1182/ blood-2007-07-103325.

25. Abel A.M., Yang C., Thakar M.S., et al. Natural killer cells: Development, maturation, and clinical utilization. Front Immunol. 2018; 9: 1869. DOI: 10.3389/ fimmu.2018.01869.

26. Foley B., Cooley S., Verneris M.R., et al. NK cell education after allogeneic transplantation: Dissociation between recovery of cytokine-producing and cytotoxic functions. Blood. 2011; 118(10): 2784-92. DOI: 10.1182/blood-2011 -04-347070.

27. Schönberg K., Fischer J.C., Kögler G., Uhrberg M. Neonatal NK-cell repertoires are functionally, but not structurally, biased toward recognition of self HLA class I. Blood. 2011; 117(19): 5152-6. DOI: 10.1182/blood-2011-02-334441.

28. Rathmann S., Glatzel S., Schönberg K., et al. Expansion of NKG2A-LIR1 - natural killer cells in HLA-matched, killer cell immunoglobulin-like receptors/HLA-li-gand mismatched patients following hematopoietic cell transplantation. Biol Blood Marrow Transplant. 2010; 16(4): 469-81. DOI: 10.1016/j.bbmt.2009.12.008.

29. Moretta L., Locatelli F., Pende D., et al. Killer Ig-like receptor-mediated control of natural killer cell alloreactivity in haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Blood. 2011; 117(3): 764-71. DOI: 10.1182/blood-2010-08-264085.

30. Elliott J.M., Yokoyama W.M. Unifying concepts of MHC-dependent natural killer cell education. Trends Immunol. 2011; 32(8): 364-72. DOI: 10.1016/J. IT.2011.06.001.

31. Zhao X.-Y., Yu X.-X., Xu Z.-L., et al. Donor and host coexpressing KIR li-gands promote NK education after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Blood Adv. 2019; 3(24): 4312-25. DOI: 10.1182/bloodadvanc-es.2019000242.

32. Kao R.L., Holtan S.G. Host and graft factors impacting infection risk in hematopoietic cell transplantation. Infect Dis Clin North Am. 2019; 33(2): 311-29. DOI: 10.1016/j.idc.2019.02.001.

33. Schaffer M., Malmberg K.-J., Ringdén O., et al. Increased infection-related mortality in KIR-ligand-mismatched unrelated allogeneic hematopoietic stem-cell transplantation. Transplantation. 2004; 78(7): 1081-5. DOI: 10.1097/01. tp.0000137103.19717.86.

34. Zhao X.-Y., Luo X.-Y., Yu X.-X., et al. Recipient-donor KIR ligand matching prevents CMV reactivation post-haploidentical T cell-replete transplantation. Br J Haematol. 2017; 177(5): 766-81. DOI: 10.1111/bjh .14622.

35. Zaia J.A., Sun J.Y., Gallez-Hawkins G.M., et al. The effect of single and combined activating killer immunoglobulin-like receptor genotypes on cytomegalo-virus infection and immunity after hematopoietic cell transplantation. Biol Blood Marrow Transplant. 2009; 15(3): 315-25. DOI: 10.1016/j.bbmt.2008. 11.030.

36. Tomblyn M., Young J.-A.H., Haagenson M.D., et al. Decreased infections in recipients of unrelated donor hematopoietic cell transplantation from donors with an activating KIR genotype. Biol Blood Marrow Transplant. 2010; 16(8): 1155-61. DOI: 10.1016/j.bbmt.2010.02.024.

37 Cook M., Briggs D., Craddock C., et al. Donor KIR genotype has a major influence on the rate of cytomegalovirus reactivation following T-cell replete stem cell transplantation. Blood. 2006; 107(3): 1230-2. DOI: 10.1182/blood-2005-03-1039.

38. Wu X., He J., Wu D., et al. KIR and HLA-Cw genotypes of donor-recipient pairs influence the rate of CMV reactivation following non-T-cell deleted unrelated donor hematopoietic cell transplantation. Am J Hematol. 2009; 84(11 ): 776-7. DOI: 10.1002/a jh.21527.

39. Gallez-Hawkins G.M., Franck A.E., Li X., et al. Expression of activating KIR2DS2 and KIR2DS4 genes after hematopoietic cell transplantation: Relevance to cytomegalovirus infection. Biol Blood Marrow Transplant. 2011; 17(11): 166272. DOI: 10.1016/j.bbmt.2011.04.008.

40. Mancusi A., Ruggeri L., Urbani E., et al. Haploidentical hematopoietic transplantation from KIR ligand-mismatched donors with activating KIRs reduces nonrelapse mortality. Blood. 2015; 125(20): 3173-82. DOI: 10.1182/ blood-2014-09-599993.

41. Chen C., Busson M., Rocha V., et al. Activating KIR genes are associated with CMV reactivation and survival after non-T-cell depleted HLA-identical sibling bone marrow transplantation for malignant disorders. Bone Marrow Transplant. 2006; 38(6): 437-44. DOI: 10.1038/sj.bmt.1705468.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

42. Bultitude W.P., Schellekens J., Szydlo R.M., et al. Presence of donor-encoded centromeric KIR B content increases the risk of infectious mortality in recipients of myeloablative, T-cell deplete, HLA-matched HCT to treat AML. Bone Marrow Transplant. 2020; 55(10): 1975-84. DOI: 10.1038/s41409-020-0858-9.

43. Cooley S., McCullar V., Wangen R., et al. KIR reconstitution is altered by T cells in the graft and correlates with clinical outcomes after unrelated donor transplantation. Blood. 2005; 106(13): 4370-6. DOI: 10.1182/blood-2005-04-1644.

44. Della Chiesa M., Falco M., Podestà M., et al. Phenotypic and functional heterogeneity of human NK cells developing after umbilical cord blood transplantation: A role for human cytomegalovirus? Blood. 2012; 119(2): 399-410. DOI: 10.1182/blood-2011 -08-372003.

45. Jin F., Lin H., Gao S., et al. Characterization of IFNY-producing natural killer cells induced by cytomegalovirus reactivation after haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Oncotarget. 2017; 8(1): 51-63. DOI: 10.18632/onco-target.13916.

46. Foley B., Cooley S., Verneris M.R., et al. Cytomegalovirus reactivation after allogeneic transplantation promotes a lasting increase in educated NK-G2C+ natural killer cells with potent function. Blood. 2012; 119(11): 2665-74. DOI: 10.1182/blood-2011-10-386995.

32. Kao R.L., Holtan S.G. Host and graft factors impacting infection risk in he-matopoietic cell transplantation. Infect Dis Clin North Am. 2019; 33(2): 311-29. DOI: 10.1016/j.idc.2019.02.001.

33. Schaffer M., Malmberg K.-J., Ringdén O., et al. Increased infection-related mortality in KIR-ligand-mismatched unrelated allogeneic hematopoietic stem-cell transplantation. Transplantation. 2004; 78(7): 1081-5. DOI: 10.1097/01. tp.0000137103.19717.86.

34. Zhao X.-Y., Luo X.-Y., Yu X.-X., et al. Recipient-donor KIR ligand matching prevents CMV reactivation post-haploidentical T cell-replete transplantation. Br J Haematol. 2017; 177(5): 766-81. DOI: 10.1111/bjh 14622.

35. Zaia J.A., Sun J.Y., Gallez-Hawkins G.M., et al. The effect of single and combined activating killer immunoglobulin-like receptor genotypes on cytomegalo-virus infection and immunity after hematopoietic cell transplantation. Biol Blood Marrow Transplant. 2009; 15(3): 315-25. DOI: 10.1016/j.bbmt.2008.11.030.