CC BY
37
№ 6 - 2013 г. 03.00.00 биологические науки
УДК 618.15-002:615.276
ВЛИЯНИЕ «ФИТОВАГИНА» НА ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ВАГИНИТА
А. В. Малоштан, А. Л. Загайко, Л. Н. Малоштан
Национальный Фармацевтический Университет (г. Харьков, Украина)
Изучено влияние суппозиториев «Фитовагин» на показатели системы ПОЛ-АОС (ТБК-активных продуктов, восстановленного глутатиона, церулоплазмина и уровень общего белка) на модели экспериментального вагинита, вызванного химически агентом. Установлено, что «Фитовагин» нормализует исследуемые показатели на фоне патологии.
Ключевые слова: экспериментальный вагинит, суппозитории, перекисное окисление липидов, антиоксидантная система.
Малоштан Анастасия Владимировна — аспирант кафедры биологической химии Национального Фармацевтического Университета, e-mail: anastasiya.maloshtan@mail.ru
Загайко Андрей Леонидович — доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой биологической химии Национального Фармацевтического Университета, рабочий телефон: +38(057) 706-30-66, e-mail: andrey.zagayko@gmail.com
Малоштан Людмила Николаевна — доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой биологии и анатомии человека Национального Фармацевтического Университета, рабочий телефон: +38(057) 706-30-73, e-mail: lnm004@ gmail.com
Введение. Инфекционная патология репродуктивной системы женщины относится к числу важнейших медико-социальных проблем современности [5, 8]. Воспалительные заболевания органов половой системы в настоящее время являются наиболее частой причиной обращения женщин к гинекологам [3].
Воспалительные процессы гениталий у женщин представляют собой распространенную патологию, частота которой не имеет тенденции к снижению. Практически при любой вагинальной инфекции в воспалительный процесс вовлекается шейка матки, поэтому под термином «вагинит» нередко подразумевают воспаление влагалища в сочетании с экзо-и эндоцервицитом, хотя в ряде ситуаций встречаются их локальные поражения. В динамике воспаления возникают взаимосвязанные нарушения местного иммунитета, кровоснабжения подлежащей стромы и клеточного обновления эпителиального пласта,
способствующие рецидивирующему течению процесса, т. е. хронизации [3].
Известно, что практически любое воспаление сопровождается усилением активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) [10].
В основе биологической целесообразности ПОЛ лежит усиление в экстремальных условиях синтеза эйкозаноидов, обновления мембран, которые способствуют осуществлению детоксикационных процессов, стабилизируют состояние организма. Одним из показателей состояния организма может быть состояние антиоксидантной системы (АОС), которая защищает организм и мембраны клеток от повреждения свободными радикалами. Церулоплазмин (ЦП) можно отнести к белкам острой фазы, поскольку концентрация его увеличивается при воспалении. ЦП обладает также антиоксидантными свойствами, поскольку способен разрушать супероксидные радикалы кислорода, предотвращая, таким образом, активацию ПОЛ, защищая биологические мембраны от разрушения. Накопление ТБК (тиобарбитуровой кислоты) — активных продуктов — является результатом несоответствия между возможностями антиоксидантных ферментов и скоростью свободнорадикального окисления [10].
Целью работы было изучение особенностей функционирования АОС животных на фоне экспериментальной модели вагинита и её коррекции суппозиториями «Фитовагин».
Методы исследования. Экспериментальные исследования были проведены на крысах-самках весом 180-200 г. Уход за ними (включая эвтаназию) в ходе эксперимента осуществляли согласно имеющимся документам, которые регламентируют организацию работы с использованием экспериментальных животных. Были соблюдены принципы «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1985) [9], а также положения «Общих принципов экспериментов на животных», одобренные Первым национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2001).
Эксперимент проводили в условиях модельной патологии, вызванной введением азотнокислого серебра, которое вызывало асептическое воспаление у крыс, неотягощенное бактериальной флорой. Создавались идеальные условия для изучения показателей воспаления ПОЛ-АОС (ТБК-АП, восстановленный глутатион ^^Н), ЦП, общий белок) [7].
Объектом исследования были суппозитории «Фитовагин», разработанные на кафедре технологии лекарств ТЛ НФаУ. В состав суппозиториев «Фитовагин» входит комплекс эфирных масел и растительных экстрактов на основе витепсола Ш 15 [4].
В качестве референс-препарата были выбраны «Суппозитории с облепиховым маслом». Животные были разделены на экспериментальные группы по 6 животных в каждой : 1-я группа — интактный контроль (ИК), 2-я группа — контрольная патология (КП), 3-я группа — животные, которым вводили суппозитории «Фитовагин», 5-я группа — животные, которым вводили препарат сравнения «Суппозитории с облепиховым маслом» («Облепиха»), 6-я группа — животные, которым вводили препарат в виде суппозиториев, содержащий только основу (плацебо), с целью исключения возможного дополнительного ее влияния. Дозы исследуемых суппозиториев и препарата сравнения вводили в пересчете по общепринятым в экспериментальной фармакологии коэффициентам видовой устойчивости (по Ю. Р. Рыболовлеву).
Лечение исследуемыми средствами продолжалось в течение 9-ти суток. Животных после окончания лечения выводили из эксперимента, и оценивали влияние суппозиториев
«Фитовагин» на состояние ПОЛ по показателю ЦП и общего белка [2], ТБК-активных продуктов [6] и АОС по основному неферментному компоненту — уровню восстановленных тиоловых групп ^Н-групп), определяемых по методике с реактивом Элмана, которые определяли в сыворотке крови в тканях влагалища.
Результаты и обсуждение. В ходе эксперимента установлено, что на фоне «химического» вагинита у крыс группы контрольной патологии наблюдалось ухудшение состояния системы ПОЛ-АОС, о чем свидетельствовало достоверное снижение показателя G-SH и повышение ТБК-активных продуктов по сравнению с группой интактного контроля (рис. 1).
Рис. 1. Влияние исследуемых средств на показатели ПОЛ-АОС (G-SH, ТБК-АП) в гомогенате влагалища и сыворотке крови крыс-самок на фоне «химического» вагинита (n = 6): * — отклонение показателя достоверное по отношению к КП, р < 0,05; ** — отклонение показателя достоверное по отношению к ИК, р < 0,05
После лечения суппозиториями «Фитовагин» отмечалось улучшение состояния системы ПОЛ-АОС у опытных животных. Достоверно уменьшался уровень ТБК-активных продуктов, и повышалось количество G-SH как в сыворотке крови, так и в гомогенате ткани влагалища по сравнению с группой контрольной патологии. По данным показателям суппозитории «Фитовагин» превышали препарат-сравнение «Суппозитории с облепиховым маслом». Учитывая тот факт, что воспалительный процесс приводит к уменьшению количества белка в тканях и увеличению его в крови, нами исследовался
общий белок и ЦП до и после лечения суппозиториями. Данные исследований показали, что на фоне КП уровень общего белка и ЦП достоверно повышались, что свидетельствовало о воспалительной реакции во влагалище (рис. 2). В то время как «Фитовагин» и «Суппозитории с облепиховым маслом» достоверно снижали уровень общего белка и ЦП в сыворотке крови, в сравнении с нелеченной патологией. «Фитовагин» не уступал по активности референс-препарату. В группе животных, получавших плацебо, не зафиксированы достоверные изменения показателей, в сравнении с контролем.
Рис. 2. Влияние исследуемых средств на показатель общего белка и ЦП в сыворотке крови на фоне «химического» вагинита, (n = 6): * — отклонение показателя достоверное по отношению к КП, р < 0,05; ** — отклонение показателя достоверное по отношению
к ИК, р < 0,05
В состав суппозиториев «Фитовагин» входят эфирные масла ряда растений, а именно, эфирное масло ромашки, содержащее хамазулен и эфирное масло полыни горькой, содержащей гвайазулен, которые отвечают за противовоспалительную и репаративную активность [11].
Биофлавоноиды, входящие в состав растений, являются природными антиоксидантами. Эфирное масло ромашки содержит биофлавоноид фарнезен, который обладает свойствами, стимулирующими грануляцию и эпителизацию, что способствует восстановлению пораженных тканей. В полыни находится аскорбиновая кислота и биофлавоноиды, которые также являются природными антиоксидантами [11].
Именно комплекс этих БАВ оказывает противовоспалительное, отчасти репаративное и антиоксидантное действия.
Выводы
1. Вагинальные суппозитории «Фитовагин» снижают уровень ТБК-активных продуктов и повышают GS-H в сыворотке крови и ткани влагалища, а также снижают уровень белка и ЦП в сыворотке крови, проявляя антиоксидантные свойства на фоне модельной патологии.
2. Сравнительный анализ показал, что суппозитории «Фитовагин» не уступают,
а в некоторых аспектах превышают референс-препарат «Суппозитории с облепиховым маслом».
3. Новые вагинальные суппозитории «Фитовагин» могут быть использованы для дальнейшего изучения в качестве перспективного средства для лечения воспалительных заболеваний половых органов у женщин.
Список литературы
1. Специфичность систем антиоксидантной защиты органов и тканей — основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами / В. Н. Бобырев,
В. Ф. Почернява, С. Г. Стародубцев [и др.] // Эксперим. и клин. фармакология. — 1994.
— Т. 57 (1). — С. 47-54.
2. Камышов В. С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям
и лабораторной диагностике / В. С. Камышов. — М. : МЕДПресс-информ, 2004. — 920 с.
3. Ковалев М. И. Использование низкоинтенсивного лазерного излучения
в акушерско-гинекологической практике / М. И. Ковалев // Журн. РОАГ. — 2007.
— № 4. — С. 17-23.
4. Левачкова Ю. В. Обгрунтування складу песарив «Фгговагш» для лжування запальних гшеколопчних захворювань / Ю. В. Левачкова, Т. Г. Ярних, В. М. Чушенко,
А. В. Малоштан // Кшшчна фармащя. — 2011. — № 1. — С. 30-33.
5. Масюкова С. А. Некоторые вопросы лечения и профилактики инфекций, передающихся половым путем, в современных условиях / С. А. Масюкова,
М. М. Шегай, В. В. Гладько // Качество жизни. Медицина. — 2004. — № 3 (6). — С. 35-38.
6. Селютина С. Н. Модификация определения концентрации ТБК-активных продуктов сыворотки крови / С. Н. Селютина, А. Ю. Селютина, А. И. Паль // Клин. лаб. диагностика. — 2000. — № 1. — С. 14-18.
7. Споиб моделювання експериментального вапшту у щурiв : шформ. лист / К. О. Степанова, О. В. Должикова, Л. М. Малоштан, А. В. Малоштан. — К. : Центр «Укрмедпатентшформ» МОЗ Украши, 2011. — № 44. — 2 с.
8. Шатунова Е. П. Причины роста воспалительных заболеваний придатков матки / Е. П. Шатунова, Ю. В. Степанова // Материалы Х юбилейного Всероссийского научного форума «Мать и дитя». — М., 2009. — С. 448.
9. European conventi on for the protection of vertebral animals used for experimental and other scientific purpose : Council of Europe 18.03.1986. — Strasbourg, 1986. — 52 р.
10. Lipid peroxidation and antioxidant status in vagina microenvironment of patients with several common vaginitis / H. Y. Guo, X. М. Hu, D. D. Han [et al.] // Clinical and Experimental Obstetrics & Gynecology. — 2013. — Vol. 40 (3). — Р. 331-336.
11. Upton R. The American herbal pharmacopoeia -The marriage of traditional herbalism and classical pharmacognosy / R. Upton ; American Herbal Pharmacopoeia, Soquel,
CA 95073 USA // Planta Med. — 2012. — Vol. 78. — AL7.
INFLUENCE OF «PHYTOVAGIN» ON LIPID PEROXIDATION IN THE CONDITIONS OF EXPERIMENTAL
VAGINITIS
A. V. Maloshtan, A. L. Zagayko. L. N. Maloshtan
National Pharmaceutical University (Kharkov, the Ukraine)
The influence of «Phytovagin» suppositories on indicators of LPO AOS system (TBA-active products, restored glutathione, hepatocuprein and level of total protein) on model of the experimental vaginitis chemically caused by the agent is studied. It is established that «Phytovagin» normalizes studied indicators against pathology.
Keywords: experimental vaginitis, suppositories, lipid peroxidation, antioxidatic system.
About authors:
Maloshtan Anastasia Vladimirovna — post-graduate student of biological chemistry chair at National Pharmaceutical University, e-mail: anastasiya.maloshtan@mail.ru
Zagayko Andrey Leonidovich — doctor of biological sciences, professor, head of biological chemistry chair at National Pharmaceutical University, office phone: +38(057) 706-30-66, e-mail: andrey.zagayko@gmail.com
Maloshtan Lyudmila Nikolaevna — doctor of biological sciences, professor, head of biology and human anatomy chair at National Pharmaceutical University, office phone: +38(057) 706-30-73, e-mail: lnm004@ gmail.com
List of the Literature:
1. Specificity of systems of antioxidatic protection of organs and tissues as fundamentals
of the differentiated pharmacotherapy of antioxidants / V. N. Bobyrev, V. F. Pochernyava, S. G. Starodubtsev [etc.] // Experim. and clin. pharmacology. — 1994. — V. 57 (1). — P. 47-54.
2. Kamyshov V. S. Reference book on clinical biochemical researches and laboratory diagnostics / V. S. Kamyshov. — M.: Medical press inform, 2004. — 920 P.
3. Kovalev M. I. Usage of low-intensive laser radiation in obstetric and gynecologic practice / M. I. Kovalyov // Journ. of RSOG. — 2007 . — № 4. — P. 17-23..
4. Levachkova Y. V. Justification of structure of «Phytovagin» pessaries for treatment
of inflammatory gynecologic diseases / Y. V. Levachkova, T. G. Yarnykh, V. M. Chushengko, A. V. Maloshtan // the Clinical pharmaceutics. — 2011. — № 1. — P. 30-33.
5. Masyukova S. A. Some questions of treatment and prophylaxis of sexually transmitted infections nowadays / S. A. Masyukova, M. M. Shegay, V. V. Gladko // Quality of life. Medicine. — 2004. — № 3 (6). — P. 35-38.
6. Selyutina S. N. Modification of determination of concentration TBA-active products
of blood serum / S. N. Selyutina, A. Y. Selyutin, A. I. Pal // Clin. lab. diagnostics. — 2000.
- № 1. - P. 14-18.
7. Way of modeling of experimental vaginitis at rats: inform. bull / E. A. Stepanova,
A. V. Dolzhikov, L. M. Maloshtan, A. V. Maloshtan. — M.: «Ukrmedpatentinform» of MH of the Ukraine, 2011. — № 44. — 2 P.
8. Shatunova E. P. Reasons of increase of inflammatory diseases of appendages of uterus / E. P. Shatunova, Y. V. Stepanova // Materials X of an anniversary All-Russian scientific forum «Mother and child». — M, 2009. — P. 448.
9. European conventi on for the protection of vertebral animals used for experimental and other scientific purpose : Council of Europe 18.03.1986. — Strasbourg, 1986. — 52 p.
10. Lipid peroxidation and antioxidant status in vagina microenvironment of patients with several common vaginitis / H. Y. Guo, X. M. Hu, D. D. Han [et al.] // Clinical and Experimental Obstetrics & Gynecology. — 2013. — Vol. 40 (3). — P. 331-336.
11. Upton R. The American herbal pharmacopoeia -The marriage of traditional herbalism and classical pharmacognosy / R. Upton ; American Herbal Pharmacopoeia, Soquel,
CA 95073 USA // Planta Med. — 2012. — Vol. 78. — AL7.
