CC BY
36
УДК 611018.81;571.8-615015.6
ВЛИЯНИЕ АМИНОКИСЛОТНЫХ КОМПОЗИЦИЙ НА Фонд ЦЕНТРАЛЬНЫХ НЕЙРОАКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ПРИ СИНДРОМЕ
ОТМЕНЫ ЭТАНОЛА
Ю.Е. Разводовский УО «Гродненский государственный медицинский университет»
Исследовано влияние внутрижелудочного введения композиций аминокислот I: (Leu:Ile:Val:Tau 1:0,25:0,25:0,5) иII: (Leu:Ile:Val:Tau:Trp 1:0,25:0,25:0,5:0.4) на фонд центральных нейроактивных соединений при синдроме отмены этанола (СОЭ) после форсированной алкогольной интоксикации по Majchrowicz. Основными эффектами СОЭ являются снижение уровней катехоламинов и таурина в гипоталамусе, а также снижение серотонинергичес-кой активности в коре, стриатуме и среднем мозге преимущественно за счет снижения доступности предшественника нейромедиатора. Введение композиции I наряду с нормализацией уровня некоторых нейроактивных соединений сопровождалось дополнительным снижением уровня триптофана во всех исследованных отделах мозга. Введение композиции II привело к значительному повышению уровня триптофана во всех исследованных отделах мозга, а также к повышению серотонинергической активности в коре и среднем мозге.
Ключевые слова: аминокислоты, синдром отмены этанола, головной мозг.
The influence of intragastrical injection of amino acids composition I: (Leu:Ile:Val:Tau 1:0,25:0,25:0,5) and II: (Leu:Ile:Val:Tau:Trp 1:0,25:0,25:0,5:0.4) on the pool of central neuroactive compounds in alcohol withdrawal syndrome (A WS) after forced alcohol intoxication according to Majchrowicz has been investigated. The main effects of A WS were the decrease in the level of catecholamines and taurine in the hypothalamus and the decrease of serotoninergic activity due to the decrease of precursor availability in the cortex, striatum and midbrain. Injection of composition I was accompanied by an additional decrease in the level of tryptophan in the brain regions. Injection of composition I resulted in the increase in tryptophan level in all the investigated brain regions and the increase in serotoninergic activity in the brain cortex and midbrain.
Key words: amino acids, alcohol withdrawal syndrome, brain.
Злоупотребление алкоголем является острой медико-социальной проблемой, которая тяжелым бременем моральных и материальных проблем ложиться на плечи государства. Хроническая алкогольная интоксикация сопровождается выраженными метаболическими нарушениями, которые становятся причиной поражения практически всех органов и систем [8, 14]. Несмотря на интенсивное изучение патогенетических аспектов алкоголизма, до настоящего времени не разработан комплексный терапевтический подход, учитывающий особенности сопутствующего хронической алкогольной интоксикации и синдрому отмены этанола (СОЭ) метаболического дисбаланса.
Изучение фонда свободных аминокислот плазмы крови больных алкоголизмом, поступивших на лечение в состоянии алкогольного абстинентного синдрома, показало, что даже после проведения полного курса стандартной терапии остаются стойкие нарушения аминокислотного обмена [6, 8]. Аминокислотный дисбаланс, сопутствующий хронической алкогольной интоксикации, обусловлен недостаточным поступлением с пищей, а также ухудшением всасывания незаменимых аминокислот с одной стороны, и нарушением функции печени - с другой [8]. Дисбаланс в фонде аминокислот играет важную роль в патогенезе нейрохимических нарушений, которыми сопровождается хроническая алкогольная интоксикация и СОЭ [17]. Сдвиги в формировании пула биогенных аминов и нейротрансмиттерных аминокислот затрагивают все звенья: доступность предшественника, их транспорт в мозг, а также синаптический выброс и деградацию [18]. В этой связи коррекция дисбаланса в фонде центральных нейроактивных соединений должна являться облигатным компонентом метаболической терапии алкогольной зависимости.
Большинство аминокислот при введении их в организм в более высоких дозах, чем они поступают с пищей, вызывают специфические фармакологические эффекты
[8,14]. Поскольку аминокислоты являются биологически активными соединениями природного происхождения, созданные на их основе препараты выгодно отличаются отсутствием побочных эффектов. Конечный продукт превращений серосодержащих аминокислот таурин является высокоактивным природным соединением, обладающим антиоксидантными, мембраностабилизирующими и адаптогенными свойствами [7]. Результаты экспериментальных и клинических исследований, проведенных в последние годы, позволяют рассматривать это соединение как эффективное средство метаболической коррекции широкого спектра патологических состояний. В частности, в экспериментальной модели алкоголизма, по Majchrowicz, было показано, что внутрижелудочное введение таурина предотвращает развитие аминокислотного дисбаланса в плазме крови и печени [1, 13]. Комплексное клинико-биохимическое исследование больных алкогольной зависимостью, поступивших в клинику в состоянии алкогольного абстинентного синдрома, показало, что у пациентов, получавших в дополнение к стандартной терапии таурин, уже к 7 суткам достоверно снижалась активность АЛТ и ГГТП, а также концентрация общего билирубина в плазме крови. В то же время, в контрольной группе активность ферментов снизилась только к 14 суткам лечения, а содержание общего билирубина к этому сроку оставалось повышенным [9]. В эксперименте было продемонстрировано, что внутри-желудочное введение таурина в дозе 650 мг/кг за час до декапитации на фоне СОЭ корригирует нарушения в функционировании серотонинергической и дофаминер-гической систем головного мозга, а также повышает отношение концентрации тормозных аминокислот-нейромедиаторов к возбуждающим [3, 12].
Поскольку незаменимая аминокислота L-триптофан является предшественником серотонина, то ее дефицит ассоциируется со снижением центральной серотонинер-гической активности. В частности, было показано, что
диета с низким содержанием триптофана приводит к значительному снижению уровня серотонина в мозге, вызывает рецидив депрессии у женщин с депрессивным эпизодом в анамнезе, снижает настроение у здоровых мужчин [16]. Предполагается, что снижение центральной серотонинергической активности при хронической алкогольной интоксикации и СОЭ может быть опосредовано снижением доступности триптофана мозгу [21]. В экспериментальном исследовании было продемонстрировано, что внутрижелудочное введение L-триптофана на фоне СОЭ в дозах 50 и 100 мг/кг за час до декапита-ции купирует нарушения функционирования серотонинергической системы [2, 11, 20]. Кроме того, курсовое введение L-триптофана в дозе 100 мг/кг на фоне хронической алкогольной интоксикации способно частично корригировать аминокислотный дисбаланс в плазме крови и печени [2]. Было также установлено, что внутримышечное введение L-триптофана уменьшает продолжительность бокового положения крыс на 35%, а продолжительность этанол-индуцированного сна на 26% [10]. В этой связи представляется обоснованным включение триптофана в состав аминокислотной композиции, предназначенной для коррекции метаболических нарушений, сопутствующих хронической алкогольной интоксикации и СОЭ.
Терапевтическое действие аминокислот с разветвленной углеводородной цепью (АРУЦ) - L-изолейцина, L-валина и L-лейцина при хронических заболеваниях печени и осложняющей их печеночной энцефалопатии основано на незаменимости АРУЦ для организма человека и органоспецифичности метаболических превращений [8]. Показано, что назначение аминозолей, адаптированных к требованиям, предъявляемым для больных со здоровой печенью, может провоцировать негативные изменения обмена аминокислот, которые ведут к развитию печеночной энцефалопатии у лиц с изначально имеющейся печеночной недостаточностью [14]. Поэтому для парентерального введения таким больным разработаны специальные смеси, содержащие повышенные количества АРУЦ (более 50%). Обогащенные АРУЦ растворы аминокислот вводят больным с нарушением функции печени с целью коррекции аминокислотного дисбаланса и связанных с ним нарушений деятельности ЦНС [6, 8, 14].
Исходя из вышеизложенного, актуальной задачей представляется разработка аминозолей на основе АРУЦ, таурина и триптофана, предназначенных для метаболической терапии сочетанного поражения печени и мозга алкогольной этиологии. Целью настоящей работы было исследование влияния аминокислотных композиций, состоящих из АРУЦ, таурина и триптофана на фонд центральных нейроактивных соединений при синдроме отмены этанола.
Материалы и методы
Эксперимент проводили на 24 белых беспородных крысах-самцах (по 6 животных в каждой группе) массой 160-200 г, содержавшихся на стандартном рационе вивария. СОЭ моделировали после принудительной алкоголизации по Majchrowicz [19]. Раствор этанола (25 %) вводили внутрижелудочно в дозе 20 мл/кг на протяжении 7 сут с интервалом 12 ч. Водный раствор смеси, состоявший из лейцина, валина, изолейцина и таурина в соотношении 1 : 0,25 : 0,25 : 0,5 (5 г/л) (композиция I), вводили внутрижелудочно в объеме 20 мл/кг через 30 мин после каждого введения этанола на протяжении всего периода алкоголизации. Аналогичным образом вводили компо-
зицию лейцина, валина, изолейцина, таурина и триптофана в соотношении 1 : 0,25 : 0,25 : 0,5 : 0.4 (30 г/л)(компо-зиция II). Суточная доза препаратов составляла 500 и 600 мг/кг, соответственно, этанола - 7 г/кг массы тела животных. Группа интактного контроля вместо растворов этанола и препаратов получала изотонический раствор в эквиобъемных количествах. Группа сравнения, на которой моделировали только СОЭ, вместо исследуемых композиций получала изотонический раствор в эквиобъем-ных количествах. Срок отмены этанола - 12 ч, последнее введение препаратов осуществляли за 1 ч до декапита-ции животных. Для оценки влияния энтерального введения аминокислотных композиций на показатели, характеризующие основные нейротрансмиттерные системы головного мозга, было исследовано содержание следующих соединений: серотонина (5-НТ), триптофана (Тгр), 5-окситриптофана (5-НТР), 5-оксииндолилуксусной кислоты (5-НІАА); дофамина (DA), тирозина (Туг), диокси-фенилуксусной кислоты (DOPAC), норадреналина (NE), гомованилиновой кислоты (HVA), 3-метокситирамин (3-MT), гамма-аминомасляной кислоты (GABA), аспартата (Asp), глутамата (Glu), глицина (Gly), таурина (Tau) в различных отделах головного мозга (гипоталамус, кора, средний мозг, стриатум). Определение нейроактивных аминокислот и биогенных аминов проводили в хлорнокислых экстрактах отделов головного мозга. Отделы мозга гомогенизировали в соотношении 1 : 10 в 0,2 М HCIO4, содержащей мМ гомотаурина и 1 мкМ ванилиновой кислоты (внутренние стандарты), 20 мг-л ЭДТА и 50 мг/л метабисульфита натрия, затем центрифугировали на холоду при 20000 g 15 мин., после чего супернатант немедленно отделяли от осадка. Для определения биогенных аминов, их предшественников и метаболитов использовался метод ион-парной ВЭЖХ: колонка Сепарон SGX C18, 5 мкм, 3х150 мм с предколонкой 3х50 мм; подвижная фаза: 0,1 М KH2PO4, 17 мМ CH3COOH, pH 3,55, гептил-сульфонат натрия 200 мг/л, октилсульфонат натрия 200 мг/л, ЭДТА 0,1 мМ, с добавлением 11,5 об.% метанола. Скорость потока 0,5 мл/мин, температура колонки 30°С [5]. Детектирование электрохимическое, потенциал рабочего электрода 0,78 В, постоянная времени 1 с. Свободные аминокислоты разделяли методом обращенно-фазной хроматографии на колонке 3х150 мм, заполненной сорбентом Диасорб-130 С16Т (8 тм) (Элсико, Россия) с изократическим элюированием (127 мМ №+ - ацетатный буфер рН 5,9: ацетонитрил: тетрагидрофуран, 85 : 3 : 12) при скорости потока 0,8 мл/мин, температуре 30°С после предколоночной дериватизации с о-фталевым альдегидом и 2-меркаптоэтанолом и флюориметричес-ким детектированием (338/425нм). Воспроизводимость метода 1,5%, максимальная чувствительность 5-10-12 М. Все определения проводили с помощью хроматографической системы Agilent 1100, прием и обработку данных - с помощью программы Agilent ChemStation A 10.1. Статистическую обработку данных ( t-критерий Стьюдента для независимых выборок, корреляционный анализ, дискриминантный анализ), проводили с помощью программного пакета Statistica. Использование дискриминантного анализа обусловлено тем, что данный метод позволяет снижать размерность многомерных статистических данных, а также предоставляет возможность наглядно представить эффекты различных факторов (в данном случае композиции аминокислот) на массив взаимосвязанных показателей. Результаты дискриминантного анализа получены с использованием пошаговой процедуры, граничные значения F-констант Фишера для включения - 2,0; для исключения - 1,9.
Таблица 1 - Содержание биогенных аминов, их предшественников и метаболитов, а также нейроактивных аминокислот в гипоталамусе при СОЭ, а также после введения на его фоне композиций аминокислот
Контроль СОЭ Композиция I Композиция II
VMA 0,215 ± 0,016 0,160 ± 0,0174* 0,312 ± 0,076 0,237 ± 0,019t
Tyr 42,1 ± 3,15 42,7 ± 2,17 28,6 ± 1,20*t 21,6 ± 2,08*tt
NE 4,31 ± 0,381 5,36 ± 0,306 6,93 ± 1,07 4,34 ± 0,339^
E 0,181 ± 0,030 0,143 ± 0,026 0,154 ± 0,025 0,128 ± 0,022
DOPAC 0,451 ± 0,086 0,409 ± 0,044 0,570 ± 0,0431 0,411 ± 0,086
DA 1,860 ± 0,63 1,210 ± 0,097 1,375 ± 0,135 1,119 ± 0,075
5-HIAA 0,174 ± 0,039 0,175 ± 0,018 0,226 ± 0,0231t 0,189 ± 0,019
Trp 7,82 ± 0,470 6,81 ± 0,366 4,96 ± 0,612*t 9,85 ± 0,717*tt
HVA 0,979 ± 0,133 1,370 ± 0,128 0,980 ± 0,242 0,819 ± 0,150t
Asp 1239,6 ± 56,7 1128,6 ± 27,4 1443,1 ± 95,0t 1366,1 ± 50,0t
Glu 8420,0 ± 275,9 8003,6 ± 168,1 9528,6 ± 656,0t 9035,1 ± 197,4t
Asn 178,2 ± 2,97 160,3 ± 4,71* 188,0 ± 8,38t 200,4 ± 12,11
His 72,1 ± 2,89 77,0 ± 2,87 64,77 ± 6,93 46,3 ± 3,09* tt
Gly 899,97 ± 33,05 862,7 ± 14,6 960,2 ± 53,6 835,2 ± 18,3ф
Thr 506,4 ± 30,1 369,2 ± 13,5* 376,6 ± 29,9* 356,2 ± 25,96*
PEA 1386,8 ± 34,2 1451,3 ± 37,8 1723,7 ± 108,0*t 1541,2 ± 44,8*
Arg 89,9 ± 4,80 90,3 ± 2,55 103,1 ± 7,32 79,3 ± 2,58tt
Tau 2335,1 ± 201,6 1960,8 ± 47,5 2359,0 ± 172,0t 2128,3 ± 62,2t
p < 0,05 по отношению: * — к контролю; t — к СОЭ; $ — к СОЭ + Тавамин
Результаты и обсуждение
В гипоталамусе СОЭ сопровождался достоверным снижением уровня VMA Asn и Thr по отношению к контролю (таблица 1). Кроме того, отмечалась тенденция к снижению уровня E, DA и Tau, а также тенденция к росту уровня HVA. Снижение уровня VMA и тенденция к снижению уровня E может свидетельствовать об угнетении активности норадренергической системы. Тенденция к снижению уровня DA может быть обусловлена снижением при СОЭ активности скорость лимитирующего фермента декарбоксилазы ароматических аминокислот [18]. С другой стороны, тенденция к росту уровня HVA позволяет предположить, что при СОЭ в гипоталамусе отмечается усиление деградации медиатора в дофаминовой системе. Тенденция к снижению уровня тормозного медиатора таурина согласуется с представлением об угнетении процессов торможения в головном мозге при СОЭ [17]. Согласно результатам корреляционного анализа, имевшая место в контроле отрицательная корреляция DA/ VMA (r=-0,88; p<0,02) при СОЭ сменилась положительной (r=0,64; p<0,02). Эти данные могут указывать на изменения характера функциональных взаимоотношений между дофаминовой и норадреналиновой нейромедиа-торными системами при СОЭ. Кроме того, имевшая место в контроле отрицательная корреляция 5-HIAA/5-HTP (r=-0,81 ; p<0,05) исчезла и появилась положительная связь 5-HT/5-HIAA HTP (r=0,93; p<0,000), что говорит о влиянии СОЭ на процессы синтеза и деградации в серо-тонинергической системе. Введение композиции I на фоне СОЭ сопровождалось достоверным повышением уровней DOPAC, 5-HIAA, Asp, Glu, Asn, PEA и Tau, а также снижением уровней Trp и Tyr. В целом, наряду с эффектом нормализации уровня ряда показателей (VMA, Asn, Tau), введение композиции I привело к существенным сдвигам в фонде центральных нейроактивных соединений. Снижение уровня триптофана, вероятно, обусловлено снижением его доступности мозгу, поскольку в данной экспериментальной ситуации в плазме крови растет уровень лейцина и валина [4]. Известно, что АРУЦ и ароматические аминокислоты конкурируют за общие транспортные системы [8]. Введение композиции II привело к достоверному росту уровней VMA, Trp, Asp, Glu, Asn, His, Arg, Tau, а также к снижению уровней Tyr, NE,
HVA. В сравнительном аспекте направленность сдвигов в фонде центральных нейроактивных соединений при введении композиции II аналогична эффектам композиции I. Существенным отличием является значительный рост уровня триптофана при введении композиции II, что, очевидно, обусловлено ростом его уровня в плазме за счет экзогенного поступления в составе аминокислотной композиции и, как следствие, улучшение его проникновения через гематоэнцефалический барьер из-за высокого градиента концентрации. Влияние исследуемых ком-
позиций на фонд биогенных аминов и нейроактивных аминокислот в гипоталамусе можно оценить с помощью дискриминантного анализа. По значению показателя лямбда Уилкса (0,001) можно судить о хорошей дискриминации, а на основании классификационной матрицы можно сделать вывод о 100% корректности обучающих выборок для всех групп. Наиболее значимыми соединениями, согласно значению критерия Фишера (вносящими наибольший вклад в общую дисперсию), были уровни следующих соединений: Tyr (F = 21,9), Trp (F = 23,3), Thr (F = 5,0), Arg (F = 3,4), Asp (F = 3,8).
В коре лобной доли больших полушарий СОЭ сопровождался достоверным снижением уровней Trp, 5-HTP, Thr и Tau (таблица 2). Снижение уровня 5-HTP может свидетельствовать о снижении синтеза нейромедиатора в серотонинергической системе при СОЭ вследствие снижения доступности предшественника мозгу, что согласуется с литературными данными [17]. Введение композиции I на фоне СОЭ привело к достоверному снижению уровней VMA, Tyr, MHPG, Trp, His. Наиболее примечательным эффектом композиции I в коре так же, как и в гипоталамусе, было снижение уровня Trp. Введение композиции II привело к достоверному снижению уровней VMA и Tyr, а также к повышению уровней Trp (в 2,1 раза), 5-HT, HVA, His. Повышение уровня 5-HT может
Таблица 2 - Содержание биогенных аминов, их предшественников и метаболитов, а также нейроактивных аминокислот в коре при СОЭ, а также после введения на его фоне композиций аминокислот
Контроль СОЭ Композиция I Композиция II
VMA 0,42 ± 0,039 0,37 ± 0,016 0,30 ± 0,028*t 0,26 ± 0,034*t
Tyr 50,38 ± 5,309 45,87 ± 3,769 25,99 ± 1,338*t 26,63 ± 1,320*t
MHPG 0,15 ± 0,023 0,08 ± 0,023 0,03 ± 0,001*t 0,04 ± 0,007* J
5-HTP 0,17 ± 0,040 0,07 ± 0,011* 0,05 ± 0,004* 0,09 ± 0,010*J
Trp 8,78 ± 1,090 4,98 ± 0,474* 3,63 ± 0,285*t 10,40 ± 0,689tJ
HVA 1,13 ± 0,499 0,50 ± 0,109 0,76 ± 0,283 1,62 ± 0,153tJ
5-HT 0,60 ± 0,025 0,55 ± 0,034 0,58 ± 0,019 0,65 ± 0,025t
Glu 12825,92 ± 336,909 12124,03 ± 364,867 11870,47 ± 242,306* 12380,83 ± 374,569
Asn 167,85 ± 7,281 150,03 ± 6,428 140,87 ± 5,062* 134,82 ± 6,773*
Ser 858,51 ± 18,474 796,41 ± 26,216 732,87 ± 24,188* 732,20 ± 27,214*
His 75,92 ± 3,343 80,05 ± 3,713 52,05 ± 1,011*t 64,37 ± 3,751*tJ
Thr 688,18 ± 33,407 575,17 ± 30,318* 528,19 ± 28,922* 509,77 ± 32,337*
ßAla 22,77 ± 1,237 25,43 ± 0,760 27,27 ± 0,890* 24,83 ± 1,211
Tau 5724,96 ± 118,712 4968,30 ± 190,005* 5173,76 ± 102,099* 5176,30 ± 364,493
свидетельствовать об ускорении синтеза медиатора за счет повышения доступности предшественника. Исходя из классификационной матрицы дискриминантного анализа, можно сделать вывод о 100% корректности обучающих выборок для всех групп, а по значению показателя Лямбда Уилкса (0,000005) можно судить о хорошей дискриминации. Наиболее значимыми соединениями, согласно значению критерия Фишера, были уровни следующих соединений: Trp (F = 23,6), Tyr (F = 24,6), bAla (F = 22,4), His (F = 19,5), Tau (F = 18,3), NE (F = 17), DOPA (F = 16), GABA (F = 15,8), DOPAC (F = 15,3). График проекций отдельных реализаций на плоскость двух главных компонент (корней) показывает, что влияние обеих композиций на фонд исследованных соединений носит нормализующий характер, причем для композиции II эффект нормализации более выражен (рисунок 1).
В стриатуме основным эффектом СОЭ было снижение уровня Trp (таблица 3). Введение композиции I сопровождалось достоверным ростом уровня VMA, по сравнению с СОЭ, а также к росту уровней DA и DOPAC, по сравнению с контролем. Ведение композиции II привело к достоверному повышению уровней VMA, Trp (в 2 раза), HVA, а также к снижению уровней 5-HTP, Gln, Thr. Классификационная матрица дискриминантного анализа говорит о 100% корректности обучающих выборок для всех групп, а по значению показателя лямбда Уилкса (0,00009) можно судить о хорошей дискриминации. Наиболее значимыми соединениями, согласно значению критерия Фишера, были уровни следующих соединений: HVA (F = 31,2), Trp (F = 23,6), 5-HTP (F = 13,7), DOPAC (F = 15,3).
В среднем мозге СОЭ сопровождался достоверным снижением уровней VMA, Trp, HVA, His, Gly, Thr, а также повышением уровня PEA (таблица 4). Введение композиции I приводило к повышению, по сравнению с СОЭ, уровней VMA, MHPG, DA, а также снижению уровней Tyr, Trp, HVA. Повышение уровня DA и снижение уровня HVA может свидетельствовать о снижении скорости синаптического выброса и деградации медиатора в до-фаминергической системе. Введение композиции II привело к достоверному повышению, по отношению к СОЭ, уровней VMA, 5-HTP, Trp, bAla, а также к снижению уровня Tyr, Asp,
Ser, His, Thr, PEA. Повышение уровня Trp и 5-HTP, а также существование положительной корреляционной связи Trp/5-HIAA (r=0,85; p<0,02) и 5-HTP/
5-HIAA (r=0,80; p<0,03) говорит об ускорении оборота медиатора в серото-нинергической системе за счет ускорения как синтеза, так и синаптической деградации. По значению показателя лямбда Уилкса (0,00003) можно судить о хорошей дискриминации, а на основании классификационной матрицы можно сделать вывод о 100% корректности обучающих выборок для всех групп. Наиболее значимыми соединениями, согласно значению критерия Фишера, были уровни следующих соединений: His (F = 26,8), Trp (F =
24,2), 5-HIAA (F = 19,7), Tyr (F = 17),
• Контроль
□ Комп озиция 1
*
i Ï
д 4-+ + F
ии ап
□
■15 -10 -5 0 5 10 15
Рисунок 1 - Расположение реализаций и групп на плоскости двух главных компонент при дискриминантном анализе: кора
Asn (Б = 15,5). График проекций отдельных реализаций на плоскость двух главных компонент показывает, что влияние композиции II на фонд исследованных соединений носит нормализующий характер по первому корню, объясняющему 73% дисперсии (рис. 2).
Результаты настоящего исследования указывают на то, что одним из наиболее отчетливых эффектов СОЭ на фонд нейроактивных аминокислот в головном мозге является снижение уровня триптофана. Уровень триптофана в головном мозге является ключевой детерминантой скорости синтеза нейромедиатора в серотонинерги-
Таблица 3 - Содержание биогенных аминов, их предшественников и метаболитов, а также нейроактивных аминокислот в стриатуме при СОЭ, а также после введения на его фоне композиций аминокислот
Контроль СОЭ Композиция I Композиция II
VMA 0,18 ± 0,012 0,17 ± 0,014 0,32 ± 0,035*| 0,290 ± 0,021*|
5-HTP 0,22 ± 0,034 0,20 ± 0,023 0,22 ± 0,042 0,102 ± 0,016*tí
DOPAC 1,15 ± 0,258 1,81 ± 0,323 1,89 ± 0,171* 1,447 ± 0,301
DA 21,32 ± 2,614 30,79 ± 4,066 35,37 ± 4,322* 22,595 ± 2,919J
5-HIAA 0,17 ± 0,035 0,12 ± 0,019 0,15 ± 0,026 0,200 ± 0,019|
Trp 10,01 ± 0,757 7,17 ± 0,753* 6,12 ± 0,408* 14,259 ± 0,974*tí
HVA 1,80 ± 0,112 1,23 ± 0,233 1,54 ± 0,351 4,538 ± 0,282*tí
Gln 5841,74 ± 404,323 5855,45 ± 296,963 5617,40 ± 177,740 4643,8 ± 305,6*tí
Thr 673,52 ± 49,530 593,31 ± 28,067 581,68 ± 38,623 427,383±37,789*tí
Arg 110,14 ± 5,301 97,04 ± 6,148 107,18 ± 5,013 90,183 ± 4,049*1
Tau 6767,16 ± 645,173 7018,75 ± 308,980 7916,73 ± 453,337 5948,457±732,593J
Таблица 4 - Содержание биогенных аминов, их предшественников и метаболитов, а также нейроактивных аминокислот в среднем мозге при СОЭ, а также после введения на его фоне композиций аминокислот
Контроль СОЭ Композиция I Композиция II
VMA 0,228 ± 0,021 0,108 ± 0,007* 0,219 ± 0,031| 0,184 ± 0,008|
Tyr 33,800 ± 2,046 34,019 ± 1,884 24,409 ± 1,041*| 19,284 ± 1,248*tí
MHPG 0,023 ± 0,002 0,025 ± 0,004 0,050 ± 0,008*| 0,048 ± 0,010
5-HTP 0,089 ± 0,006 0,066 ± 0,008 0,052 ± 0,006* 0,090 ± 0,007|J
DA 0,858 ± 0,079 0,861 ± 0,063 1,251 ± 0,055*| 1,009 ± 0,049J
5-HIAA 0,198 ± 0,023 0,165 ± 0,016 0,165 ± 0,017 0,178 ± 0,023
Trp 7,958 ± 0,413 5,909 ± 0,367* 4,090 ± 0,258*| 9,003 ± 0,654|J
HVA 1,155 ± 0,053 0,737 ± 0,066* 0,452 ± 0,096*| 0,758 ± 0,086* J
Asp 1377,609 ± 31,239 1409,800 ± 35,309 1382,566 ± 41,455 1273,513 ± 29,213*|
Glu 7143,797 ± 255,025 7590,788 ± 157,367 8340,431 ± 678,196 6785,2 ± 181,2|J
Asn 107,503 ± 3,223 115,986 ± 2,530 125,424 ± 4,743* 106,363 ± 4,662J
Ser 345,489 ± 8,545 348,851 ± 13,868 397,489 ± 47,424 289,965 ± 14,246*|
His 62,757 ± 1,817 51,183 ± 2,671* 25,844 ± 4,835*| 17,902 ± 0,599*|
Gly 1356,381 ± 30,840 1283,480 ± 16,154* 1186,603 ± 81,175 1378,324 ± 270,496
Thr 468,814 ± 13,197 382,879 ± 21,174* 348,717 ± 16,896* 264,604 ± 23,821|J
PEA 894,068 ± 23,347 979,309 ± 27,736* 993,060 ± 62,241 849,504 ± 45,400|
ßAla 60,765 ± 2,143 55,681 ± 1,336 58,761 ± 5,304 75,837 ± 3,871*tí
Tau 1899,602 ± 20,435 1752,671 ± 71,341 2369,661 ± 334,615 1665,243 ± 79,084*
• • > +++
♦ □ □.
С
* Контроль + СОЭ £,
П Композиция л Композиция 1
•25 -20 -15 -10 -5 0 5 10 15 20
Рисунок 2 - Расположение реализаций и групп на плоскости двух главных компонент при дискриминантном анализе: средний мозг
ческой системе, поскольку при его снижении уменьшается насыщение субстратом скорость-лимитирующего фермента этого синтеза триптофан гидроксилазы [15]. Доступность триптофана мозгу определяется тремя основными факторами: активностью печеночной триптофан пирролазы, уровнем связывания триптофана белками плазмы, а также степенью конкуренции триптофана с другими аминокислотами (Val, Leu, ILe, Phe, Tyr) за общую систему транспорта в головной мозг [21]. Снижение доступности триптофана при СОЭ может быть обусловлено снижением его уровня в плазме из-за повышения активности печеночной триптофан пирролазы, индуцированной повышением уровня кортизола [15]. Введение композиции I приводило к еще большему, по сравнению с СОЭ, снижению доступности триптофана, очевидно, из-за его конкуренции с АРУЦ за общие системы транспорта в мозг. В этой связи с целью увеличения доступности предшественника серотонина в головном мозге при СОЭ представляется целесообразным включение триптофана в аминокислотную композицию, состоящую из АРУЦ и таурина.
Таким образом, основными эффектами СОЭ являются снижение уровней катехоламинов и таурина в гипоталамусе, а также снижение серотонинергической активности в коре, стриатуме и среднем мозге преимущественно за счет снижения доступности предшественника нейромедиатора. Введение композиции I наряду с нормализацией уровня некоторых нейроактивных соединений сопровождалось дополнительным снижением уровня триптофана во всех исследованных отделах мозга. Введение композиции II привело к значительному повышению уровня триптофана во всех исследованных отделах мозга, а также к повышению серотонинергической активности в коре и среднем мозге. Актуальной задачей дальнейших исследований является всестороннее изучение обоснованности включения триптофана в состав аминозолей, предназначенных для купирования алкогольного абстинентного синдрома.
Литература
1. Влияние аминокислот с разветвленной углеводородной цепью, таурина и триптофана на содержание свободных аминокислот в плазме крови и печени крыс при синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский [и др.] // Вести национальной Академии Наук Беларуси. - 2008. - №2. - С. 66-71.
2. Влияние смеси аминокислот с разветвленной углеводородной цепью, таурина и триптофана на структуру печени и фонд свободных аминокислот у крыс при субхронической алкогольной
интоксикации и синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский [и др.] // Новости науки и техники. Сер. Мед. Вып. Алкогольная болезнь / ВИНИТИ. - 2001. - №12. - С. 4-10.
3. Влияние триптофана и таурина на активность центральных нейротрансмиттерных систем при синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский [и др.] // Материалы научно-практической конференции, посвященной 40-летию ГрГМУ. Гродно, 1998. - С. 49-50.
4. Влияние триптофана и таурина на формирование фонда свободных аминокислот в плазме крови при синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский [и др.] // Материалы научно-практической конференции, посвященной 40-летию ГрГМУ. Гродно, 1998.
- С. 50-51.
5. Дорошенко, Е.М. Авторефер. дис. канд. биол. наук. Минск, 1 994.
6. Козловский, А.В. Нарушения обмена аминокислот при алкоголизме / А.В. Козловский, Ю.Е. Разводовский, С.Ю. Островский // Материалы научно-практической конференции, посвященной 40-летию ГрГМУ. - Гродно, 1998. - С. 37.
7. Нефедов, Л.И. Биологическая роль таурина / Л.И. Нефедов // Вести АН Беларуси. - 1992. - №3-4. - С. 99-106.
8 . Островский, Ю.М. Аминокислоты в патогенезе, диагностике и лечении алкоголизма / Ю.М. Островский, С.Ю. Островский. Минск. Наука и техника, 1995. - С. 278.
9. Применение таурина в комплексном лечении алкоголизма / Ю.Е. Разводовский [и др.] // Актуальные вопросы современной медицины. - Гродно, 2002. - С. 327-330.
10. Разводовский, Ю.Е. Влияние L-триптофана на продолжительность этанол-индуцированного сна / Ю.Е. Разводовский // Материалы научно-практической конференции молодых ученых и студентов, посвященной памяти академика Ю.М. Островского.
- Гродно, 2003. - С. 185.
11. Разводовский, Ю.Е. Влияние L-триптофана на фонд центральных нейроактивных соединений при синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский, Е.М. Дорошенко // Нейрохимия. - 2004.
- Том 21. - №1. - С. 44-51.
12. Разводовский, Ю.Е. Влияние таурина на содержание в ЦНС нейроактивных соединений при синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский, Е.М. Дорошенко // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2007. - Том 70. - №5. - С. 38-43.
1 3 . Смирнов, В.Ю. Влияние таурина на фонд свободных аминокислот при синдроме отмены этанола / В.Ю. Смирнов, Ю.Е. Разводовский, Е.М. Дорошенко // Журнал ГрГМУ. - 2004. - №1. -С. 24-26.
14. Шейбак, В.М. Обмен свободных аминокислот и кофер-мента А при алкогольной интоксикации / В.М. Шейбак. - Гродно, 1998. - С. 152.
15. Badawy, A.A. Tryptophan metabolism in alcoholism / A.A. Badawy // Adv. Exp. Med. Biol. - 1999. - Vol. 467. - P. 265-272.
16. Bell, C. Tryptophan depletion and its implications for psychiatry / C. Bell, J. Abrams, D. Nutt // British Journal of Psychiatry.
- 2001. - Vol. 178. - P. 399-405.
17. Esel, E. Neurobiology of alcohol withdrawal: inhibitory and excitatory neurotransmitters. / E, Esel // Turkish Journal of Psychiatry.
- 2006. - Vol. 2, N2. - P. 1-9.
1 8 . Littleton, J. Neurochemical mechanisms underlying alcohol
withdrawal. / J. Littleton // Alcohol Health & Research World. -1998. - Vol. 22. - P. 13-24.
19. Majchrowicz, E. Animal models in alcohol research / E. Majchrowicz, W.A. Hunt; eds. K. Eriksson, J.D. Sinclair, K. Kiianmaa.
- N.Y.:L., 1980. - P. 419-424.
20. Razvodovsky, Y.E. Effect of tryptophan on the pool of central neuroactive compounds after ethanol withdrawal. / Y. E. Razvodovsky, Ye. M. Doroshenko // European Neuropsychopharmacology. 2003. - Vol. 13 (Suppl. 1). - P 37.
21 . Tryptophan metabolism in alcoholism. Tryptophan but not excitatory amino acid availability to the brain is increased before the appearance of the alcohol-withdrawal syndrome in men / A.A. Badawy [et al.] // Alcohol and Alcoholism. - 1998. - Vol. 34, N4. - P 616625.
Поступила 23.03.09
5 0
