CC BY
48
DOI http://dx.doi.org/10.18821/0234-5730-2017-62-1-29-32 Hematology and Transfusiology. 2017; 62(1)
Original article
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 616.4-006-085.361.4-013.3:614.2
Хамаганова Е.Г., Кузьминова Е.П., Паровичникова Е.Н., Кузьмина Л.А., Чугреева Т.П., Чапова Р.С., Юшкова А.А., Савченко В.Г.
вероятность нахождения hla-идентичного родственного донора для больных с заболеваниями системы крови из семей с разным числом детей
ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, 125167, г. Москва, Россия
Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток - наиболее эффективный метод лечения гемобластозов и некоторых других заболеваний системы крови, целью которого является излечение больного. Предпочтительные доноры аллогенных гемопоэтических стволовых клеток - HLA-идентичные сиблинги (потомки одних и тех же родителей), так как они наследуют не только одинаковые с больным HLA-гены, но и одни и те же HLA-гаплотипы (HLA-гаплотип - совокупность генов HLA, лежащих на одной хромосоме). Целями работы являлись анализ распределения HLA-идентичных с больным, HLA-гаплоидентичных и расходящихся по обоим HLA-гаплотипам сиблингов у больных с заболеваниями системы крови из семей с разным числом детей и оценка вероятности нахождения HLA-идентичного родственного донора для больного. Установлено, что в семьях пациентов, нуждающихся в трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, HLA-гаплотипы наследуются в соответствии с менделевским типом наследования независимо от числа детей в семье. Примерно четверть сиблингов HLA-идентичны с больным, около половины совпадают с больным только по одному HLA-гаплотипу (HLA-гаплоидентичны), остальные расходятся с больным по обоим HLA-гаплотипам. С увеличением числа сиблингов шансы нахождения HLA-идентичного родственного донора для больного повышаются. Так, вероятность нахождения HLA-идентичного родственного донора для больного с одним сиблингом составила 27%, для больного с двумя сиблингами - 37%, для больного с тремя сиблингами - 47%. Однако HLA-идентичный родственный донор может отсутствовать у больного, нуждающегося в аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, при любом числе сиблингов в семье.
Ключевые слова: трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток; HLA-гаплотип;
сиблинг; менделевский тип наследования; распределение HLA-гаплотипов.
Для цитирования: Хамаганова Е.Г., Кузьминова Е.П., Паровичникова Е.Н., Кузьмина Л.А., Чугреева Т.П., Чапова Р.С., Юшкова А.А., Савченко В.Г. Вероятность нахождения HLA-идентичного родственного донора для больных с заболеваниями системы крови из семей с разным числом детей. Гематология и трансфузиология. 2017; 62(1): 29-32. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0234-5730/2017-62-1-29-32
Khamaganova E.G., Kuzminova E.P., Parovichnikova E.N., Kuzmina L.A., Chugreeva T.P., Chapova R.S., Yushkova A.A., Savchenko V.G.
PROBABILITY OF THE FINDING THE HLA-IDENTICAL RELATED DONOR FOR PATIENTS WITH HEMATOLOGICAL DISORDERS FROM FAMILIES WITH DIFFERENT NUMBERS OF CHILDREN
National Research Center for Hematology, Moscow, 125167, Russian Federation
Transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells is the most effective therapy for patients with hematological malignancies and other hematological disorders. The most preferable donors of allogeneic hematopoietic stem cells are the HLA-identical siblings (descendants of the same parents) because they inherit the identical with patient HLA-haplotypes. The aim of the article was to analyze the segregation of HLA-haplotypes in families of patients with hematological disorders and assessment of the probability to find HLA-identical related donor for patients from families with different number of siblings. HLA-haplotypes are inherited in accordance with Mende-lian inheritance regardless of number of siblings in the family of patient with hematological disorder. The more number of siblings, the higher the probability to find HLA-identical related donor. Thus, the probability of the finding of HLA-identical related donor for patients with one sibling accounted near 27%, for patients with two siblings - 37%, for patients with three siblings - 47%. However, HLA-identical related donor can be absent for the patient in need of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation regardless of number of his/her siblings.
Keywords: transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells; HLA-haplotype; sibling; Mendelian inheritance; distribution of haplotypes.
For citation: Khamaganova E.G., Kuzminova E.P., Parovichnikova E.N., Kuzmina L.A., Chugreeva T.P., Chapova R.S., Yushkova A.A., Savchenko V.G. Probability of the finding the HLA-identical related donor for patients with hematological disorders from families with different numbers of children. Hematology and Transfusiology. Russian Journal (Gematologiya i transfusiologiya). 2017; 62(1): 29-32. (in Russian). DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0234-5730/2017-62-1-29-32
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Acknowledgments. The study had no sponsorship. Received 29 June 2016 Accepted 10 February 2017
Для корреспонденции:
Хамаганова Екатерина Георгиевна, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, 125167, г. Москва, Россия. E-mail: ekhamag@mail.ru. For correspondence:
Khamaganova Ekaterina G., MD, PhD, DSc., leading researcher of the Laboratory of Molecular Hematology of the National Research Center for Hemato-
logy, Moscow, 125167, Russian Federation. E-mail: ekhamag@mail.ru._
Information about authors:
Khamaganova E.G., http://orcid.org/0000-0002-0110-3314, Scopus Author ID: 7801399544; Parovichnikova E.N., http://orcid.org/0000-0001-6177-3566; Kuzmina L.A., http://orcid.org/0000-0001-6201-6276; Savchenko V.G., http://orcid.org/0000-0001-8188-5557, ID: 8532861000.
Оригинальная статья
Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) - наиболее эффективный метод лечения гемобластозов и некоторых других заболеваний системы крови [1]. Предпочтительный донор при алло-ТГСК - HLA-идентичный сиблинг или сибс (сибсы - потомки одних и тех же родителей, от англ.: sibs - sisters/brothers), так как они наследуют не только одинаковые HLA-гены, но и одни и те же HLA-гаплотипы [2]. HLA-гаплотипом называют совокупность генов HLA, лежащих на одной хромосоме, HLA-генотипом -совокупность генов HLA на обеих хромосомах. Поскольку наследование гаплотипов HLA подчиняется законам Менделя, вероятность совпадения (также как и полного несовпадения) HLA-генотипов у сиблингов составляет 25%, вероятность совпадения одного из HLA-гаплотипов - 50% (рис. 1). Увеличение числа сиблингов повышает шансы найти среди них HLA-идентичного донора гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) для больного. В подавляющем большинстве субъектов Российской Федерации, как и в большинстве европейских стран, многодетными считаются семьи с тремя и большим числом детей.
Имеются отдельные наблюдения, в которых сообщается о неравновесном распределении родительских гаплотипов системы HLA в семьях, где имеется ребенок, больной лейкозом, и более частом, чем следует из менделевского расщепления, нахождении в таких семьях HLA-идентичных сиблингов [3, 4].
Цели исследования - анализ распределения HLA-идентичных с больным, HLA-гаплоидентичных и расходящихся по обоим гаплотипам сиблингов у больных заболеваниями системы крови из семей с разным числом детей и оценка вероятности нахождения HLA-идентичного родственного донора для больного.
Материал и методы
С 01 января 2011 г. по 31 декабря 2015 г. в ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России (ГНЦ) были HLA-типированы 523 больных различными заболеваниями системы крови (282 лица мужского пола и 241 женского) в возрасте от 16 до 64 лет (медиана 38,5 года), из них острыми миелоидными лейкозами 195 больных, острыми лимфобластными лейкозами 87, миелодиспластическимисиндромами79, апластическойанемией 43, хроническим миелолейкозом 40, множественной миеломой 22, неходжкинскими лимфомами 17, Ph-негативными миелопролифе-ративными заболеваниями 16, хроническим лимфолейкозом 15, лимфогранулематозом 7, анемией Даймонда-Блекфена 1, талас-семией 1.
C целью поиска HLA-идентичного родственного донора для алло-ТГСК HLA-типированы 712 сиблингов этих больных, из них мужчин 382 (53,6%), женщин 330 (46,4%). Возраст потенциальных родственных доноров составил от 9 до 65 лет (медиана 37,5 года).
В зависимости от числа сиблингов больные были разделены на четыре группы:
1-я группа - 393 больных с одним сиблингом;
2-я группа - больные с двумя сиблингами (95 больных, 190 сиб-лингов);
Отец Мать
а Ь С d
А1 A3 А24 А2
С7 С7 С4 С6
В8 В7 В35 В13
DR3 DR15 DR1 DR7
DQ2 DQ6 DQ5 DQ2
Ребенок 1 Ребенок 2 Ребенок 3 Ребенок 4
а С а d Ь С А d
А1 А24 А1 А2 А1 А24 A3 А1
С7 С4 С7 С6 С7 С4 С7 С6
В8 В35 В8 В13 В7 В35 В7 В13
DR3 DR1 DR3 DR7 DR15 DR1 DR15 DR7
DQ2 DQ5 DQ2 DQ2 DQ6 DQ5 DQ6 DQ2
Рис. 1. Менделевский тип наследования HLA-гаплотипов. a и b - HLA-гаплотипы отца; c и d - HLA-гаплотипы матери.
3-я группа - 19 больных, которые имели по три сиблинга (всего 57);
4-я группа - 16 больных, у которых было четыре и более сиблингов (всего 72).
ДНК получали из венозной крови, взятой в пробирки с этилен-диаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА). Выделение ДНК проводили с помощью набора "Arrow Blood DNA 500" (NorDiag ASA, Norway) на приборе для автоматического выделения нуклеиновых кислот NorDiagArrow или с помощью набора DNA Isolation Kit ("Life Technologies", США) в соответствии с рекомендациями производителя.
Генотипирование проводили методом полимеразной цепной реакции с сиквенс-специфическими праймерами (PCR-SSP) по 5 генам HLA - HLA-A *-B *-C *-DRB 1*-DQB 1* с использованием наборов Olerup ("Olerup SSPAB", Швеция). В соответствии с EFI-стандартами во всех случаях HLA-геноидентичность HLA-фенотипически идентичного донора была подтверждена или выведением всех четырех родительских HLA-гаплотипов (при типировании родителей и ближайших родственников), или типированием при высоком разрешении (с разрешением на уровне аллелей по позициям, кодирующим пептидсвязывающий сайт молекул HLA) генов HLA класса II, а также тех генов HLA класса I, по которым при низком разрешении выявлялось отсутствие второго аллеля.
При расхождении по одному из вариантов хотя бы одного гена HLA больной и его сиблинг считались HLA-гаплоидентичными, при расхождении по обоим вариантам хотя бы одного гена HLA больной и его сиблинг считались расходящимися по обоим HLA-гаплотипам.
Статистическую значимость различий наблюдаемого и теоретического расщепления HLA-гаплотипрв проводили с использованием таблиц сопряженности и критерия х [5]. Пороговый уровень статистической значимости - 0,05.
Результаты
В 1-й группе (больные, имеющие одного сиблинга) из исследования были исключены 4 больных с HLA-идентичным родственным донором, поскольку было известно, что они ранее HLA-типировались в других клиниках и в ГНЦ этим парам пациент - родственный донор типирование проводили повторно с целью подтверждения HLA-идентичности перед алло-ТГСК. Также из исследования были исключены две пары больной-сиблинг, которые при обследовании оказались однояйцевыми близнецами. Таким образом, в 1-ю группу пациентов вошли 387 больных заболеваниями системы крови, имевших одного сиблинга, не являвшегося однояйцевым близнецом. Распределение HLA-идентичных с больным, HLA-гаплоидентичных и расходящихся по обоим гаплотипам братьев/сестер у больных с разным числом сиблингов представлено в таблице.
Поскольку 1-я группа охватывала наиболее значительное число больных (75%), для этой группы был проведен отдельный анализ статистической значимости различий наблюдаемого и теоретического распределения HLA-гаплотипов. Анализ показал, что в группе больных, имеющих только одного сиблинга, наблюдаемое расщепление HLA-гаплотипов у сиблингов больных статистически незначимо по сравнению с ожидаемым (теоретическим). 27% сиблингов совпали с больным по обоим HLA-гаплотипам, 52% - по одному HLA-гаплотипу, 21% расходились с больным по обоим HLA-гаплотипам.
Из многодетных семей были 130 (25%) больных. Сохранялся вопрос: происходит ли наследование HLA-гаплотипов по законам Менделя в семьях больных из многодетных семей? В совокупности 130 больных имели 319 сиблингов, из которых HLA-идентичны с больным были 22%, совпадали с больным по одному HLA-гаплотипу - 56%, 22% сиблингов расходились с больным по обоим HLA-гаплотипам. Таким образом, полученные данные показали, что и в многодетных семьях сохраняется менделевское расщепление HLA-гаплотипов.
Итак, из всех 706 сиблингов 517 включенных в исследование больных 173 (24%) сиблинга были HLA-идентичны с больным, 380 (54%) сиблингов расходились с больным по одному HLA-гаплотипу, а 153 (22%) сиблинга не имели с больным общих HLA-гаплотипов. Следовательно, наблюдаемое расщепление HLA-гаплотипов у больных заболеванием системы крови и их сиблингов практически совпало с ожидаемым (теоретическим) расщеплением в соответствии с менделев-ским типом наследования.
DOI http://dx.doi.org/10.18821/0234-5730-2017-62-1-29-32
Hematology and Transfusiology. 2017; 62(1)
Original article
Распределение ЫЬЛ-идентичных, ЫЬЛ-гаплоидентичных и расходящихся по обоим гаплотипам с больным сиблингов у больных
из семей с разным числом детей
Число больных Сиблинги
Больные HLA-идентичные с больным HLA-гаплоидентичные с больным расходящиеся по обоим HLA-гаплотипам с больным всего сиблингов в группе
Больные с одним сиблингом 387 (75%) 104 (27%) 200 (52%) 83 (21%) 387
Р 0,55 0,64 0,23
Больные из многодетных семей:
с двумя сиблингами 95 (18%) 41 (22%) 106 (56%) 43 (21%) 190
с тремя сиблингами 19 (4%) 11 (19%) 32(56%) 14 (25%) 57
с четырьмя сиблингами и более 16 (3%) 17 (24%) 42 (58%) 13 (18%) 72
Всего ... 130 (25%) 69 (22%) 180 (56%) 70 (22%) 319
Р 0,30 0,11 0,30
Итого ... 517 (100%) 173 (24%) 380 (54%) 153 (22%) 706 (100%)
Р 0,81 0,15 0,13
Примечание.р - статистическая значимость различий с теоретическим расщеплением.
Естественно, что для больных из многодетных семей увеличиваются шансы найти НЬА-идентичного родственного донора. К тому же больной из многодетной семьи может иметь не одного, а нескольких НЬА-идентичных доноров. Однако в многодетных семьях сиблинги больного часто НЬА-идентичны друг с другом, но не с больным, поэтому даже для больных с несколькими сиблингами не всегда удается подобрать НЬА-идентичного родственного донора.
НЬА-идентичного донора имели 27% больных 1-й группы (с одним сиблингом), рис. 2. Во 2-й группе (с двумя си-блингами) больных с НЬА-идентичными родственными донорами было 37% (различия между группами статистически значимы; р = 0,05). В 3-й группе больных с тремя сиблингами НЬА-идентичного донора имели 47% больных. В 4-й группе больных с четырьмя и большим числом сиблингов доля НЬА-идентичных родственных доноров достигала 63%. Отсутствие статистической значимости различий между 2-й и 3-й группами (р = 0,39), а также между 3-й и 4-й группами (р = 0,37), вероятно, связано с незначительным числом больных в 3-й и 4-й группах (всего 19 и 16 пациентов соответственно).
Больные 4-й группы (п = 16) имели не менее 4 сиблингов (от 4 до 7, всего 72). В этой группе обязательно имелись НЬА-идентичные между собой сиблинги, так как в этих семьях было 5 детей и больше, а вариантов наследования НЬА-гаплотипов в соответствии с менделевским расщеплением возможно только 4 (см. рис. 1), исключая случаи кроссинго-вера. Однако и в этой группе не для всех больных находился НЬА-идентичный сиблинг. НЬА-идентичный родственный донор был найден только для 10 (63%) пациентов, у 6 (37%) больных НЬА-идентичный сиблинг отсутствовал.
Обсуждение
Проведенное исследование показало, что в семьях больных с заболеваниями системы крови (при этом более 50% исследованных нами пациентов составляли больные острыми лейкозами) наследование НЬА-гаплотипов происходит в соответствии с менделевским типом наследования. Примерно четверть сиблингов независимо от числа детей в семье НЬА-идентична с больными.
Полученные нами данные говорят против неравновесного наследования НЬА-гаплотипов в семьях больных с заболеванием системы крови. Конечно, наблюдаемое в семьях наших больных распределение НЬА-гаплотипов не полностью совпадает с теоретическим расщеплением, хотя и не имеет с ним статистически достоверных различий. Некоторое снижение доли НЬА-идентичных с больным сиблингов может быть связано с таким явлением, как кроссинговер. Рекомби-нантная хромосома, образующаяся вследствие кроссинговера в районе комплекса НЬА-генов, делает ее носителя неНЬА-
идентичным с носителями нормальных (некроссоверных) родительских хромосом. К сожалению, в данном исследовании НЬА-типирование родителей больных проводили не всегда, поэтому выявить доказанный по раскладке родительских НЬА-гаплотипов кроссинговер не представлялось возможным. Однако поскольку известно, что частота рекомбинаций в НЬА-комплексе не превышает 0,94% [6], возможное проявление неучтенных рекомбинаций не могло оказать существенного влияния на наблюдаемое распределение НЬА-гаплотипов.
Незначительное понижение доли сиблингов, расходящихся с больным по обоим НЬА-гаплотипам, и повышение доли НЬА-гаплоидентичных сиблингов возможно было также связано с тем, что в отличие от НЬА-идентичных с больным сиблингов, неНЬА-идентичным сиблингам не проводилось подтверждающее типирование с высоким разрешением, так как они были отведены в качестве НЬА-идентичных доноров уже по результатам НЬА-типирования при низком разрешении. Поэтому теоретически в число НЬА-гаплоидентичных сиблингов могли попасть некоторые сиблинги на самом деле расходящиеся с больным по обоим НЬА-гаплотипам на уровне высокого разрешения.
Можно предполагать, что причиной заключения о неравновесном распределении родительских НЬА-гаплотипов в семьях, где имеется ребенок, больной лейкозом, и более частом, чем следует из менделевского расщепления, нахождении в таких семьях НЬА-идентичных сиблингов [3], могла быть небольшая выборка исследования (всего 101 семья,
%
70 60 50 40 30 20 10 0
~г
«у;
Рис. 2. Больные, имеющие НЬА-идентичного родственного донора, среди пациентов с разным числом сиблингов.
По оси абсцисс - больные из семей с разным числом сиблингов; по оси ординат - больные с НЬА-идентичным родственным донором.
Оригинальная статья
из которых в 50 было два ребенка: больной + сиблинг). К тому же широкое внедрение в практику методов ДНК-типирования HLA-системы в последние десятилетия значительно улучшило качество HLA-типирования.
С увеличением числа сиблингов повышается шанс нахождения HLA-идентичного с больным родственного донора. Вероятность нахождения HLA-идентичного родственного донора для больного с одним сиблингом составила 27%, для больного с двумя сиблингами - 37%, для больного с тремя си-блингами - 47%. Однако HLA-идентичный с больным донор может отсутствовать при любом числе сиблингов. Для больных, у которых отсутствует HLA-идентичный родственный донор, необходим поиск HLA-совместимого неродственного донора. Следует иметь в виду, что число многодетных семей постоянно сокращается, понижается средний коэффициент рождаемости, поэтому число больных, для которых имеется возможность подобрать HLA-идентичного родственного донора, постоянно снижается.
Таким образом, в семьях больных с заболеваниями системы крови HLA-гаплотипы наследуются в соответствии с мен-делевским расщеплением независимо от числа детей в семье.
С увеличением числа сиблингов шансы нахождения HLA-идентичного родственного донора повышаются. Вероятность нахождения HLA-идентичного родственного сиблинга у больных с одним сиблингом близка к 25% (27%), около 37% у больных с двумя сиблингами и возрастает до 47% для больных с тремя сиблингами. Однако HLA-идентичный родственный донор может отсутствовать у больного, нуждающегося в трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, при любом числе сиблингов.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Савченко В.Г., ред. Программное лечение заболеваний системы крови: Сборник алгоритмов диагностики и протоколов лечения заболеваний системы крови. М.: Практика; 2012.
2. Tiercy J.M. Immunogenetics of allogeneic HCST. In: The EBMT Handbook 2008. Available at http://www.ebmt.org/Contents/Resources/Li-brary/EBMTESHhandbook/ (Accessed 25 February 2016)
3. Зотиков Е.А., Красникова Н.А., Кутьина Р.М., Удовиченко А.И., Любимова Л.С. Неменделевский тип наследования комплекса HLA. Иммунология. 1989; 6: 20-3.
4. Зарецкая Ю.М., Алещенко С.М., Леднев Ю.А, Мамиляева З.Х., Чу-греева Т.П., Хамаганова Е.Г. и др. Неожиданные эффекты в наследовании антигена HLA-A19. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2005; 2: 26-30.
5. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика; 1998.
6. Martin M., Mann D., Carrington M. Recombination rates across the HLA complex: use of microsatellites as a rapid screen for recombinant chromosomes. Hum. Mol. Genet. 1995; 4(3): 423-8.
REFERENCES
1. Savchenko V.G., ed. Program treatment of blood diseases: Diagnostic and treatment protocols for hematological diseases. Moscow: Praktika; 2012. (in Russian)
2. Tiercy J. M. Immunogenetics of allogeneic HCST. In: The EBMT Handbook 2008. Available at http://www.ebmt.org/Contents/Resources/ Library/EBMTESHhandbook/ (accessed 25 February 2016)
3. Zotikov E.A., Krasnikova N.A., Kutina R.M, UdovichenkoA.I., Lubimova L.S. Non Mendelian inheritance of HLA complex. Immunology. Russian Journal (Immunologiya). 1989; 6: 20-3. (in Russian)
4. Zaretskaya Yu.M., Aleshchenko S.M., Lednev Yu.A, Mamilyaeva Z.Kh., Chugreeva T.P., Khamaganova E.G., et al. Unexpected effects in the inheritance of HLA-A19 antigen. Bulletin of Transplantology and Artificial Organs. Russian Journal (Vestnik transplantology i iskusstvennykh organov). 2005; 2: 26-30. (in Russian)
5. Glants S. Bio-medical statistics. Moscow: Praktika; 1998. (In Russian)
6. Martin M., Mann D., Carrington M. Recombination rates across the HLA complex: use of microsatellites as a rapid screen for recombinant chromosomes. Hum. Mol. Genet. 1995; 4(3): 423-8.
Поступила 29.06.16 Принята к печати 10.02.17
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 616.36-002-022-032:611-018.5]:615.38
Туполева Т.А., Романова Т.Ю., Гуляева А.А., Тихомиров Д.С., Игнатова Е.Н., Овчинникова Е.Н., Ярославцева Н.Г., Абакаров Р.Р., Мисько О.Н., Гапонова Т.В., Савченко В.Г.
опасность передачи вирусов гепатитов в и с с кровью доноров
ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, 125167, г. Москва, Россия
Остаточный риск трансфузионного инфицирования вирусами гепатитов В (ВГВ) и С (ВГС) в России в несколько десятков раз выше, чем в США. В развитых странах уже много лет широко применяется тестирование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) как индивидуальных образцов крови доноров, так и в формате минипулов. Это выгодное экономическое решение, поскольку снижает стоимость заготавливаемых компонентов крови. Актуальным остается вопрос - обеспечивает ли такой подход должный уровень вирусной безопасности? Молекулярные маркеры вирусов выявляли в серо-негативных образцах плазмы доноров (n = 33 799) в пулах из 6. Количественно охарактеризованы 72 позитивных образца: 21 по ДНК ВГВ, 51 - РНК ВГС. Исследованы 17 экспериментально приготовленных пулов плазмы, содержащих ДНК ВГВ- или РНК ВГС-позитивный образец. Использованы коммерческие наборы реагентов. За весь период исследования ПЦР-тестирование позволило дополнительно определить наличие инфицирования ВГВ у 3 доноров и ВГС у 3. Низкие значения концентрации ДНК ВГВ зарегистрированы в 14 из 21 образца крови доноров, а в 4 образцах концентрация находилась на пороговом уровне чувствительности тест-системы. Низкие концентрации РНК ВГС определены в 14 из 51 образца крови доноров. Высокие значения концентрации РНК вГс преобладали (в 37 образцах). Все 5 пулов из 6 и из 12 образцов, содержащих РНК ВГС-позитивный образец плазмы, были положительными. ДНК ВГВ была выявлена в 7 из 10 пулов из 6 образцов, а 2 пула из 12 образцов оказались отрицательны. Учитывая полученные нами данные по высокой частоте низких концентраций ДНК ВГВ (66,67% случаев), тестирование донорской крови методом ПЦР в формате минипулов может приводить к недовыявлению инфицированных образцов при использовании тест-систем, обладающих недостаточной чувствительностью.
Ключевые слова: вирусы гепатитов В и С; донорская кровь; молекулярные маркеры.
Для цитирования: Туполева Т.А., Романова Т.Ю., Гуляева А.А., Тихомиров Д.С., Игнатова Е.Н., Овчинникова Е.Н., Ярославцева Н.Г., Абакаров Р.Р., Мисько О.Н., Гапонова Т.В., Савченко В.Г. Опасность передачи вирусов гепатитов В и С с кровью доноров. Гематология и трансфузиология. 2017; 62(1): 32-36. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0234-5730/2017-62-1-32-36
