CC BY
14
Науковий вкник Л^вського нацюнального ушверситету ветеринарно! медицини та бютехнологш iMeHi С.З. Гжицького.
CepiH: Ветеринарнi науки
Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies.
Series: Veterinary sciences
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
doi: 10.32718/nvlvet9614 http://nvlvet.com.ua
UDC 619:614.48
Determination of the virucidal properties of the new biocide "DezSan"
O.L. Nechyporenko, A.V. Berezovskyy, T.I. Fotina, R.V. Petrov
Sumy National Agrarian University, Sumy, Ukraine
Article info
Received 08.10.2019 Received in revised form
08.11.2019 Accepted 11.11.2019
Sumy National Agrarian University, G. Kondrat'eva, Str., 160, Sumy, 40000, Ukraine. Tel.: +38-095-495-29-33 E-mail.: [email protected]
Nechyporenko, O.L., Berezovskyy, A. V., Fotina, T.I., & Petrov, R.V. (2019). Determination of the virucidal properties of the new biocide "DezSan". Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary sciences, 21(96), 81-85. doi: 10.32718/nvlvet9614
The high concentration offarm birds in a limited area creates favorable conditions for the spread of viral diseases. In this regard, the veterinary service is faced with the task ofpreventing the outbreak of infectious diseases of the poultry and the further spread of the disease. For this purpose a complex of antiepizo-otic measures is carried out, the key point of which is the disinfection of poultry buildings, equipment, containers, inventory, etc. Industrial poultry is constantly in need of the latest modern disinfectants, which will have the following properties: high biocidal capacity, prolonged action, reduced aggressiveness to treated surfaces, safety for personnel and the environment, ease of use, moderate price. Over time, microorganisms can create resistance to disinfectants. In order to prevent this phenomenon, a permanent rotation of disinfestations at a poultry enterprise, which will be created on the basis of various active substances, is necessary. The goal of the work. Investigate the virilidine action of the new disinfectant "DezSan " for RNA and DNA-containing viruses. Materials and methods of research. To verify the virilidic effect, two series of experiments were carried out using the ducts of hepatitis RNA and the DNA-virus of smallpox of the pox. To determine the effectiveness of the virilidic concentration of "DezSan" in relation to the bird pox virus -DNA-content was cultured on chorionic-alantium shell in the 10-12 day chick embryos and to the hepatitis virus duckling virus-RNA-purposive, a suspension of the virulent material that was obtained after propagation virus in primary cultures of dactylon embryo cells. For the experiment, 10 mattresses were used. The virus content of the liquid was mixed with equal volume of disinfectant solution "DezSan", withstand 15, 30 and 60 minutes. In this case, used 0.1%, 0.25%, 0.5% and 1% solution of disinfectant "DezSan". The effectiveness of decontamination of test object surfaces from the pox virus and the hepatitis virus ducts disinfectant was checked in the following order: on a sterilized surface of test objects, a sterile pipette was applied to a suspension of 1 to 2 cm3 of the virus. Contaminated test objects were left in the cuvettes horizontally and vertically, dried for 1-2 hours and with the help of the sprayer, the wetted surface was treated with an experimental disinfectant solution, taking into account the concentration, exposure and amount of disinfectant used. Results of research and discussion. "DezSan" in a concentration of 0.1% after 15 minutes. Inactivated hepatitis virus ducts by 46.3%; after 30 minutes - by 91.1%, and in an hour - by 94.1%. At 0.25% concentration of the solution at exposure for 15 minutes. the death of the virus was observed at 99.5%. 30 minutes later and 1 hour - the virus of hepatitis ducklings has been neutralized by 100%. Complete inactivation of the virus in 15 minutes was carried out in the treatment of test surfaces of 0.5% and 1% solution "DezSan". In the washings taken after 30 and 60 minutes from surfaces treated with 0.5% and 1.0% solution of disinfectant, changes in test systems were not detected. 0.1% solution of disinfectant "DezSan" after 15 minutes. inactivated viral particles by only 45.7%. 30 minutes later the virus was already eradicated by 93.0%, and after 1 hour - by 96.0%. A solution of "DezSan" at a concentration of 0.25% after 15 min. destroying 99.6% of viral particles. And after 30 minutes and 1 year completely inactivated the virus. Thus, the experimental means "DezSan" in the concentration of 0.5% and 1.0% showed a pronounced virilidine activity and is capable of within 30 and 60 minutes. completely destroy the virus of hepatitis Ducklings. At 0.25% of the solution "DezSan" after 15 minutes. 99.7% of the viral parasites of the pox had been disposed of. And after 30 minutes and for 1 hour, the vehicle at the same concentration completely inactivated the virus. It should be noted that in the concentration of 0.5% and 1.0%, "DezSan" had a pronounced virilidine activity and could completely inactivate the pox virus pox during all controlled periods. Conclusions and prospects for further research. It has been proved that the "DezSan" biocide has expressed virilidic properties in relation to the RNA-containing virus of infectious hepatitis ducts during
exposure for 15 minutes at concentrations of 0.25% and above. It was found that 0.25% solution of disinfectant "Dezsan" at exposures of 30 and more minutes completely kills the DNA - containing pox virus of .smallpox. The drug "DezSan" can be used for disinfection measures in poultry farms with viral diseases, as it is effective against RNA and DNA-containing viruses. In future, the sporocidal properties of the biocide "DezSan" will be studied.
Key words: poultry breeding, disinfectant, biocid "DezSan", virucidity, disinfection, viruses.
Визначення вiрулiцидних властивостей нового бтциду "ДезСан"
О.Л. Нечипоренко, А.В. Березовський, Т.1. Фотша, Р.В. Петров
Сумський нацюнальний аграрний унгверситет, м. Суми, Украгна
В cmammi наведент дат до^дження sipyni-yudHux властивостей нового вШчизняного бюциду "ДезСан ". Промислове nmaxie-ництво постйно потребуе новШтх сучасних дезтфекцшних зacобiв, як будуть володти такими властивостями: висока боцид-на здаттсть, пролонгована дiя, знижена агресивтсть до поверхонь, що оброблюються, безпечтсть для персоналу та навколиш-нього середовища, простота застосування, помipнa цта. З часом у мiкpооpгaнiзмiв можливе утворення pезucmенmноcmi до дезт-ф^ючих зacобiв. Щоб запобкти даному явищу необхiднa постшна ротащя деззacобiв на пmaхiвнuчомy пiдпpuемcmвi, що будуть створен на оcновi piзнuх дючих речовин. До^дження проводили в умовах лаборатори "Ветеринарна фармащя " Сумського нащ-онального аграрного утверситету та лаборатори Сумськог Державноi бiологiчноi фабрики. Для пеpевipкu вipyлiцuдноi дп були проведен двi серп доcлiдiв з використанням РНК^русу гепатиту каченят та ДНК^русу вюпи птищ. Визначення ефекmuвноcmi знищення вipycy вкпи птиц дезтфектантом проводили методом знезараження тест-об 'екmiв i суспензтним методом. Доведено, що бюцид "ДезСан " мае виражеш вipyлiцuднi влacmuвоcmi щодо РНК-вмютного вipycy шфекцшного гепатиту каченят при експо-зици 15 хвилин у концентращях 0,25% та вище. Встановлено, що 0,25% розчин дезтфектанту "ДезСан " за експозици 30 та бть-ше хвилин повтстю вбивае ДНК-вмюний вipyc вюпи птищ. Бюцид "ДезСан " може бути використаний при проведенш дезтфекцшних зaходiв в пmaхiвнuчuх господарствах при вipycнuх захворюваннях, осктьки вт ефективний щодо РНК та ДНК-вмюних вipyciв.
Ключовг слова: пmaхiвнuцmво, дезтфектант, бюцид "ДезСан ", вipyлiцuднicmь, дезтфекщя, вipycu.
Вступ
В навколишньому середовищ1 е велика шльшсть р1зних збуднишв, яш здатш викликати захворювання у птищ. При потраплянш в ослаблений або виснаже-ний оргашзм птищ таю мжрооргашзми швидко розм-ножуються, птиця починае хворгги. Небезпечш вони тим, що вщ хворо! особини поступово заражаеться все погол1в'я. Важливо зазначити, що шфекцшш хвороби птищ, до яких належать i в1русш, можуть викликати смертшсть серед птищ до 100% (Karysheva, 2002; Fotina & Vashchyk, 2017; Plys, 2018).
Спалахи шфекцшних хвороб птахiв перюдично виникають в рiзних кра!нах свиу, в тому чи^ i в Укра!ш. Найб№ш небезпечними i поширеними серед вiрусних захворювань е ньюкаслська хвороба, грип, шфекцшний бронхи, шфекцшний ларинготрахе!т, хвороба Гамборо (Verzhykhovskyi et al., 2007). Висока концентрацiя поголiв'я сшьськогосподарсько! птищ на обмеженш територи створюе сприятливi умови для розповсюдження вiрусних захворювань (Verbytskyi et al., 2004). У зв'язку з цим перед ветеринарною службою постае завдання не допустити спалаху шфекцш-них хвороб птицi та подальшого розповсюдження хвороби. Для цього проводиться комплекс протиеш-зоотичних заходiв, ключовим моментом яких е прове-дення дезшфекцп птахiвничих примiщень, обладнан-ня, тари, iнвентарю тощо (Vengerko, 2007; Kolos et al., 2007).
Промислове птахiвництво постiйно потребуе новь тнiх сучасних дезiнфекцiйних засобiв, яш будуть во-лодiти такими властивостями: висока бюцидна здат-
нiсть, пролонгована дiя, знижена агресивнiсть до поверхонь, що оброблюються, безпечшсть для персоналу та навколишнього середовища, простота застосу-вання, помiрна цiна (Verbytskyi et al., 2004; Panikar et al., 2006). З часом у мiкроорганiзмiв можливе утворення резистентносп до дезшф^ючих засобiв. Щоб запоб^и даному явищу необхвдна постiйна ротащя деззасобiв на птахiвничому пiдприемствi, що будуть створеш на основi рiзних дiючих речовин (Denyer & Stewart, 1998).
Мета i завдання дослгдження. Дослвдити вiрулi-цидну дш нового дезшф^ючого бiоциду "ДезСан" щодо РНК та ДНК-вмюних вiрусiв. Для досягнення поставлено! мети необхiдно було виршити так1 завдання:
1. Встановити необхвдну концентрацiю деззасо-бу для шактиваци ДНК та РНК-вмiсних вiрусiв.
2. Визначити експозищю для ефективного зне-шкодження вiрусiв.
3. Надати пропозицп щодо використання бюци-ду "ДезСан" в птахiвничих господарствах для прове-дення дезiнфекцi!.
Матерiал i методи дослвджень
Дослвдження проводили в умовах лаборатори "Ветеринарна фарма^" Сумського нащонального аграрного унiверситету та лаборатори Сумсько! Державно! бiологiчно! фабрики. В сво!х дослiдах ми використали бiоцид "ДезСан" виробництва НВФ "Бровафарма". Основнi дiючi речовини бiоциду: алшлдиметилбензи-ламонш хлорид, октилдецилдиметиламонiю хлорид,
дидецилдиметиламонш хлорид, диоктилдиметиламо-шю хлорид, глутаровий альдепд.
Для перев1рки в1рулщидно! дп провели дв1 серп дослщв з використанням РНК-в1русу гепатиту каче-нят та ДНК- в1русу вюпи птиц (Kotsiumbas et а1., 2006).
Для визначення ефективносп в1рулщидно! конце-нтраци "ДезСан" щодо в1русу вюпи птиц - ДНК-вм1сний культивували на хорюн-аланто!снш оболонш в 10-12-денних курячих ембрюнах та до в1русу гепатиту каченят - РНК-вм1сний використовували суспен-зш в1русовмюного матер1алу, який отримували шсля розмноження в1русу на первинних культурах клггин качиних ембрюнш.
Для дослвду використовували по 10 матращв. Вь русомютку родину зм1шували з р1вним об'емом роз-чину дезшфектанту "ДезСан", витримували по 15, 30 та 60 хв. При цьому використовували 0,1%, 0,25%, 0,5% 1 1% розчини дезшфектанту "ДезСан". Ефектившсть знезараження поверхонь тест-об'екпв ввд в1русу вюпи птиц та в1русу гепатиту каченят дезшфектан-том перев1рялн у такому порядку: на простерил1зова-ну поверхню тест-об'екпв наносили стерильною ш-петкою 1-2 см3 суспензп в1русу. Контамшоваш тест-об'екти залишали в кюветах горизонтально 1 вертикально, тдсушували 1-2 години та за допомогою опри-скувача зволожували поверхню дослвдним дезшф1ку-ючим розчином з урахуванням концентраций експози-ци 1 шлькосп використаного дезшфектанту. Як контроль для обробки тест-об'екпв використовували сте-рильну воду. Через певний час з поверхш тест-об'екпв робили змиви стерильною марлевою сервет-кою з контрольних та дослщних проб. До проби р1ди-ни (10-50 см3) додавали 0,05 М трис-буфер (рН 9,0), в
об'ем1 1-2 см3 i струшували протягом 5 хв. Сумш центрифугували при 1500 об/хв 15-20 хв, надосадову рГдину використовували для визначення залишково! iнерцiйностi. Надосадову рiдину та поживне середо-вище (на основi шактивовано! сироватки кровi велико! рогато! худоби) вносили для визначення цитопа-тично! дi! в моношар культури клiтин. Прояв цитопа-тично! дi! (ЦПД) в моношарi культури клггин мав проявлятись у виглядГ округлення клгган, утворення симпластiв i багатоядерних клпин та появи в них зернистости Стушнь дегенерацп клпин оцiнювали за 4-бальною системою у хрестах: ++++ - деструкцГя вах клгган (клпини вгд'едналися вгд скла i плавають у середовищi); +++ - поряд з повною дегенеращею трапляються окремi живГ неушкодженi клпини; ++ -деструкцiя половини клгган; + - дегенерацiя менше половини клпин. Вгдсутнють дегенерацп - клгшни культури не вгдрГзняються вщ контрольно! (не заражено! вГрусом) культури. Для тдтвердження цитопа-тичного ефекту використовували РН (реакцш нейт-ралГзацп).
Отримаш результати оброблювали статистично з використанням критерш Стьюдента та табличного редактора "Ехсе1".
Результати та Тх обговорення
На першому еташ дослщжень була визначена вь рулщидна дГя бюциду "ДезСан" на вГрус гепатиту каченят (РНК-вмюний). Визначення ефективносп вГрулщидних властивостей "ДезСан" на вГрус гепатиту каченят на рГвш 15-75 пасаж1в проводили на первинних культурах клгган качиних ембрюнш (табл. 1).
Таблиця 1
Ефектившсть шактивацп вГрусу гепатиту каченят за допомогою дезшфектанту "ДезСан" на поверхш тест-об'екпв, % (М ± m, n = 10)
Експозищя _Концентращя засобу "ДезСан", %_
(хв)_0,1_0,25_0,5_1,0
15 46,3 ± 0,2 99,5 ± 0,3** 100 100 30 91,1 ± 1,6 100 100 100 60_94,1 ± 0,4*_100_100_100
Примтка: * - Р <0,05, ** - Р < 0,01
Ефектившсть знешкодження вГрусу гепатиту каченят розчинами "ДезСан" проводили суспензшним методом знезараження тест-об'екпв. ПГд час прове-дення дослгджень була доведена ефектившсть дезшфектанту на вГрус, що був на поверхш тест-об'екпв, змш в культурГ клгган не виявлено. Виходячи з ре-зультапв табл. 1 можна стверджувати, що "ДезСан" в концентраци 0,1% через 15 хв шактивував вГрус гепатиту каченят на 46,3%; через 30 хв - на 91,1%, а через годину - на 94,1%.
При 0,25% концентраци розчину при експозицп 15 хв загибель вГрусу спостерГгали на 99,5%.
Через 30 хв i 1год - вГрус гепатиту каченят був знешкоджений на 100%.
Повна шактивашя вГрусу через 15 хвилин здшс-нювалась при обробш тестових поверхонь 0,5% i 1% розчином "ДезСан". В змивах, яш були взяп через 30 та 60 хвилин з поверхонь, оброблених 0,5% i 1,0% розчином дезшфектанту, змш у тест-системах не ви-являли.
ВГрулщидну концентрашю "ДезСану" для шактивацп вГрусу гепатиту каченят визначали суспензшним методом, зггдно з юнуючою методикою, як тест-системи клпин качиних ембрюшв, в яких вщбувалось розмноження вГрусу гепатиту каченят (табл. 2).
Таблиця 2
1нактиващя Bipycy гепатиту каченят розчинами дезшфектанту (суспензшний метод) "ДезСан" (М ± m, n = 10)
Експозищя, Концентрац1я "ДезСан", %
хв 0,1 0,25 0,5 1
15 109,30 ± 0,18 106,8 ± 0,53 0 0
45,7 ± 0,4* 99,6 ± 0,4** 100 100
108,6 ± 0,62 0 0 0
30 93,0 ± 0,4** 100 100 100
107,2 ± 0,42 0 0 0
60 96,0 ± 0,7** 100 100 100
Примтка: * - Р <0,05, ** - Р < 0,01
Вихгдний титр вгрусу гепатиту каченят 109,3ЕЩ5о/см3; В чисельнику вказана залишкова тфекцшшсть вгрусу в lg ЕЩ^о/см3; В знаменнику - ефектившсть тактиваци вгрусу, %.
Виходячи з даних табл. 2, бачимо, що 0,1% розчин дезшфектанту "ДезСан" через 15 хв шактивував вipy-ст частинки лише на 45,7%. Через 30 хв знешко-дження вipycy вщбувалося уже на 93,0%, а через 1 год. - на 96,0%.
Розчин "ДезСану" у концентраци 0,25% через 15 хв знищував 99,6% вipycних частинок. А через 30 хв та 1 год повнютю шактивував вipyc.
Таким чином, експериментальний зааб "ДезСан" в концентраци 0,5% i 1,0% виявив виражену вipyлiцид-ну активнicть i здатний протягом 30 i 60 хв повшстю знищити вipyc гепатиту каченят.
На другому еташ дослвджень визначали вipyциднy дiю експериментального засобу "ДезСан" на вipyc вicпи птицi (ДНК-вмicний).
З метою визначення ефективно! вipyлiцидноl концентраци "ДезСан" щодо ДНК-вмicного вipycy вicпи птицi культивували його на хорюн-алантоюнш обо-лонцi в 10-12-денних курячих ембpiонах. Визначення ефективноcтi знищення вipycy вicпи птицi дезшфек-тантом проводили методом знезараження тест-об'екпв i cycпензiйним методом згiдно з рекоменда-цiями. Варто зазначити, що в результата проведених доcлiджень змш в кyльтypi клiтин не виявлено. Це сввдчить про ефективнicть дезшфекцшного засобу на вipyc, який мютився на повеpхнi тест-об'екту (табл. 3).
Таблиця 3
Показники ефективноcтi шактиваци вipycy вюпи птицi за допомогою дезiнфектантy "ДезСан" на поверхш тест-об'eктiв (М ± m, n = 10)
Експозищя _Концентрац1я дезшфектанту, %_
(хв)_01_025_0,5_10_
15 45,4% ± 0,2 98,3% ± 0,2* 100% 100% 30 90,7% ± 1,4 100% 100% 100% 60_95,1% ± 0,5*_100%_100%_100%
Примтка: * - Р < 0,05
З даних табл. 3. видно, що "ДезСан" в 0,1% концентраци через 15 хв шактивував вipyc лише на 45,4%. Проте через 30 хв ефектившсть дезшфектанту зросла до 90,7%, а через 1 годину - до 95,1%. При обробщ тест-об'екпв 0,25% розчином "ДезСан" через 15 хв спостерпали загибель вipycy на 98,3%, а через 30 хв i 1 годину - вipyc вюпи птиц знешкоджений на 100%. При обробщ поверхонь 0,5% i 1% розчином "ДезСану" вже через 15 хв вщбувалась повна шакти-вацiя вipycy. У змивах, з оброблених 0,5% та 1% розчинами поверхонь, яш були взяп через 30 хв и 1 год, змш у тест-системах (хорюн-алантоюш оболонки в 10-12-денних курячих ембрюнах) не виявлено.
При проведенш дослщжень суспензшним методом ставили за мету визначити ефективну вipyлiциднy концентрацш дезшфшуючого засобу "ДезСан" для шактиваци вipycy вюпи птищ. В дослвдженнях визначали вipyциднy активнicть таких концентрацш дезш-
фектанту "ДезСан": 0,1%, 0,25%, 0,5% i 1,0%.
Для пвдтвердження цитопатичного ефекту викори-стовували РН (реакц1ю нейтpалiзацil).
Виходячи з даних табл. 4 можна зробити висновок, що 0,1% розчин дезшфектанту "ДезСан" через 15 хв шактивував лише на 44,3% вipycнi часточки. В тш же концентраци через 30 хв "ДезСан" уже шактивував вipyc на 90,1%, а через 1 год - на 97,1%.
При ди 0,25% розчину "ДезСан" через 15 хв ввдбу-валося знешкодження 99,7% вipycних часточок вюпи птищ. А через 30 хв та 1 годину зааб в тш же концентраций, повнютю шактивував вipyc. Варто зазначити, що в концентраци 0,5% та 1,0% "ДезСан" мав вира-жену вipyлiциднy активнють i ми протягом вах конт-рольованих теpмiнiв повнicтю шактивувати вipyc вicпи птицi.
Таблиця 4
1нактивац1я Bipycy вюпи птиц за дп дезшфектанту (суспензшний метод) "ДезСан" (М ± m, n = 10)
Експозищя Концентращя "ДезСан", %
(хв.) 0,1 0,25 0,5 1
15 109,25 ± 0,15 105,8 ± 0,45 0 0
44,3 ± 0,4* 99,7 ± 0,6* 100 100
108,56 ± 0,39 0 0 0
90,1 ± 0,4* 100 100 100
106,4 ± 0,65 0 0 0
97,1 ± 0,5* 100 100 100
Примтка: * - Р < 0,05
BuxidHm титр eipycy eicnu птиц 109,5ЕЩ5о/см3; В чисельнику вказана залишкова терцшшсть вiрусу в lg ЕЩ50/СМ3; В знаменнику - ефективтсть тактиваци eipycy, %.
При аналiзi даних, отриманих за двома piзними методиками, можна стверджувати, що 0,25% розчин дезшфектанту "ДезСан" за експозицп 30 та бшьше хвилин повнютю вбивае вipyc вюпи птицi.
Таким чином, доведено, що бюцид "ДезСан" мае виpаженi вipyлiциднi влаcтивоcтi щодо РНК- та ДНК-вмicних вipyciв у концентpацiях 0,25% та вище.
Висновки
1. Доведено, що бюцид "ДезСан" мае виражеш вipyлiциднi влаcтивоcтi щодо РНК-вмicного вipycy iнфекцiйного гепатиту каченят при експозицп 15 хвилин у концентра^х 0,25% та вище.
2. Встановлено, що 0,25% розчин дезшфектанту "ДезСан" за експозицп 30 та бшьше хвилин повшстю вбивае ДНК^рус вюпи шиш.
3. Бюцид "ДезСан" може бути використаний при проведенш дезшфекцшних заходiв в птахiвничих господарствах при вipycних захворюваннях, оcкiльки вiн ефективний щодо РНК та ДНК-вмюних вipyciв.
Перспективи подальших до^джень. В подаль-шому будуть вивченi cпоpоциднi властивосп бiоцидy "ДезСан".
References
Denyer, S.P., & Stewart, G.S.A.B. (1998). Mechanisms of action of disinfectants. Int Biodeter Biodegr, 41(3-4), 261-268. doi: 10.1016/S0964-8305(98)00023-7. Fotina, T., & Vashchyk, Y. (2017). Comparative evaluation of effectiveness of preparations "Saroflox" and enrofloxacin towards to the pathogens of poultry's bacterial diseases. Scientific Messenger of LNU of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series:
Veterinary Sciences, 19(77), 143-147. doi: 10.15421/nvlvet7731.
Karysheva, A.F. (2002). Spetsialna epizootolohiia: Pidruchnyk. K.: Vyshcha osvita (in Ukrainian).
Kolos, Yu., Stets, V., & Tytarenko, V. (2007). Rol sanitarnoi obrobky - dezinfektsii u pidtrymanni stabilnoho epizootychnoho blahopoluchchia u ptakhivnytstvi. Veterynarna medytsyna Ukrainy, 12, 28-30 (in Ukrainian).
Kotsiumbas, I.Ia., Malyk, O.H., & Patereha, I.P. (2006). Doklinichni doslidzhennia veterynarnykh likarskykh zasobiv. Lviv: Triada plius (in Ukrainian).
Panikar, I.I., Reshetylo, O.I., & Panikar, I.I. (2006). Vyrobnychi vyprobuvannia novitnikh dezinfektantiv u ptakhivnytstvi. Visnyk Sum. NAU. Sumy, 1-2(15-16), 147-149 (in Ukrainian).
Plys, V. (2018). The influence of symbionts of microbiocenosis on the indicators cytohemopoez at mixed pasteurellosis and ascaridosis disease bird. Scientific Messenger of LNU of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary Sciences, 20(83), 25-29. doi: 10.15421/nvlvet8305. "
Vengerko, L.A. (2007). Veterinarno-sanitarnye meroprijatija po zashhite pticevodcheskih hozjajstv ot zanosa vozbuditelej zaraznyh boleznej. Efektivne ptahivnictvo. 6(30), 5-8. https://lib.dsau.dp.ua/ book/37961?lang=ua (in Russian).
Verbytskyi, P.I., Dostoievskyi, P.P., & Busol, V.O. (2004). Dovidnyk likaria veterynarnoi medytsyny. K.: Urozhai (in Ukrainian).
Verzhykhovskyi, O., Kolos, Yu., Tytarenko, V., & Stets, V. (2007). Epizootychnyi stan ptakhivnytstva v Ukraini. Vet. medytsyna Ukrainy, 6, 8-10 (in Ukrainian).
