CC BY
30
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ
experimental gastroenterology
ВЛИЯНИЕ АУТОТРАНСПЛАНТАЦИИ СЕГМЕНТА ПЖ НА ЕГО ЭКЗОКРИННУЮ ФУНКЦИЮ
Восканян С. Э., Дегтярев В. С., Корсаков И. Н., Найденов Е. В.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр Российской Федерации Федеральный медицинский биофизический центр Федерального медико-биологического агентства», Москва
РЕЗЮМЕ
В экспериментах на собаках изучена экзокринная секреция аутотрансплантированных сегментов поджелудочной железы (ПЖ), а также секреция культей ПЖ животных, подвергнутых ее проксимальной резекции. Выявлено более выраженное поражение экзокринной функции ПЖ у животных, перенесших ее аутотрансплантацию по сравнению с животными, подвергнутыми проксимальной резекции органа. Установлено сохранение адаптивности панкреатической экзосекреции к нутритивному составу дуоденального содержимого, а также феномена «генерализованного торможения» панкреатической экзосекреции, вызванного энтеральным введением трипсина во всех группах животных. Ключевые слова: Поджелудочная железа, Трансплантация, Экзокринная секреция
SUMMARY
In experiments on dogs the exocrine secretion of pancreatic segment graft after its autotransplantation and of pancreatic stamps after proximal resection of the pancreas was investigated. More significant impairment of the exocrine secretion of the pancreas was revealed in animals after pancreatic graft autotransplantation in comparison with animals after the proximal resection of the pancreas. Maintenance of the adaptation of pancreatic exocrine secretion to the nutritional composition of the intestinal contents and «generalized inhibition» of pancreatic exocrine secretion caused by duodenal trypsin infusion was revealed in all groups. Keywords: Pancreas, Transplantation, Exocrine secretion
CD
Распространенность, тяжесть и частые осложнения делают проблему лечения сахарного диабета одной из наиболее актуальных [3, 5]. Трансплантация поджелудочной железы (ПЖ) остается «золотым стандартом» лечения тяжелых форм этого заболевания [7, 8].
В настоящее время применяются методики трансплантации сегмента ПЖ с энтеральным и мо-чепузырным дренированием протока ПЖ [6]. При энтеральном дренировании панкреатического протока панкреатоэнтероанастомоз (ПЭА) накладывается, как правило, с дистальными отделами тонкой кишки. Вместе с тем, двенадцатиперстная кишка (ДПК) и проксимальные отделы тощей кишки являются местом наибольшей концентрации гормональных и невральных структур, ответственных за регуляцию функционирования органов верхнего этажа брюшной полости и пассаж панкреатического секрета имеет важное значение для нормального
отправления их функции [2]. В данной работе изучена сохранность экзосекреторной функции панкреатических трансплантатов, а также ее зависимость от уровня наложения ПЭА.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Группы экспериментальных животных
Группа 1. Изучение экзокринной функции ПЖ после резекции тела и дуоденальной доли ПЖ (12 животных);
Группа 2. Изучение экзокринной функции ПЖ после панкреатэктомии и сегментарной аутотран-сплантации ПЖ (САПЖ) с формированием венозного оттока в систему нижней полой вены и ПЭА с дистальной петлей тонкой кишки (18 животных);
Группа 3. Изучение экзокринной функции ПЖ после панкреатэктомии и САПЖ с формированием венозного оттока в систему воротной вены
и ПЭА с проксимальной петлей тонкой кишки (18 животных).
Анестезия. Индукция анестезии осуществлялась внутримышечным введением 2% раствора ксилази-на (Interchemie Werken «de Adelaar» BV, Нидерланды) в дозе 0,15 - 0,20 мл на кг массы тела животного. Поддержание анестезии проводилось внутривенным введением тиопентала-натрия в дозе 10 мг/кг массы тела/ч. Выведение животных из эксперимента осуществлялось внутривенным введением 10 мл 2% раствора ксилазина в соответствии с требованиями Хельсинкской конвенции по гуманному обращению с экспериментальными животными [1, 4]. Осуществлялась профилактика острого послеоперационного панкреатита внутривенным введением октреотида во время вмешательства со скоростью 5 мкг/ч, первые 2 суток после вмешательства октре-отид вводился в дозе 1мкг/кг в сутки.
Методика проксимальной резекции ПЖ (ПРПЖ). Мобилизовывались тело и дуоденальная часть ПЖ таким образом, чтобы сохранялось кровоснабжение ДПК, ПЖ пересекалась на уровне слияния краниальной брыжеечной и селезеночной вен. Мобилизованная часть ПЖ удалялась, накладывался ПЭА с первой петлей тощей кишки.
Методика выполнения панкреатэктомии с САПЖ. ПЖ рассекалась на уровне слияния краниальной брыжеечной и селезеночной вен. Связочный аппарат ПЖ полностью мобилизовывался, селезеночные сосуды пересекались. Выполнялась консервация ПЖ охлажденным кустодиолом. Выполнялась спленэктомия и панкреатэктомия. В группе 2 формировались анастомозы внутренних подвздошных артерии и вены с проксимальными концами селезеночных сосудов трансплантата по типу «конец в конец», ПЭА с петлей подвздошной кишки. В группе 3 формировались анастомозы «конец в конец» между селезеночной веной трансплантата и дистальным концом каудальной брыжеечной вены, после чего формировался анастомоз между дистальным концом селезеночной артерии панкреатического трансплантата и левой ободочной артерией конец в конец. Формировался ПЭА с первой петлей тощей кишки.
Изучение экзосекреторной функции ПЖ. Экзосекреция ПЖ изучалась на 45 сутки после
выполнения хирургического вмешательства. Петля тонкой кишки с трансплантированным сегментом ПЖ, выводилась в рану и рассекалась по противобрыжеечному краю напротив ПЭА в поперечном направлении, панкреатический проток канюлировался. Панкреатический секрет собирался получасовыми порциями. Проводилось введение стимуляторов и ингибиторов экзосе-креции ПЖ. Схема их введения приведена в таблице 1.
Определялся объем панкреатического секрета, концентрация в нем белка, активность протеаз (общая протеолитическая активность) и липазы.
Статистическая обработка и способ представления результатов. Результаты представлены в виде медиана (межквар-тильный интервал). Статистическая значимость различий определялась для независимых групп с помощью и-критерия Манна-Уитни, для зависимых — с помощью критерия Вилкоксона. Различия считались статистически значимыми при р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
При сравнении динамики дебитов белка у животных, перенесших панкреатэктомию с САПЖ и животных, перенесших ПРПЖ, выявлено более значительное повышение секреторной активности у последних (Рис. 1).
В отличие от группы 1, в группах 2 и 3 на 180 минуте эксперимента не выявлено значимого снижения дебита белка по сравнению с предыдущим значением, напротив, в группе 3 отмечен его рост ^<0,05).
Динамика дебитов протеаз в группах животных, подвергнутых панкреатэктомии с САПЖ, помимо менее выраженного повышения секреторной активности ПЖ, отличалась отсутствием значимого снижения секреции протеолитических ферментов в ответ на введение в ДПК трипсина в малой дозе. Введение трипсина в дозе 0,1 мг/кг, вызывало значительное торможение секреции протеаз во всех группах животных (рис. 2).
Б >
о
S
1_ 9 Q S
< ш
Og 0.1S
Ш о
Нв п ^
о й
I- ш
и
га
L Б
га
X
X
<
га
I-
х ш 2 s а ш с и
Таблица 1
СХЕМА ВВЕДЕНИЯ СТИМУЛЯТОРОВ И ИНГИБИТОРОВ ПАНКРЕАТИЧЕСКОЙ ЭКЗОКРИННОЙ СЕКРЕЦИИ
Минута эксперимента Вводимый стимулятор или ингибитор панкреатической экзосекреции
0 Секретин 0,2 мг/кг массы тела внутривенно
90 Подкисленный до рН 2,0 пептон 1,0 мл/кг массы тела интрадуоденально
150 Трипсин 0,01 мг/кг интрадуоденально
180 Олеат натрия 0,5 г/кг интрадуоденально + секретин 0,2 мг/кг массы тела внутривенно
240 Трипсин 0,1 мг/кг интрадуоденально
550 500 450 400 350 300
э
250 200 150 100 50
1 1 1 1 1 1 1 х 1 1 х л _................._......................._......................._......................._..................................................... л ....._.........._....._....._....._....._......
х л у < >
V х < \
6 V х х х
х х > х ^ V
1-х... т ьЖЛ 1 \ х
-хх/ Мо
ххх
-ОИ9г
30 60 90 120 150 180 210 Минута эксперимента
240 270
Рисунок 1. Динамика дебитов белка у животных, подвергнутых резекции ПЖ и панкреатэктомии с аутотрансплантацией сегмента ПЖ.
О — ПРПЖ, Д — САПЖ на подвздошные сосуды (группа 2); ® — САПЖ на брыжеечные сосуды (группа 3); Л — р<0,05 по сравнению с группой 2, V — по сравнению с группой 3, U критерий Манна-Уитни; х — р<0,05 по сравнению с предыдущим значением, критерий Вилкоксона; маркер — медиана; X — 25 и 75 процентили.
л
0
600 500 400 %300 200 100 0
0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 Минута эксперимента
Рисунок 2. Динамика дебитов протеаз у животных, подвергнутых резекции ПЖ и панкреатэктомии с аутотрансплантацией сегмента ПЖ.
О — ПРПЖ, Д — САПЖ на подвздошные сосуды (группа 2);9 — САПЖ на брыжеечные сосуды (группа 3); Л — р<0,05 по сравнению с группой 2, V — по сравнению с группой 3, U критерий Манна-Уитни; х — р<0,05 по сравнению с предыдущим значением, критерий Вилкоксона; маркер — медиана; I — 25 и 75 процентили.
о*
Повышение дебитов секреции липазы в течение всего периода наблюдения было более значительным в 1 группе ^<0,01). При анализе динамики дебитов липазы отмечено существенное повышение секреции липазы в ответ на введение олеиновой кислоты во всех группах животных (рис. 3).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
У животных, перенесших панкреатэктомию с САПЖ, наблюдалось более существенное, по сравнению с животными, перенесшими проксимальную резекцию ПЖ, снижение секреторного ответа
на нутритивную стимуляцию. Кроме того, выявлено отсутствие реакции на дуоденальное введение трипсина в малых дозах (селективного торможения секреции). При этом, сохранялись адаптивность секреции к нутритивному составу дуоденального содержимого и реакция на введение высокой дозы трипсина (генерализованное торможение панкреатической экзосекреции). Выявлена сохранность экзокринной функции аутотрансплантированного сегмента ПЖ, что определяет целесообразность сохранения кишечного пассажа его секрета и должно учитываться при выборе способа формирования ПЭА при трансплантации ПЖ.
900 800 700 600 500
э
400 300 200 100
>х
х л
v À
; X л X
Xх л л л w X! X У О
w w .....Ь
\x XX
л л / Sfo
w X w / ^ •
30 60 90 120 150 180 210 Минута эксперимента
240 270
Рисунок 3. Динамика дебитов липазы у животных, подвергнутых резекции ПЖ и панкреатэктомии с аутотрансплан-тацией сегмента ПЖ.
О — ПРПЖ, Д — САПЖ на подвздошные сосуды (группа 2); в — САПЖ на брыжеечные сосуды (группа 3); Л — р<0,05 по сравнению с группой 2, V — по сравнению с группой 3, U критерий Манна-Уитни; х — р<0,05 по сравнению с предыдущим значением, критерий Вилкоксона; маркер — медиана;Л — 25 и 75 процентили.
Б >
о
S
1_ 9
о is
OS 0.1S
Ш о
Нв п Ё
О й
а
I- Ш
и
га
L Б
га
X
X
<
га
I-
х ш S s а ш с и
0
0
ЛИТЕРАТУРА
1. Западнюк И. П., Западнюк В. И., Захария Е. А., Западнюк Б. В. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. — Киев, 1983. — 384 с.
2. Коротько Г. Ф. Физиология системы пищеварения. — Краснодар, 2009. — 608 с.: ил. Сунцов Ю. И., Болотская Л. Л., Маслова О. В.,
3. Казаков И. В. Эпидемиология сахарного диабета и прогноз его распространенности в Российской Федерации // Сахарный диабет. — 2011. — № 1. — С. 15 - 18.
4. Шалимов С. А., Радзиховский А. П., Кейсевич Л. В. Руководство по экспериментальной хирургии. — М.: Медицина, 1989. — 272 с.
5. Шумаков В. И. Трансплантология. Руководство для врачей — 2 изд. — М: МИА. — 2006. — 544 с.
6. Gruessner A. C. 2011 update on pancreas transplantation: comprehensive trend analysis of 25,000 cases followed up over the course of twenty-four years at the International Pancreas Transplant Registry (IPTR). // Rev Diabet Stud. — 2011. — № 1. — P. 6 - 16.
7. Meloche R. M. Transplantation for the treatment of
type 1 diabetes. // World J Gastroenterol. — 2007. — N 47. — P. 6347 - 6355
8. Vardanyan M., Parkin E., Gruessner C., Rodriguez Rilo H. L. Pancreas vs. islet transplantation: a call on the future. // Curr Opin Organ Transplant. — 2010. — N 1. — P. 124 - 130.
m
