CC BY
60
УДК 615.916:616.36:547.458
Т.Д. Четверикова, Л.О. Гуцол, Л.С. Васильева
ВЛИЯНИЕ АРАБИНОГАЛАКТАНА НА АКТИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ И СТРУКТУРУ ПЕЧЕНИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ АНЕМИИ
Иркутский государственный медицинский университет (Иркутск)
Показано, что введение природного полисахарида арабиногалактана в период максимального развития экспериментальной гемолитической анемии способствует, уменьшению интенсивности процессов липопероксидации и повреждения ткани печени.
Ключевые слова: гепатоциты, фенилгидразин, арабиногалактан
INFLUENCE OF ARABINOGALACTAN ON ACTIVITY OF LIPID PEROXIDATION PROCESSES AND LIVER STRUCTURE IN EXPERIMENTAL HEMOLYTIC ANEMIA
T.D. Chetverikova. L.O. Gutsol. L.S. Vasilyeva
Irkutsk State Medical University (Irkutsk)
It is shown that administration of natural polysaccharide arabinogalactan at period, of experimental hemolytic anemia's maximum, expression causes decreasing of intensity lipid, peroxidation processes and damage to liver tissue.
Key wards: hepatocytes, phenylhydrazine, arabinogalactan_________________________________________
В настоящее время все больше внимание уделяется таким свойствам новых лекарственных средств, как адресность доставки и побочные влияния. Перспективными в этом плане являются углеводные молекулы, которые опознаются и поглощаются лектинами клеточной поверхности. К данному классу веществ относится арабиногалактан
— полисахарид из клеточных стенок хвойных деревьев (различных видов лиственниц) и других растений [7,10, 12, 13, 15]. Арабиногалактан хорошо растворим в воде и отличается от других полисахаридов низкой вязкостью растворов высокой концентрации, что объясняется сферической формой его макромолекул и определяет целесообразность его парентерального введения [9, 14].
Арабиногалактан обладает антиоксидативной активностью [4], способен вступать в реакции с различными функциональными реагентами [В], высоко аффинен к асиалогликопротеиновым рецепторам, наибольшее количество которых обнаружено на гепатоцитах, и относится к полисахаридам, поступающим в клетку с помощью рецепторно-опосредованного эндоцитоза [12, 11, 14].
Целью исследования явилось изучение влияния природного полисахарида арабиногалактана, полученного из лиственницы сибирской, на динамику повреждения ткани печени при экспериментальной гемолитической анемии.
МЕТОДИКА
Опыты выполнены на 54 беспородных белых крысах-самцах массой 180 — 200 г. Содержание, питание, уход и выведение из эксперимента соответствовали «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденным требованиям, приказу № 755 от 12.08.77. У животных вызывалась токсическая гемолитическая анемия путем внутримышечного введения солянокислого фенилгидразина по 3 мг/100 г массы тела в течение двух дней [1]. На пятый день эксперимента (пик анемии) половине из них внутримышечно вводился раствор ара-биногалактана в дозе 20 мг/100 г массы, остальным — физиологический раствор. В пик анемии, а также через 1, 3, 5, 15 суток после него определялась концентрация гидроперекисей липидов (ГПЛ) по методу В.Б. Гаврилова и М.М. Мишко-рудной [2] и малоновых диальдегидов (МДА) по
методу И.Д. Стальной, Т.Г. Гаришвили [6] в печени и брались образцы ткани печени для морфологических исследований. Образцы ткани печени фиксировались в 10% нейтральном формалине и заливались в парафин. Срезы толщиной 7 мкм окрашивались гематоксилин-эозином (для обзорных морфометрических исследований) и на ШИК-реакцию с контролем амилазой (для выявления гликогена в гепатоцитах) [5]. В паренхиме печени определялась объемная доля гепатоцитов, сосудов, очагов некроза, а также подсчитывалось процентное количество дистрофически измененных клеток, двуядерных гепатоцитов, измеряли размер гепатоцитов. Количество гликогена оценивалось в баллах по четырехбальной шкале (0,
1, 2, 3 балла), затем высчитывался цитохимический индекс по общепринятой формуле: ЦХИ = (0 X n0 + 1 X n1 + 2 X n2 + 3 X n3)/(n0 + n1 + n2 + + n3), где n0, n1, n2, n3 — количество гепатоцитов. Поскольку АГ вводился в пик анемии, регистрация всех показателей начиналась через сутки после него.
РЕЗУЛЬТАТЫ
При отравлении фенилгидразином во все сроки эксперимента концентрация продуктов липо-пероксидации в печени значительно превышает норму. В пик анемии — в 2 раза, в первые сутки после пика — в 1,6 — 2,6 раза. На третьи сутки после пика анемии концентрация ГПЛ остается повышенной, а концентрация МДА возвращается к норме, что приводит к увеличению соотношения ГПЛ/МДА в 2,5 раза по сравнению с его значением у интактных крыс. На пятые сутки после пика анемии концентрация ГПЛ и МДА повышается относительно нормы в равной степени. К 15 суткам вновь нарушается сбалансированность отношения ГПЛ/МДА, что проявляется увеличением этого показателя (табл. 1).
На основании этих данных можно сделать вывод, что интоксикация фенилгидразином провоцирует продолжительную гиперактивацию ПОЛ в печеночной ткани, сопровождающуюся дисбалансом реакций липопероксидации.
В пик гемолитической анемии в печени наблюдается застой крови в собирательных и центральных венах, приводящий к механическому расширению синусоидных внутридольковых капилляров
Таблица 1
Концентрация продуктов перекисного окисления липидов в печени и их соотношение при интоксикации фенилгидразином и ведении арабиногалактана
Серия Показатели Интактные крысы Подопытные крысы
пик 1 сутки 3 сутки 5 сутки 15 сутки
ФГ ГПЛ 7,43 ± 0,9 17,5 ± 1,25* 19,5 ± 1,56* 14,2 ± 0,36* 16,2 ± 0,87* 12,9 ± 0,77*
МДА 3,34 ± 0,6 6,65 ± 1,2 5,23 ± 0,23* 1,9 ± 0,05 7 ± 0,23* 2,24 ± 0,1
ГПЛ/МДА 3,06 ± 0,74 0,87 ± 0,4 3,72 ± 0,2 7;6 ± 0,3* 2,3 ± 0,09 5,9 ± 0,44*
ФГ + АГ ГПЛ 7,43 ± 0,9 17,5 ± 1,25* 12,9 ± 0,9*/** 15,5 ± 0,8* 10,8 ± 1,13** 14,5 ± 0,9*
МДА 3,34 ± 0,6 6,65 ± 1,2 3,2 ± 0,14** 4,6 ± 0,2** 3,3 ± 0,5** 1,3 ± 0,1*/**
ГПЛ/МДА 3,06 ± 0,74 2,87 ± 0,4 4,04 ± 0,28 3,41 ± 0,23** 3,64 ± 0,7 11,1 ± 0,76*/**
Примечание: * - статистически значимое отличие показателей при введении АГ на фоне отравления ФГ от аналогичных значений у интактных крыс; ** - статистически значимое отличие показателей при введении АГ на фоне отравления ФГ от аналогичных значений у крыс при интоксикации ФГ.
Таблица 2
Структурно-функциональная характеристика печени при отравлении фенилгидразином
и введении арабиногалактана
Показатели Интактные крысы Подопытные крысы
пик 1 сутки 3 сутки 5 сутки 15 сутки
і_ © доля сосудов, %, V 17,1 ± 0,96 26,16 ± 1,1* 9,52 ± 0,66* 6,49 ± 0,43* 9,04 ± 0,48* 8,26 ± 0,5*
доля некроза, %, V 0,81 ± 0,26 40,96 ± 1,98* 36,44 ± 2,35* 53,52 ± 1,87* 35,39 ± 3,8* 43,41 ± 2,63*
нормальные клетки, % 99,2 ± 0,25 58,5 ± 2,7* 61,8 ± 1,4* 21,9 ± 3,7* 60,7 ± 2,53* 44,2 ± 4,46*
баллонная дистрофия, % 0 0,52 ± 0,28 1,78 ± 0,44* 24,5 ± 4,45* 3,89 ± 1,38* 12,42 ± 2,86*
ЦХИ гликогена 1,7 ± 0,1 1,4 ± 0,1 1,5 ± 0,1 0,4 ± 0,2* 1,3 ± 0,2 1 ± 0,1*
двуядерные клетки, % 10 ± 1,2 11,2 ± 1,1 12,2 ± 1,5 13,4 ± 0,7* 14,2 ± 1,04* 13,9 ± 1,3
клетки < 13,5 мкм, % 18 ± 1,2 22,43 ± 3,3 23,8 ± 2,9 23,55 ± 1,4* 24,02 ± 2,8 21,48 ± 1,5
клетки среднего размера, % 65 ± 4,3 53,47 ± 2,8 51 ± 1,4* 36,65 ± 2* 45,48 ± 13,7 48,92 ± 2,3*
клетки > 18 мкм, % 18 ± 0,7 24,1 ± 4,1 25,2 ± 2,6* 39,8 ± 1,8* 30,5 ± 2,2* 29,6 ± 3,1*
і_ < + і_ © доля сосудов, %, V 17,1 ± 0,96 26,16 ± 1,1* 9,98 ± 0,8* 13 ± 0,7*/** 5,6 ± 0,5*/** 11,4 ± 0,7*/**
доля некроза, %, V 0,81 ± 0,26 40,96 ± 1,98* 31,9 ± 2,8* 26 ± 3,5*/** 15,8 ± 1,3*/** 22,2 ± 3,3*/**
нормальные клетки, % 99,2 ± 0,25 52,5 ± 2,7* 62 ± 3,9* 62,3 ± 8,5*/** 3,5 ± 0,7*/** 739 ± 3,26*/**
баллонная дистрофия, % 0 0,52 ± 0,28 4,6 ± 1,7* 10,3 ± 6,4 80,8 ± 1,5*/** 1,7 ± 0,6*/**
ЦХИ гликогена 1,7 ± 0,1 1,4 ± 0,1 1,3 ± 0,1* 0,9 ± 0,1* 0,04 ± 0,02*/** 1,3 ± 0,1*
двуядерные клетки, % 10 ± 1,2 11,2 ± 1,1 13 ± 2 15,7 ± 1,9* 15,6 ± 1,2* 13,2 ± 1,1
клетки < 13,5 мкм, % 18 ± 1,2 22,43 ± 3,3 24,6 ± 2,9 28,1 ± 1,8* 28 ± 2,2* 18,2 ± 2,4
клетки среднего размера, % 65 ± 4,3 53,47 ± 2,8 52,4 ± 2,4* 44,5 ± 5,6* 19,7 ± 4,9* 57,6 ± 3,3
клетки > 18 мкм, % 18 ± 0,7 24,1 ± 4,1 22,9 ± 4,2 27,4 ± 2,7*/** 52,38 ± 2,4*/** 24,2 ± 2,3*
Примечание: * - статистически значимое отличие показателей при введении АГ на фоне отравлении ФГ от аналогичных значений у интактных крыс; ** - статистически значимое отличие показателей при введении АГ на фоне отравлении ФГ от аналогичных значений у крыс при интоксикации ФГ.
и увеличению их объемной доли в 1,5 раза (Р < 0,05) (табл. 2). Междольковые перегородки умеренно инфильтрированы лейкоцитами, что свидетельствует о повышении проницаемости сосудов микроциркуляции.
В паренхиме печени за прошедшие 5 суток (от введения ФГ до пика анемии) сформировались обширные очаги некроза. Разрушено 41 ± 2 % объема печени (Р< 0,05). Среди сохранившихся
гепатоцитов встречаются единичные клетки с баллонной дистрофией. Остальные клетки имеют нормальную структуру. Основываясь на данных литературы, мы полагаем, что альтерация гепато-цитов может быть вызвана оксидативным эффектом ФГ [3].
Соотношение клеток различных размеров и относительное количество двуядерных гепатоци-тов не изменяется, но наблюдается тенденция к
увеличению числа мелких (молодых) и крупных гепатоцитов и уменьшению содержания клеток средних размеров, т.е. пролиферативные процессы в этот срок недостаточно активны.
Цитохимический индекс (ЦХИ), отражающий содержание гликогена в гепатоцитах, в этот срок не изменяется, что, по-нашему мнению, связано либо с блокадой метаболических процессов, либо с высокой скоростью некротизации ткани.
В первые сутки после пика анемии застойные явления несколько ослабевают. Объем капиллярного русла уменьшается в 2,8 раза по сравнению с предыдущим сроком наблюдения и в 1,8 раза по сравнению с нормой (Р < 0,05). Сохраняется умеренная инфильтрация междольковых перегородок моноцитами и лимфоцитами. Объем некротизиро-ванной ткани по сравнению с предыдущим сроком не изменяется. Количество клеток с баллонной дистрофией увеличивается до 1,8 ± 0,5 % объема ткани печени (Р < 0,05). Отмечается тенденция к увеличению числа мелких и двуядерных клеток. По сравнению с интактными крысами в 1,3 раза уменьшается число клеток, имеющих нормальные размеры и в 1,4 раза возрастает число гепатоцитов крупных размеров, что, по нашему мнению, может быть связано с распространением дистрофических процессов (Р < 0,05). ЦХИ по-прежнему не изменяется, что свидетельствует о стабилизации нарушений процессов гликогенеза и гликогенолиза.
Представленные данные свидетельствуют о том, что, альтеративные процессы прогрессируют. Возрастает число клеток с баллонной дистрофией. Это приводит к увеличению объема отдельных гепатоцитов, что, в свою очередь, вызывает сдавление синусоидных капилляров, уменьшение их просвета и, соответственно, нарушения трофики ткани. Одновременно с этим выявляется тенденция к увеличению количества молодых и двуядерных гепатоцитов, образующихся в результате незавершенного митоза, что может свидетельствовать о начале структурной компенсации поврежденной ткани путем пролиферации клеток.
На 3 сутки после пика анемии формируется стаз в сосудах притока, оттока и капиллярах. Объем капиллярного русла еще более уменьшается: по сравнению с предыдущим сроком в 1,5 раза, по сравнению с нормой — в 2,6 раза, что в значительной степени связано с распространением баллонной дистрофии. В междольковых перегородках сохраняется лейкоцитарная инфильтрация того же клеточного состава, что и в предыдущий срок наблюдений. Площадь некротизированной ткани возрастает до 53,5 ± 1,9%, а число клеток с баллонной дистрофией — до 24,5 ± 4,5 % (Р < 0,05). В результате интенсификации дистрофических изменений количество клеток, имеющих большие размеры, увеличивается по сравнению с нормой в 2,2 раза, а по сравнению с предыдущим сроком наблюдения — в 1,6 раза (Р < 0,05). Параллельно деструктивным явлениям активизируются восстановительные процессы. Число двуядерных и молодых клеток возрастает в 1,3 и 1,4 раза соответствен-
но (Р< 0,05). ЦХИ по сравнению с предыдущим сроком снижается более чем в 4 раза, что, по-видимому, связано с началом репарации и с восстановлением способности клеток к утилизации гликогена.
Следовательно, на 3 сутки после пика анемии нарушения кровотока становятся более выраженными, что способствует прогрессированию как обратимой (дистрофия), так и необратимой (некроз) альтерации, общий объем которой в этот срок становится максимальным и составляет 80 % печеночной ткани. В то же время нарастающая баллонная дистрофия ведет к сдавлению синусоидных капилляров, что еще более затрудняет циркуляцию крови и усугубляет дистрофические изменения в клетках. Параллельно деструктивным процессам активизируется репаративная регенерация.
На 5 сутки наблюдается частичное восстановление кровотока: в сосудах притока застойные явления выражены меньше, чем в сосудах оттока. Объем капиллярного русла увеличивается по сравнению с предыдущим сроком в 1,4 раза, но все еще в 1,9 раза меньше, чем в норме (Р < 0,05). Сохраняется лейкоцитарная инфильтрация междольковых перегородок. Выраженность баллонной дистрофии уменьшается в 6 раз, но объем некротизированной ткани все еще остается значительным, составляя 35,4 ± 3,8 % (Р < 0,05). Число двуядерных и молодых гепатоцитов сохраняется на прежнем уровне. Число клеток больших размеров имеет тенденцию к уменьшению, что связано с уменьшением объема баллонной дистрофии (Р < 0,05). Число гепатоцитов среднего диаметра увеличивается и отрицательно коррелирует с уменьшением мелких клеток (г = —0,8), что указывает на созревание новообразованных гепатоцитов. ЦХИ меньше нормы в 1,3 раза, но по сравнению с предыдущим сроком увеличивается в 3,3 раза, в связи с возрастанием числа гликогенсинтезирующих клеток (Р < 0,05).
Таким образом, в этот срок эксперимента улучшается кровоснабжение гепатоцитов, уменьшается объем поврежденной ткани, увеличивается содержание гликогена в печени. Темп восстановительных процессов достаточно интенсивен, о чем свидетельствует увеличение количества двуядерных и молодых гепатоцитов в сочетании с созреванием последних.
На 15 сутки застойные явления во всех сосудах исчезают, но диаметр капилляров меньше нормы в 2 раза (Р < 0,05), и кровоток в органе полностью не восстанавливается. Вновь увеличивается число клеток с баллонной дистрофией (12,4 ± 2,86 %), а объемная доля очагов некроза остается практически такой же, что и в предыдущий срок (43,4 ± 2,6 %, Р < 0,05). Число двуядерных и молодых гепатоци-тов соответствует значениям нормы. Количество клеток средних размеров не изменяется по сравнению с предыдущим сроком, и меньше нормальных значений в 1,1 раза. Количество гепатоцитов больших размеров превышает норму в 1,6 раза (Р < 0,05). ЦХИ сохраняет свое прежнее значение, но меньше нормы в 1,7 раза (Р < 0,05).
Следовательно, через 3 недели после интоксикации остается поврежденным более 50 % объема печени. Процессы репарации активируются, но умеренно. Сохранившиеся гепатоциты способны осуществлять гликогенную функцию: запасы гликогена начинают восстанавливаться.
При введении АГ на первые и пятые сутки после пика анемии, по сравнению с крысами, которым АГ не вводился, интенсивность липоперокси-дации значительно снижается (Р < 0,05). Соотношение ГПЛ и МДА во все сроки, кроме 15 суток, не изменяется и остается сбалансированным. Следовательно, введение АГ в период максимального развития гемолитической анемии предупреждает гиперактивацию ПОЛ в течение 5 суток наблюдения, т.е. пока АГ находится в организме (табл. 1).
В пик анемии во многих собирательных и центральных венах наблюдается небольшой застой крови, внутридольковые синусоидные капилляры сужены. Объем капиллярного русла уменьшен по сравнению с нормой в 1,7 раза и не отличается от объема капилляров в этот срок у крыс, которым не вводился АГ (Р < 0,05, табл. 2). Междольковые перегородки умеренно инфильтрированы лейкоцитами. Можно предположить, что в условиях введения АГ стимулируются миграционные потенции этих клеток и тем самым создаются условия для их участия в реализации защитных эффектов. Объем некротизированной ткани печени составляет
31,9 ± 2,78 %, клеток с баллонной дистрофией — 4,62 ± 1,72 %, т.е. деструктивные процессы выражены в той же степени, что и у животных, не получавших АГ в этот же срок (Р < 0,05). Соотношение клеток различных размеров по сравнению с таковым у интактных крыс не изменяется, но отмечается тенденция к увеличению количества клеток малых размеров и к уменьшению числа гепатоцитов нормальных размеров (Р < 0,05). ЦХИ уменьшается по сравнению с нормой в 1,3 раза, что может быть связано с усилением гликогенмобили-зующей функции печени (Р < 0,05), в то время как у животных без АГ в этот срок процессы метаболизма гликогена заблокированы.
Из представленных данных следует, что однократное введение АГ (в пик анемии) не уменьшает общую площадь альтерации ткани печени в начальный период интоксикации (к концу 1 суток после пика анемии). Тем не менее, прослеживается тенденция к снижению интенсивности некроза и увеличению числа клеток с баллонной дистрофией, что говорит о большей выживаемости клеток. Гликогенная функция печени существенно не страдает, о чем говорит сохранение способности гепатоцитов к его утилизации. Наблюдается тенденция к увеличению числа молодых клеток.
На 3 сутки после пика анемии застойные явления в сосудах не выявляются. Объемная доля капилляров по сравнению с предыдущим сроком эксперимента меньше в 1,3 раза и в 2 раза превышает этот показатель у животных, не получавших АГ (Р < 0,05). Междольковые перегородки умеренно инфильтрированы лейкоцитами. Выражен-
ность деструктивных процессов в паренхиме печени остается значительной, но в 2 раза меньшей, чем у животных, которым АГ не вводился: объем некротизированной ткани составляет 26 ± 3,5 %, а клеток с баллонной дистрофией — 10,3 ± 6,4 % (Р < 0,05). Эти данные свидетельствуют о гепатоп-ротекторном эффекте АГ, который может реализоваться с участием различных механизмов, включающих стабилизацию мембран гепатоцитов [10 — 12], антиоксидативные реакции, активацию фагоцитоза [4]. По сравнению с нормой в 1,7 раза возрастает число молодых, в 1,6 раза — двуядерных гепатоцитов, в 1,5 раза — клеток больших размеров; в 1,5 раза снижается число средних гепатоцитов (Р < 0,05). В этот период наблюдения оставшиеся клетки активно размножаются и восстанавливают разрушенную паренхиму. ЦХИ снижается относительно предыдущего срока в 1,4 раза, а по сравнению с его значением у интактных крыс — в
1,9 раза (Р < 0,05), что свидетельствует об уменьшении запасов гликогена, по-видимому, связанном с их активным использованием для обеспечения энергией пролиферативных процессов.
Таким образом, к этому сроку наблюдения кровообращение в печени восстанавливается. По сравнению с крысами, не получавшими АГ, объем разрушенной ткани уменьшается втрое. Изменение соотношения гепатоцитов различных размеров указывает на более активную пролиферацию гепатоцитов, которая обеспечивается за счет запасов гликогена.
На 5 сутки после пика анемии объем капиллярного русла уменьшается в 2,3 раза по сравнению с предыдущим сроком и в 3 раза по сравнению с нормой (Р < 0,05). Вместе с тем, застойных явлений в микрососудах не выявляется. В междольковых перегородках сохраняется умеренная лейкоцитарная инфильтрация. По сравнению с предыдущим сроком наблюдений, объем некротизированной ткани уменьшается в 1,6 раза, а доля гепатоцитов с баллонной дистрофией увеличивается в В раз (Р < 0,05). По сравнению с нормой в 1,6 раза возрастает число двуядерных и молодых гепатоцитов, в 2,9 раза
— крупных клеток; содержание гепатоцитов среднего размера снижается в 3,3 раза (Р< 0,05). Гликоген практически исчезает — ЦХИ падает до 0,04, что в 42,5 раза меньше нормы (Р < 0,05).
Следовательно, в этот срок на фоне уменьшения необратимых альтеративных процессов доминируют обратимые — в виде баллонной дистрофии. Этот вид клеточной дистрофии обнаруживается в 81 % гепатоцитов и логично объясняет увеличение размеров клеток и уменьшение запасов гликогена. Пролиферативные процессы, по сравнению с предыдущим сроком, не интенсифицируются, но остаются на достаточно высоком уровне.
К 15 суткам объем капилляров, по сравнению с предыдущим сроком, увеличивается в 2 раза, но все еще меньше нормы в 1,5 раза (Р < 0,05). Кровоток по венам и артериям не нарушен, застойных явлений в капиллярах не наблюдается. Перивас-кулярная лейкоцитарная инфильтрация исчезает.
Объем некротизированной паренхимы печени уменьшается до 22,2 ± 3,34 %, доля клеток с баллонной дистрофией до 1,7 ± 0,6 % ткани органа (Р < 0,05). Число двуядерных и молодых гепатоци-тов возвращается к норме. По сравнению с предыдущим сроком наблюдений количество клеток нормальных размеров увеличивается в 2,9 раза, но все еще в 1,1 раза меньше нормы, гепатоцитов больших размеров уменьшается в 2,2 раза, но этих клеток все еще в 1,3 раза больше нормы (Р < 0,05). ЦХИ возрастает по сравнению с предыдущим сроком в 32,5 раза, оставаясь все еще ниже нормы в
1,3 раза, что говорит о частичном восстановлении запасов гликогена (Р < 0,05).
Итак, альтеративные процессы к 15 суткам наблюдения значительно менее выражены, чем у животных, не получавших АГ. Активность пролиферации снижается до исходного уровня. Восстанавливается гликогенез, о чем говорит увеличение гликогена в печени. Повышенное число гепатоцитов больших размеров объясняется, с одной стороны, сохраняющейся баллонной дистрофией, с другой — компенсаторной гипертрофией части гепатоцитов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Анализируя полученные результаты, можно сделать следующее обобщение. Во все сроки интоксикации ФГ наблюдается значительное повреждение печени, проявляющееся развитием баллонной дистрофии и некроза. Максимальная степень альтерации гепатоцитов выявляется на 3 сутки. В патогенезе повреждения печени возможно участие нескольких механизмов: непосредственное действие токсина на клеточные структуры, активация СРО, нарушение кровообращения в органе. Доказательством последнего является высокая степень корреляции (r = — 0,97) между объемом капиллярного русла и выраженностью баллонной дистрофии. Начиная с 3 суток включаются репаративные процессы, что подтверждается увеличением числа молодых и двуядерных клеток.
При однократном введении АГ в пик анемии изменения объема внутридолькового сосудистого русла происходят по тем же закономерностям, как и у животных, не получавших АГ. Чем больше внутриклеточный отек, тем меньше просвет синусоидных капилляров. Наименьший диаметр капилляры имеют через 5 суток в период максимальной выраженности баллонной дистрофии. Во все сроки наблюдения, кроме первых суток, степень некроти-зации печеночной ткани почти вдвое меньше, а клеток с баллонной дистрофией больше, чем у животных, не получавших АГ (Р < 0,05). Следовательно, АГ предохраняет гепатоциты от разрушения. Механизмы реализации гепатопротекторного эффекта полисахарида, скорее всего, различны: он может действовать как антиоксидант [4], может укреплять гликокаликс клеточных мембран, связывать токсические вещества и препятствовать их действию на клетки. Запасы гликогена при введении АГ расходуются постепенно и лишь к 5 суткам истощаются.
К этому сроку в 81 % сохранившихся гепатоцитов развивается баллонная дистрофия. Иными словами, максимум повреждения смещается на 5 сутки. Учитывая, что период полувыведения АГ составляет 3 суток [9], можно полагать, что отмена его эффектов к 5 суткам приводит к перенапряжению де-зинтоксикационной функции печени и распространению дистрофических процессов, которые, вместе с тем имеют обратимый характер и практически исчезают к концу наблюдений. Вероятно, обратимость изменений в гепатоцитах обусловлена сохранением способности клеток к утилизации гликогена, что обеспечивает энергией восстановительные процессы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Белокриницкая Т.Е. Влияние полипептидов эритроцитов на систему эритрона при экспериментальной анемии / Т.Е. Белокриницкая, Б.И. Кузник, В.Х. Хавинсон // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 1992. - Т. 114. - С. 132-133.
2. Гаврилов В.Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови / В.Б. Гаврилов, М.И. Мишко-рудная // Лаб. дело. - 1983. - №3. - С. 33-36.
3. Глутатион-зависимая антиоксидантная система у крыс в условиях острого отравления производными гидразина / С.А. Куценко, А.И. Карпи-щенко, В.А. Башарин, С.И. Глушков // Авиакосм. и экол. мед. - 2001. - Вып. 1. - С. 68-73.
4. Иммуномодулирующие свойства арабино-галактана лиственницы сибирской (Larix sibi-rica L.) / В.И. Дубровина, С.А. Медведева, Г.П. Александрова, Н.А. Тюкавкина и др. // Фармация. -2001. - №5. - С. 26-27.
5. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники / Г.А. Меркулов. - Л.: Медицина, 1969. - 424 с.
6. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы биохимии // Под ред. В.Н. Ореховича.
- М.: Медицина, 1977. - С. 66-68
7. Arabinogalactan derivatives and uses there of / W. Jung Chu, P. Enriquez, S. Palmacci, L. Jozephson et al. // Biotechnol. Adv. - 1997. - N 1. - P. 246.
8. Delivery of therapeutic agents to receptors using polysaccharides / E.V. Groman, E.T. Menz, P.M. Enriquez, W. Jung Chu et al. // Patent N 5554384, 10.09.96.
9. Groman E.V. Arabinogalactan for hepatic drug delivery / E.V. Groman, P.M. Enriquez, W. Jung Chu, L. Josephson // Bioconjugate Chem. - 1994. - N5.
- P. 547-556.
10. Intracellular disposition of polysaccharides in rat liver parenchymal and nonparerchymal cells / T. Tanaka, Y. Fujishima, S. Hanano, Y. Kaneo // Jnt. J. Pharm. - 2004. - Vol. 286, N 1-2. - P. 9-17.
11. Larch arabinogalactan for hepatic drug delivery: isolation and characterisation of a 9 kDa arabinogalactan fragment / J.H. Prescott, P.M. Enriquez, W. Jung Chu, E.T. Menz et al. // Carbohydrate Research. - 1995. - Vol. 278. - P. 113-128.
12. Pharmacokinetics and biodisposition of fluorescein — labeled arabinogalactan in rats f Y. Kaneo, T. Ueno, T. Tanaka, H. Jwase et al. ff Jnt. J. Pharm. - 2000. - Vol. 201, N 1. - P. 59-69.
13. Rihova B. Receptor - mediated targeted drug or toxin delivery f B. Rihova ff Adv. Drug Deliv. Rev.
- 1998. - Vol. 29, N3. - P. 273-289.
14. Structure of gum arabic and its configuration in solution / H.A. Swenson, H.V. Kaustinen, O.A. Ka-ustinen, N.S. Tomson // J. Polymer Sci. — 1968. — Vol. 6, A-2. - P. 1593-1606.
15. Wadhwa M.S. Receptor mediated glyco-targeting / M.S. Wadhwa, K.G. Rice // J. Drug Target.
- 1995. - Vol. 3, N2. - P. 111-127.
