ВЛИЯНИЕ ДВУХ НОВЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ ГИДРОБИОНТОВ НА ТРОМБОЦИТЫ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO
Ю.В.Шерстюк, А.Г.Марачев
Экологический факультет, Российский университет 'дружбы народов, Подольское шоссе, 8/5, 113093, Москва, Рдссия
Исследовано влияние двух новых препаратов на основе со-3 ПНЖК гидробионтов — препарата из жира печени трески, получившего название Кодвитален, и препарата из жира печени ската — на АДФ- и коллаген-индуцированную агрегацию, а также ристомицин-индуцированную агглютинацию тромбоцитов человека in vitro. Показано, что оба препарата обладают способностью снижать АДФ- и коллаген-индуцированную агрегацию и ристомицин-индуцированную агглютинацию тромбоцитов. При этом во всех случаях Кодвитален оказывал более выраженное действие, особенно на ристомицин-индуцированную агглютинацию.
Полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК), являясь неотъемлемой частью биомембран, играют важную роль в развитии и нормальном функционировании организма. Наряду с пластической функцией, они проявляют специфические регуляторные свойства, обеспечивая работу многих ферментных систем и участвуя в межклеточных контактах, выполняют энергетические и транспортные функции. В начале 1960-х гг. появились первые исследования, показавшие, что жиры рыб, благодаря высокому содержанию пен-таеновых и гексаеновых жирных кислот, снижают уровень холестерина в. крови животных и людей. В 1960-1970-е гг. влияние ш-З ПНЖК (жиры гидробионтов, преимущественно морских) исследовали в основном на состояние сердечно-сосудистой системы человека. Интерес к проблеме ю-3 ПНЖК особенно стимулировали работы датских ученых Д. Диерберга и X. Бенга [1]. В 1980-1990-е гг. ш>-3 ПНЖК стали рассматривать в качестве перспективных средств профилактики и лечения многих заболеваний, прежде всего сердечно-сосудистых и онкологических, дающих самый высокий процент смертности среди населения. Показано положительное воздействие ПНЖК и пищевых добавок на юс основе на содержание и обмен холестерина в крови [2], на мозговую, зрительную и другие системы организма [3]. К настоящему времени проведены широкие исследования по изучению физиологической активности жирных кислот, их гемостимулирующих и сосудозащитных свойств [4].
Известно, что незаменимые жирные кислоты, такие как линолевая кислота (18:2) и линоленовая кислота (18:3), обязательно должны входить в состав полноценного рациона. Организм млекопитающих, включая человека, не способен синтезировать эти кислоты и может получать их только с пищей. Эти жирные кислоты являются предшественниками ПНЖК, а затем и эйкозанои-дов — низкомолекулярных биорегуляторов: простагландинов, тромбоксанов и прочих биологически активных веществ, которые играют важную роль в процессах перекисного окисления липидов (ПОЛ), тромбообразования, воспалительных и других реакциях организма, в частности, обусловленных неблагоприятными факторами окружающей среды.
Уникальным , источником простагландинов являются морские гидробион-ты. Морские организмы особенно богаты эйкозапентаеновой кислотой (ЭПК)
(20:5) и докозагексаеновой кислотой (ДГК) (22:6), что отличает их от сухопутных организмов. Особенно интересны исследования эйкозаноидов в онкологическом аспекте, поскольку известно, что при развитии опухолевого процесса происходит нарушение метшблйзма Шкозаноидов в организме человека и животных. ;! 1
В связи с вышесказанным предстйвляетсй' актуальным дальнейшее изучение новых и существующих пищевых добавок да основе ю-3 ПНЖК гидро-бионтов, в частности их влияние на клетки крови и организм человека в целом. С этой целью нами проводилось изучение влияния двух новых препаратов на основе <о-3 ПНЖК гидробионтов — препарата из жира печени трески, получившего название Кодвитален (К), и препарата из жира печени ската (С) — на АДФ- и коллаген-индуцированную агрегацию, а также ристомицин-индуцированную агглютинацию тромбоцитов человека in vitro.
Оценку антитромбоцитарного действия препаратов К и С проводили по методу G.G. Вот на агрегометре фирмы Chronolog Corporation (США) на базе кафедры общей патологии и патофизиологии РбСсийской Медицинской Академии последипломного образования совместно с Сотрудниками кафедры.
Результаты обработаны статистически с определением достоверности различий на 95% уровне по критерию Стьюдента (методом зависимых выборок).
Проведенные эксперименты показали, что препарат Кодвитален при концентрации 20 мг/мл вызывал резкое снижение АДф4индуцированной агрегации тромбоцитов уже к 1 мин. инкубации, после чего процесс снижения продолжался к 7 мин. и далее практически не менялся (рис. 1). При использовании Кодвиталена в концентрации 10 мг/мл данный эффект был менее выражен и развивался на протяжении всей 15-минутной инкубации.
100
10 мг/мл (К) 20 мг/мл (К) 10 мг/мл (С) 20 мг/мл (С)
Рис. 1. Влияние Кодвиталена (К) й препарата из жира Печени ската (С) на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов
На коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов Кодвитален при обеих концентрациях (10 и 20 мг/мл) оказывал равномерно развивающееся (с 1 по 15 мин. инкубации) угнетающее воздействие (рис. 2).
Препарат С в случае как АДФ-, так и коллаген-индуцированной агрегации проявлял менее выраженное и более замедленное угнетающее влияние, чем Кодвитален (см. рис. 1 и 2). : ; г , л
Наибольшие различия в действии препаратов К и С обнаружены при их воздействии на ристомицин-индуцированную агглютицацию тромбоцитов. При этом, если степень и характер угнетения агглютинации в присутствии препарата С (рис. 3) сравнимы с предыдущими результатами, то по реакции на Кодвитален (рис. 4) доноры тромбоцитов могут быть разделены на 2 группы:
— в группе А уже к 1 мин. инкубации наблюдалось резкое угнетение агглютинации, далее практически не меняющееся (в течении 30 мин.) и имеющее ярко выраженную зависимость от концентрации препарата (при 20 мг/мл Кодвитален вызывал практически полную блокаду агглютинации);
— в группе Б наблюдалось постепенное, менее выраженное время- и дозозависимое снижение агглютинации.
100
10ш/мл(К) ' 20мг/мл(К5 10мг/Мл(С) 20мг/мл(С)
Рис. 2. Влияние Кодвиталена (К) и препарата из жира печени ската (С) на коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов
100
10 мг/мл 20 мг/мл
Рис. 3. Влияние препарата из жира печени ската на ристомицин-индуцированную агглютинацию тромбоцитов
10 мг/мл (А) 20 мг/мл (А) 10 мг/мл (Б) 20 мг/мл (Б)
Рис. 4. Влияние Кодвиталена на ристомицин-индуцированную агглютинацию тромбоцитов, полученных от двух групп (А и Б) доноров
На основании полученных результатов можно сделать вывод, что новые препараты на основе ю-З ПНЖК — Кодвитален (К) и препарат из жира печени ската (С) — активно снижают агрегационную способность тромбоцитов и могут служить лечебно-профилактическими средствами при заболеваниях, связанных с нарушением гемостаза (тромбофилических состряниях). Однако, на наш взгляд, серьезного внимания в дальнейших исследованиях требует вопрос об индивидуальных особенностях реакции людей на прием этих и подобных препаратов.
ЛИТЕРАТУРА < jp
1. DyerbergJ., ВаЩН.О., Stoffersm E., Monsada S., Vane RJ. Eicosapentaenoic acid and prevention of thrombosis and aflierosclerosis // Lancet; — 1978. — Vol. 2 (8081). — P. 117-119.
2. LynfleldJ. Marife omega-3 adds and atherosclerosis // Ann. Int. Med. — 1988. —
P. 483-484. .
3. Спиричев В.Б. Цитание и здоровье: биологические активные добавки к пище. — М.: Медицина, І996. — С. 5-18.
4. Кулакова С.Н. Влияние изометрии жирных кислот на липидный состав и функциональные свойства мембран и тромбоцитов: Автореф. канд. дис. — М., 1985. — С. 34.
EFFECTS OF TWO NEW PREPARATIONS ORIGINATED FROM POLYUNSATURATED FATTY ACIDS OF HYDROBIONTS ON HUMAN THROMBOCYTES IN VITRO J.V.Sheritok, A.G.Marachev
Ecological Faculty, Peoples ’ Friendship -Russian University,
Podolskoye shosse, 8/5, 113093, Moscow, Russia
Two new preparations originated from lipids of cod’s liver (named as Codvitalen) and skate’s liver were investigated on their ability to influence on ADP- and collagen-induced aggregation and ristomy-cin-induced agglutination of human thrombocytes in vitro. Both preparations were shown to decrease ADP- and collagen-induced aggregation and ristomycin-induced agglutination of thrombocytes. At all cases Codvitalen has more pronounced efficiency, especially on ristomycin-induced agglutination.