CC BY
24БИТ 2017 Том 1 № 1
МЕДИйИНСКИЕ НАУКИ
УДК 615.281.9
ВИРУЛОЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА «ФАРГАЛС» В ОТНОШЕНИИ ВИРУСОВ ГЕПАТИТА ВИС
Баженов J1.Г., Маматкулов И.Х., Алматов Б.И., Кан Н.Г., Жураев Р.Х.
Республиканский специализированный центр хирургии им. ак. В.Вахидова, НИИ микробиологии, эпидемиологии и инфекционных заболеваний МЗ РУз., Институт вирусологии МЗ РУз.,
Ташкентский областной центр санэпиднадзора МЗ РУз
VIRUCIDAL ACTIVITY OF BIOTECHNOLOGICAL PREPARATION «FARGALS» TOWARDS В AND С HEPATITIS VIRUSES
Bajenov L.G., Mamatkulov I.H., Almatov B.I., Kan N.G., Jurayev R.H.
Republican specialized center of surgery named after Ac. V. Vahidov, Research institute of microbiology, epidemiology and infectious diseases of MH RU,
Institute of virology of MH RU, Tashkent regional center of sanitary-and-epidemiologic inspection of MH RU
Аннотация
Новый биотехнологический препарат «ФАРГАЛС» характеризуется выраженной антимикробной активностью в отношении широкого ряда бактерий и грибов. Целью настоящего исследования явилось изучение ви-рулоцидной активности данного препарата против вирусов гепатита В и С. Определение РНК вируса гепатита С и ДНК вируса гепатита В в клиническом материале (20 образцов плазмы крови больных с HBV и HCV) проводили с помощью метода полимераз-ной цепной реакции (ПЦР) с гибридизаци-онно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» (Real Time PCR). Представленные предварительные результаты свидетельствуют о достаточно высокой вирулоцидной активности ФАРГАЛСА в отношении вирусов гепатита В и С.
Ключевые слова: Фаргалс, вирус гепатита В, вирус гепатита С, вирулоцидная активность.
Abstract
New biotechnological preparation «FARGALS» is characterized by marked antimicrobial activity towards broad series of bacteria and fungi. The purpose of this work was study of virucidal activity of the given preparation towards viruses of the hepatitis B and C. The revealing of RNA of the hepatitis C virus and DNA of the hepatitis B virus in clinical material (20 samples of the blood plasma of patients with HBV and HCV) was carried out by means of polymerase chain reaction (PCR) method with hybridization-florescent detection (Real Time PCR). Presented preliminary results prove sufficiently high virucidal activity of FARGALS towards viruses of B and C hepatitis.
Keywords: Fargals, hepatitis B virus, hepatitis C virus, virucidal activity.
Вирусные гепатиты - группа инфекционных заболеваний печени, вызванных ге-патотропными вирусами, принадлежащими к различным семействам. Причиной возникновения вирусных гепатитов являются 5 основных вирусов. Они образуют две группы
гепатитов - энтеральные (HAV и НЕ\/) и парентеральные (HBV, Н^ и НР\/). Для энте-ральных гепатитов характерен в основном
МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
БИТ 2017 Том 1 № 1
Таблица.
Результаты определения вирусной нагрузки в образцах плазмы крови до и после 30 минут контакта с препаратом Фаргапс
№ об- Наименова- вирусная нагрузка в плазме Вирусная нагрузка в плазме
разца ние инфекции крови до обработки препа- крови после обработки пре-
ратом паратом
514 НСУ 5,5Х1СГ4 итрицательныи
522 НСУ 4.5x10*4 Отрицательный
575 НСУ 8.7x10*6 3.5x10*3
577 НСУ 4.3x10*5 Отрицательный
620 НСУ 1.6x10*5 Отиицательный
623 НСУ 6,4x10*5 2,3x10*3
628 НСУ 2.4x10*6 5,3x10*4
629 НСУ 4,2x10*4 Отрицательный
125 НВУ 3^1x10*4 Отрицательный
205 НВУ 6.9x10*6 1,3x10*4
296 НВУ 4 9x10*4 Отрицательный
411 НВУ 2.1x10*4 Отрицательный
НВУ 3.8x10*4 Отрицательный
НВУ 9.9x10*7 1,0x10*5
430 НВУ 2,1x10*4 Отрицательный
455 НВУ 4,2x10*3 Отрицательный
622 Нет вирусов Описательный Отрицательный
630 Нет вирусов Отрицательный Отрицательный
508 Нет вирусов Отиицательный Отиицательный
533 Нет вирусов Отрицательный Отрицательный
фекально-оральный путь передачи и эти вирусы вызывают только острый гепатит. Вирусы энтеральных гепатитов обладают высокой инфекционностью и стабильностью. Вирусы гепатитов В, С и Р покрыты оболочкой, передаются парентерально и способны вызвать не только острый, но и хронический вирусный гепатит. Вирусы гепатита В и С играют важнейшую роль в возникновении хронических вирусных заболеваний печени -они ответственны за развитие 60-70% циррозов печени и 70-80% первичных раков печени [3,6].
В связи с высокой распространённостью вирусных гепатитов, одной из основных задач современной медицины является разработка доступных и эффективных методов их химиотерапии и профилактики.
Широко распространенные в настоящее время антимикробные препараты, в том числе антибиотики, являются, как правило, неэффективными при лечении вирусных инфекций. Это, прежде всего, связано с отсутствием у вирусов собственных метаболических путей, ведущих к получению энергии и синтезу строительного материала. Поэтому химиопрепараты, блокирующие определенные жизненно важные для
того или другого микроорганизма метаболические реакции, ферменты, катализирующие эти реакции, не оказывают ингибирую-щего действия на внеклеточные вирионы. В то же время различные вещества, являющиеся ингибиторами репликации ДНК или процессов транскрипции и трансляции информации на рибосомы, могут оказывать ингибирующее действие при репродукции вирусных частиц в клетке хозяина. Вследствие того, что многие из этих веществ подавляют жизнедеятельность самой клетки, их нельзя использовать в качестве химиоте-рапевтических средств [2,3,5,6]. Поэтому поиск новых противирусных препаратов представляется весьма актуальным. В этой связи мы обратили внимание на Фаргалс, это новый биотехнологический препарат, который характеризуется выраженной антимикробной активностью в отношении широкого ряда бактерий и грибов [1].
Целью настоящего исследования явилось изучение вирулоцидной активности Фаргалса против вирусов гепатита В и С.
Материал и методы исследования
В качестве объекта для исследования использовали образцы плазмы перифери-
28
Бюллетень инновационных технологий
БИТ 2017 Том 1 № 1
ческой крови. Забор крови проводили с помощью вакуумных пробирок, содержащих 3% раствор ЭДТА из расчета 1:20. Для получения плазмы пробирки с кровью центрифугировали в течение 20 мин при 1500 об/мин. Полученную плазму в объеме 1мл переливали в пробирки объемом 1,5 мл и хранили при - 20° С.
Всего изучено 20 образцов плазмы крови. Из них 8 образцов содержали вирусы гепатита В, 8 - вирусы гепатита С, 4 образца не содержали маркеров вирусных гепатитов.
Соотношение плазмы и препарата Фар-галс составило 1:4, т.е. в 800 мкл образца добавляли по 200 мкл препарата. В качестве контроля использовали стерильный физиологический раствор в том же соотношении.
Наличие РНК вируса гепатита С и ДНК вируса гепатита В клиническом материале, проводили с помощью метода полимераз-ной цепной реакции (ПЦР) с гибридизаци-онно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» (Real Time PCR) [4]. Использованы набора реагентов «Ампли-Сенс HCV-Mohhtop-FRT», «АмплиСенс HBV-Mohhtop-FRT» (ФГУН Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии, Москва, Россия) до обработки Фаргалсом и через 30 минут после обработки.
МЕДИУИНСКИЕ НАУКИ
Результаты и обсуждение
Полученные результаты представлены в таблице.
Как видно из таблицы, из 8 проб с HCV в 5 (62,5 %) вирусы отсутствовали, а в оставшихся 3 (37,5 5%) пробах вирусная нагрузка оказалась существенно (на 2-3 порядка) снижена по сравнению с исходным уровнем.
Из 8 образцов с HBV в 6 (75,0 %) вирусы не были обнаружены, а в остальных 2 (25,0 %) пробах вирусная нагрузка была ниже исходного уровня на 2 порядка.
Действие препарата на плазму, не содержащую вирусные частицы, не отразилось в виде неспецифических проявлений и не ингибировало внутренний контроль, используемый с каждым образцом, в качестве «контроля качества» выделения нуклеиновых кислот (внутренний контроль прилагается в наборе реагентов ПЦР).
После контакта образцов плазмы с физиологическим раствором (контроль) вирусная нагрузка практически не изменилась.
Таким образом, представленные предварительные результаты свидетельствуют о достаточно высокой вирулоцидной активности Фаргалса в отношении вирусов гепатита В и С, что обуславливает целесообразность продолжения исследований в этом направлении.
Список литературы
1. Баженов Л.Г., Мустанов А.Н., Екубжонов Ф.Т. с соавт. Антимикробная активность нового биотехнологического препарата «Фаргалс» и перспективы его клинического применения// Intern.Scientific Surgical Association, 2008. - № 1. - C.23-25.
2. Маматкулов И.Х., Эрмаматов А.Э., Симонова Е.А. ИФА - как метод определения эффективности действия дезинфектан-тов на HBsAg // Инфекция, иммунитет и фармакология, 2000. - №3. - С.35-36.
3. Страчунский Л. С., Белоусов Ю.Б., Козлов С.Н. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. Смоленск: МАКМАХ, 2007. - С. 356-372.
4. Higuchi R. Kinetic PCR analysis: real-time monitoring of DNA amplification reactions //Biotechnology, 1993 - No.11. - P.1026-1030.
5. Papageorgiou G., Mocé-Llivina L., Jofre J. New Method for Evaluation of Virucidal Activity of Antiseptics and Disinfectants// Appl Environ Microbiol., 2001. - V.67, No.12. -P.5844-5848.
6. Roberts G., Chan-Myers H., Favero M. Virucidal activity of ortho-phthalaldehyde solutions against hepatitis В and С viruses// Am J Infect Control., 2008. - V.36, No.3. -P.223-226.
Поступила в редакцию 22.10.2016
Сведения об авторах:
Баженов Леонид Григорьевич - доктор медицинских наук, профессор, Республиканский специализированный центр хирургии им. ак. В.Вахидова e-mail: [email protected].
