CC BY
21
УДК 547.821:616.381-002-092.9 DOI 10.24412/2220-7880-2021-2-67-73
ВЛИЯНИЕ ЧАСТИЧНО ГИДРИРОВАННЫХ ПИРИДИНОВ, ПРОИЗВОДНЫХ ЦИАНОТИОАЦЕТАМИДА, НА ПОКАЗАТЕЛИ ЛЕТАЛЬНОСТИ КРЫС С КАЛОВЫМ ПЕРИТОНИТОМ
'БибикЕ.Ю., 1 Кривоколыско Б.С., 'ВенидиктоваЮ.С., 'Самокиш А.А., 'Заболотная Н.Г., 12ФроловК.А., 2 3Доценко В.В., 12 Кривоколыско С.Г.
1ГУ ЛНР «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки», Луганская Народная Республика (91045, Луганск, кв. 50-летия Обороны Луганска, 1г), e-mail: helen_bibik@mail.ru 2НИЛ «Химэкс» ГОУ ВПО «Луганский национальный университет им. Владимира Даля», Луганская Народная Республика (91034, Луганск, кв. Молодежный, 20а, корп. 7)
3ФГБОУ ВО «Кубанский государственный университет», Краснодар, Россия (350040, Краснодар, ул. Ставропольская, 149)
Одной из наиболее сложных проблем современной клинической медицины является лечение тяжелых форм перитонита. Несмотря на совершенствование методов хирургического лечения и фармакологической коррекции, летальность при разлитом гнойном перитоните на протяжении многих десятилетий не имеет тенденции к снижению на фоне нарастающей резистентности возбудителей к антибактериальным лекарственным средствам. Целью исследования является изучение показателей смертности крыс с экспериментальным каловым перитонитом после введения синтезированных нами малотоксичных образцов новых частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида. Проведенные исследования детоксицирующей и антитоксической активности шести образцов частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида, на модели калового перитонита показали их способность после однократного внутрижелудочного введения в дозе 5 мг/кг предотвращать гибель от 28,6% до 42,9% животных. При этом показатели ранней летальности от калового перитонита в первые 12 часов на фоне фармакокоррекции соединением CV043 были на уровне нулевых значений. Процент летальности крыс, получавших CV047, CV042 в качестве фармакокорректора острого экспериментального перитонита, был в три раза ниже, чем в контроле. Уровень смертности крыс в опытной группе CV146 в остром периоде был ниже, чем в контроле, в два раза.
Ключевые слова: каловый перитонит, частично гидрированные пиридины, летальность.
EFFECT OF PARTIALLY HYDROGENATED PYRIDINES, DERIVATIVES OF CYANOTHIOACETAMIDE, ON THE INDEXES OF MORTALITY OF RATS WITH FECAL PERITONITIS
'BibikE.Yu., 'Krivokolysko B.S., 'Venidiktova Yu.S., 'Samokish A.A., 'Zabolotnaya N.G., 12Frolov K.A., 2' 3Dotsenko V. V., ',2Krivokolysko S. G.
1Lugansk State Medical University named after St. Luke, Lugansk, Lugansk People's Republic (91045, Lugansk, 50 years of Defense of Lugansk St., 1G), e-mail: helen_bibik@mail.ru
2Lugansk National University named after Vladimir Dahl, NIL «Himeх», Lugansk, Lugansk People's Republic (91034, Lugansk, Molodezhniy Sq., 20A, bld. 7)
3Kuban State University, Krasnodar, Russia (350040, Krasnodar, Stavropolskaya St., 149).
One of the most difficult problems of modern clinical medicine is the treatment of severe forms of peritonitis. Despite the improvement of surgical treatment methods and pharmacological correction, mortality with diffuse purulent peritonitis for many decades has not tended to decrease against the background of increasing resistance of pathogens to antibacterial drugs. The aim of the study is to estimate the mortality rates of rats with experimental fecal peritonitis after using of the synthesized by us low toxicity samples of new partially hydrogenated pyridines, derivatives of cyanothioacetamide. Studies of the detoxifying and antitoxic activity of six samples of partially hydrogenated pyridines, derivatives of cyanothioacetamide, on the model of fecal peritonitis showed their ability to prevent death from 28.6% to 42.9% of animals after a single intragastric using of 5 mg/kg. At the same time, the indicators of early mortality from fecal peritonitis in the first 12 hours against the background of pharmacocorrection with CV043 were at the level of zero values. The mortality rate of rats treated with CV047, CV042 as a pharmacocorrector of acute experimental peritonitis was three times lower than in the control. The mortality rate of rats in the experimental group CV146 in the acute period was lower than in the control twice.
Keywords: fecal peritonitis, partially hydrogenated pyridines, mortality.
Введение
Одной из наиболее сложных проблем современной клинической медицины является лечение тяжелых форм перитонита. Несмотря на совершен-
ствование методов хирургического лечения и фармакологической коррекции, летальность при разлитом гнойном перитоните на протяжении многих десятилетий не имеет тенденции к снижению, находясь
в пределах, по данным различных авторов, от 32% до 86% [1]. Эта проблема приобретает еще большую актуальность в свете нарастающей резистентности возбудителей к антибактериальным лекарственным средствам. При этом неэффективная антибиотико-терапия в 2 раза увеличивает летальность при абдоминальном сепсисе [2]. В большинстве стран мира сепсис входит в десятку основных причин смертности пациентов отделений реанимации и интенсивной терапии. При этом смертность при сепсисе может достигать 30%, а при септическом шоке - более 50%.
Отсутствие существенных сдвигов в результатах лечения осложненных форм перитонита находит свое отражение в многочисленных научных исследованиях, использующих различные подходы к лечению данной хирургической патологии.
В настоящее время особый интерес исследователей и клиницистов привлекает ряд синдромов, лежащих в основе патогенеза перитонита как одного из наиболее тяжелых осложнений различных хирургических заболеваний. К таковым относятся синдром системной воспалительной реакции, полиорганной недостаточности, сепсиса и септического шока, окислительного стресса и эндотелиальной дисфункции, кишечной недостаточности и интраабдоминальной гипертензии [3].
Основными критериями оценки эффективности лечения перитонита и абдоминального сепсиса являются показатели летальности и осложнений. В этой связи целенаправленный поиск новых и безопасных средств для фармакотерапии острых септических состояний является весьма актуальной задачей современных фармакологических исследований.
Одной из потенциально новых лекарственных мишеней для фармакотерапии сепсиса, по данным некоторых авторов, следует считать аденозиновые рецепторы А2А [4, 5]. В работе Martin C. et al. было показано десятикратное увеличение уровня адено-зина в плазме крови у пациентов с септическим шоком [6].
Перечень предполагаемых 6i
Одним из перспективных направлений таких исследований может быть комплексное изучение частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида, которые обладают широким спектром фармакодинамической активности, синтезированных на базе НИЛ «Химэкс» ЛНУ им. Владимира Даля по известным методикам [7-11].
В серии ранее проведенных нами исследований на моделях острого тетрахлорметанового гепатита, острого тетрациклинового гепатита и парацетамоль-но-алкогольного поражения печени были установлены гепатопротекторные и детоксицирующие свойства 6 образцов частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида, при их внутриже-лудочном введении в дозе 5 мг/кг.
Предварительно проведенное изучение острой токсичности исследуемых образцов осуществлялось в соответствии с Межгосударственным стандартом ГОСТ 32644-2014 (OECD, Test № 423:2001, IDT). За 14-дневный период наблюдения после затравки препаратами нами не было зафиксировано ни одного случая гибели крыс ни на одной из дозировок 50, 300 и 2000 мг/кг. Все животные были активны, сохранялся аппетит и потребность в воде. Даже введение максимальной (2000 мг/кг) дозировки изучаемых замещенных ди- и тетрагидропиридинов характеризовалось нулевой летальностью. Видимых признаков нейротоксичности, ульцерогенности, гепатотоксич-ности нами не было обнаружено. В связи с этим исследуемые образцы вновь синтезированных соединений следует отнести к малотоксичным препаратам, что подтвердило результаты ранее проведенного их предикторного анализа in silico.
Образцы исследуемых новых производных частично гидрированных пиридинов были протестированы нами по компьютерным программам виртуального биоскрининга [12]. Список предполагаемых биомишеней проанализирован и приведен в качестве примера для соединения с лабораторным шифром CV146 ниже в табл. 1.
Таблица 1
шшеней для действия CV146
Target Common name Uniprot ID ChEMBL ID # sim. cmpds (3D / 2D) Target Class
Microtubule-associated protein (by homology) Mapt D3ZKD9 767 / 6 Unclassified
Androgen receptor Ar P15207 CHEMBL3072 10 / 4 Transcription Factor
Protein LOC100911347 (by homology) LOC100911347 M0RAG6 198 / 11 Membrane receptor
Adora3 protein (by homology) LOC100363178 Q4V8H0 198 / 11 Membrane receptor
Adenosine receptor A1 Adorai P25099 CHEMBL318 330 / 5 Membrane receptor
Adenosine receptor A2a (by homology) Adora2a P30543 CHEMBL302 239 / 7 Membrane receptor
Adenosine receptor A3 (by homology) Adora3 P28647 CHEMBL3360 73 / 4 Membrane receptor
Adenosine A2B receptor (by homology) Adora2b B1WBR3 122 / 5 Membrane receptor
Cytochrome P450 2A3 (by homology) Cyp2a3 D4A519 1 / 4 Enzyme
Cytochrome P450 2C7 (by homology) Cyp2c7 D4ABM1 1 / 4 Enzyme
В связи с потенциальной возможностью их влияния на аденозиновые рецепторы актуальными и перспективными являются дальнейшие доклинические исследования частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида, для поиска новых высокоэффективных и безопасных средств для фар-макокоррекции перитонита и абдоминального сепсиса как наиболее частого и грозного осложнения абдоминальной хирургической патологии.
Целью исследования является изучение показателей смертности крыс с экспериментальным каловым перитонитом после введения синтезированных нами малотоксичных образцов новых частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида.
Материал и методы
Для исследований использовались замещенные ди- и тетрагидропиридины с шифрами С^42. СУ043, СУ046, СУ047, СУ080 и СУ146, химические формулы которых приведены на рисунке 1.
Экспериментальные исследования были проведены на 62 белых лабораторных крысах-самцах массой 180-220 г в осенне-зимний период в сертифицированной фармакологической лаборатории ГУ ЛНР «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки». Животные были выбраны случайным образом.
СУ042
СУ043
СУ046
СУ080
СУ146
СУ047
Рис. 1 Химические формулы изучаемых замещенных ди- и тетрагидропиридинов
Условия содержания животных и манипуляции, проводившиеся с ними, соответствовали требованиям, содержащимся в методических рекомендациях по этической экспертизе биомедицинских исследований. Перед началом эксперимента все животные были тщательно осмотрены, учитывались их вес, возраст, двигательная активность и состояние шерстяного покрова.
Экспериментальный перитонит вызывали путем внутрибрюшинной инъекции дважды про-
фильтрованной 20%-ной каловой взвеси из расчета 1 мл / 100 г массы животного [13].
Перед началом эксперимента 62 лабораторные белые беспородные крысы были распределены на девять групп: первая - интактная (6) (крысы без патологии, которым вводили внутрибрюшинно эквивалентное каловой взвеси количество воды для инъекций), вторая и последующие группы включали по 7 животных - контрольная (животные с каловым перитони-
том), третья группа сравнения (тиотриазолин в дозе 50 мг/кг через 1 час после моделирования перитонита). Крысы шести опытных групп (с четвертой по девятую) получали с целью фармакокоррекции вну-трижелудочно однократно через 1 час поле введения каловой взвеси образцы исследуемых производных пиридина в дозе 5 мг/кг. За животными всех групп осуществлялся визуальный мониторинг поведенческой активности, аппетита, жажды, состояния шерстяного покрова, реакции на звуковой раздражитель. На протяжении 14 суток оценивали динамику гибели крыс.
Для оценки условного риска смертности крыс при заданных значениях исходных признаков использовали модель Кокса. Она основана на предположении, что функцию риска можно факторизовать, т. е. представить в виде произведения двух функций:
h(t) = h0(t)y(Zr...,Zm), (1)
где ho(t) - базовая функция интенсивности, y(zi,...,zJ - функция изучаемых признаков [14].
В общем случае функция признаков, как и сами признаки, выбираются из соображений предметной области и целей исследования.
Факторизованная модель обладает тем замечательным свойством, что для оценки ее параметров требуется не так много наблюдений, как потребовалось бы для нефакторизованной модели. Существенным в этой модели считается то, что зависимость является мультипликативной. Это предположение иногда называется гипотезой пропорциональности. Для моделирования мы пользовались статистическим пакетом для общественных наук SPSS Statistics.
Результаты и их обсуждение
Животные контрольной группы после внутри-брюшинного введения 20%-ной каловой взвеси уже с первых часов наблюдения находились в возбужденном состоянии, проявляя друг по отношению к другу агрессию. Спустя 6 часов их состояние характеризовалось резко сниженной двигательной активностью, вялостью и заторможенностью. Гибель первой крысы в контрольной группе зарегистрирована на 9-м часу по-
сле моделирования калового перитонита. К 12-часовой отметке погибло 50% лабораторных крыс с моделируемой хирургической патологией. При вскрытии крыс контрольной группы из брюшинной полости вытекает мутная жидкость в количестве 1,4-2,1 мл (рис. 2). На органах брюшной полости, особенно на поверхности селезенки, обнаружены белые фибринозные нити.
Рис. 2. Фото погибшей крысы контрольной группы после вскрытия брюшной полости
В срок до 24 часов погибло еще одно животное. Оставшиеся в живых крысы не передвигались по клетке, лежали на боку, приняв атипичную щадящую для живота позу, с упором на передние лапы, поджав задние. Они не принимали корм и воду. Шерсть животных была взъерошенной, дыхание поверхностным. Передняя брюшная стенка была резко болезненной.
Время гибели последней крысы контрольной группы зафиксировано на 100-часовой отметке. Животное не принимало пищу и воду, не передвигалось по клетке, не реагировало на звуковые и тактильные раздражители.
В группе сравнения крысы, получавшие с фар-макотерапевтической целью антиоксидант тиотри-золин, показали указанный в таблице 2 процент летальности в значительно более ранние сроки после моделирования калового перитонита.
Рис. 3. Динамика показателя летальности крыс с каловым перитонитом и фармакокоррекцией частично гидрированными пиридинами, производными тиоацетамида
Таблица 2
Динамика гибели крыс с каловым перитонитом на фоне фармакокоррекции тиотриазолином
Время после введения каловой взвеси % гибели Клинические особенности
1 час 0% Животные находятся в возбужденном состоянии
6 часов 0% Отмечается вялость и заторможенность животных
12 часов 42,8% Животные не употребляют корм
24 часа 71,4% Крысы сбились в клубочки в углу клетки, не ложатся на живот, передняя брюшная стенка напряжена
36 часов 85,7% Животное не употребляет ни воду, ни корм, не реагирует на звуковые раздражители
48 часов 100% Наступила гибель последней крысы
Динамика показателя смертности крыс шести опытных групп, которым после внутрибрюшинного введения 20%-ной каловой взвеси осуществлялась фармакокоррекция частично гидрированными пири-динами, производными цианотиоацетамида, представлена на рис. 3. Так, уже к 12-му часу наблюдения нами зарегистрирован в два раза меньший процент гибели крыс в опытных группах в сравнении с контрольной и группой сравнения (на фоне тиотриазолина).
В период с 24 до 60 часов животные всех опытных групп были вялыми, заторможенными, лежали, сбившись в углу клетки. На 35-м часу после моделирования калового перитонита погибла четвертая крыса в опытной группе СУ146. В дальнейшем гибели в этой опытной группе крыс не наблюдалось.
Анализ показателей ранней летальности к 12-му часу после моделирования, приведенный в табл. 3, в опытной группе СУ043 свидетельствует о нулевой смертности.
Как видно из рис. 3, наиболее высокую протекторную активность в отношении абдоминального
Динамика ранней гибели крыс с каловым пе гидрированными пиридинами
сепсиса показали образцы СУ043, СУ080 и СУ146. В соответствующих опытных группах зарегистрирована летальность на уровне 57,1% в первые 60 часов после введения каловой взвеси в брюшинную полость. Однако эти частично гидрированные пириди-ны, однократно введенные через час после моделирования перитонита, предотвратили гибель оставшихся крыс до конца эксперимента (табл. 4).
Оценивая клинические особенности течения экспериментального калового перитонита у крыс опытных групп, следует акцентировать внимание на том, что однократное введение образцов изучаемых замещенных ди- и тетрагидропиридинов с лабораторными шифрами СУ042, СУ043, СУ046, СУ047, СУ080 и СV146 способствовало тому, что к 72-му часу у выживших лабораторных животных появились аппетит и желание потреблять воду, полноценная двигательная активность и реакция на звуковые раздражители. Видимых признаков общего интоксикационного синдрома с этого времени до окончания 14 суток наблюдения нами отмечено не было.
Таблица 3
;ритонитом и фармакокоррекцией частично , производными тиоацетамида
Группа 1 6 12 24 36 48 60 72 84 96
Контроль 0% 0% 50% 66,6% 83,3% 83,3% 83,3% 83,3% 83,3% 83,3%
Сравнение 0% 0% 42,8% 71,4% 85,7% 100% 100% 100% 100% 100%
СУ046 0% 0% 28,6% 28,6% 42,8% 57,1% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4%
СУ146 0% 14,1% 28,6% 42,8% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1%
СУ047 0% 0% 14,1% 42,8% 57,1% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4%
СУ043 0% 0% 0% 14,1% 42,8% 42,8% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1%
СУ042 0% 0% 14,1% 14,1% 28,6% 42,8% 57,1% 57,1% 57,1% 71,4%
СУ080 0% 0% 28,6% 42,8% 42,8% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1%
Таблица 4
Динамика отсроченной гибели крыс с каловым перитонитом и фармакокоррекцией частично гидрированными пиридинами, производными тиоацетамида
Группа 108 120 132 7-е сутки 10-е сутки 14-е сутки
Контроль 100% 100% 100% 100% 100% 100%
Сравнение 100% 100% 100% 100% 100% 100%
СУ046 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4%
СУ146 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1%
СУ047 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4%
СУ043 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1%
СУ042 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4% 71,4%
СУ080 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1% 57,1%
Нами осуществлялось моделирование исследования эффективности замещенных ди- и тетрагидро-пиридинов с шифром CV043 при изучении показателей смертности крыс с экспериментальным каловым перитонитом после введения синтезированных нами малотоксичных образцов новых частично гидрированных пиридинов, производных цианотиоацетамида.
Как и в любом регрессионном анализе, первая часть вывода содержит данные о базовой модели (Block 0), значение -2LL для модели без предикторов составляет 35,665. Затем представлена модель с одной независимой переменной CV043 (ID). В одной таблице представлены значения нескольких тестов для оценки качества построенной модели. Мы ви-
дим (рис. 4), что для модели с одной переменной значение -2LL уменьшилось (35,660), значение х2 составляет 0,005, на уровне значимости 0,944 (overall (score) test), что не позволяет нам принять нулевую гипотезу, значит, предиктор улучшает предсказательную способность модели. В данной таблице также представлены значения тестов likelihood ratio test, х2 при сравнении модели с таковыми из предыдущего шага (при этом представляет собой разность между -2LL шагов 0 и 1) и блока (разность между значениями -2LL блоков), но так как у нас модель одна и имеет единственный предиктор, то эти два показателя идентичны. Чаще всего показатели всех тестов имеют одну тенденцию и близки по значениям.
Рис. 4. Оценка коэффициентов модели с одним предиктором
Далее следует таблица с переменными, вошедшими в модель (рис. 5). В модели Кокса нет константы. Коэффициент регрессионного уравнения (В) для единственного фактора «возраст» составляет
0,017 (однако его сложно интерпретировать, так как значение регрессионного коэффициента не дает информации о силе влияния переменной на риск развития исхода).
Рис. 5. Переменные в уравнении регрессии
Далее в таблице представлены стандартная ошибка коэффициента В (S.E.); критерий Вальда (Wald, критерий значимости коэффициента В для соответствующей независимой переменной, зависит от значения критерия и числа степеней свободы (df)); статистическая значимость критерия Вальда (Sig., при значениях <0,05 независимая переменная вносит значимый вклад в предсказательную способность модели); Exp(B) - экспонента В, или eB, отражает отношение рисков. При увеличении на единицу риск более раннего наступления исхода увеличивает-
ся в 1,018 раза, или на 2,1%. Границы 95%-ного ДИ (95,0% CI for Exp(B)) отражают, в каких пределах с вероятностью 95% находится значение этого коэффициента для популяции, из которой была сформирована изучаемая выборка. Чем шире будут границы интервала, тем менее точно значение коэффициента b отражает его значение переменной для генеральной совокупности, и наоборот.
На рис. 6 отражена графически вероятность того, что у крыс в первые 50 часов не будет зарегистрирована смертность в течение периода наблюдения.
Рис. 6. График кумулятивной выживаемости в период наблюдения
Каждая точка на кривой показывает, какова вероятность того, что усредненное животное (то есть имеющее средние значения всех предикторов) нашей выборки будет живым, оставшись в выборке до момента времени, который мы выберем по оси абсцисс.
Выводы
Таким образом, проведенные скрининговые исследования детоксицирующей и антитоксической активности 6 образцов частично гидрированных пири-динов, производных цианотиоацетамида, на модели калового перитонита показали их способность после однократного внутрижелудочного введения в дозе 5 мг/кг предотвращать гибель от 28,6% до 42,9% животных.
При этом показатели ранней летальности от калового перитонита в первые 12 часов на фоне фар-макокоррекции соединением CV043 были на уровне нулевых значений.
Процент летальности крыс, получавших CV047, CV042 в качестве фармакокорректора острого экспериментального перитонита, был в три раза ниже, чем в контроле.
Уровень смертности крыс в опытной группе CV146 в остром периоде был ниже, чем в контроле, в два раза.
В связи с этим, учитывая низкую токсичность исследуемых образцов изучаемых замещенных ди-и тетрагидропиридинов, их следует считать перспективными в плане дальнейших доклинических и клинических исследований в качестве эффективных средств фармакотерапии перитонита и абдоминального сепсиса.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии явного или потенциального конфликта интересов, связанного с публикацией статьи.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Литература/References
1. Суковатых Б.С., Блинков Ю.Ю. Новые способы лечения распространенного перитонита // Вестник экспериментальной и клинической хирургии. 2014. Т. 12. № 2. С. 165-176. [Sukovatykh B.S., Blinkov Yu.Yu. New methods of treatment of common peritonitis. Vestnik eksperimental 'noi i klinicheskoi khirurgii. 2014;12(2):165-176. (In Russ.)]
2. Векслер Н.Ю. Оптимизация интенсивной терапии больных с гнойно-воспалительными заболеваниями брюшной полости методами детоксикации и дезинтоксикации // Медицинский альманах. 2013. № 3 (27). С. 100-101. [Veksler N.Yu. Optimization of intensive care in patients with purulent-inflammatory diseases of the abdominal cavity by detoxification and detoxification methods. Meditsinskii al'manakh. 2013;3(27):100-101. (In Russ.)]
3. Малков И.С., Салахов Э.К. Оценка эффективности лечения больных с распространенным перитонитом // Практическая медицина. 2010. № 1 (40). С. 82-84. [Malkov I.S., Salakhov Ye.K. Evaluation of the effectiveness of treatment of patients with advanced peritonitis. Prakticheskaya meditsina. 2010;1(40):82-84. (In Russ.)]
4. Сивак К.В., Васин А.В., Егоров В.В. и др. Аденозиновый рецептор A2A лекарственная мишень для терапии сепсиса // Молекулярная биология. 2016.
Т. 50. № 2. С. 231-245. [Sivak K.V., Vasin A.V., Egorov V.V. et al. Adenosine receptor A2A drug target for sepsis therapy. Molekulyarnaya biologiya. 2016;50(2):231-245. (In Russ.)]
5. Головкин А.С., Асадуллина И.А., Кудрявцев И.В. Пуринергическая регуляция основных физиологических и патологических процессов //Медицинская иммунология. 2018. Т.20. № 4. С. 463-476. [Golovkin A.S., Asadullina I.A., Kudryavtsev I.V. Purinergic regulation of basic physiological and pathological processes. Meditsinskaya immunologiya. 2018;20(4):463-476. (In Russ.)]
6. Martin C., Leone M., Viviand X. et al. High adenosine plasma concentration as a prognostic index for outcome in patients septic shock. Crit. Care Med. 2000;28(9):3198-3202.
7. Dyachenko V.D., Krivokolysko S.G., Lit-vinov V.P. A new method for the synthesis of N-methylmorpholinium 4-aryl-5-cyano-2-oxo-1,2,3,4-tetrahydropyridine-6-thiolates and their properties. Russian chemical bulletin. 1997;46(10):1758-1762.
8. Nesterov V.N., Krivokolysko S.G., Dotsen-ko V.V., Litvinov V.P. Synthesis, properties, and structures of ammonium 4-aryl-5-cyano-2-oxo-1,2,3,4-tetrahydropyridine-6-thiolates. Russian chemical bulletin. 1997;46(5):990-996.
9. Dyachenko V.D., Mitroshin A.E., Litvinov V.P. Synthesis and properties of 6-oxo-3,5-dicyano-1,4,5,6-tetrahydrospiro-(4'-R-cyclohexane-1',4-pyridine)-2-thiols and -selenols. Chemistry of Heterocyclic Compounds. 1996;32(9): 1058-1065.
10. Baumane L., Krauze A., Chernova L., Sile L., Duburs G., Stradins J. Synthesis and Electrochemical Oxidation of Nitriles of 4-Aryl-2-carbamoylmethylthio-5 -ethoxycarbonyl -1,4 -dihydropyridine-3 -carboxylic Acids. Chemistry of Heterocyclic Compounds. 2003;39(12):1591-1599.
11. Litvinov V.P., Krivokolysko S.G., Rusa-nov E.B. Cascade heterocyclization in the synthesis of new sulfur-containing 1,4-dihydropyridines and 1,4,5,6,7,8-hexahy-droquinolines. Doklady Chemistry. 2001;377(4):94-100.
12. Gfeller D., Michielin O., Zoite V. Shaping the interaction landscape of bioactive molecules. Bioinformatics. 2013;29(23):3073-3079.
13. Ермола Ю.А., Сатаева Т.П. Морфологические изменения легких при моделировании экспериментального перитонита // Современные научные исследования и инновации. 2017. № 2. [Ermola Yu.A., Sataeva T.P. Morfologicheskie izmeneniya legkikh pri modelirovanii eksperimental'nogo peritonita. Sovremennye nauchnye issledovaniya i innovatsii. 2017;2. (In Russ.)] Доступно по: http:// web.snauka.ru/issues/2017/02/77888. Ссылка активна на 12.06.2020.
14. Шарашова Е.Е., Холматова К.К., Горбатова М.А., Гржибовский А.М. Применение регрессии Кокса в здравоохранении с использованием пакета статистических программ spss // Наука и здравоохранение. 2017. № 6. [Sharashova E.E., Kholmatova K.K., Gorbatova M.A., Grzybovsky A.M. Application of Cox regression in healthcare using the SPSS statistical software package. Nauka i zdravookhranenie. 2017;6. (In Russ.)] Доступно по: https://cyberleninka.ru/ article/n/primenenie-regressii-koksa-v-zdravoohranenii-s-ispolzovaniem-paketa-statisticheskih-programm-spss. Ссылка активна на 6.10.2020.
