действие на жидкокристаллическую структуру липидного бислоя, которая накладывает ограничения на протекание процессов ПОЛ. Мембрана обогащается фракциями фосфолипидов с более низкой температурой фазового перехода, благодаря чему повышается ее антиокислительная активность. В этой связи следует отметить, что, воздействуя низкоинтенсивным лазерным излучением, мы не вносим в организм ничего чужеродного, а лишь корректируем систему саморегулирования и поддержания гомеостаза. Действие НИЛИ на процессы, происходящие в организме, может не проявляться на фоне оптимального функционирования физиологической или биохимической системы, но может быть выражено при сдвигах функционального состояния этих систем.
Выводы:
1.При субхронической интоксикации ДХЭ происходит накопление продуктов ПОЛ, снижается активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и содержание глутатиона, нарушается соотношение холестерин / фосфолипиды, вызывая понижение проницаемости и сорбционных свойств эритроцитарных мембран.
2.Использование курса лазеротерапии уменьшает содержание продуктов ПОЛ, нормализует показатели антиоксидантной системы, а также проницаемость и сорбционную емкость мембран эритроцитов. Данные эксперимента дают основание считать, что использование при интоксикации ДХЭ НИЛИ патогенетически обосновано.
Литература
1. Владимиров, Ю.А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов / Ю.А. Владимиров // Патол. физиология и эксперим. терапия.- 1989.- № 4.- С. 7-19.
2. Волчегорский, И.А. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в геп-тан-изопропанольных экстрактах крови / И.А. Волчегорский, А.Г.Налимов, Б.Г. Яровинский, Р.И. Лифшиц // Вопросы медицинской химии.- 1989.- № 1.- С. 127-130.
3. Гаврилюк, В.П. Структурно-функциональные нарушения эритроцитов и их коррекция у больных с легкими и тяжелым течением острого панкреатита / В.П. Гаврилюк, П.М. Назаренко, А.И. Конопля // Курский научно-практический вестник “Человек и его здоровье”.- 2007.- № 3.- С. 29-36.
4. Дудник, Л.Б. Перекисное окисление липидов и его связь с изменением состава и антиокислительных свойств липидов при коматогенных формах острого вирусного гепетита В / Л.Б. Дудник, Л.М.Виксна, А.Я. Майоре // Вопросы медицинской химии.-2000.- Т.46.- № 6.- С. 597-609.
5. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов / Г.И. Клебанов [и др.] // Лаб. дело.- 1988.- № 5.- С. 59-62.
6. Копытова, Т.В. Исследование сорбционной емкости мембран эритроцитов для оценки характера эндогенной интоксикации при дерматозах / Т.В. Копытова // Клиническая лабораторная диагностика.- 2006.- № 1.- С. 18-19.
7. Меркулов, В.И. Дихлорэтан. Токсические свойства и отравления / В.И. Меркулов.- М., 1986.- 19 с.
8. Москвин, С.В. Эффективность лазерной терапии / С.В. Москвин.- М.: НПЛЦ «Техника», 2003.- 254 с.
9. Молекулярные нарушения мембраны эритроцитов при патологии разного генеза являются типовой реакцией организма: контуры проблемы / В.В. Новицкий [и др.] // Бюллетень сибирской медицины.- 2006.- № 2.- С. 62-69.
10. Пентюк, А.А. Определение фосфолипидов по образованию гидрофобного комплекса с ферротиоцианатом аммония / А.А. Пентюк, В.И. Гуцол, О.А. Яковлева // Лаб. дело.- 1987.-№ 6.- С. 457-459.
11. Путилина, Е.Ф. Определение восстановленного глута-тиона в тканях / Е.Ф. Путилина // В сб.: Методы биохимических исследований.- Л.: Медицина, 1982.- С. 183-186.
12. Рязанцева, Н.В. Типовые нарушения молекулярной организации мембраны эритроцита при соматической и психической патологии / Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий // Успехи физиологических наук.- 2004.-Т.35.- № 1.- С. 53-65.
13. Сентебова, Н.А. Предложение по унификации методов определения свободного и этерифицированного холестерина в сыворотке крови / Н.А. Сентебова // Лаб. дело.- 1976.- № 6.-С. 375-380.
14. Субботина, Т. Н. Перекисное окисление липидов и
проницаемость мембран эритроцитов у детей и подростков с сахарным диабетом типа 1 / Т.Н. Субботина, Н.М. Титова, А.А. Савченко // Клиническая лабораторная диагностика.- 2004.-№ 5.- С. 33-35.
15. Glock, G. Further studies on the properties and assay of glucose-6-phosphate dehydrogenase and 6-phosphogluconate dehydrogenase of rat liver / G. Glock, P. MeLean // Biochem.- 1953.-Vol.55, № 3.- P. 400-408.
16. Kamani, G. HPLC determination of cefazolin in plasma, urine and dialysis fluid / G. Kamani, C.L. Low, T.T.H. Valerie, W.K. Chui // Pharm. Pharmacol.- 1998.- № 50.- P. 118.
THE STRUCTURAL-FUNCTIONAL DAMAGEs OF ERYTHROCYTES AND THEIR CORRECTION BY LOW INTENSIVE LASER RADIATION IN
SUBCHRONIC INTOXICATION WITH DICHLORETHANE
D.V. SRUBILIN, D.A. ENIKEYEV, I.D. ISAKOV Bashkirian State Medical University
The purpose of this investigation was to study intensity of lipid peroxidation (LPO) and state of erythrocyte membranes intoxicated with dichlorethane (DCE) before and after correction by laser radiation. Experimentally, male rats were used to model subchronic intoxication by intragastric administration of DCE at a dose of 0,01 LD50 for 60 days. Impulse low intensive laser radiation (LILR) was applied on the projected site of the liver and tail vein using the “Matrix” device. With repeated DCE administration, accumulation of LPO products occurred. There was a reduction in gluco-6-phosphatdehydrogenase activity and glutation content. Cholesterol/phospholipids correlation was damaged. This caused a decrease in permeability and sorption characteristics of erythrocyte membranes. LILR application reduced the content of LPO products. Antioxidant system indicators and erythrocyte membrane permeability were within normal limits. Experimental data obtained allow to conclude that with DCE intoxication, the use of LILR is based on pathogenetic grounds.
Key words: dichlorethane, membrane, lipid peroxidation, laser radiation.
УДК 796:615.272.4
ВЛИЯНИЕ ДИОСМИНА НА СКОРОСТЬ ВОССТАНОВЛЕНИЯ РАБОТОСПОСОБНОСТИ И ПОВЕДЕНЧЕСКИЙ СТАТУС ЖИВОТНЫХ НА ФОНЕ ИНТЕНСИВНЫХ ФИЗИЧЕСКИХ И ПСИХОЭМОЦИОНАЛЬНЫХ НАГРУЗОК.
А.В. ВОРОНКОВ, И.Н, ТЮРЕНКОВ, А.А. СЛИЕЦАНС,
Н.А. МУРАВЬЕВА*
Для изучения влияния диосмина в дозе 100 мг/кг per os на работоспособность и переносимость интенсивной физической и психоэмоциональной нагрузки были сформированы 3 группы животных: 1) животные, подвергавшиеся интенсивной физической нагрузке, получавшие диосмин; 2) животные, подвергавшиеся интенсивной физической нагрузке, не получавшие вещества; 3) животные, не подвергавшиеся интенсивной физической нагрузке. Интенсивную физическую нагрузку моделировали плаванием мышей с грузом, равным 15% от массы тела животного в течение 7 дней. Физическую работоспособность оценивали по длительности плавания, поведенческую активность - по результатам теста «открытое поле». Применение диосмина сохраняло работоспособность и восстанавливало поведенческие реакции животных на фоне интенсивной физической и психоэмоциональной нагрузки по сравнению с контрольной группой.
Ключевые слова: физическая нагрузка, психоэмоциональная нагрузка, работоспособность, флавоноиды, диосмин.
Высококвалифицированные спортсмены в процессе тренировочной и соревновательной деятельности испытывают интенсивные физические и психоэмоциональные нагрузки, превышающие адаптационные возможности организма и приводящие к функциональным нарушениям в организме спортсменов с последующим развитием утомления и снижением спортивных результатов [4,7]. Одну из этиологически значимых ролей в формировании дезадаптации и развитии переутомления играет активация свободнорадикальных процессов и ослабление антиоксидантной защиты организма. Учитывая значение окислительного стресса в развитии дезадаптации при интенсивных физических и психоэмоциональных перегрузках, целесообразно предположить, что перспективным подходом для коррекции функциональных нарушений, ассоциированных с переутомлением, является примене-
* Волгоградский государственный медицинский университет, ул. Пугачевская, 3, Волгоград
ние антиоксидантных средств, в частности, флавоноидов, обладающих выраженным антиоксидантным действием [5].
Цель исследования — изучение влияния диосмина на скорость восстановления работоспособности и поведенческих реакций у животных после моделирования истощающих физических и психоэмоциональных нагрузок.
Материалы и методы исследования. Эксперименты выполнены на 29 белых беспородных мышах-самцах, массой 2230 г, разделенных на 3 группы, рандомизированных по поведенческой активности: первую из них составили животные, не подвергавшиеся интенсивной физической нагрузке (И, n=9), разделенных на 3 подгруппы по 3 животных в каждой; вторую (контрольную) - животные, подвергавшиеся интенсивной физической нагрузке, не получавшие вещества (ФН, n=10); третью - животные, подвергавшиеся интенсивной физической нагрузке, получавшие диосмин 100 мг/кг per os, через 30 минут после физической нагрузки в течение всего эксперимента (ФН+Д, n=10). Интенсивную физическую нагрузку моделировали плаванием мышей с грузом, равным 15% от массы тела животного на протяжении 7 дней. Критерием ограничения времени плавания служило опускание животного на дно бассейна, после которого оно не могло самостоятельно подняться на поверхность. Интактные животные подвергались физической нагрузки по 1 подгруппе в день по следующей схеме: «1 день-плавание, 2 дня-отдых, 1 день-плавание, 2 дня-отдых» для каждой подгруппы. Эксперимент занял 9 дней, плавание - 7 дней, кроме этого в первый день эксперимента (до физической нагрузки), на четвертый день плавания и в последний день эксперимента (после физической нагрузки) проводилась оценка поведенческих реакций животных в тесте «Открытое поле». Статистическая обработка данных производилась с помощью пакетов программ Microsoft Office Excel, BioStat 2008 5.2.5.0.
Все животные содержались в условиях вивария с естественным световым режимом, на стандартной диете (ГОСТР 50258-92), с соблюдением Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях, а также правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ 3 51000.3-96 и 51000.4-96) и Приказу МЗ РФ .№267 от 19.06.2003г. «Об утверждении правил лабораторной практики» (GLP).
Результаты и их обсуждение. При сравнении продолжительности плавания у животных трех групп на протяжении эксперимента получены следующие результаты (рис.1).
Животные интактной группы показали достоверно не различимые результаты в группе по продолжительности плавания на протяжении семи дней эксперимента. Тогда как у животных контрольной группы наблюдалось увеличение продолжительности плавания в среднем на 36% от исходного значения, а также по сравнению с животными интактной группы на второй день эксперимента, что, по-видимому, связано с активацией резервных адаптационных возможностей организма [6]. На третий день у мышей контрольной группы наблюдалось снижение продолжительности плавания на 52,2% по сравнению с исходными данными и на 50,9% по сравнению с аналогичным показателем у ин-тактных животных, что, возможно, связано со срывом адаптации, развитием функциональных нарушений и переутомления, что согласуется с литературными данными [1,3]. С четвертого дня эксперимента происходит постепенное увеличение времени плавания и развитие тренированности у животных, однако к седьмому дню эксперимента не было достигнуто исходного уровня работоспособности, что составило 71,6% от первоначального значения и 73% от аналогичного значения у интактных животных. У животных, получавших диосмин, наблюдается снижение продолжительности плавания на протяжении всего эксперимента по сравнению с интактными животными. Однако по сравнению с контрольной группой уровень работоспособности животных, получавших диосмин, достоверно выше (p<0,05) и на седьмой день эксперимента составляет 83,7% от исходного уровня и 84,9% от аналогичного значения у интактных животных, что в среднем на 12% выше показателя контрольной группы.
При оценке поведенческих реакций у животных интактной группы наблюдается тенденция к снижению двигательной и ориентировочно-исследовательской активности на протяжении эксперимента, однако эти изменения не достоверны и объясняются феноменом габитуации [2]. У животных контрольной группы и животных, получавших диосмин, наблюдается достоверное сни-
жение двигательной и ориентировочно-исследовательской активности на фоне интенсивной физической нагрузки по сравнению с исходными показателями для каждой группы, а также аналогичным значением интактной группы к четвертому дню эксперимента. Однако отмечено, что на фоне приема диосмина происходит увеличение двигательной активности по сравнению с контрольной группой на девятый день эксперимента, что составляет 87,2% от аналогичного показателя интактной группы (рис. 2), и ориентировочно-исследовательской активности, значение которой составляет 85,5% от показателя у интактной группы (рис.3), что достоверно выше на 14,5 и 10,6% соответственно, чем у животных контрольной группы.
* 40 д
-ь И
с .>■■■ ■*-i ФН*Д
10 I-"' ФН
1 2 3 4 5 Дни плавания. 6 7
Рис. 1. Влияние диосмина на продолжительность плавания животных. Примечание (здесь и далее): И - интактные животные; ФН - животные, подвергавшие интенсивной физической нагрузке, не получавшие веществ;
ФН+Д - животные, подвергавшиеся физической нагрузке, получавшие диосмин. * - Достоверно по отношению к исходному значению (р<0,005) # - Достоверно по отношению к значению интактной группы (р<0,005)
Рис. 2. Влияние диосмина на двигательную активность животных на фоне интенсивной физической нагрузки
Выводы:
1. Семидневная физическая и психоэмоциональная перегрузка приводит к снижению работоспособности и угнетению поведенческих реакций у животных.
25 -і
¿OHdipVJKH 4 день после нашу ¿ки
Рис. 3. Влияние диосмина на ориентировочно-исследовательскую активность животных на фоне интенсивной физической нагрузки
2. Курсовое введение диосмина после физической и психоэмоциональной нагрузки сохраняло работоспособность и восстанавливало двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность у мышей по сравнению с животными контрольной группы.
Литература
1. Влияние имидазольного производного Гамма-аминомасляной кислоты на физическую работоспособность животных при повторяющихся физических / М. Н. Багметов [и др.] Вестник Российского государственного медицинского университета.- 2006.- № 2.- С.340
2. Дубровина, Н. И. Успехи физиологических наук / Н.И. Дубровина.- 2011.- Т.42.- №1.- С. 53-66.
3. Каркищенко, Н.Н. Биомедицина / Н.Н. Каркищенко.-2010.-Т.1.-№ 4- С. 6-23.
4. Роженцов, В.В. Утомление при занятиях физической культурой и спортом: проблемы, методы исследования /В.В. Ро-женцов, М.М. Полевщиков.- М: Советский спорт, 2006.- 280 с.
5. Зависимость между антиоксидантным действием флаво-ноидов и их влиянием на вазодилатирующую функцию эндотелия в условиях эндотелиальной дисфункции / И. Н. Тюренков [и др.] Экспериментальная и клиническая фармакология.- 2010.- № 10.-С.14-16.
6. Хабибуллина, И.Р. Вестник Челябинского государственного педагогического университета / И.Р. Хабибуллина,
Э.Ш. Шаяхметова, Л. М. Масягутова.- 2009.- №10-2.- С. 320-327.
7. Nicolaidis, M.J. Sports Med. / M.J. Nicolaidis.- 2008-Vol. 38.- №7- P. 579-606.
THE DIOSMIN EFEECTS ON SPEED RECOVERY EFFICIENCY AND BEHAVIORAL STATUS IN THE ANIMALS DURING INTENSIVE
PHYSICAL AND PSYCHO-EMOTIONAL LOADS
A.V. VORONKOV, I.N. TYURENKOV, A.A. SLIETSANS,
N.A. MURAVIEVA
Volgograd State Medical University
To study the effect of diosmin 100 mg/kg per os on the efficiency and tolerability of intense physical and emotional stress have been formed three groups of animals: 1) the animals were subjected to intense physical activity, treated with diosmin. 2) animals subjected to intense physical activity, did not receive the substance, 3) the animals are not subjected to intense physical activity. Intensive exercise simulated swimming of mice with a load equal to 15% by weight of the animal for 7 days. Physical performance was assessed by the duration of swimming behavioral activity - as measured by an "open field". The use of diosmin maintained performance and reduced behavioral responses of animals to the background of intense physical and emotional stress as compared with the control group.
Key words: physical loads, psycho-emotional loads, efficiency, flavonoids, diosmin.
УДК 612.43
СТРЕСС-ИНДУЦИРОВАННЫЕ ГОРМОНАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ У СТУДЕНТОВ
О.В. ЛАВРОВ, В.Ф. ПЯТИН, И.В. ШИРОЛАПОВ*
В работе исследовано влияние экзаменационного стресса как стрес-сорного фактора, индуцирующего регуляторные ответы эндокринной системы студентов (n=93). Сывороточные уровни гормонов и биогенных аминов (тиреотропный гормон, кортизол, инсулиноподобный фактор роста, лептин, адреналин, серотонин, гистамин) оценивались методом ИФА в зависимости от вегетативных реакций испытуемых при стрессе. Выявлены снижение сывороточных уровней тиреотропного гормона и кортизола и увеличение содержания в крови тестированных биогенных аминов. У испытуемых с различным характером вегетативных ответов (с устойчивым повышением индекса Кер-до и без такового) были увеличены сывороточные концентрации гистамина до экзамена и адреналина после экзамена. Установленные изменения показателей эндокринной системы подчеркивают индивидуальный характер реакций каждого испытуемого.
Ключевые слова: экзаменационный стресс, общий адаптационный синдром.
Эндокринная система, наряду с нервной и иммунной, является регуляторной системой организма и выполняет общую функцию поддержания гомеостазиса внутренней среды организма. Воздействие стрессорных факторов вызывает изменение параметров функциональной активности регуляторных и эффекторных физиологических систем организма, в том числе различные адаптивные изменения в регуляции секреции гормонов и биогенных аминов [3,7,8]. Суммарное влияние синергично действующих стрессорных факторов, возникающих в период экзаменационной сессии, составляют силу и длительность стресса и в целом характеризуют его как физиологический или патологический. При этом не только параметры стресса, но и состояние антистрессорной системы и суммарная активность внутренних механизмов адаптации организма человека в условиях психоэмоциональных
нагрузок во взаимосвязи определяют особенности гормональной реактивности [1,10]. В период экзаменационной сессии у студентов могут регистрироваться выраженные изменения вегетативной и гормональной регуляции функций, что определило актуальность и дизайн настоящего исследования.
Цель исследования — изучить особенности сывороточных концентраций гормонов и ряда биогенных аминов в условиях воздействия экзаменационного стресса у студентов во взаимосвязи с их вегетативным профилем.
Материал и методы исследования. Исследование выполнено на группе молодых здоровых добровольцев (стартовая группа испытуемых включала 203 студента медицинского вуза), которые до участия в исследовании прошли детальное медицинское обследование. В результате были отобраны 93 студента, в полной мере соответствующие критериям включения и исключения. Группу контрольных данных составили результаты предварительного обследования испытуемых вне экзаменационной сессии.
Исследования выполнялись за 1 час до экзамена и в течение 1 часа после: измерение вегетативных реакций (систолического и диастолического АД, ЧСС и вычисление индекса Кердо) и гормонального профиля. Сывороточные уровни гормонов и биогенных аминов (тиреотропный гормон, кортизол, инсулиноподобный фактор роста, лептин, адреналин, серотонин, гистамин) исследовались методом ИФА с использованием фотометра «Opsys Thermolabsystems», вошера и комплекта моноклональных антител. Оценка индекса Кердо проводилась в соответствии с критериями, согласно которым его повышение более чем на 15% свидетельствует о сдвиге вегетативных реакций в пользу симпатико-тонии, а снижение на эту же величину и более - в пользу пара-симпатикотонии.
Результаты исследования обрабатывались с использованием пакета прикладных программ «StatPlus». Достоверность измерений оценивалась в парном и гомоскедастическом двухвыборочном Т-тесте. Также для статистической обработки данных применялись методы непараметрической статистики (Манна-Уитни и Колмогорова-Смирнова). Статистическая значимость принималась при р<0,05.
Результаты и их обсуждение. Исследование вегетативных реакций в условиях экзаменационного стресса позволило разделить студентов на две категории: с устойчивым ростом вегетативного индекса Кердо (у 53% испытуемых в нашем исследовании) и без устойчивого роста вегетативного индекса Кердо (у 47% студентов).
Согласно данным табл.1, достоверную разницу гормональных показателей до и после сдачи экзамена можно было зарегистрировать только для уровней биогенных аминов (серотонина, гистамина, адреналина) в крови, в то время как исследование гормонального статуса студентов не выявило значимых постэкзаменаци-онных сдвигов параметров на уровне средних величин.
Таблица 1
Сывороточные концентрации тестируемых показателей до и после экзамена
Тестируемые показатели До экзамена После экзамена р
Тиреотропный гормон (мЕД/л) 0,61 ± 0,67 0,56 ± 0,53 0,701
Кортизол (нмоль/л) 101,2 ± 71,1 79,3 ± 38,6 0,145
Инсулиноподобный фактор (нг/мл) 256,3 ± 94,5 262,5 ± 89,4 0,516
Лептин (нг/мл) 4,98 ± 2,58 4,70 ± 3,02 0,236
Серотонин (мг/мл) 162,2 ± 73,4 139,1 ± 61,7 0,020
Г истамин (нг/мл) 2,42 ± 2,03 2,21 ± 2,70 0,001
Адреналин (пг/мл) 0,42 ± 0,36 0,84 ± 1,12 0,001
При этом ряд показателей гормонального статуса и, в первую очередь, содержание в крови биогенных аминов формируют довольно устойчивые отклонения при экзаменационном стрессе, которые продолжают нарастать после экзамена. Для проверки этого предположения был проведен анализ изменения каждого тестированного гормона в сопоставлении с нормативными для данной возрастной группы контрольными значениями. Результаты этого анализа представлены в виде частоты встречаемости сдвигов (отклонений) изучаемых показателей в табл. 2.
* Самарский государственный медицинский университет: ул. Чапаевская, 89, Самара, 443099