CC BY
83
РАЗНОЕ
УДК 577.333:615.838:616-002.7
В.А. Шкурупий, В.Ю. Куликов, Е.Б. Меньщикова, Н.К. Зенков,
И.В. Жиляков
ВЛИЯНИЕ БАЛЬНЕОЛОГИЧЕСКОГО ФАКТОРА КУРОРТА БЕЛОКУРИХА НА АНТИОКСИДАНТНУЮ АКТИВНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ И НА ЕE ИЗМЕНЕНИЕ В ДИНАМИКЕ ХРОНИЧЕСКОГО НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ГРАНУЛEМАТОЗНОГО ВОСПАЛЕНИЯ
ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск; Санаторий «Катунь» ЗАО «Белокуриха»
В настоящем исследовании показано, что бальнеологические процедуры способствуют увеличению антирадикальной активности сыворотки крови, которая определяется содержащимися в крови водорастворимыми антиоксидантами, при этом трехкратное принятие ванн с азотно-кремнистыми радонсодержащими водами курорта Белокуриха давало существенно более выраженный вышеупомянутый эффект, чем от принятия ванн с водопроводной водой. Процесс генерализованного SiO2-индуцированного гранулематозного воспаления сопровождается возрастанием антиоксидантной активности сыворотки лишь на поздних сроках наблюдения (30-е сутки после индукции), однако в этот период при проведении бальнеологических процедур дополнительного повышения величины данного показателя не происходит.
Ключевые слова: антиоксидантная активность, радон, воспаление
Введение
В мировом медицинском и научном сообществе в настоящее время по-прежнему существуют сомнения в оправданности и эффективности радоновых процедур, что объясняется, с одной стороны, поверхностным представлением о канцерогенном действии ионизирующей радиации и слабо мотивированной радиофобией, а с другой стороны — стремлением свести обнаруживаемое влияние радонсодержащих ванн и ингаляций на происходящие в живых организмах процессы к эффекту плацебо. Для преодоления сложившихся стереотипов и объективной оценки имеющих место эффектов радонотерапии необходимо проведение широкомасштабных разносторонних исследований, в том числе с использованием лабораторных животных.
Поскольку к числу базовых и наиболее хорошо изученных свойств испускаемого радоном а-излучения относится индукция радикалообра-зования в результате радиолиза воды, оправдан интерес исследователей к возможности влияния бальнеологических процедур с применением радонсодержащих природных вод на редоксбаланс живых систем, а также на возможность воздействия с их помощью на развивающиеся при многих
адаптивных и патологических процессах возмущения этого баланса, приводящие, как правило, к развитию окислительного стресса [4]. В многочисленных работах обнаружен позитивный терапевтический эффект радонотерапии при классических свободнорадикальных патологических процессах и состояниях, таких, как воспаление [1], ишемия/реперфузия [3], диабет [2], однако вопрос, насколько непосредственно этот эффект связан с воздействием радона на процессы свободнорадикального окисления в организме и на их динамическое равновесие с системой антиок-сидантной защиты, нуждается в более детальной проработке. Как на животных, так и на людях показано, что под влиянием радоновых процедур происходит активация внутриклеточных антиок-сидантных ферментов в различных органах и тканях [15, 16, 20, 21, 22], при этом, по данным разных авторов, отмечается как снижение [16, 21], так и повышение [7] интенсивности процессов с участием активированных кислородных метаболитов. За длительный период клинических наблюдений было зарегистрировано позитивное влияние радонсодержащих кремнийорганических ванн при ряде нозологий, в основе которых лежит хроническое воспаление. В этой связи в настоящем
исследовании изучено изменение внеклеточной антирадикальной активности, которая определяется содержащимися в жидкой части крови водорастворимыми антиоксидантами, под действием бальнеологических процедур с использованием азотно-кремнистых радонсодержащих термальных вод курорта Белокуриха, а также изменение данного показателя в ходе развития хронического неспецифического гранулематозного воспаления и влияние на него экспозиции животных в радонсодержащих водах.
Материал и методы
Реактивы. В работе использовались 2,2’-азо-бис-(2-амидинопропан) дигидрохлорид (AAPH) («Aldrich», Германия), люминол («Serva», Германия), тролокс (6-гидрокси-2,5,7,8-тетраме-тилхроман-2-карбоксильная кислота) («Aldrich», Германия), среда Хенкса без фенолового красного (НПО «Вектор», Кольцово).
Экспериментальные животные
Исследования проведены на 48 крысах-сам-цах породы Вистар с массой тела 300-350 г. Содержание животных и все эксперименты осуществляли в соответствии с требованиями «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1977 г. № 755). Предварительно, в течение двух недель, животные были адаптированы к условиям содержания, имели свободный доступ к стандартным кормам и водопроводной воде. Животные были разделены на 11 групп по 4-5 крыс в каждой. В
1 группу входили интактные животные (группа «Интактные»). Крысам 2-5 групп назначали курс из 3 или 20 ежедневных ванн, по окончании которых осуществляли их декапитацию и забор крови для получения сыворотки; каждая бальнеологическая процедура представляла собой погружение животных на 30 мин в водопроводную воду или азотно-кремнистые радонсодержащие термальные воды курорта Белокуриха (температура воды 22-24 °С; концентрация радона 8 нКи/л), группы соответственно обозначали: «Вода 3», «Радон 3», «Вода 20» и «Радон 20». У крыс 6-11 групп было индуцировано неспецифическое воспаление путем однократного введения в хвостовую вену 0,8 мл суспензии микрокристаллов диоксида кремния S-563 (1-5 мкм) в изотоническом 0,9-процентном водном растворе NaCl из расчета 35 мг/кг; часть животных через 10 суток начинала принимать курс ванн в описанных выше условиях в течение 3 суток (группы «Воспаление 13 + Вода 3», «Воспаление 13 + Радон 3») или 20 суток (группы «Воспаление 30 + Вода 20», «Воспаление 30 + Радон 20»); животных соответствующих групп сравнения умерщвляли через 13 и 30 су-
ток после инъекции суспензии SiO2 (группы «Воспаление 13» и «Воспаление 30»).
Определение антиоксидантной активности
сыворотки крови
Принцип метода. Антирадикальную активность сыворотки крови оценивали по методу [12] в собственной модификации. В основе данного метода лежит способность азосоединений (так называемых азоинициаторов) подвергаться спонтанному термолизу с образованием алкильных радикалов. При разложении использованного в работе водорастворимого азоинициатора ААРН возникают газообразный азот и 2 алкильных радикала (Рис. 1), которые быстро реагируют с кислородом с образованием пероксильных и алкок-сильных радикалов RO2• и RO••, в водном растворе при 37 °С и рН 7,0 время полуразложения ААРН составляет 175 часов, а скорость генерации радикалов — 1,36*10-6 моль/л/с [13]. При взаимодействии радикалов с хемилюминесцентным (ХЛ) субстратом люминолом (5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндионом) образуются радикалы лю-минола, испускающие кванты света, количество которых регистрируется с помощью хемилюми-нометра (использовался биохемилюминесцен-тный анализатор БХЛМ 3606, СКТБ «Наука», Россия). При добавлении в систему тестируемого образца (в настоящей работе — сыворотки крови) содержащиеся в нем антиоксиданты взаимодействуют с радикалами и подавляют ХЛ люминола в течение периода времени («лаг-фаза»), прямо пропорционального суммарному антиоксидантному (антирадикальному) потенциалу образца. Антиоксидантный потенциал образца сравнивается с антирадикальной активностью стандартного антиоксиданта (в настоящей работе — тролок-са, водорастворимого аналога а-токоферола).
Процедура. В измерительную кювету добавляли 1 мл бесцветной среды Хенкса, 100 мкл 1
СН, CHjNHj «I © 1 I I 9
Cl© HjN=C—C-N=N-C—C=NH
I I NH3CH3
I
CHj
Cl®
2,2'-азобис<2-амидинопропан) дигидрохлорид U°C
CH3
HjN-C—C* + N-I I
nh2ch3
CH3
h2n=c—c—0—0*
3 I I
nh2ch3
CH3 NH2
•c—C=NH2 I
CH,
CH>HH2 I J 4 •o-c—C=HH2 I
CHj
Пероксильный радикал Алкокшлькый радикал
Рис. 1. Термическое разложение 2,2’-азобис-(2-амидинопропан) дигидрохлорида с образованием радикалов RO2•и RO'
мМ раствора люминола в изотоническом растворе №С1 (приготовленного из маточного 100 мМ раствора люминола в диметилсульфоксиде) и 100 мкл тестируемого образца либо бесцветной среды Хенкса (контроль). В качестве тестируемого образца использовали сыворотку крови, разведенную 1:4 средой Хенкса, либо раствор тролокса в среде Хенкса (конечная концентрация 1 мкМ,
2 мкМ, 5 мкМ). Кювету помещали в хемилюми-нометр, термостатировали при 37 °С в течение 10 мин, после чего индуцировали радикалообра-зование путем добавления 100 мкл 100 мМ раствора ААРН.
Статистический анализ. Данные представлены в виде М±т, где М — среднее арифметическое, т
— стандартная ошибка среднего. Для сравнения средних величин использовали дисперсионный анализ с последующим применением критерия множественных сравнений Дункана, различия между средними величинами в группах считали значимыми при Р<0,05.
Результаты
Введение азоинициатора ААРН в среду инкубации, содержащую люминол, сопровождается вспышкой ХЛ, интенсивность которой через 45 мин выходит на плато и остается неизменной в течение длительного времени (более 40 мин). Кинетика ХЛ данной модельной системы представлена на рис. 2 (кривая 1). В отсутствие любого из компонентов системы свечение не регистрировали.
При наличии в среде инкубации антиоксидантов интенсивность ХЛ после добавления раствора ААРН некоторое время остается неизменной либо незначительно увеличивается. Завершение лаг-фазы, свидетельствующее об истощении в тестируемом образце (раствор тролокса, кривая 2 или сыворотка крови, кривая 3) соединений с антира-дикальной активностью, сопровождается резким
повышением свечения, уровень которого вскоре достигает величин, характерных для «плато» «холостой» пробы, вместо тестируемого образца содержащей раствор Хенкса. Продолжительность лаг-фазы определяли как время от момента введения в среду инкубации раствора ААРН до момента вспышки ХЛ, определяемого с помощью касательных. Эффект выражали в мкМ-эквивалентах тролокса, исходя из полученного уравнения линейной регрессии у = 66,192л: + 95,154 (г=0,9934), где л — концентрация тролокса (мкМ), у — продолжительность лаг-фазы (секунды) (Рис. 3).
Результаты изучения влияния бальнеопроцедур на антиоксидантную активность сыворотки крови представлены на рис. 4. Обнаружено: уже через 3 суток принятия животными ванн из водопроводной воды (Рис. 4а) величина данного показателя существенно увеличивается и в 2,1 раза превышает полученную на интактных крысах (соответственно 5,34±0,84 и 2,54±0,44 мкМ тролокса, Р=0,0365). Купание крыс в радонсодержащей воде курорта Белокуриха сопровождалось более выраженным повышением общей антиок-сидантной активности сыворотки, величина которой составила 8,30±0,47 мкМ тролокса, что соответственно в 3,3 и в 1,6 раза больше величин для интактных животных (Р=0,0001) и принимавших ванны из водопроводной воды (Р=0,0354). При более длительном курсе бальнеологических процедур, состоявшем из 20 ежедневных ванн, антиоксидантная активность сыворотки крови повышалась в еще большей степени (Рис. 4б, в). Так, ее величина для животных, принимавших ванны из водопроводной воды, составляла 8,51±0,51 мкМ тролокса (в 1,6 раза больше величины, полученной для группы «Вода 3», Р=0,0256), а из воды источников курорта Белокуриха — 10,8±2,23 мкМ тролокса (в 1,3 раза больше величины, полученной для группы «Радон 3», Р=0,0705).
Рис. 2. Типичные кинетические кривые изменения хемилюминесценции в модельных системах «люминол — AAPH» (кривая 1), «AAPH — люминол — тролокс 2 мкМ» (кривая 2); «AAPH — люминол — сыворотка крови, разведeнная 1:4» (кривая 3)
Концентрация (мкМ)
Рис. 3. Концентрационная зависимость «доза — эффект» для тролокса
На 13-е сутки после индукции хронического мононуклеарного воспаления (Рис. 4а) значимых изменений исследуемого показателя, по сравнению с группой интактных животных, не выявлено (4,32±0,88 мкМ тролокса, Р=0,1554), при этом трехдневное купание животных на фоне воспаления как в пресной, так и в радонсодержащей воде приводило к увеличению антиоксидантной активности сыворотки их крови соответственно в 1,8 (7,87±0,72 мкМ тролокса, Р=0,0120) и в 2,3 раза (9,88±0,77 мкМ тролокса, Р=0,0002). На 30-е сутки после инъекции животным суспензии диоксида кремния происходило существенное возрастание величины данного параметра, она составила 6,95±0,46 мкМ тролокса и значимо отличалась от выявленной как у интактных крыс (в 2,7 раза, Р=0,0017), так и в группе «Воспаление 13» (в 1,6 раза, Р=0,0487). Более продолжительный курс ванн, состоявший из 20 процедур (Рис. 4б, в), у животных на фоне воспаления не сопровождался
СЛЕЗ — купание в водопроводной воде ■ >
Ш — купание в радон-еодержагцеЙ воде 1 і — воспаление + купание вводопроводной воде
воспаление+ купание врадон-содержащей воде отянчие от группы :інтА>:ньс: животных достоверно прнР < 0,05 I различия между группами достоверны праР < 0,05
Рис. 4. Влияние бальнеологических процедур на изменение антирадикальной активности сыворотки крови крыс в динамике SiO2-индуцированного воспаления: а — купание 3-и сутки, воспаление 13-е сутки; б — купание 20-е сутки, воспаление 30-е сутки, в — сравнение между группами, по оси х: 3, 20 — количество ванн, 13, 30 — сутки после введения суспензии SiO2
дальнейшим изменением антиоксидантной активности сыворотки крови, ее величины составляли 7,6±0,23 мкМ тролокса в группе «Воспаление 30 + Вода 20» и 8,8±0,58 мкМ тролокса — в группе «Воспаление 30 + Радон 20» и достоверно не отличались ни от величин, полученных в группе «Воспаление 13» (соответственно Р=0,5989 и Р=0,1916), ни от величин, выявленных в группах животных без воспаления, принимавших 20-дневный курс бальнеологических процедур (соответственно Р=0,5060 и Р=0,1264).
Обсуждение
В настоящее время во многих экспериментальных и клинических исследованиях показано, что действие на организм широкого спектра возмущающих факторов сопровождается активацией свободнорадикальных окислительных процессов и, соответственно, смещением редоксбаланса его внутренних систем разной степени выраженности
— возникновением состояния, называемого окислительным стрессом [4]. При этом в зависимости от специфичности и степени выраженности такого возмущающего воздействия живые системы отвечают на него по-разному — от физиологической трансдукции сигнала с участием редоксза-висимых факторов транскрипции до активации систем, отвечающих за повышение степени вос-становленности внутренней среды (антиоксидантную защиту).
К числу процессов, сопровождающихся развитием окислительного стресса, относятся стресс-реакция по Селье [10], воспаление [8], ишемия/ реперфузия [4] и другие патологические состояния. Как показано в настоящем исследовании, стрессирующая процедура помещения крыс в необычные для них условия (ванночки с водой) приводит к изменению редоксбаланса на уровне целого организма, что, в частности, проявляется повышением суммарной антирадикальной активности сыворотки крови, определяемой по способности сыворотки взаимодействовать с радикалами в модельной системе «водорастворимый азоинициатор — люминол». Наибольший вклад в оцениваемую с помощью данного метода антиоксидантную активность вносят мочевая кислота (по данным разных авторов, от 43% [12] до 53% [18]) и так называемые неидентифицированные антиоксиданты (НА), 25-35% [12, 18]; на долю остальных известных восстановителей, содержащихся в жидкой части крови (аскорбат, а-токо-ферол, коэнзим Ц, билирубин, SH-группы глута-тиона, альбумина и других белков), приходится не более 4%. Более того, показано, что именно изменением концентрации мочевой кислоты и НА обусловливается происходящее в некоторых случаях повышение антиоксидантной активнос-
ти биологических жидкостей человека: например, при системном воспалительном ответе [18], пре-эклампсии [23], старении [11].
Закономерным следствием активации свободнорадикальных окислительных процессов в мембранах и липопротеиновых частицах является расходование жирорастворимых антиоксидантов, в результате окисления и катаболизма которых появляются низкомолекулярные соединения: у токоферолов и убихинонов обрывается «хвост», у флавоноидов раскрывается и разрывается кольцо С [4]. Это позволяет предположить, что в условиях окислительного стресса «запасенные» в липидных структурах фенольные антиоксиданты могут служить источником новых, уже водорастворимых фенольных соединений, которые пополняют фракцию НА, за счет чего и происходит обнаруженное нами повышение. Не исключена и возможность опосредованного защитного действия водорастворимых продуктов окисления липо-фильных фенольных антиоксидантов, связанного с их способностью активировать редокс-зависи-мые регуляторные пути и, соответственно, индуцировать транскрипцию генов, контролируемых антиоксидант-респонсивным элементом (в том числе генов, кодирующих глутатион S-трансфера-зы, глутатионпероксидазу 2, глутатионредуктазу, у-глутамилцистеинсинтетазу, супероксиддимута-зы и многие другие антиоксидантные ферменты) [24]. Кроме того, представляется вероятным, что выявленное нами повышение антиоксидантной активности сыворотки крови, выраженность которого нарастала по мере увеличения количества стрессирующих процедур купания, можно отчасти объяснить гормонзависимой активацией ксан-тиноксидоредуктазы, единственного источника мочевой кислоты в организмах млекопитающих. Так, на клетках НС11 показано, что под действием комбинации кортизола и пролактина активность фермента увеличивается в 4-5 раз [17].
Классическим индуктором радикалообразова-ния в живых организмах является ионизирующая радиация [4]. Содержащийся в азотно-кремнистых термальных водах курорта Белокуриха радон ^п) представляет собой природный радиоактивный газ, испускающий а-частицы, под действием которых в роговом слое кожи при радоновых ваннах во время и сразу после окончания процедуры происходит кратковременное повышение концентрации радиогенных радикалов. Несмотря на то, в организм проникает менее одного процента Rn, содержащегося в воде ванны, по выходе из ванны 60% радона из кожного депо диффундирует в дерму, поступает в кровь и далее в различные органы [5]. Таким образом, непосредственному прооксидантному воздействию радона подверга-
ются не только кожные структуры, но и ткани и органы всего организма.
В проведенном нами исследовании обнаружено, что в результате приема ванн из радонсодержащей воды у животных происходит повышение общей антиоксидантной активности сыворотки крови, при этом после трех процедур величина данного параметра достоверно выше по сравнению с величиной этого показателя, полученного у крыс, купавшихся в обычной воде. Усиление антиоксидантной защиты организма на разных уровнях под влиянием радоновых процедур выявлено во многих исследованиях, проведенных главным образом учеными из Японии — страны, наиболее богатой радоновыми источниками. Так, повышение супероксиддисмутазной активности выявлено в печени и почках крыс через 4 часа воздействия 22^п в концентрации 3 кБк/м3 [20], в головном мозге кроликов (ингаляция Rn в концентрации 14-18 кБк/л в течение 90 мин [15]), в сыворотке крови как здоровых людей [14], так и больных остеоартритом [21] и бронхиальной астмой [16] после пребывания в сауне с концентрацией Rn 2,08 кБк/м3 (у этих людей также увеличивалась активность каталазы), а также жителей района горячих источников Мисасы [22].
Непосредственный прооксидантный эффект радона как индуктора радикалообразования в силу ничтожно малой его концентрации в кровотоке, безусловно, не может быть единственной причиной выявленного в настоящей работе изменения редокс-баланса. Наиболее вероятным представляется, что в данном случае применима теория радиационного гормезиса [9], согласно которой кривая «доза-эффект» представляет собой не прямую линию, а и- или _|-образна, и низкие дозы радиации стимулируют многие функции клеток, включая антиоксидантную защиту, ферментативную репарацию, иммунное или апоптотическое удаление повреждений ДНК. Парадоксальное, на первый взгляд, антимутаген-ное действие низких доз радиации подтверждается яркими примерами. Так, проведенное в 1987 г. обследование 7852 человек, эвакуированных из зоны Восточно-Уральского радиоактивного следа после радиационной аварии в 1957 году, показало, что смертность от злокачественных новообразований у жителей облученных территорий (поглощенная доза излучения от 4,0 до 49,6 кГр) была на 27-39% ниже, чем у жителей необлученных участков того же региона [6]. В японском городке Мисаса, знаменитом своими радонсодержащими ключами, уровень стандартизационной смертности от рака у жителей районов с повышенным содержанием Rn в воздухе (54 Бк/м3) составлял
0,538, в то время как у обитавших в районах с ана-
логичной средней по стране концентрацией радона 16 Бк/м3 — 0,850 (при в среднем по Японии принятом за 1,000) [22].
Активация свободнорадикальных окислительных процессов на разных стадиях воспалительного процесса показана во многих исследованиях [4]. Индукция в данной работе вялотекущего хронического мононуклеарного воспаления путем внутривенной инъекции диоксида кремния сопровождалась умеренным увеличением общей антиоксидантной активности, которое на 30-е сутки становилось достоверным. При этом, если проведение к 13-м суткам воспалительного процесса трехкратных бальнеологических процедур повышало данный показатель, то после 20 ванн (как из обычной, так и радонсодержащей воды) на 30-е сутки воспаления его величина не изменялась. Обнаруженный факт можно объяснить, с одной стороны, эффектом насыщения, характерным для многих биологических процессов и служащим для контроля и управления цепными саморазвивающимися процессами. Так, известно, что в определенных условиях, в том числе при чрезмерном увеличении концентрации, любой антиоксидант может проявлять прооксидан-тные свойства; это особенно справедливо для водорастворимых антиоксидантов [4]. С другой стороны, поскольку рост антиоксидантной активности сыворотки крови при воспалении, очевидно, отчасти обусловлен повышением уровня мочевой кислоты (воспалительный процесс, как правило, сопровождается выраженной активацией ксантиноксидоредуктазы [17]), в силу некоторых нежелательных эффектов урата включаются механизмы, подавляющие его неконтролируемое накопление. Так, показано, что гиперурикемия способствует разобщению нейрональной и эндотелиальной изоформ NO-синтазы эндотелио-цитов, в результате чего фермент не только теряет способность синтезировать оксид азота, но и начинает генерировать супероксид-анион, тем самым усиливая внутрисосудистый окислительный стресс и дисфункцию эндотелия [19]. В повышенных концентрациях мочевая кислота обладает провоспалительным действием, стимулируя синтез мононуклеарными фагоцитами фактора некроза опухолей-а, интерлейкинов 1р и 6, хемо-аттрактантного белка моноцитов 1, а также усиливает тромбообразование, активируя тромбоциты [17, 19].
Заключение
Таким образом, в настоящем исследовании обнаружено, что бальнеологические процедуры способствуют увеличению антирадикальной активности сыворотки крови, которая определяется содержащимися в крови водорастворимыми
антиоксидантами, при этом эффект от трехкратного принятия ванн с азотно-кремнистыми радонсодержащими термальными водами курорта Белокуриха был выше, чем от ванн с водопроводной водой. Процесс воспаления также сопровождается возрастанием вышеупомянутого показателя, однако без дополнительного повышения при принятии ванн. Данный эффект, так же, как отсутствие прироста антиоксидантной активности сыворотки крови у животных без воспаления при длительном приеме радонсодержащих ванн по сравнению с обычными, очевидно, обусловлен эффектом насыщения, служащим для контроля и управления цепными саморазвивающимися процессами.
IFLUENCE OF THE BELOKURIKHA BALNEAL FACTOR ON SERUM ANTIOXIDATIVE ACTIVITY AND ITS ALTERATION IN THE COURSE OF CHRONIC NONSPECIFIC GRANULOMATOUS INFLAMMATION
V.A. Shkurupii, V.Yu. Kulikov, E.B. Menshikova, N.K. Zenkov, I.V. Zhilyakov
Balneal treatment was shown to make for increase serum antiradical activity, which is determined by blood water-soluble antioxidants;3 bathing with the Belokurikha nitro-siliceous radon spring water were more effective than with ordinary water. Serum antioxidant activity rise in the late phase of SiO2-induced granulomatous inflammation (30 day after silica injection), but there was no additional augmentation of the index due to balneological procedures at this time.
Литература
1. Барнацкий, В.В. Современная оценка эффективности радоновых ванн различных концентраций на этапе медицинской реабилитации больных серонегативными спондилоартритами / В.В. Барнацкий, В.Д. Григорьева, Е.Н. Калюшина // Вопр. курортол., физио-тер. и леч. физ. культ. — 2005. — № 4. — С. 13-17.
2. Влияние радоновых ванн курорта Белокуриха на чувствительность белых крыс к диабетогенному действию аллоксана / В.Г. Селятицкая, Н.А. Пальчикова, Б.А. Эфендиев и др. // Бюл. СО АМН СССР. — 1986.
— № 1. — С. 12-20.
3. Влияние радоновых ванн на физическую работоспособность и экстрасистолию больных ишемической болезнью сердца со стабильной стенокардией / С.В. Клеменков, О.Б. Давыдова, Е.Ф. Левицкий и др. // Вопр. курортол., физиотер. и леч. физ. культ. — 1999.
— № 6. — С. 6-9.
4. Зенков, Н.К. Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова. — М., 2001. — 340 с.
5. К 100-летию радонотерапии / А.Н. Разумов, И.И. Гусаров, Б.Н. Семенов и др. // Вопр. курортол., физио-тер. и леч. физ. культ. — 2005. — № 6. — С. 3-7.
6. Крестинина, Л.Ю. Анализ отделенных канцерогенных последствий облучения населения на территории ВУРСа / Л.Ю. Крестинина, М.М. Косенко, В.А. Костюченко // Проблемы медицинской реабилитации населения, подвергшегося радиационному воздействию. — Екатеринбург, 1994. — С.19-25.
7. Маршалик, Б.Е. Применение воздушных радоновых ванн для реабилитации иммунной системы у больных бронхиальной астмой / Б.Е. Маршалик, А.Н. Фенько // Вопр. курортол., физиотер. и леч. физ. культ.
— 1991. — № 6. — С. 6-10.
8. Меньщикова, Е.Б. Окислительный стресс при воспалении / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Успехи соврем. биол. — 1997. — Т. 117, вып.2. — С. 155-171.
9. Радиационный гормезис, радонотерапия и радо-нопрофилактика / А.Н. Разумов, И.И. Гусаров, Б.Н. Семенов и др. // Вопр. курортол., физиотер. и леч. физ. культ. — 2001. — № 5. — С. 47-50.
10. Реброва, Т.Ю. Регуляция опиоидными пептидами активности антиоксидантных ферментов и системы простаноидов в миокарде при стрессе / Т.Ю. Реброва, Л.Н. Маслов, Ю.Б. Лишманов // Биомед. хим. — 2005.
— № 2. — С. 177-184.
11. Age-related changes in the peroxyl radical scavenging capacity of human plasma / R.T. Aejmelaeus, P. Holm, U. Kaukinen et al. // Free Radic. Biol. Med. — 1997. — Vol. 23. — P. 69-75.
12. Alho, H. Total antioxidant activity measured by chemiluminescence methods / H. Alho, J. Leinonen // Meth. Enzymol. — 1999. — Vol. 299. — P. 3-14.
13. Bartosz, G. Total antioxidant capacity / G. Bartosz // Adv. Clin. Chem. — 2003. — Vol. 37. — P. 219-292.
14. Biochemical comparison between radon effects and thermal effects on humans in radon hot spring therapy / K. Yamaoka, F. Mitsunobu, K. Hanamoto et al. // J. Radiat. Res. — 2004. — Vol. 45. — P. 83-88.
15. Effects of radon inhalation on biological function
— lipid peroxide level, superoxide dismutase activity, and membrane fluidity / K. Yamaoka, Y. Komoto, I. Suzuka et al. // Arch. Biochem. Biophys. — 1993. — Vol. 302. — P. 37-41.
16. Elevation of antioxidant enzymes in the clinical effects of radon and thermal therapy for bronchial asthma / F. Mitsunobu, K. Yamaoka, K. Hanamoto et al. // J. Radiat. Res. — 2003. — Vol. 44. — P. 95-99.
17. Harrison, R. Physiological roles of xanthine oxi-doreductase / R. Harrison // Drug Metab. Rev. — 2004.
— Vol. 36. — P. 363-375.
18. Is the endogenous peroxyl-radical scavenging capacity of plasma protective in systemic inflammatory disorders in humans? / K. Tsai, T.-G. Hsu, C.-W. Kong et al. // Free Radic. Biol. Med. — 2000. — Vol. 28. — P. 926-933.
19. Is there a pathogenetic role for uric acid in hypertension and cardiovascular and renal disease? / R.J. Johnson, D.H. Kang, D. Feig et al. // Hypertension. — 2003.
— Vol. 41. — P. 1183-1190.
20. Ma, J. Effect of radon exposure on superoxide dismutase (SOD) activity in rats / J. Ma, H. Yonehara, M. Ikebuchi, T. Aoyama // J. Radiat. Res. — 1996. — Vol. 37.
— P. 12-19.
21. Study on biologic effects of radon and thermal therapy on osteoarthritis / K. Yamaoka, F. Mitsunobu, K. Hanamoto et al. // J. Pain. — 2004. — Vol. 5. — P. 20-25.
22. The elevation of p53 protein level and SOD activity in the resident blood of the Misasa radon hot spring district / K. Yamaoka, F. Mitsunobu, S. Kojima et al. // J. Radiat. Res. — 2005. — Vol. 46. — P. 21-24.
23. The total peroxyl radical-trapping ability of plasma and cerebrospinal fluid in normal and preeclamptic parturients / J.T. Uotila, A.-L. Kirkkola, M. Rorarius et al. // Free Radic. Biol. Med. — 1994. — Vol. 16. — P. 581-590.
24. Wasserman, W.W. Functional antioxidant responsive elements / W.W. Wasserman, W.E. Fahl // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1997. — Vol. 94. — P. 5361-5366.
