CC BY
40
Больным собакам был назначен курс лечения каниквантелом плюс и соблюдение диеты и через два месяца животные выздоровели (период наблюдения).
Литература: 1.Пасечник В.Е. Дис. канд. веет. наук. - Москва. - 2000. -185с. 2. Пасечник В.Е. //Сб. мат. научн. конф. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. - М. - 2006. - Вып. 7. - С. 294 - 296. 3. Samantaray J.C., Singh H., Das G.B., Verma I.C. //Journal of Para- sitology. - 1993. - 79 (3). -P. 457 - 458.
First fatal cases in dogs of valuable breeds as a result of Trichocephalus vulpis infection recorded in Russia. Pasechnic V.E. All-Russian K.I. Skryabin Institute of Helminthology.
Summary. One recorded the rate of T. vulpis infection on the level of 20% among 25 examined dogs. The large number of helminths were found in large and caecum intestine at total helminthological examination of 2 puppies, which were attributed to Trichocephalus (= Trichuris) vulpis Froelich, 1789. Infected dogs were treated by caniquantel at dose level of 1 tabllete/kg of body weight; according to the data on 4 observed dogs recovery was established.
ВЛИЯНИЕ БЕЛКОВОГО СЕКРЕТОРНО-ЭКСКРЕТОРНОСОМАТИЧЕСКОГО ПРОДУКТА ЛИЧИНОК ТРИХИНЕЛЛ НА СОМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ САМОК КРЫС И ИХ ЭМБРИОНЫ НА СТАДИЯХ РАННЕГО ОРГАНОГЕНЕЗА ПРИ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ
Пашинская Е.С., Побяржин В.В., Бекиш В.Я.
УО «Витебский государственный медицинский университет»
Введение. Инвазия Trichinella spiralis обуславливает взаимодействие организма хозяина с секреторно-экскреторно-соматическими веществами, выделяемыми личинками и взрослой формой паразита. Большой интерес представляет собой изучение влияния белкового секреторно-экскреторносоматического продукта T. spiralis на состояние иммунной системы хозяина. Ранее В.Я. Бекишем и соавт. было выяснено, что сенсибилизация белковым соматическим продуктом из тканей гельминтов сопровождается кластогенным и анеугенным воздействиями, индуцируя повреждения в соматических клетках костного мозга хозяина, а так же вызывает повреждение генома генеративных клеток в семенниках животных [1]. Наша цель состояла в том, чтобы изучить влияние белкового секреторно-экскреторно-соматического продукта личинок T. spiralis на соматические и эмбриональные клетки при беременности самок крыс линии Wistar на ранних стадиях органогенеза эмбрионов.
353
Материалы и методы. Исследования проводились на 20 самках и 4 самцах крыс линии Wistar массой 250 г в возрасте 4 месяца. Животные содержались в клетках в соотношении 5 самок к 1 самцу на протяжении 48 часов в условиях вивария. Наступление беременности у животных определялось по наличию сперматозоидов в мазке из влагалища и гиперемии наружных половых органов. Беременные самки были разделены на 2 группы по 10 животных в каждой. Получение белкового секреторно-экскреторносоматического продукта из личинок T. spiralis проводилось в соответствии методу О.-Я.Л. Бекиша [2]. Стерилизацию продукта осуществляли посредством пропускания через бактерицидные капроновые фильтры с размером поры 0,45 мкм, а определение белка выполняли биуретовым методом [5]. Крысам 1-ой (контрольной) группы вводили внутрибрюшинно 0,9 % стерильный раствор хлорида натрия с 5-го по 8-ой дни беременности. Крыс 2-ой группы сенсибилизировали внутрибрюшинно белковым секреторно-экскреторно-соматическим продуктом личинок T. spiralis в суточной дозе 50 мкг/г массы тела животного с 5-го по 8-ой дни беременности (ранняя стадия органогенеза). На 19-ый день беременности крыс умерщвляли под эфирным наркозом, после чего производили выделение матки с эмбрионами и бедренных костей. Получение клеточных суспензий из эмбрионов и костного мозга крыс проводили по разработанному нами методу [6]. Для изучения возможных генотоксических и цитотоксических нарушений в соматических клетках самок и их эмбрионов применяли щелочной гель-электрофорез изолированных клеток (метод “ДНК-комет”) по N.P. Singh et al., модифицированному B. Hellman et al. и нами [3, 8, 9]. В микропрепаратах подсчитывали по 50 клеток, где учитывали следующие показатели генотоксичности: «длина хвостов комет» в пикселях; процент ДНК в «хвосте кометы»; «момент хвоста» вычисленный программой из «длины хвоста» умноженного на процент ДНК в «хвосте кометы». Для оценки цитотоксического воздействия белкового секреторно-экскреторносоматического продукта личинок T. spiralis в каждом препарате из 100 случайно выбранных клеток костного мозга и эмбрионов определяли процент апоптотических. Эмбриотоксические изменения определяли с учетом рекомендаций Б.И. Любимова и соавт. [4] и Р.У. Хабриева и соавт. [7]. Основными показателями эмбриотоксичности считали предимплантационную гибель (разность между количеством желтых тел в яичниках и количеством мест имплантаций в матке) и постимплантационную смертность (разность между количеством мест имплантаций и количеством живых плодов). Полученные данные от сенсибилизированных самок и их эмбрионов сравнивались с показателями контрольной группы.
Результаты и обсуждение. В контрольной группе животных показатель предимплантационной гибели составил 3,2%, а постимплантационной - 3,3%.
У самок 2-ой группы, сенсибилизированных с 5-го по 8-ой дни беременности (стадия раннего органогенеза), отмечалось снижение количества живых эмбрионов в 1,4 раза; количество мертвых эмбрионов в среднем
354
составило 0,90+1,10; средняя масса эмбрионов уменьшилась в 1,5 раза; средний краниокаудальный размер в 1,3 раза по отношению к контрольным показателям. У сенсибилизированных животных постимплантационная гибель превысила контрольный показатель в 6,4 раза.
Результаты метода ДНК-комет контрольной группы показали, что в костном мозге самок «длина хвостов комет» (в пикселях) составила 3,32+0,16, процент ДНК в «хвостах комет» - 0,50+0,08, «момент хвоста» - 0,02+0,01, процент апоптотических клеток - 1,00+1,05.
При оценке результатов группы сенсибилизированных самок, полученных с применением метода ДНК-комет, установлено, что все показатели генотоксичности и цитотоксичности в клетках костного мозга достоверно превышали контрольные величины. Так «длина хвостов комет» (в пикселях) была в 2,3 раза выше контрольного показателя; процент ДНК в «хвостах комет» был выше в 6,5 раза; «момент хвоста» превышал контрольный уровень в 3,6 раза; число апоптотических клеток оказалось выше в 7,2 раза по отношению к данным контрольной группы.
Для контрольной группы животных в эмбриональных клетках «длина хвостов комет» (в пикселях) составила 3,34+0,15, процент ДНК в «хвостах комет» - 0,47+0,11, «момент хвоста» - 0,02+0,00, процент апоптотических клеток - 1,90+1,85.
В клетках эмбрионов сенсибилизированных животных «длина хвостов комет» и процент ДНК в «хвостах комет» превышали уровень контроля в 2 и 7,5 раза; «момент хвоста» комет увеличился в 11 раз; число апоптотических клеток в 8 раз соответственно контрольным данным.
Проведенные исследования показали, что внутрибрюшинная сенсибилизация самок крыс белковым секреторно-экскреторно-соматическим продуктом личинок T. spiralis (стадия раннего органогенеза) сопровождается эмбриотоксическим эффектом к 19-ому дню беременности, который характеризуется ростом постимплантационной гибели в 6,4 раза. Эмбриотоксический эффект так же характеризуется уменьшением средней массы эмбрионов в 1,5 раза; среднего краниокаудального размера в 1,3 раза.
Генотоксические и цитотоксические изменения в клетках костного мозга и клетках эмбрионов показывает повышение: «длины хвостов комет» в 2,3 и 2 раза; процента ДНК в «хвостах комет» в 6,5 и 7,5 раза; «момента хвоста» в 11 и 36 раз; числа апоптотических клеток в 7 и 8 раз в сравнении с данными контрольной группы.
Заключение. 1. Белковый секреторно-экскреторно-соматический продукт личинок T. spiralis обладает эмбриотоксическим эффектом при сенсибилизации беременных самок на стадии раннего органогенеза эмбрионов, который характеризуется повышением постимплантационной гибели в 6,4 раза. Эмбриотоксический эффект сопровождается уменьшением средней массы эмбрионов в 1,5 раза и понижением среднего краниокаудального размера в 1,3 раза по отношению к контрольным показателям. 2. Генотоксический и цитотоксический эффекты в соматических
355
клетках костного мозга хозяина и их эмбрионов при сенсибилизации белковым секреторно-экскреторно-соматическим продуктом на стадии раннего органогенеза выражаются в увеличении показателей процента поврежденной ДНК в 6,5-7,5 раза, числа апоптотических клеток в 7-8 раз.
Литература. 1.Бекиш В.Я., Бекиш О.-Я.Л. // Витебск.- Изд. ВГМУ. -2004. - С. 40-43. 2. Бекиш О.-Я.Л. // Здравоохранение Белоруссии.- 1972.-№ 3.- С. 81-82. 3. Бекиш В.Я., Дурнев А.Д. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2004. - Т. 138, № 9. - С. 320-323. 4. Любимов Б.И. и др. // Ведомости Фармакологического комитета. - М.: - 1998. - №1. - 20с. 5. Морозова Н.А. и соавт. // Лабораторное дело. - 1991. - №2. - С.23-25. 6. Пашинская Е.С. и соавт. // Матер. 62-й научной сессии УО «ВГМУ». - 2007, Витебск. - С. 163-165. 7. Хабриев Р.У. и др. // 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ОАО Изд. «Медицина», 2005. - 832с. 8. Hellman B. et al. // Int. Arch. Occup. Environ. Health. - 1997. - Vol. 69. - P. 185-192. 9. Singh N.A. et al. // Exp. Cell Res. - 1988. - Vol. 5. - P. 415-418.
Effects of protein secretory-excretory-somatic product of Trichinella larvae on somatic cells of rats females and their embryos at stages of early organogenesis at sensibilization. Pashinskaya E.S., Pobyarzhin V.V., Bekish V.Ya. Vitebsk State Medical University.
Summary. Protein secretory-excretory-somatic product of Trichinella larvae displayed embryotoxic effect at sensibilization of rat females at stages of early organogenesis. That effect was characterized by increase of postimplantation lethality by 6,4 times. Further embryotoxic effect was characterized by decrease of females embryo mean body weight by 1,5 times and reduction of embryo size by 1,3 times. Genotoxic and cytotoxic effects found in somatic cells in bone marrow of a host and it’s embryos were manifested in increase of damaged DNA by 6,5-7,5 times and number of apoptotic cells by 7-8 times.
ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ЗАРАЖЕННОСТИ КАРПОВЫХ РЫБ МЕТАЦЕРКАРИЯМИ OPISTHORCHIS FELINEUS (RIVOLTA, 1884).
Пельгунов А.Н.
Центр паразитологии Института проблем экологии и эволюции
им. А.Н.Северцова РАН
Введение. Материал для данной работы был собран в течение 2002-2009 гг. в Тобольском и Уватском районах Тюменской области. Бассейн нижнего течения Иртыша считается центром гиперэндемичного очага описторхоза, одного из самых социальнозначимых паразитарных заболеваний человека. Возбудитель описторхоза Opisthorchis felineus (Rivolta, 1884) паразитирует
356
