CC BY
53
УДК 615.32:591.51
ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТА ЛАПЧАТКИ БЕЛОЙ И «ТИРЕОТОНА» НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ У КРЫС
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
В данной статье рассматривается влияние экстракта лапчатки белой сухого и разработанного на его основе препарата «Тиреотон» на когнитивные и. двигательные функции крыс в эксперименте. В результате проведенного исследования установлено, что экстракт, лапчатки белой сухой и «Тиреотон» способствуют, уменьшению когнитивно-эмоциональных расстройств у животных. Ключевые слова: экстракт лапчатки белой, центральная нервная система, когнитивные функции
THE INFLUENCE OF DRY EXTRACT OF CINQUEFOIL WHITE AND «THYREOTON» ON THE FUNCTIONAL STATUS OF CENTRAL NERVOUS SYSTEM OF RATS
E.V. Arkhipova
The Institute of Common and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude
In the article the influence of dry extract of Cinquefoil white and complex «Thyreoton», which has been prepared, on the basis of dry extract of Cinquefoil white, on cognitive and motorial functions has been considered. These researches revealed, the decrease of development of cognitive and. emotional disorders in experimental animals. Key words: extract of Cinquefoil white, central nervous system, cognitive functions
В последние годы в связи с воздействием неблагоприятных факторов окружающей среды (ухудшающаяся экология, дефицит йода в почве, воде и продуктах питания, содержащих канцерогены) отмечается рост заболеваний щитовидной железы.
Заболевания щитовидной железы сопровождаются повышенной, пониженной или эутиреоидной функциональной активностью с диффузным или узловым изменением органа. С функциональной точки зрения почти все заболевания щитовидной железы можно условно разделить на две группы: гипотиреоз и гипертиреоз [5].
В патогенезе гипотиреоза доминирует поражение центральной нервной системы (ЦНС), симптомы которой чаще всего проявляются в начальный период болезни. Как правило, при дефиците тиреоидных гормонов в организме характерны снижение памяти, потеря интереса к окружающему, депрессивные состояния и, так называемая, гипотиреоидная энцефалопатия. У больного развиваются апатия, адинамия, сонливость, замедленное мышление, речь [2]. Тиреоидные гормоны необходимы для развития и функционирования ЦНС. При врожденном гипотиреозе в случае поздней диагностики и лечения развиваются симптомы задержки развития психической деятельности [1].
В этой связи остается актуальным поиск новых препаратов растительного происхождения. Лекарственные растения содержат широкий спектр биологически активных веществ, обладают несколькими видами фармакологической активности, характеризуются плавным нарастанием фармакологического эффекта [6]. Важным их свойством является низкая токсичность и отсутствие неблагоприятных побочных эффектов при их длительном приеме. С учетом патогенеза
гипотиреоза разработано многокомпонентное средство: «Тиреотон», в состав которого входит сухой экстракт из корневищ с корнями лапчатки белой (Potentilla alba L.), сухой экстракт шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi), сухой экстракт родиолы розовой (Rhodiola rosea L.) в соотношении 50, 25, 25 % соответственно.
Целью настоящего исследования явилось определение влияния экстракта лапчатки белой и препарата «Тиреотон» на поведенческую активность крыс.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследования проведены в зимний период 2010 — 2011 гг. на лабораторных животных (крысах обоего пола линии Wistar, массой 180 ± 10 г) в соответствии с действующими требованиями, предъявляемыми к изучению новых лекарственных средств [7]. В каждой группе было по 10 животных. Животные находились в стандартных условиях вивария. Водный раствор экстракта лапчатки белой, полученный водно-спиртовой экстракцией, вводили в дозе 30 и 50 мг/кг внутрижелудочно, комплекс «Тиреотон» — в дозе 50 и 100 мг/кг за 40 — 50 минут до кормления 1 раз в день в течение 7 дней. Животные контрольной группы получали дистиллированную воду в аналогичном режиме и эквиобъемном количестве.
Для исследования ориентировочных реакций и поведенческой активности у крыс использовали метод «открытого поля» [3]. Использована модель открытого поля диаметром 100x100 см с отверстиями (норками) диаметром 4 см. Исследования проводили в утреннее время между 10 и 12 часами, последнее кормление животных проводили за 40 — 50 минут до проведения теста. Испытание
П1111111111111111111ПIIIIII 1111ГП □ I I I I I I III □ П11 I I I I I I
113
проводили однократно в течение 3 минут по стандартной методике. Регистрировали число пересеченных квадратов периферических и центральных (горизонтальная активность), число подъемов на задние лапки (вертикальная активность), число дефекаций, груминг, число заглядываний в норки (норковый рефлекс). Об общей двигательной активности судили по горизонтальному и вертикальному рефлексам.
С использованием «Приподнятого крестообразного лабиринта» (ПКЛ), который позволяет адекватно оценивать состояние тревожности животного, исследовали влияние указанных средств. В этом тесте оценивали: двигательную активность, степень выраженности эмоциональной реакции страха и тревоги [4]. Во время эксперимента лабиринт освещается ярким белым светом. В начале тестирования крыс помещали в центр лабиринта головой к открытому лучу. Визуально регистрировали следующие параметры: латентный период ухода с центральной площадки; количество посещений и время пребывания на «открытых» и «закрытых лучах»; количество выходов и время пребывания на центральной площадке; количество «выглядываний» на «открытые лучи» (эпизоды, когда крыса осматривала открытые лучи, но опиралась на них только передними лапами); количество «свеши-ваний» (эпизодов, когда животное перегибалось через край «открытых лучей»).
Для оценки влияния указанных экстрактов на формирование и воспроизведение памятного следа в норме и в условиях амнезии использовали метод условного рефлекса пассивного избегания
(УРПИ). Параметры электроболевого раздражения, наносимого через электродный пол, составляли
0,3 — 0,6 мА. Проверка сохранения УРПИ состояла в помещении животного в светлый отсек через различные интервалы времени: через 1 сутки, 3 суток, 7 суток. Для оценки степени обучения через эти интервалы отмечали латентное время первого захода в темный отсек камеры, где ранее с использованием болевого раздражения проводилось обучение. Использовали 3-минутный период пребывания животного в светлом отсеке.
Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью программы Statistica 6.0 for Windows.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты проведенных исследований приведены в таблицах 1—3:
Известно, что при стрессе и тревожности нарушается функционирование желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и повышается интенсивность дефекации, что позволяет судить о степени эмоционального стресса по числу актов дефекации. Установлено, что показатели груминга и дефекации крыс не отличаются от данных контрольной группы, а уменьшение показателей общей двигательной активности при этом позволяет сделать вывод, что животные групп, которые получали экстракт лапчатки белой в дозах 30 и 50 мг/кг являются более эмоциональными по сравнению с контрольной группой.
При курсовом введении комплекса «Тиреотон» в дозе 50 и 100 мг/кг отмечено увеличение общей двигательной активности на 28 и 18 % соответствен-
Таблица 1
Влияние экстрактов лапчатки белой и «Тиреотона» в тесте «открытое поле» на 8 сутки наблюдения
Показатели Общая двигательная активность Норковая активность Вертикальная активность Груминг Дефекация
Контрольная 20,1 ± 1,25 1,9 ± 0,17 8,0 ± 0,35 5,7 ± 0,40 3,0 ± 0,10
Опытная 1 (экстракт лапчатки 30 мг/кг) 15,5 ± 0,90 0,9 ± 0,03 5,7 ± 0,12 2,8 ± 0,17* 3,0 ± 0,24
Опытная 2 (экстракт лапчатки 50 мг/кг) 14,2 ± 0,90 0,7 ± 0,04 8,8 ± 0,70 5,5 ±0,30 3,2 ± 0,20
Опытная 3 (Тиреотон 50 мг/кг) 28,0 ± 0,96* 1,25 ± 0,10 8,75 ± 0,50 2,0 ± 0,10* 1,125 ± 0,08*
Опытная 4 (Тиреотон 100мг/кг) 24,37 ± 2,10* 1,8 ± 0,10 9,5 ± 0,80 2,1 ± 0,17* 1,4 ± 0,12*
Примечание: * - здесь и далее означает, что различия значимы по сравнению с данными контрольной группы при p < 0,05.
Таблица 2
Влияние экстракта лапчатки белой и «Тиреотон» в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт»
Показатели Контрольная Опытная 1 (лапчатка 30 мг/кг) Опытная 2 (лапчатка 50 мг/кг) Опытная 3 (Тиреотон 50 мг/кг) Опытная 4 (Тиреотон 100 мг/кг)
Время, закрытый рукав 183,8 ± 4,10 139,2 ± 3,80* 140,9 ± 6,80* 149,8 ± 7,20* 156,07 ± 7,71*
Время, центр 0,5 ± 0,02 0 4,2 ± 0,30* 1,25 ± 0,09* 1,98 ± 0,12*
Время, открытый рукав 23,4 ± 1,72 18,2 ± 0,90 16,1 ± 1,01 14,37 ± 1,01* 21,05 ± 1,03
Заходы, закрытый рукав 1,37 ± 0,10 0,9 ± 0,03* 1,6 ± 0,11 1,25 ± 0,08 1,1 ± 0,07
Заходы, открытый рукав 0,375 ± 0,01 0,6 ± 0,01* 0,4 ± 0,03 1,2 ± 0,11* 0,625 ± 0,04*
Выглядывания 0,625 ± 0,03 0,9 ± 0,03 1,9 ± 0,13* 1,4 ± 0,11* 1,81 ± 0,14*
Стойки вертикал 2,87 ± 0,09 2,5 ± 0,20 4,4 ± 0,30* 3,85 ± 0,26* 5,6 ± 0,40*
114
пмимппииимп ммпммгп □ I i i i ii iii □ nil iiiii
Таблица 3
Влияние экстракта лапчатки белой и «Тиреотона» в тесте «УРПИ»
Показатели Через 1 сутки Через 3 суток Через 7 суток
Контроль 59,75 ± 1,20 33,87 ± 1,05 44,4 ± 2,16
Опытная 1 (лапчатка 30 мг/кг) 59,8 ± 3,10 49,2 ± 2,87* 33,8 ± 2,14
Опытная 2 (лапчатка 50 мг/кг) 51,9 ± 3,05 55,45 ± 3,12* 50,7 ± 2,97
Опытная 3 (Тиреотон 50 мг/кг) 65,5 ± 3,60 53 ± 3,12* 52,9 ± 2,11
Опытная 4 (Тиреотон 100 мг/кг) 61,7 ± 4,10 51 ± 2,16* 51,2 ± 1,97
но, при этом отмечено уменьшение актов груминга и дефекации в два раза по сравнению с данными в контрольной группе, что свидетельствует о снижении эмоционального фона крыс и увеличении ориентировочно-исследовательской активности.
При курсовом введении экстракта лапчатки белой в дозе 30 мг/кг в ПКЛ зарегистрировано сокращение времени проведения в закрытых рукавах на 23 % по сравнению с данными контрольной группы животных. При введении препарата «Тиреотон» в дозе 50 мг/кг наблюдалось снижение времени проведения в закрытых рукавах на 22 %, в дозе 100 мг/кг — на 15 % по сравнению с данными в контрольной группе животных. Время проведения в открытых рукавах приближалось к данным контрольной группы животных, наблюдали увеличение выглядываний и заходов в центральную зону. Эти данные позволяют сделать вывод, что при введении экстракта лапчатки белой в дозе 30 мг/кг и «Тиреотона» в дозе 50 мг/кг вырастает исследовательская активность, уменьшается тревожность животных.
В результате проведенного теста УРПИ на фоне экстракта лапчатки белой в дозе 50 мг/кг антиам-нестические функции крыс отчетливо выражены, чем в дозе 30 мг/кг, а «Тиреотона» в дозе 50 мг/кг по сравнению с данными животных контрольной группы. Таким образом, отмечена активация выработки условного рефлекса пассивного избегания, улучшались запоминание у крыс, пространственная ориентировка.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Установлено, что курсовое введение экстракта лапчатки белой сухого в экспериментально-терапевтических дозах в умеренной степени влияет на двигательную активность, при этом заметны улучшение когнитивно-эмоциональной активности
крыс по сравнению с контролем. «Тиреотон» в дозе 50 мг/кг способствует уменьшению интеллектуаль-но-мнестических расстройств, увеличению общей двигательной активности животных. Данный эффект «Тиреотона» обусловлен входящим в его состав экстрактов, которые оказывают выраженное нейропротективное, тонизирующее действие, повышая возбудимость животных.
ЛИТЕРАТУРА
1. Балаболкин М.И. Эндокринология. — М., 1998. - 305 с.
2. Валдина Е.А. Заболевания щитовидной железы. — СПб.: Питер, 2006. — 365 с.
3. Воронина Т.А., Неробкова Н.Н. Методические указания по изучению противосудорожной активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. МЗ РФ. Департамент контроля качества, эффективности и безопасности фармакологических средств. Фармакологический комитет МЗ РФ. — М., 2000. — С. 138—145.
4. Калуев А.В. Стресс, тревожность и поведение. Актуальные проблемы моделирования тревожного поведения животного. — М., 1998. — 145 с.
5. Кубарко А.И., Yamashita S. Щитовидная железа. Фундаментальные аспекты. — Минск — Нагасаки, 1998. — 355 с.
6. Кукес В.Г. Клиническая фармакология. — М., 2006. — 796 с.
7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ МЗ РФ. Департамент контроля качества, эффективности и безопасности лекарственных средств. Научный центр экспертизы и государственного контроля лекарственных средств. Фармакологический Комитет МЗ РФ. — 2000. — 398 с.
Сведения об авторе
Архипова Эржена Владимировна - аспирант лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: 8 (924) 6551858; e-mail: arkhipova15@mail.ru).
ПИПИПИМИ 1ПI I III I I МГП □ II I I I I III Г ШИПП I
115
