Визначення мінімальної інгібуючої дози нової похідної сполуки 1,2,4-триазолу гк-96 до бактеріальних тест культур

Filatova G.V.

УДК: 619:615.26

Фшатова Г.В. ©

Лугансъкий нацюналъний аграрнийутеерситет

ВИЗНАЧЕННЯ М1Н1МАЛЬН011НГ1БУЮЧ01ДОЗИ HOBOI П0Х1ДН01 СПОЛУКИ 1,2,4-ТРИАЗОЛУ ГК-96 ДО БАКТЕР1АЛЬНИХ ТЕСТ

КУЛЬТУР

Визначено м1шмалъну тг1буючу дозу похгдногсполуки 1,2,4-триазолу ГК-96 до тест-культур Salmonella typhimorium 144, Esherichia coli ATCC № 3912/4, Klebsiella pneumonia K 56 ma Staphylococcus aureus ATCC№ 25923 у nopiennmi з цефтриаксоном за методом сертнихрозведенъ.

Ключое1 слова: похгднг 1,2,4-триазолу, Salmonella typhimorium 144, Esherichia coli ATCC № 3912/4, Klebsiella pneumonia K 56 ma Staphylococcus aureus ATCC№ 25923,цефтриаксон, ДМФА.

Вступ. Похщш 1,2,4-триазолу зумовлюють протибактер1альну, протигрибкову, протималяршну актившсть, а також викликають шпбщш росту м1кроорганизм1в [5,1].

За даними Вологшо! I.B. i3 250 вивчених сполук, що е пох1дними класу каркасних гетероцикл1в груп аза- (моно-, д1 -,три -,тетра - азаадаманташв), азагомо - (д1- , три-, тетра-азагомоадаманташв) i азад1гомоадамантан1в (тетраазад1гомоадамантан1в) i3 р1зними зам1нниками у б1лковому ланцюгу, бактерицидна активн1сть у концентрац11 10 мг/см3 була встановлена у 8 % дослщжуваних сполук. Найб1льш перспективними виявилися сполуки 3-[4-(4-Phenyl-5-thioxo-4,5-dihydro-1H-[1,2,4] triazol-3yl-methoxy)-phenyl]-2-phenyl-3H -guinazolin -4- one; 3 - {4- [4-(4-Fluoro-phenyl)-5 -thioxo-4,5 -dihydro-1H-[1,2,4]triazol-3-yl-methoxy]-phenyl}-2-phenyl-3H-guinazolin-4-one;3-{4-[4-(4-Nitro-phenyl)-)-5-thioxo-4,5-dihydro-1H=[1,2,4]triazol-3-yl-methoxy]- phenyl}-2-phenyl-3H -guinazolin -4- one; 3-{4-[4-2,(4-Difluoro-phenyl)-5-thioxo-4,5-dihydro-1H-[1,2,4]triazol-3-yl-ethoxy]- phenyl}-2- phenyl-3H -guinazolin -4- one [2].

Матер1ал i методи досл1джень. Визначали антибактер1альну активн1сть ново! сполуки ГК-96 у р1зних концентрац1ях, що е похщним 1,2,4-триазолу. Визначення чутливост1 Salmonella typhimorium 144, Esherichia coli ATCC № 3912/4, Klebsiella pneumonia K 56 та Staphylococcus aureus ATCC№ 25923до вказаних сполук проводили методом сершних подвшних розведень препарат1в у м'ясопептонному бульйон1 (МПБ) [3,4]. Метод сершних розведень у бульйош супроводжувався контролем росту тест культур у МПБ без сполуки ГК-96, ДМФА (диметилформамщ)та антибютика цефтриаксон. Чистоту cycnemii' мжрооргашзм1в оц1нювали вис1вом на поживн1 середовища i3 наступною

- науковий KepiBHHK, кандидат ветеринарних наук, доцент ЛНАУ 338

мжроскотею та фарбуванням за Грамом. Концентраци дослщних речовин занесен! до таблиц! 1.

Таблиця 1

Концентрацй' дослщних речовин та мжрооргашзм1в

Розведення речовин

Номер проб1рки Мжрооргашзми, 0,5 MF ДМФА ГК-96 Цефтриаксон

1:40 1:40 50 ОД

1 1,5х108 1 20 1 20 1 25

2 1,5х108 1 10 1 10 1 12,5

3 1,5х108 1 5 1 5 1 6,25

4 1,5х108 1 2,5 1 2,5 1 3,125

5 1,5х108 1 1,25 1 1,25 1 1,562

6 1,5х108 1 0,625 1 0,625 1 0,781

7 1,5х108 1 0,3125 1 0,3125 1 0,399

8 1,5х108 1 0,156 1 0,156 1 0,195

9 1,5х108 1 0,078 1 0,078 1 0,097

10 1,5х108 1 0,039 1 0,039 1 0,048

Пор1вняльну оцшку чутливост1 мжрооргашзм1в до дослщжуваних сполук проводили за иоказником мшмально! бактерицидно! концентрацй (МБцК) та мЫмально! шпбуючо! концентрацй (MIK). Концентращя 12-годинно! бульйонно! культури музейних штам1в становила 1,5х108 колошеутворюючих одиниць КУО/см, що при денатометричному контрол1 вщповщае стандарту мутност1 0,5 заМакФарландом.

Брутто-формула сполуки rK-96-(carboxymethyl)-4-((5-nitrofuran-2-yl)methyleneamino)-4#-1,2,4-triazol-1-ium chloride.

N-N-СН2—СООН

• СГ

О

Т ft ^ Формула 1

N=CH~4 >-no2

о 2

Брутто-формула диметилформам1ду (ДМФА), що е розчинником для ГК-96): C3H7NO

Формула 2

Цефтриаксон - антибютик цефалоспоринового ряду III поколшня, у нормальних умовах - бший або бшо-жовтий кристал1чний порошок, легкорозчинний у вод1 Брутто-формула: (Z)-(6R,7R)-7-[2-2-aмiнo-1,3-тiaзoл-4-ш)-2-(метоксшмшо) ацетамщо]-8-оксо-3-[(2,5-дигщро-2-метил-6-оксид о-5-оксо-1,2,4-триазин-3-ш) тюметил]-5-т1а-1-азабщикло[4.2.0]окт-2-ене-2-карбоксилату динатр1ева ешь

Формула 3

339

Результата дослщження. Врахування результате дослщу проводилося теля оцшювання контролю дослщних шокулюм1в, яю знаходилися в умовах з низькою температурою (t+4°C) та в умовах термостату (t+37°C) Результати з внзначення чутлнвост1 мшрооргашзм1в до дослщних речовнн наведен! в таблиц! 2.

Таблиця 2

Чутливост1 музейних штам1в мжрооргашзм1в до ГК-96, ДМФА та

цефтриаксону

Ha3Ba Номер проб1рки

Ky^bTypH Ta AOC^iAHOi cno^yKH 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Salmonella typh. - - - - - + ++ ++ ++ ++

144+rK-96

E.coli ATCC+ rK-96 - - - - - + ++ +++ +++ +++

Klebsiella pneumonia - - - - - + ++ +++ +++ +++

K 56+

TK-96

Klebsiella pneumonia - - + ++ +++ +++ +++ +++ +++ +++

K56+

Staph. aureus ATCC№ - - - - - - - - - -

25923+ TK-96

Staph. aureus ATCC№ - - + ++ +++ +++ +++ +++ +++ +++

25923+ flM®A

Salmonella typh. 144+ - - + ++ +++ +++ +++ +++ +++ +++

E.coli ATCC+ flM®A - - - ++ +++ +++ +++ +++ +++ +++

Klebsiella pneumonia - - - - - - - - - -

K56+ ueTpnaKCOH

Staph. aureus ATCC№ - - - - - - - - - -

25923+ ueTpnaKCOH

Примггки: - прозора рвдина; ++ - помутншня та опалесценщя; +++ - стшке помутншня та опалесценщя з випаданням осаду

Ощнка впливу сполуки ГК-96 на музейш штами деяких м1крооргашзм1в свщчить про р1зний ступ1нь бактерицидно! активное^ до вибраних тест культур.

Найбшьш чутливою до дп сполуки ГК-96 в yeix досл1джуваних концентращях (1:20-1:0,3125) виявилася культура Staphylococcus aureus ATCC№ 25923. Аналог1чну д1ю викликав антиб1отик цефтриаксон, який вплинув бактерицидно у вибраних концентращях.

Бшьш низькою виявилася чутливкть Klebsiella pneumonia K 56 та Esherichia coli ATCC № 3912/4 до ГК-96. При цьому бактерицидний ефект в!д дп ГК-96 в1дбувся до розведення 1:0,625 включно. Поряд з цим встановлено б1льш високу чутлив1сть Klebsiella pneumonia K 56 до цефтриаксону, на що

340

вказуе повна вщсутшсть росту дано! культури при культивуванш з yciMa дослщними концентращями антибютика (25 ОД - 0,048 ОД ).

Бактерюстатично сполука ГК-96 вплинула на picT Esherichia coli ATCC № 3912/4 та Klebsiella pneumonia K 56 у розведенш 1:0,3125. Повну затримку росту Salmonella typhimorium 144 забезпечуе ГК-96 до розведення 1:0,3125 та бактерюстатичну дш - до розведення 1:0,039. Пщтвердженням бактерицидно! та бактерюстатично! ди ГК-96 та дослщних речовин пор1вняння була вщсутшсть росту мшрооргашзм1в при nepecißi з npoöipoK, в яких не виявили росту або спостер1гали слабку опалесценцш.

Результата контрольних вис1в1в на МПА та МПБ сшвпадали з результатами основного дослщу, що вказуе на нездатшсть до росту теля культивування у присутност1 ГК-96 та цефтриаксону, у вщповщних розведеннях.

Додатковий контроль вщсутност1 росту тест культур у мазках, пофарбованих за Грамом, також пщтвердив бактерюстатичний або бактерицидний ефект, зумовлений ГК-96 та антибютиком цефтриаксоном.

У виавах тест культур ¿з розведеннями ДМФА (в якост1 контролю ди розчинника сполуки ГК-96) виявляли бактерицидну його дш у розведенш 1:20 та 1:10 по вщношенню до тест культур.

Висновки.

1. Встановлено, що дослщна сполука ГК - 96 мае досить висою iHri6yro4i властивост1 проти тест культури Staphylococcus aureus ATCC№ 25923 в концентраци сполуки 0,039% сер1йного розведення, що е аутентичним до ди цефтриаксону, концентрац1я якого дор1внюе 0,048 ОД/мл.

2. М1н1мальну ¿нг1буючу дш ГК - 96 щодо Salmonella typhimorium 144 встановлено в концентраци 0,3125 %, до Klebsiella pneumonia K 56 та Esherichia coli ATCC - у концентраци 0,625 % сершного розведення, тод1 як цефтр1аксон д1яв бактерщидно до концентраци 0,048 ОД/мл.

Л1тература

1. Бакуменко, М.Г. Исследования антимикробной активности тиозамещеных 1,2,4-триазала / М.Г. Бакуменко, Б.А. Самура, А.И. Панасенко[ и др.] // Тез. докл. X. рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». - М.,2003. - С. 578.

2. Вологина, И.В. Антимикробные свойствахимических соединений классов азаадамантанов и четвертичных аминов / И.В. Вологина // Автореферат дисс... канд. вет.наук.-Покров .-2008.-26с.

3. MB 9.9.5-143-2007 Визначення чутливост1 м1кроорган1зм1в до антибактер1альних препарат1в. Методичш вказ1вки. - К.,2007.- с.43-67.

4. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам / НА.Семина, С.В. Сидоренко, С.ПРезван [и др.] // Методические указания МУК 4.21890-04.-2004.-54с.

5. Havaldar, F.H. Syntheses of 1,2,4 - triazole Derivatives and their Biological Activity/ F.H. Havaldar, A.R Patil // E -Journal of Chemistry,Vol.5, №2, pp. 347 -354.

341

Summary Filatova G. V.

Lugansk National Agrarian University, Lugansk, Ukraine DETERMINATION OF THE MINIMAL INHIBITORY DOSE OF NEW 1,2,4-TRIAZOLE COMPOUNDS GK-96 FOR BACTERIAL CULTURES

The minimmal inhibitory dose derivative of 1,2,4-triazole GK to test cultures Salmonella typhimorium 144, Esherichia coli ATCC № 3912/4, Klebsiella pneumonia K 56 and Staphylococcus aureus ATCC № 25923v compared with ceftriaxone and DMF according to the method of serial dilutions.

Keywords: Salmonella typhimorium 144, Esherichia coli ATCC № 3912/4, Klebsiella pneumonia K 56, Staphylococcus aureus ATCC№ 25923 and Klebsiella pneumoniae K № 56, CC, inhibitory dose, ceftriaxone,DMF.

Рецензент - к.б.н., доцент Турко 1.Б.

342

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Filatova G.V.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Filatova G.V.

Текст научной работы на тему «Визначення мінімальної інгібуючої дози нової похідної сполуки 1,2,4-триазолу гк-96 до бактеріальних тест культур»