CC BY
50
УДК 615.7:612.62:599.322.4
ВЛИЯНИЕ ЭХИНОХРОМА А НА ПРОЦЕССЫ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ В ПОЧКАХ 40-СУТОЧНЫХ БЕЛЫХ КРЫС ПОДВЕРГНУТЫХ ПРЕНАТАЛЬНОМУ ВОЗДЕЙСТВИЮ НИТРАТА СВИНЦА
1Елена Юрьевна ПРИЕЗЖЕВА, 1Ольга Антоновна ЛЕБЕДЬКО, 2Борис Яковлевич РЫЖАВСКИЙ, 1,2Владимир Кириллович КОЗЛОВ
Хабаровский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН -НИИ охраны материнства и детства, Хабаровск
2Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск
В почках 40-суточных белых крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца, имела место декомпенсированная активация свободнорадикального окисления. Пренатальное введение эхонохрома А устраняло выявленные нарушения.
Ключевые слова: почки, свободные радикалы, эхинохром
Ухудшение экологического фона, токсико-аллергические воздействия ведут к поражению в первую очередь почек, которые являются элиминирующими органами [1, 2]. Среди разнообразных токсикантов, привлекающих внимание представителей медико-биологической науки, одно из главных мест занимают соли тяжелых металлов, в т.ч. свинец, являющийся наиболее распространенным экотоксикантом [3]. В проведенных нами ранее экспериментальных исследованиях [4] было показано, что однократное пренатальное воздействие нитрата свинца вызывает деструктивные изменения в почках, регистрируемые в отдаленных периодах постнатального органогенеза. При этом, основным биохимическим механизмом импринтинга токсического действия нитрата свинца является декомпенсированная активация свободнорадикального окисления на органном и организменном уровнях.
В настоящее время в офтальмологии, гастроэнтерологии, кардиологии и неврологии широко применяется антиоксидант природного происхождения
- эхинохром А, являющийся хиноидным пигментом панцирей и игл морских ежей, обитающих в Японском море [5, 6]. В доступной нам литературе данных о применении эхинохрома А в нефрологической практике не обнаружено.
Целью нашей работы было изучить влияние эхинохрома А на процессы свободнорадикального окисления в почках 40-суточных белых крыс, подвергшихся пренатальному воздействию нитрата свинца.
Изучались животные 3-х групп. Первая (n=37)
- потомство 6 интактных самок, вторая (n=60)- потомство 7 самок, которым на 17-18 день беременности через желудочный зонд вводили однократно 0,91,1 мл 4 % раствора нитрата свинца (200 мг/кг массы тела). В третьей группе (n=26) изучалось потомство 3-х самок крыс, получавших 1 % раствор гистохрома (Gistochrom), содержащий в 1 мл 0,01 г эхинохрома (2,3,5,7,8-пентагидрокси-6-этилнафталиндион-1,4) и
0,045 г натрия углекислого. Препарат, разведенный 1:50 физраствором, в дозе 0,1 мг/кг вводился беременным самкам внутрибрюшинно на 17-18 сутки беременности, за день до введения нитрата свинца и на следующий день после затравки. Все животные содержались в условиях одного вивария, пищу и воду получали ad libitum. В 40-дневном возрасте производили забой животных декапитацией.
Для интегральной оценки процессов биогенеза свободных радикалов в гомогенатах почек использовали метод хемилюминесценции (ХМЛ). Регистрацию ХМЛ осуществляли на люминесцентном спектрометре LS 50B «PERKIN ELMER» по методикам [7, 8]. При исследовании спонтанной и индуцированной Fe2+ ХЛ определяли: S-sp - светосумму за 1 минуту спонтанной ХЛ, величина которой коррелирует с интенсивностью генерации свободных радикалов; максимум быстрой вспышки (h) индуцированной ХМЛ, свидетельствующей о содержании гидроперекисей липидов; Sind-1 - светосумму за 2 минуты Fe^-индуцированной ХЛ, величина
Приезжева ЕЮ. - науч. сотр. лаб. перинатальной патологии детей, е-таіі: [email protected] Лебедько ОА. - докт. мед. наук, зав. клинико-диагностической лабораторией
Рыжавский Б.Я. - докт. мед. наук, профессор, зав. кафедрой гистологии, проректор по научной работе Козлов В.К. - докт. мед. наук, профессор, чл.-корр. РАМН, директор, зав. кафедрой детских болезней педиатрического факультета
1000 т 800 600 400 200 0
S sp
S ind 1 S lum
Sluc
H
S ind 2
h
□ контроль □ свинец □ свинец+эхинохром A
Рис. Показатели хемилюминесценции (отн.ед.) гомогенатов почек 40-суточных белых крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца и эхинохрома А (в % по отношению к группе «контроль») Примечание: стрелками обозначена достоверность различий -р<0,05 по отношению к контрольной группе
которой отражает интенсивность накопления пере-кисных радикалов. Определяли S-luc - светосум-му за 1 минуту люцигенин-зависимой ХЛ, величина которой прямо коррелирует с содержанием супероксиданион-радикала. Кинетику ХЛ, инициированную Н202 в присутствии люминола, анализировали по параметрам: S-lum - светосумме за 1 минуту люминол-зависимой ХЛ, величина которой находится в прямой зависимости от интенсивности продукции гидроксил-радикала, Sind-2 - светосумме за 2 минуты Н202-индуцированной ХЛ, величина которой обратна активности антиоксидантной анти-радикальной системы защиты (АОРЗ). Интенсивность ХМЛ, измеренную в милливольтах, рассчитывали на 1 мг влажной ткани и выражали в относительных единицах.
Анализ хемилюминограмм продемонстрировал (рис.), что в почках 40-суточных белых крыс, перенесших пренатальное воздействие нитрата свинца. имело место увеличение интенсивности процессов свободнорадикального окисления ^р) в 5,8 раза, в т.ч. за счет повышения продукции гидроксил-радикалов ^ 1ит), супероксид-анион радикалов ^1ис) и перекисных радикалов ^ ind 1) в 6,1; 5,5 и 6,7 раза, соответственно.
Активизировался и первичный этап пероксида-ции липидов - концентрация гидроперекисей липидов (И) возросла в 7 раз.
Выявленные нарушения процессинга свободных радикалов сопровождались снижением резистентности к перекисному окислению - амплитуда Н увеличилась в 8,9 раза и ослаблением антиоксидантной антирадикальной защиты - показатель Sind-2 возрос в 6,3 раза.
Воздействие эхинохрома А предотвратило формирование нарушений свободнорадикального статуса, о чем свидетельствовало отсутствие статисти-
чески значимых отличий от контрольного уровня всех исследуемых параметров хемилюминесценции гомогенизированных тканей почек 40-суточных белых крыс, пренатально подвергнутых воздействию нитрата свинца. Полученные экспериментальные данные обосновывают возможность применения эхинохрома А для пренатальной профилактики и коррекции нарушений свободнорадикального статуса почек, обусловленных воздействием экотоксиканта.
Таким образом, эхинохром А полностью устранял нарушения в системе «генерация свободных радикалов - детоксикация свободных радикалов» в почках 40-суточных белых крыс, обусловленные пренатальным воздействием нитрата свинца.
Литература
1. Аксенова М.Е. Тяжелые металлы: механизмы нефротоксичности // Нефрология и диализ. 2000. 2 (1-2): 15-21.
Aksenova M.E. The Heavy metals: mechanisms nephrotoxicity // Nephrology and dialisis. 2000. 2 (1-2): 15-21.
2. Lane W.G., Kemper A.R. American College of Preventive Medicine Practice Policy Statement. Screening for elevated blood lead levels in children // Am. J. Prev. Med. 2001. 20 (1): 78-82.
3. Pavlova E.L., Lilova M.I., Savov V.M. Oxidative stress in children with kidney disease // Pediatric Nephrology. 2005. 11: 1599-1604.
4. Приезжева Е.Ю., Лебедько О.А., Рыжавский Б.Я., Козлов В.К. Влияние введения нитрата свинца беременным крысам на почки их потомства // Дальневосточный мед. журн. 2007. 3: 30-32.
Priezzheva E.Y., Lebedko O. A., Ryzhavsky B. Ya., Kozlov V. K. The effects of the nitrate lead injection to pregnant rats on the kidney posterity // Far East. Med. J. 2007. 3: 30-32.
5. Мищенко Н.П. Федореев С.А., Догадова Л.П. Препарат гистохром для офтальмологии // Вестн. ДВО
РАН. 2004. 3: 111-119.
Mischenko N.P., Fedoreev S.A., Dogadova L.P. The Preparation histochrom for ophthalmology // Bull. FEB RAS.
2004. 3: 111-119.
6. Lebedev A.V., Levitskaya E.L., Tikhonova E.V.
Antioxidant properties, autooxidation, and mutagenic activity of echinochrome a compared with its etherified derivative //
Biochemistry (Mosc). 2001. 8: 885-893.
7. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И. Итоги науки и техники. Сер. Биофизика // М.: Изд-во. ВИНИТИ АН СССР. 1991. 29: 147 c.
Vladimirov Y.A., Azizova O.A., Deev A.I. Free radicals above-ground system. The Totals of the science and technology.
Ser. Biofizika // M.: VINITI AN USSR. 1991. 29: 147 p.
THE INFLUENCE EHINOHROMA А ON PROCESSES FREE RADIKAL OXIDATIONS IN KIDNEY 40-DRAINAGE WHITE RATS SUBJECTED TO PRENATAL INFLUENCE LEAD
*Elena Yurievna PRIEZZHEVA, *Olga Antonovna LEBEDKO, 2Boris Yakovlevich RYZHAVSKY, 1,2Vladimir Kirillovich KOZLOV
Khabarovsk Branch of the Far Eastern Scientific Center of Respiratory Physiology and Pathology under the SB RAMS - Research Institute of Mother and Child Health Care 2Far Eastern State Medical University, Khabarovsk
In bud 40-dayly white rats, subjected to prenatal influence nitrate lead, existed decompensition an activation free radical oxidations. Prenatal introduction echinochrom A but avoided the revealled breaches.
Key words: kidney, free radicals, echinochrom A
Priezzheva E.Yu. - research worker of laboratory perynatal to pathology children, e-mail: [email protected] Lebedko O.A. - Doct. Med. Sci., head of clinico-diagnostic laboratory
Ryzhavsky B.Ya. - Doct. Med. Sci., professor, head of chair to histology, prorector on scientific work Kozlov V.K. - Doct. Med. Sci., professor, director, head of chair of the pulpit to children diseases
8. Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: Методич. рекомендации. СПб.: Наука, 2000. 198 c.
Artyunyan A.V., Dubinina E.E., Zybina N.N. The Methods of the estimation free radical oxidations and antioxidations of the system of the organism: Methodical rekomendacii. SPb.: Science, 2000. 198 p.
