ЛИТЕРАТУРА
Б а г д а с а р ь я н Г. А., Казанцева В. А. Гиг. и сан., 1965, № 7, с. 4.— Григорьева Л. В., Старовойтова Т. В. Там же, с. 108.— Казанцева В. А., Багдасарьян Г. А. Методические указания по выделению цитопатоген-ных энтеровирусов из сточных вод. М., 1965.— Kelly S., W i nsser V., W i n k e 1 -stein W., Am. J. publ. Hlth, 1957, v. 47, p. 72.— R i о r d a n I., Yale J. Biol. Med.„ 1962, v. 34, p. 512.
Поступила 23/VI 1970 r.
CERTAIN REGULARITIES OF THE ENTEROVIRUSES CIRCULATION IN THE ENVIRONMENT AND AMONG THE POPULATION OF ODESSA
D. M. Babov, L. T. Gubenko, A. A. Muromtseva, N. E. Yarotskaya
The viruses ECHO 3, 6 and 7 and Coxsackie B3 and B5 were found mainly to circulate the whole year round among the population and in the sewage of Odessa for the period from 1966 to 1968. These serotypes were detected in the sewage when they were recovered from 1.9 to 4.9 per cent of the population. The concentration of the virus from the sewage was attained by means of the swab method: at least three swabs were immersed at each site of sewage sampling. The virus isolation was accomplished in the Hep-2 line of cells and that in the human embryonic fibroblasts.
УДК 615.28:547.563.13'021].015.44:576.8.095.К
ВЛИЯНИЕ ДИНИТРООРТОКРЕЗОЛА НА РАЗВИТИЕ НЕКОТОРЫХ САПРОФИТНЫХ И ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
М. И. Тарков, Г. В. Меренюк, Л. А. Тимченко Молдавский научно-исследовательский институт гигиены и эпидемиологии, Кишинев
Использование в сельском хозяйстве различных пестицидов вызывает необходимость выяснения воздействия их на микроорганизмы. Эта проблема имеет два взаимосвязанных аспекта: ядохимикаты, вносимые в почву, угнетают «нормальную» микрофлору почвенного биоценоза; они же влияют на «постороннюю» микрофлору почвы, в том числе и на попадающие в нее патогенные микроорганизмы. В этом отмечается, во-первых, непосредст-ственное влияние яда на патогенные микроорганизмы, а во-вторых, косвенное — посредством угнетения нормальной почвенной флоры, деятельность которой обусловливает процессы самоочищения почвы. Успехи в изучении указанных выше вопросов в первую очередь определяются созданием достаточно надежных методических приемов и возможностью конструкции модели, наиболее приближающейся к естественным условиям.
Многие авторы исследовали влияние действующего начала пестицидов на чистые культуры микроорганизмов. Тот же путь избран и нами, но> при этом использовались количественные микробиологические методы исследования (М. И. Тарков и соавт.).
Влияние пестицидов на почвенную микрофлору изучали ряд исследователей (Н. С. Соколов; П. И. Захарченко и Н. И. Мельников; Ш. Т. Атабаев, 1964, 1965; Ю. У. Хасанов, 1966, и др.). Полученные ими данные весьма противоречивы.
Известно, что нитроортокрезол обладает сильными бактерицидными свойствами. Так, Г. Н. Желтяков, анализируя бактерицидные свойства динитроортокрезола (ДИНОК) по методике бактериальных тест-объектов для контроля бактерицидного действия дезинфекционных средств, установил, что для ДИНОК фенольный коэффициент равен 1.
Мы изучили влияние ДИНОК на чистые культуры красных дрожжей как представителей почвенных сапрофитов и на патогенные микроорганизмы — сальмонеллы и кишечную палочку.
Опыты проводили с сухим препаратом, содержащим 30% ДИНОК с пересчетом на действующее начало. Рабочие растворы пестицида готовили в стерильной дистиллированной воде.
Влияние ДИНОК на чистые культуры микроорганизмов определяли путем внесения его в различных концентрациях в питательную среду, на которой выращивались микроорганизмы.
Красные дрожжи R. gracilis, Esch, coli u Sal. typhimurium использовали после 10-кратного пересева с целью получения «чистой линии». Культуру красных дрожжей сохраняли и выращивали на жидкой и твердой средах Сабуро, Esch, coli и Sal. typhimurium — на мясо-пептонном бульоне и мясо-пептонном агаре. Культуры, выросшие на скошенном агаре, смывали физиологическим раствором и взвешивали в нем, концентрацию клеток определяли турбодимитрнчески с пересчетом на коли-стандарт по специально полученным индексам.
В опытах с твердыми питательными средами раствор ДИНОК в стерильной дистиллированной воде вносили в расплавленный и охлажденный до 40°агар, после чего им заливали чашки Петри, содержащие 1 мл культуры микроорганизмов, которые равномерно распределялись во всей среде (25 «качаний»). Посевы инкубировали в термостате: красные дрожжи при 28° в течение 48 часов, Esch, coli и Sal. typhimurium при 37° в течение 24 часов; затем производили подсчет выросших колоний (микробное число).
Проведены 3 серии опытов по определению влияния препарата на культуры микроорганизмов в зависимости от концентрации ДИНОК в агаре и от концентрации микроорганизмов.
Полученные данные (табл. 1) свидетельствуют о том, что влияние ДИНОК в первую очередь зависит от вида испытанного микроорганизма. Так, ингибирующий эффект для кишечной палочки и сальмонелл превышает таковой для красных дрожжей в 20 и 60 раз. Как видно из табл. 1, ингибирующий эффект ДИНОК зависит не только от примененной концентрации пестицида, но и от количества микроорганизмов, подвергнутых ее влиянию.
Зависимость ингибирующего эффекта одной и той же концентрации ДИНОК при различных посевных дозах, по нашему мнению, объясняется различной резистентностью отдельных клеток в популяции.
Дальнейшие исследования проводились нами только с одной посевной дозой — 100—200 клеток в 1 мл, так как упомянутые выше опыты показали, что выявленные закономерности будут репрезентативными и для других концентраций микроорганизмов.
Были определены нетоксические и токсические концентрации ДИНОК ло отношению к изучаемым микроорганизмам при посевной дозе около 100—200 клеток в 1 мл (табл. 2). Нетоксическая доза препарата для красных дрожжей составляла 0,3 мг/л, абсолютно токсическая — 6 мг/л. ДИНОК в пределах 0,9—6 мг/л проявляет постепенно возрастающую токсичность. Концентрация препарата 1,5 мг/л не влияла на рост кишечной палочки, концентрация же 150 мг/л приводила к полному подавлению роста ее. Следовательно, пределы токсичности вещества ограничены дозами 3—150 мг/л. Соответственно при концентрации пестицида 30 мг/л прорастали 100% засеянной культуры сальмонелл, а при концентрации 9Ö0 мг/л рост полностью прекращался.
Рассмотрим данные о влиянии ДИНОК на микроорганизмы при их выращивании в жидких питательных средах.
В опытах с жидкими питательными средами разлитые по 100 мл среда Сабуро и мясо-пептонный бульон засевали 100—200 клетками изучаемых микроорганизмов в 1 мл, затем в среду вносили различные концентрации препарата. Посевы инкубировали в термостате при 28 (красные дрожжи) и 37° (кишечная палочкг и сальмонеллы), затем проводили высев на чашки Петри методом микробного числа. Подсчет выросших колоний производили в том случае, если их было не более 1000. Если вырастало больше колоний, мы указывали, что их было более 1000 или отмечали сплошной рост.
Полученные данные свидетельствуют о том, что все испытанные концентрации ДИНОК оказывают ингибирующее влияние на развитие популяции красных дрожжей. В опытных сериях сразу после посева количество клеток практически не отличается от контрольных, затем оно постепенно уменьшается. Наименьшее количество клеток отмечается через 6—12 часов после начала воздействия препарата.
Таблица 1
Влияние ДИНОК на культуры красных дрожжей, кишечной палочки и сальмонелл
Концентрация ДИНОК (в мг/л) Посевная доза (количество клеток в 1 мл)
1 млн. 100 тыс. 10 тыс. 1 тыс. 100
Контроль 0,9 1,2 6,0 15,0 Сплошной рост » > » » 580 1 И. grac Сплошной рост > > 1 » 82 0 ills Сплошной рост » 1 » » 0 0 Сплошной рост » » » > 0 0 100 94 75 0 0
Esch, coli
Контроль 150,0 300,0
Контроль 450,0 900,0
Сплошной рост > »
0
Сплошной рост » »
0
Сплошной рост 152 0
Сплошной рост 32 0
Ба1. 1урЫтипит
Сплошной рост 851 0
Сплошной рост 32 0
Примечание. Цифры— количество выросших колоний.
892 3
о
1017
3
о
100 о о
100 о о
Через 24 часа в контрольных сериях и в серии опытов с концентрацией ДИНОК 3 мг/л отмечался сплошной рост. В культуре, содержащей препарат на уровне 15 мг/л, определены 233 клетки в 1 мл среды. Концентрация пестицида 24 и 27 мг/л
Т а б л[и ц а 2
Влияние различных концентраций ДИНОК на развитие микроорганизмов (100—200 клеток в 1 мл)
Концентрация ДИНОК (в мг/л)
Микроорганизмы
R. gracilis
Esch, coll
Sal. typhlmu-riurn
абс.
абс.
абс.
полностью подавляла рост. Через 48 часов в серии опытов с концентрацией ДИНОК 24 мг/л отмечался рост — 87 колоний. В[серии опытов с концентрацией препарата 27 мг/л рост отсутствовал.
Следовательно, концентрация ДИНОК 27 мг/л приводила к полной гибели культуры красных дрожжей, меньшие концентрации (3—24 мг/л)— к частичной гибели. Под влиянием препарата латентная фаза удлинялась с 1 до 48 часов.
Концентрация пестицида 3—30 мг/л практически не влияла на развитие популяции кишечной палочки, концентрация 90—900 мг/л приводила к замедлению роста и удлинению латентной фазы, а концентрация 1350 мг/л — к полному подавлению роста.
Подобная картина наблюдалась и при проверке влияния пестицида на культуру сальмонелл.
Контроль 0,3 0,9 1,5 3,0 6,0 30,0 90,0 150,0 450,0 900,0
100 100 94 77 48 0
100 100 94 77 48 0
113
115 101
98 70 0
100
100 90
86 62 0
234
240
198 163 0
100
100
83 70 0
Обращает на себя внимание несколько меньшее проявление токсичности препарата в жидких питательных средах по сравнению с плотными.
Таким образом, резистентность кишечной палочки к ДИНОК при внесении его в твердые питательные среды по сравнению с резистентностью красных дрожжей больше в 25 раз, а сальмонелл — в 150 раз. При внесении препарата в жидкие питательные среды оба патогенные микроорганизмы устойчивее, чем красные дрожжи, в 50 раз. Микроорганизмы более устойчивы к препарату при их выращивании в жидких питательных средах, нежели в твердых питательных средах, в 1,5—9 раз.
Концентрация ДИНОК ниже абсолютно токсических приводит к гибели определенного процента клеток, причем величина эта находится в прямой зависимости от концентрации препарата. В субтоксических дозах препарат удлиняет латентную фазу от 1 до 48 часов в зависимости от вида микроорганизма и испытанных концентраций пестицида.
Можно предположить, что попавший в почву ДИНОК в концентрации до 27 мг)кг окажет угнетающее влияние на почвенную микрофлору. Что касается патогенной микрофлоры кишечной группы, то при указанных концентрациях пестицида она не будет угнетаться; возможно, условия их выживания в почве улучшатся вследствие угнетения почвенной микрофлоры. Sal. typhimurium оказались более резистентными к препарату, чем Esch, coli — микроорганизмы, считающиеся санитарно-показатель-ными по отношению к группе сальмонелл. Это свидетельствует от том, что в подобного рода исследованиях использование Esch, coli как санитарного показателя нецелесообразно.
!
ЛИТЕРАТУРА
Атабаев Ш. Т. В кн.: Материалы Научного симпозиума по токсикологии и гигиене ядохимикатов, применяемых в сельском хозяйстве. Ташкент, 1964, с. 148.— Ата -баев Ш. Т. Гиг. и сан., 1965, № 1, с. 3.— Захарченко П. И., Мельников Н. И. Изобретения, 1965, № 3, с. 32.— Желтяков Г. Н. Мед. ж. Узбекистана, 1965, № 2, с. 54,— Соколов Н.С. Земледелие, 1956, № 7, с. 98,— X а с а -нов Ю. У. В кн.: Материалы 2-й научной конференции молодых ученых медиков Узбекистана. Ташкент, 1966, с. 541.
Поступила 30/111 1970 г.
EFFECT OF DINITROORTHOCRESOL ON THE GROWTH OF CERTAIN SAPROPHYTIC AND PATHOGENIC MICROORGANISMS
M. I. Tarkov, G. V. Merenyuk, L. A. Timchenko
Under experimental conditions dinitroorthocresol was shown to be a powerful inhibitor of growth of red Saccharomycetaceae. The resistance of B. coli and Salmonellae exceeded that of red Saccharomycetaceae 25 to 150 times in case of growth of microorganisms on solid nutrient media and 50 times — in liquid media.
УДК 616.71-008.924.2-02:613.32
РОЛЬ МИНЕРАЛЬНОГО СОСТАВА ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ В НАКОПЛЕНИИ Бг90 В КОСТНОЙ ТКАНИ ВЗРОСЛОГО
НАСЕЛЕНИЯ
А. Н. Сухомлина, П. В. Рамзаев
Сведения о влиянии минеральных веществ на накопление Бг90 в организме человека в естественных условиях жизни крайне ограничены. Известна лишь одна работа (А. Н. Кармаева и соавт.) в отношении этого изотопа в связи с потреблением кальция питьевой воды. Мы ставили своей целью дополнить имеющиеся сведения.