CC BY
85
Петрищева Г.В., Зойнов П.Н.
Оренбургская государственная медицинская академия E-mail: [email protected]
ВИДОВОЙ СОСТАВ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ В РАЗЛИЧНЫХ ЛАНДШАФТНЫХ ПРОВИНЦИЯХ ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ В НИХ ДНК ВОЗБУДИТЕЛЕЙ
Приведены данные исследования распространенности, численности и видового состава ик-содовых клещей, имеющих эпидемическое значение в Оренбургской области. Определены особенности распространения различных видов иксодовых клещей в соответствии с ландшафтами Оренбургской области.
Ключевые слова: иксодовые клещи, иксодовый клещевой боррелиоз, природно-очаговые инфекции, ландшафты.
Трансмиссивные природно-очаговые инфекции остаются одной из актуальных проблем в системе эпидемиологического надзора за инфекционными болезнями в Российской Федерации. За последние 15-20 лет описан ряд неизвестных ранее арбовирусных, хантавирусных, эрлихиозных, спирохетозных и других природно-очаговых инфекций [1]. Наличие единого механизма передачи инфекций, общих резервуарных хозяев и переносчиков возбудителей определяют существование сочетанных очагов трансмиссивных природно-очаговых инфекций: клещевого энцефалита (КЭ), клещевого риккетсиоза (КР), иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) и моноцитарного эрлихиоза человека (МЭЧ). Поэтому микстзара-женность клещей в естественных условиях, по-видимому, должна быть обычным явлением, а возможность существования различных возбудителей и их взаимоотношения в организме таких клещей заслуживают особого внимания [4].
Ландшафтно-географические особенности территории и высокая численность иксодовых клещей определяют значимость этих заболеваний в структуре инфекционной патологии. Присасывание клещей оказывается общим фактором риска для развития бактериальных, вирусных, риккетсиозных и микст-инфекций [2].
Целью работы являлось изучение распространения и определение видового состава ик-содовых клещей в различных ландшафтных провинциях Оренбургской области и выявление ДНК возбудителей в них.
Материалы и методы
В лаборатории переносчиков инфекции РАМН НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи исследовано 52 иксодовых клещей (Тхо^ёае) из Оренбургс-
кой области с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР). Голодные взрослые клещи D. marginatus, D. reticulatus и I. persulcatus были собраны с растительности на флаг во второй-третьей декаде мая в лесостепной зоне Европейской части России (Оренбургская область: в Сак-марском, Оренбургском, Соль-Илецком, Грачев-ском, Бугурусланском, Переволоцком районах).
Геномную ДНК выделяли из тканей каждого клеща отдельно с помощью гуанидинтио-цианата и фенола/хлороформа [3].
ПЦР-скрининг клещей на наличие ДНК боррелий, проведен родоспецифичными праймерами, фланкирующими фрагмент гена ospc и участок спейсера 5S-23S рРНК (в nested ПЦР) [6]. Амплификация специфической ДНК E. muris проведена с праймерами HE3-MuHE1, фланкирующими участок 16S рРНК гена [5], а A. phagocytophilum - в nested ПЦР, первичной парой праймеров ge3a-ge10 и затем праймерами ge9-ge2 на участок 16S рРНК гена. Риккетси-альная ДНК была амплифицирована праймерами, фланкирующими участок 16S рРНК (fD1-Rc16S.452n) и gltA (RpCS.877p-RpCS.1258n) [7] генов.
Результаты и обсуждение
Показатели численности иксодовых клещей являются одной из важных характеристик активности природных очагов иксодовых клещевых боррелиозов. При исследовании активности природных очагов принимали во внимание результаты энтомологических наблюдений.
Из 2344 исследованных клещей, методом флаго/час, D. reticulates составил 45,3% (1061 особь), D. marginatus - 43,9% (1030 особь) и I. persulcatus - 10,8% (253 особи).
I. persulcatus распределялся в основном в двух ландшафтных зонах: в Заволжско-Преду-ральской лесостепной провинции - 55,7%, в Обще-Сыртовской степной провинции - 44,3% (характерно мозаичное распространение), а в других ландшафтных зонах выявлены только единичные находки этого клеща.
Ареал D. reticulates и D. marginatus охватывает все шесть ландшафтных провинций Оренбургской области, но наиболее велико их количество в Обще-Сыртовской степной провинции - 64,3%.
Исследовано 52 иксодовых клеща собранных на территории Заволжско-Предуральской возвышенной лесостепи и Общесыртовско-Преду-ральской возвышенной степи трех видов -D. marginatus (19 - 36,5%), D. reticulates (13 - 25,0%), I. persulcatus (20- 38,5%).
Из 20 клещей I. persulcatus ДНК возбудителей определялась у 15(75,0%). В том числе у 7 (35,0%) выявили ДНК Borrelia burgdorferi sensu lato, у 1 (5,0%) - ДНК Ehrlichia muris, у 14 (70,0%) - ДНК Rickettsia spp. В шести случаев (30,0%) обнаруживались ДНК 2-3 возбудителей. У 5 (25,0%) клещей I. persulcatus -Borrelia burgdorferi sensu lato+ Rickettsia spp. и в одном случае (5,0%) Ehrlichia muris+ Rickettsia spp.
Из 20 клещей I. persulcatus ДНК возбудителей определялась у 15(75,0%). В том числе у 7 (35,0%) выявили ДНК Borrelia burgdorferi sensu lato, у 1 (5,0%) - ДНК Ehrlichia muris, у 14 (70,0%) - ДНК Rickettsia spp. В шести случаев (30,0%) обнаруживались ДНК 2-3 возбудителей. У 5 (25,0%) клещей I. persulcatus -Borrelia burgdorferi sensu lato+ Rickettsia spp. и в одном случае (5,0%) Ehrlichia muris+ Rickettsia spp.
Из 19 клещей D. marginatus ДНК возбудителей определялась у 6(31,6%). У 4 (21,0%) выделены ДНК Ehrlichia muris, а у 3 (15,8%) - Rickettsia spp. В одном (5,3%) случае выделены ДНК двух возбудителей - Ehrlichia muris+ Rickettsia spp.
ДНК возбудителей в клещах D. Reticulates находили в 69,2% случаев (9 из 13). У 3 (23,1%) -ДНК Ehrlichia muris, а у 6 (46,1%) - Rickettsia spp.
В Заволжско-Предуральской лесостепи исследовано три клеща D. marginatus, в одном (33,3%) из которых была выявлена ДНК Ehrlichia muris.
На территории Общесыртовско-Преду-ральской степи изучению подверглись 20 клещей I. persulcatus, 16 клещей D. marginatus и 13 - D. reticulates (всего 49). ДНК возбудителей определялась у 29 (59,2%) особей.
ДНК Borrelia burgdorferi sensu lato определялась только у I. Persulcatus. ДНК Ehrlichia muris находили у 3 (18,5%) клещей D. marginatus, у 3 (23,1%) клещей D. Reticulates и у1 (20,0%) клеща I. Persulcatus. ДНК Rickettsia spp выявлялась у 3 (18,5%) клещей D. marginatus, у 6 (46,1%) клещей D. reticulates и у 13 (65,0%) клещей I. persulcatus.
Выявление ДНК B. burgdorferi s. l. и Rickettsia spp на территории Общесыртовско-Предуральской степи позволяет говорить о существовании природных очагов боррелиозов и риккетсиозов в степных ландшафтах. Обнаружение в клещах ДНК Ehrlichia muris позволяет предположить существование или формирование очагов эрлихиозов на этой же территории.
Полученные данные позволяют говорить о существовании природных очагов инфекций в лесостепных и степных ландшафтах области, подтверждая значимость этой проблемы для здравоохранения, а также необходимость разработки адекватных профилактических мероприятий.
13.01.2011
Список литературы:
1. Корренберг Э.И.// Новые инфекции, передающиеся клещами, с позиции теории природной очаговости болезней // Научная конференция с международным участием достижения отечественной эпидемиологии в xx веке. Взгляд в будущее. Санкт-Петербург, 2001.- с.- 136-137.
2.Коренберг Э.И, Воробьева Н.Н. и др. //Инфекции передающиеся иксодовыми клещами в Пермском крае. Пермь, 2007. с.4-62.
3.Нефедова В.В., Коренберг Э.И. и др.Сравнительная оценка результативности индикации боррелий в иксодовых клещах (Ixodidae) методами темнопольной микроскопии и полимеразной цепной реакции (ПЦР) // Паразитология, 2001, 35: 3-8
4. Anderson B.E., et al. Detection of the etiologic agent of human ehrlichiosis by polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol., 1992, Vol. 30, P. 775-780.
5. Massung R.F., Slater K., Owens J.H. et al. Nested PCR assay for detection of granulocytic ehrlichiae //J. Clin. Microbiol, 1998, Vol. 36, P. 1090-1095.
6. Rehacek J. e.a. Experemental double infection with Coxiella burneti and tick-born encephalitis virus in Dermacentor reticulates tick //Acta Virol. 1987. Vol. 30. P. 65-74.
7. Regnery R.L., Spruill C.L., Plikaytis B.D. Genotypic identification of rickettsiae and estimation of intraspecies sequence divergence for portions of two rickettsial genes // J Bacteriol., 1991, Vol. 173, P. 1576-1589
Сведения об авторах:
Петрищева Г.В., ассистент кафедры эпидемиологии и инфекционных болезней Оренбургской государственной академии, кандидат медицинских наук е-шаИ: [email protected] Зойнов П.Н., аспирант кафедры эпидемиологии и инфекционных болезней Оренбургской
государственной медицинской академии 460000, ул. Советская, 6, тел. (3532) 560223, е-mail: [email protected]
UDC 616.995.7
Petrischeva G.V., Zoynov P.N.
E-mail: [email protected], [email protected]
THE SPECIES STRUCTURE OF IXODES TICKS IN DIFFERENT LANDSCAPE PROVINCES OF ORENBURG REGION AND IDENTIFICATION OF PATHOGENS’ DNA IN THEM
Data of studies of prevalence, the number and species structure of Ixodes ticks that have epidemic importance in the Orenburg region are given. The features of different types of distribution of Ixodes ticks in accordance with the landscapes of the Orenburg region aredescribed.
Key words: Ixodes ticks, Ixodes tick-borne Lyme disease, natural foci of infection, landscapes.
Bibliography:
1. Korenberg E.I.//the New infections transferred by pincers, from a position of the theory natural очаговости illnesses// Scientific conference with the international participation of achievement domestic эпидемиологии in xx a century. A prospection. St.-Petersburg, 2001. s. - 136-137.
2. Korenberg E.I, Vorobeva N.N., etc.//Infections transferred иксодовыми pincers in the Perm edge. Perm, 2007. s.4-62.
3. Nefedov V. V, Korenberg E.I., etc. the Comparative estimation of productivity of indication боррелий in иксодовых pincers (Ixodidae) methods темнопольной microscopy and полимеразной chain reaction (n^)//Parasitology, 2001, 35: 3-8
4. Anderson B.E., et al. Detection of the etiologic agent of human ehrlichiosis by polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol., 1992, Vol. 30, P. 775-780.
5. Massung R.F., Slater K., Owens J.H. et al. Nested PCR assay for detection of granulocytic ehrlichiae // J. Clin. Microbiol, 1998, Vol. 36, P. 1090-1095.
6. Rehacek J. e.a. Experemental double infection with Coxiella burneti and tick-born encephalitis virus in Dermacentor reticulates tick //Acta Virol. 1987. Vol. 30. P. 65-74.
7. Regnery R.L., Spruill C.L., Plikaytis B.D. Genotypic identification of rickettsiae and estimation of intraspecies sequence divergence for portions of two rickettsial genes // J Bacteriol., 1991, Vol. 173, P. 1576-1589
