23Оригинальная статья УДК 636.8
https://doi.org/10.57034/2618723X-2023-01-03
Вариабельность
биохимических показателей крови и установление референтных интервалов в доклинических исследованиях. Сообщение 9: кошки
М.В. Мирошников*, К.Т. Султанова, М.А. Ковалева, М.Н. Макарова
АО НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ», Ленинградская обл., Россия * Е-mail: [email protected]
Резюме. Этиопатогенез многих заболеваний и патологических состояний кошек и человека в значительной степени схож между собой. К их числу можно отнести лейкемию, болезнь Альцгеймера, сердечно-сосудистые заболевания, инфекции, иммунодефицитные состояния, ожирение, сахарный диабет и патологию сетчатки. Ввиду этого кошка может быть моделью выбора в доклинических исследованиях для изучения данных заболеваний, разработке новых методов хирургической коррекции, а также в тестировании новых фармакологических субстанций. В связи с широким привлечением кошек в доклинические исследования возникает проблема мониторинга нормального состояния организма и регистрации протекания жизненно важных процессов. Биохимический анализ сыворотки крови лабораторных животных является рутинной частью доклинических центров, который является неотъемлемой частью оценки состояния организма. Как правило, полученные значения интерпретируются путем сравнения с референтным интервалом. Референтный интервал, или диапазон нормы, в доклинических исследованиях — это не только интервал значений, который считается физиологической нормой, но и основа, точка отсчета для исследователя при интерпретации полученного набора результатов и дальнейшего определения наличия или отсутствия патологического процесса у лабораторных животных. Цель данной работы — установление основных биохимических показателей в сыворотке крови кошек породы русская голубая. Данные, используемые для формирования референтных интервалов, были получены от интактных животных за временной период май-ноябрь 2022 г. в АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ». В исследование были включены кошки: 30 самцов и 28 самок (небеременные и нерожавшие, без учета фазы менструального цикла). Возраст животных соответствовал диапазону 6-12 мес. В сыворотке крови животных регистрировали такие показатели, как креатинин, мочевина, аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, щелочная фосфатаза, холестерин, триглицериды, общий белок, альбумин, глюкоза, креатинкиназа, лактатдегидрогеназа и общий билирубин. При сравнении полученных интервалов с референтными значениями из источников литературы показано, что в целом диапазоны рассматриваемых показателей схожи. При сопоставлении референтных интервалов биохимических показателей крови кошек с таковыми у человека сделан вывод, что верхняя граница таких показателей, как креатинин, мочевина, аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, глобулины, креатинкиназа, глюкоза (самки) и лактатдегидрогеназа, выше у лабораторных животных. Верхняя граница показателей уровня холестерина, триглицеридов, альбумина, соотношения альбуминов и глобулинов и общего билирубина ниже у кошек, чем у человека. Установленные в исследовании референтные интервалы биохимических показателей крови кошек породы русская голубая являются полезным инструментом в области доклинических исследований и могут быть применены для мониторинга здоровья животных, поддержания адекватности сформированной патологической модели и изучения токсикологических свойств новых химических веществ.
Ключевые слова: лабораторные животные, кошки, русская голубая, кровь, сыворотка Благодарности. Работа выполнена без спонсорской поддержки.
Для цитирования: Мирошников М.В., Султанова К.Т., Ковалева М.А., Макарова М.Н. Вариабельность биохимических показателей крови и установление референтных интервалов в доклинических исследованиях. Сообщение 9: кошки. Лабораторные животные для научных исследований. 2023; 1. 26-39. https://doi.org/10.57034/2618723X-2023-01-03.
© Мирошников М.В., Султанова К.Т., Ковалева М.А., Макарова М.Н., 2023
Original article
Variability of blood biochemical parameters and establishment of reference intervals in preclinical studies. Part 9: cats
M.V. Miroshnikov*, K.T. Sultanova, M.A. Kovaleva, M.N. Makarova
Research and manufacturing company "Home of Pharmacy", Leningrad oblast, Russia * E-mail: [email protected]
Abstract. The etiopathogenesis of many diseases and pathological conditions of cats and humans is largely similar to each other. These include leukemia, Alzheimer's disease, cardiovascular diseases, infections, immunodeficiency conditions, obesity, diabetes mellitus and retinal pathology. In view of this, the cat can be a model of choice in preclinical studies for the study of these diseases, the development of new methods of surgical correction, as well as testing new pharmacological substances. Due to the widespread involvement of cats in preclinical studies, there is a problem of monitoring the normal state of the body and registering the flow of vital processes. Biochemical analysis of blood serum of laboratory animals is a routine part of preclinical centers, which is an integral part of the assessment of the state of the body. As a rule, the obtained values are interpreted by comparison with the reference interval. The reference interval or range of norm in preclinical studies is an interval of values that is considered a physiological norm. The reference interval or range of norm in preclinical studies is an interval of values that is considered a physiological norm. This is the basis, the starting point for the researcher when interpreting the obtained set of results and further determining the presence or absence of a pathological process in laboratory animals. The purpose of this work was to establish the main biochemical parameters in the blood serum of cats of the Russian blue breed. The data used for the formation of reference intervals were obtained from intact animals for the time period May-November 2022 in "Home of Pharmacy". The study included 30 males and 28 females of cats. The age of the animals corresponded to the range of 6-12 months. In the blood serum of animals, such indicators as creatinine, urea, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, cholesterol, triglycerides, total protein, albumin, glucose, crea-tine kinase, lactate dehydrogenase and total bilirubin were recorded. When comparing the obtained intervals with reference values from literary sources, it was shown that, in general, the ranges of the considered indicators are similar. When comparing the obtained reference intervals of biochemical parameters of the blood of cats and the corresponding reference intervals of humans, it was concluded that the upper limit of such indicators as creatinine, urea, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, globulins, creatine kinase, glucose (females) and lactate dehydrogenase is higher in laboratory animals. The upper limit of cholesterol, triglycerides, albumin, the ratio of albumins to globulins and total bilirubin is lower in cats than in humans. The reference intervals of biochemical blood parameters of Russian blue cats established in the study are a useful tool in the field of preclinical research and can be used to monitor animal health, the adequacy of the formed pathological model and study the toxicological properties of new drugs.
Keywords: The Russian Blue Cat, laboratory animals, felines, biomedical research, blood, serum Acknowledgements. The study was performed without external funding.
For citation: Miroshnikov M.V., Sultanova K.T., Kovaleva M.A., Makarova M.N. Variability of blood biochemical parameters and establishment of reference intervals in preclinical studies. Part 9: cats. Laboratory Animals for Science. 2023; 1. 26-39. https://doi.org/10.57034/2618723X-2023-01-03.
Введение
В настоящее время кошки в качестве лабораторных животных используются не более чем в 2% экспериментов. Однако они вносят уникальный вклад в науку. Особые биологические характеристики делают их незаменимыми в области экспериментальной неврологии, офтальмологии, исследовании ретровирусов, наследственных и иммунодефицитных заболеваний [1].
Домашняя кошка (Felis cattus) является одним из немногих млекопитающих, для которых была собрана обширная информация о геноме. Этот необычный акцент обусловлен значительным числом естественных наследственных заболеваний,которые полезны в качестве моделей их аналога у человека, например, восприимчивость к вирусу лейкемии и вирусу иммунодефицита кошек [2].
У рассматриваемого вида животных самая высокая частота естественных лимфоидных
злокачественных новообразований среди всех неродственных млекопитающих. Вирус кошачьей лейкемии (FeLV) представляет собой онковирус, который вызывает лимфо-саркому, лейкемию и апластическую анемию у кошек. Создание данной патологии у рассматриваемых животных считается важной моделью для нескольких характеристик ре-тровирусно-индуцированных заболеваний, особенно гематопоэтических опухолей, таких как острый лимфобластный лейкоз и лимфо-ма. Вирус также вызывает иммунодефицит и миелосупрессию у животных. После заражения у кошек сохраняется виремия, и вирус выделяется, в частности, со слюной и выделениями из носа [3].
Заболевание кошек, вызываемое вирусом иммунодефицита кошек (FIV), считается одним из наиболее актуальных естественных моделей синдрома приобретенного иммунодефицита. Преимущества модели кошачьей болезни включают сходство не только с вирусом иммунодефицита человека (лентивирусом человека), но также имеют похожие патогенез и клинические признаки, легкость экспериментального заражения и предсказуемое прогрессирование заболевания. Характерные изменения в иммунной системе — это лимфа-денопатия, нейтропения, снижение пролифе-ративного ответа лимфоцитов и повышенная восприимчивость к оппортунистическим инфекциям [4].
Еще одним примером схожего протекания патологического процесса у человека и кошки является модель инфицирования Helicobacter. Helicobacter pylori — этиологический агент, ответственный за последовательность дегенеративных изменений в слизистой оболочке желудка человека, начиная с гастрита, прогрессирующего до пептической язвы, и заканчивая раком желудка. Helicobacter felis может точно воспроизводить все повреждения, обнаруженные при заболевании человека (кроме язв), особенно те, которые связаны с хронической инфекцией [5].
Другими примерами вовлеченности кошек в доклинические исследования являются модели неинфекционных заболеваний, например, сердечно-сосудистые. Описаны три основных типа спонтанной кардиомиопатии у кошек: гипертрофическая, застойная (ди-латационная) и рестриктивная. Гипертрофическая кардиомиопатия в настоящее время является наиболее распространенным спонтанным заболеванием сердца у кошек, поражающим 10-15% популяции, и схожа с симптоматикой и течением этого заболевания у человека [6, 7].
Кошки также используются в доклинических исследованиях, направленных на изучение патобиохимических и фармакологических аспектов ожирения и сахарного диабета [8, 9]. Кошки с ожирением имеют повышенное ко-
личество внутри- и внемиоцеллюлярного жира [10], что у людей обычно связано с потерей чувствительности к инсулину [11]. Повышенное количество жира в мышцах связано с изменением экспрессии и активности липо-протеинлипазы. Этот фермент приобретает более высокую активность в мышечной ткани, что приводит к распределению жирных кислот в мышцах [10]. Было показано, что как глюко-неогенный, так и гликогенолитический вклад в производство глюкозы в печени кошек (худых и страдающих ожирением) аналогичен тому, который был зарегистрирован у людей [12]. У рассматриваемых животных повышенная масса тела и инсулинорезистент-ность также сопровождаются нарушениями в соотношении липопротеинов, аналогичными тем, которые наблюдаются у людей. У кошек с ожирением отмечается увеличение уровня свободных неэтерифицированных жирных кислот, липопротеинов очень низкой плотности и триглицеридов в крови [13].
Другим примером использования кошек как модели in vivo в доклинических исследованиях является изучение противовоспалительной активности новых фармакологических агентов. Была разработана эффективная модель подкожного введения каолина кошке, а также показано, что данная инъекция в лапу животного вызывает четко выраженный, воспроизводимый и обратимый воспалительный ответ [14].
Еще одним примером использования кошек в доклинических исследованиях являются офтальмологические исследования. Популяции собак и кошек имеют большой потенциал для использования в качестве крупных экспериментальных животных ввиду сходства заболеваний сетчатки с таковыми у человека [15].
Кошки и собаки подвержены широкому перечню различных онкологических заболеваний [16, 17]. Поскольку у грызунов значительно реже развиваются онкологические заболевания и протекают иным образом, чем у человека, крупные животные являются незаменимыми моделями для изучения этиопатогенеза, фармакологической и хирургической коррекции данных заболеваний. К числу наиболее часто моделируемых онкологических патологий относят неходжкинскую лимфому [18], рак молочной железы [19], рак легких [20] и опухоли головы и шеи [21].
Известно, что функциональная активность семейства CYP1 кошек схожа с человеческим аналогом, но протекает интенсивнее, чем у человека, а подсемейства CYP2A и CYP2E кошек осуществляют каталитическую активность медленнее, чем человеческие аналоги. Ор-тологи CYP2B и CYP2C у кошек либо совсем не экспрессируются в печени животного, либо в очень незначительных количествах, тем самым они не играют значительной роли в метаболизме лекарственных веществ, который
связан в основном с данными подсемействами. Подсемейство CYP2D у кошек аналогично таковому человека, а активность подсемейства CYP3А значительно ниже, чем у человека. Таким образом, метаболизм фармакологического агента у кошек протекает аналогично таковому у человека, если в основном он связан с семейством CYP1 или подсемействами CYP2A, CYP2Е, CYP2D [22, 23].
Ввиду широкой вовлеченности кошек в доклинические исследования возникает проблема контроля нормального состояния организма и регистрации протекания жизненно важных биохимических процессов.
Цель данной статьи — установление референтных интервалов основных биохимических показателей в сыворотке крови кошек. Данная информация необходима в доклинических исследованиях для контроля мониторинга здоровья животных, моделирования патологического процесса и тестирования новых фармакологических агентов.
Материал и методы
Данные, используемые для формирования референтных интервалов, были получены от интактных животных за временной период май-ноябрь 2022 г. в АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ». Проведенные манипуляции и эксперименты были одобрены биоэтической комиссией. В исследование включены кошки породы русская голубая: 30 самцов и 28 самок (небеременные и нерожавшие, без учета фазы менструального цикла). Возраст животных соответствовал диапазону 6-12 мес, масса тела самцов и самок была в пределах 3-5 кг. Животных содержали в одинаковых стандартных условиях вивария: температура воздуха 22-26 °С, относительная влажность 40-75%, 12-часовой световой день. Кормление животных проводили в соответствии с Директивой 2010/63/Еи Европейского парламента и Совета Европейского союза от 22 сентября 2010 г. по охране животных, используемых в научных целях. Исследование выполнено с соблюдением принципов Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов и других научных целей (Страсбург, 1986), и в соответствии с правилами надлежащей лабораторной практики. Определение интересующих биохимических показателей проводили в одинаковых условиях с использованием общепринятых преаналитических и аналитических методов. Забор крови у кошек производился из передней подкожной вены предплечья. Для фиксации животного использовали елизаветинский (ветеринарный) воротник. Забор крови происходил в несколько этапов. Первым этапом была подготовка — удаление шерсти вдоль расположения вены и дезинфекция кожи, затем кожа непосредственно перед проколом
должна была высохнуть. После этого накладывали жгут, чтобы визуализировать вены. Далее осуществляли прокол и постепенное продвижение иглы вдоль сосуда, забор крови в пробирку и перемешивание с антикоагулянтом. После данных манипуляций жгут снимали и накладывали давящую повязку на 1015 мин для предотвращения образования гематомы. Кровь собирали натощак без се-дации и анестезии в вакуумные пластиковые пробирки с активатором свертывания и гелем (ООО «КОРВЕЙ», Россия). Затем, для получения сыворотки, кровь центрифугировали в течение 15 мин при 3000 об/мин на центрифуге ОПн-3.04 «Дастан» (Киргизия). Полученную сыворотку переносили в стерильные пробирки, в которых определяли биохимические показатели. В сыворотке крови животных на автоматическом биохимическом анализаторе Rendom Access A-25 (BioSystems, Испания) с использованием соответствующих наборов регистрировали следующие показатели: кре-атинин, мочевина, аланинаминотрансфера-за (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), щелочная фосфатаза, холестерин, триглице-риды, общий белок, альбумин, глюкоза, кре-атинкиназа, лактатдегидрогеназа и общий билирубин. Концентрацию общего билирубина определяли с помощью набора реактивов («Вектор-Бест», Россия), уровень остальных аналитов рассчитывали, применяя биохимические наборы (BioSystems, Испания). Все статистические расчеты проводили с использованием программы GraphPad Prism 9.0 (США), статистические выбросы оценивали с помощью метода Тьюки, который был описан ранее [24-26], вид распределения определяли, используя критерий Шапиро-Уилка, парные сравнения между животными разного пола проводили с применением U-критерия Ман-на-Уитни и f-критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
Из анализа были исключены значения, называемые «жесткие» и «мягкие» выбросы, то есть данные, лежащие за пределами интервала Q3 и Q1 (1-го и 3-го квартилей). Верхний и нижний пределы рассчитывали следующим образом:
Q1-1,5IQR и Q3+1,5IQR.
Данные о доле статистических выбросов по каждому показателю и выходящие за пределы референтных интервалов представлены в табл. 1.
Наибольшие статистические выбросы и отклонения среди биохимических показателей крови самцов зарегистрированы в отношении АЛТ — 13,3%, щелочной фосфатазы и общего белка — 10% (см. табл. 1). Также были зарегистрированы статистические отклонения ме-
Таблица 1. Статистические выбросы и отклонения (в %) при исследовании русской голубой кошки
Показатель Самцы Самки
Креатинин 3,3 0,0
Мочевина 6,7 0,0
Аспартатаминотрансфераза 6,7 7,1
Аланинаминотрансфераза 13,3 7,1
Щелочная фосфатаза 10,0 0,0
Холестерин 0,0 0,0
Триглицериды 6,7 0,0
Общий белок 10,0 14,3
Альбумин 0,0 10,7
Глобулины 3,3 3,6
Соотношение альбумин/глобулины 3,3 7,1
Глюкоза 3,3 7,1
Общий билирубин 0,0 3,6
Креатинкиназа 6,7 10,7
Лактатдегидрогеназа 3,3 7,1
нее 10% по таким показателям, как мочевина, АСТ, триглицериды и креатинкиназа — 6,7%, а также креатинин, глобулины, соотношение альбумин/глобулины, глюкоза и лактатде-гидрогеназа — 3,3%. По показателям холестерина, альбуминов и общего билирубина статистических выбросов замечено не было. У самок наибольшие статистические отклонения зарегистрированы в отношении общего белка — 14,3%, альбумина и креатинкиназы — 10,7%. Среди таких показателей, как АСТ, АЛТ, соотношение альбумин/глобулины, глюкоза и лактатдегидрогеназа, статистические выбросы составили 7,1%, отклонения глобулинов и общего билирубина — 3,6%. Среди таких показателей, как креатинин, мочевина, щелочная фосфатаза, холестерин и триглицериды, статистических выбросов не зарегистрировано.
Вид распределения полученных значений определяли по критерию Шапиро-Уилка. В зависимости от вида распределения референтные интервалы рассчитывали следующим образом:
X ±1,96SD —
ср '
для нормального распределения;
2,5-97,5%о — для ненормального распределения (табл. 2).
В табл. 2 представлены результаты референтных интервалов биохимических показателей крови кошек.
Полученные диапазоны значений самцов и самок кошек породы русская голубая сопоставимы между собой по всем рассматриваемым показателям, статистической разницы не выявлено (см. табл. 2).
При сравнении полученных интервалов с референтными значениями из источников литературы (табл. 3) показано, что в целом диапазоны рассматриваемых показателей схожи, но присутствуют и различия. Так, по ряду источников ширина рассчитанных референтных диапазонов креатинина, щелочной фосфатазы, холестерина, альбумина, глобулинов, соотношение альбумин/глобулины, глюкозы, общего билирубина, креатинкиназы и лактатдегидрогеназы оказалась меньше, а мочевины, наоборот, больше. Данные различия могут быть связаны с преаналитическими и аналитическими особенностями проведения анализа, породы животных и условий их содержания. Именно поэтому лучшим решением для всех доклинических центров является установление своих собственных референтных интервалов лабораторных животных. Нормальные диапазоны АСТ, АЛТ и общего белка оказались схожи с аналогичными из данных литературы.
Таблица 2. Референтные интервалы (РИ) биохимических показателей крови у русской голубой кошки
Показатель Самцы Самки
Способ расчета РИ Способ расчета РИ
Креатинин, мкмоль/л X ±1,96SD (Х ) ср ' v ср 69-183 (126) X ±1,96SD (Х ) ср ср 59-170 (114)
Мочевина, ммоль/л Х ±1,96SD (Х ) ср ср 7,2-15 (11) X ±1,96SD (Х ) ср ср 7,2-16 (12)
Аспартатаминотрансфераза, Ед/л 2,5-97,5% (50%) 16-65 (23) X ±1,96SD (Х ) ср ср 16-65 (23)
Аланинаминотрансфераза, Ед/л 2,5-97,5% (50%) 40-120 (54) X ±1,96SD (Х ) ср ср 25-107 (66)
Щелочная фосфатаза, Ед/л 2,5-97,5%о (50%о) 25-147 (55) 2,5-97,5%о (50%о) 29-158 (72)
Холестерин, ммоль/л Х ±1,96SD (Х ) срср 2,3-4,5 (3,4) Хс ±1,96SD (Хс ) с с 1,3-4,1 (2,7)
Триглицериды, ммоль/л Х ±1,96SD (Х ) срср 0,11-0,51 (0,31) 2,5-97,5% (50%) 0,03-0,97 (0,29)
Общий белок, г/л Х ±1,96SD (Х ) срср 68-80 (74) Хс ±1,96SD (Хс ) с с 67-94 (80)
Альбумин, г/л Х ±1,96SD (Х ) срср 25-34 (29) Хс ±1,96SD (Хс ) с с 25-33 (29)
Глобулины, г/л Х ±1,96SD (Х ) с с 39-51 (45) 2,5-97,5% (50%) 43-68 (48)
Соотношение альбумин/глобулины Хс ±1,96SD (Хс ) с с 0,49-0,79 (0,64) Хс ±1,96SD (Хс ) с с 0,46-0,75 (0,60)
Глюкоза, ммоль/л Хс ±1,96SD (Хс ) с с 3,8-5,3 (4,5) 2,5-97,5% (50%) 3,6-7,0 (4,6)
Общий билирубин, мкмоль/л Хс ±1,96SD (Хс ) с с 0,11-2,4 (1,3) Хс ±1,96SD (Хс ) с с 0,10-2,3 (1,2)
Креатинкиназа, Ед/л 2,5-97,5% (50%) 65-339 (118) Хс ±1,96SD (Хс ) с с 97-205 (151)
Лактатдегидрогеназа, Ед/л 2,5-97,5% (50%) 95-336 (149) Хр±1,9650 (Х) 94-306 (200)
Примечание. В скобках: для данных с нормальным распределением — среднее значение; для не подчиняющихся нормальному распределению — медиана.
Сопоставляя полученные референтные интервалы биохимических показателей крови кошек породы русская голубая и соответствующие референтные интервалы человека (см. табл. 3), можно сделать вывод, что верхняя граница диапазона показателей креатинина, мочевины, АСТ, АЛТ, глобулинов, креатинкиназы, глюкозы (самки) и лактатде-гидрогеназы выше у лабораторных животных. Верхняя граница интервалов холестерина, триглицеридов, альбумина, соотношения альбумин/глобулины и общего билирубина ниже у кошек, чем у человека. Рассчитанные интервалы общего белка и глюкозы (самцы) соответствуют таковым двух видов.
Биохимическое исследование крови позволяет выявить субклинические и клинические заболевания кошки, определить работу ферментативной системы организма и дать информацию о поражении того или иного органа лабораторного животного. Ниже указана характеристика представленных в статье биохимических показателей крови данного вида животных, а также рассмотрены наиболее распространенные патологические и физиологические состояния, при которых происходят изменения этих показателей у человека и кошек (табл. 4).
Уровень глюкозы иногда может быть повышен у рассматриваемых животных с сахарным
диабетом. Самая распространенная причина повышенного уровня глюкозы у животных — стресс в момент взятия крови в результате секреции катехоламинов и стимуляции глю-конеогенеза. Быстро определить, является ли повышение уровня глюкозы временным или постоянным, можно проведя общий анализ мочи. При хронически повышенном уровне глюкозы он также будет увеличен и в моче. У кошек сахарный диабет часто возникает вследствие сочетанного нарушения секреции инсулина и дефекта инсулиновых рецепторов, а также гипергликемия может развиться на фоне действия гормонов, таких как глюкагон, тироксин, гестагены и эстрогены. Низкий уровень сахара в крови встречается реже и бывает признаком рака поджелудочной железы или обширной инфекции, например, сепсиса. Низкий уровень сахара в крови может вызвать депрессию у животного или судороги [1, 36, 37].
Общий белок в крови отражает состояние аминокислотного обмена в организме, включает альбумин и более крупные белки, называемые глобулинами. Белки в организме животного принимают участие практически во всех жизненных процессах, важно как их повышенное, так и пониженное количество. Уровень общего белка может быть увеличен, если кошка обезвожена, или им-
Таблица 3.
Данные литературы, касающиеся референтных значений биохимических показателей крови кошек и человека
Показатель Кошка Человек [27, 28]
Без учета пола Мужчина Женщина
50-190 [29]НУ 71-186 [30]НУ 53-221 [31]("=20)
Креатинин, мкмоль/л 105-224 [32](п=44) 53-106 44-97
67-157 [33]НУ 71-186 [34]НУ 44-159 [35]НУ
Мочевина, ммоль/л 6-12 [29]НУ 6,4-12 [33]НУ 2,9-12,5 [35]НУ 3,3-8,3
Аспартатаминотрансфераза, Ед/л 17-48 [30]НУ 13-62 [32](п=44) 10-56 [33]НУ 20-60 [34]НУ До 40
Аланинаминотрансфераза, Ед/л 31-105 [29]НУ 28-109 [30]НУ 2-161 [31]("=20) 29-142 [32](п=44) 34-90 [33]НУ 20-120 [34]НУ До 40
8-186 [31]("=20) 1-197 [8] 84-538 [8 (0-6 мес)
21-197 [8]НУ
Щелочная фосфатаза, Ед/л 184-538[8]НУ 40-130 35-105
Холестерин, ммоль/л 2,0-12 [29]НУ 2,3-6,5 [32](п=44) 1.8-5,8 [33]НУ 1.9-6,7 [34]НУ 1,9-5,2 [35]НУ До 5,2
Триглицериды, ммоль/л Менее 1,2 [30]НУ 0,15-1,49 [32](п=44) 0,2-1,4 [34]НУ 0,45-1,84 0,40-1,53
Общий белок, г/л 66-84 [30]НУ 47-83 [31]("=20) 64-85 [32](п=44) 65-84 [33]НУ 61-80 [34]НУ 54-78 [35]НУ 64-83
Альбумин, г/л
Глобулины, г/л
Соотношение альбумин/глобулины
30-44 [29]НУ 32-43 [30]НУ 30-45 [31]("=20) 32-45 [32](п=44) 25-37 [33]НУ 28-40 [34]НУ 23-39 [35]НУ 22-50 [35]НУ
0,7-1,4 [29]НУ 0,8-1,5 [30]НУ 0,45-1,2 [31]("=20) 0,7-1,5 [32](п=44) 0,5-0,9 [33]НУ
35-50
20-30
1,2-2,3
Глюкоза, ммоль/л 4,4-7,7 [29]НУ 3,9-10 [30]НУ 2,0-8,0 [31]("=20) 3,9-8,3 [35]НУ 3,3- 5,5
Общий билирубин, мкмоль/л 0-4 [29]НУ 0-3,4 [32](п=44) 1,7-8,6 [34]НУ До 21
Креатинкиназа, Ед/л 94-449 [29]НУ 70-558 [32](п=44) 58-489 [33]НУ 50-450 [34]НУ Менее 167 Менее 190
71-406 [30]НУ
Лактатдегидрогеназа, Ед/л 60-490 [34]НУ 135-214 135-225
Примечание: n — количество животных; НУ — количество животных в источнике литературы не указано.
Таблица 4.
Сравнение биохимических показателей и связанных с ними некоторых патологических состояний кошек и человека
Показатель Изменение показателя Некоторые патологические состояния, характерные для кошек и человека [1-47]
Креатинин Увеличение Снижение скорости клубочковой фильтрации/почечного кровотока, дегидратация, увеличение катаболизма белка, острая и хроническая почечная недостаточность, действие токсических веществ (аминогликозиды)
Снижение Увеличение скорости клубочковой фильтрации/тока крови через почки, беременность, кахексия
Мочевина Увеличение Дегидратация, гиповолемия, шок, ожоги, сепсис, хроническая почечная недостаточность, нефротоксины, гломерулонефрит, пиелонефрит, обструкция мочевыводящих путей, высокобелковая диета, неоплазия
Снижение Снижение потребления белка или голодание, гипергидратация, нарушение всасывания, повышенный диурез, печеночная недостаточность
Аспартатаминотрансфераза Увеличение Патологии печени, ожоги, повреждение лекарствами, метастазы в печени, тяжелая физическая нагрузка, сердечная недостаточность
Снижение Клинически незначимо, голодание
Аланинаминотрансфераза Увеличение Разрушение клеток печени при некрозе, циррозе, желтухе, опухоли печени, разрушение мышечной ткани при травме, мышечной дистрофии, ожоги, токсическое действие на печень лекарств (антибиотиков и др.)
Снижение Клинически незначимо, голодание
Щелочная фосфатаза Увеличение Холестаз, повреждения печени, панкреатит, молодой возраст, период заживления перелома, неоплазия костной ткани, метаболические заболевания костей (резорбция костной ткани), беременность
Снижение Пожилой возраст, голодание, снижение массы тела
Холестерин Увеличение Ожирение, гипотиреоз, панкреатит, болезни почек, сахарный диабет
Снижение Голодание, недостаточное всасывание в кишечнике
Триглицериды Увеличение Богатая жирами пища, ожирение, панкреатит, сахарный диабет, гепатит, сердечная ишемия, нарушения функции почек, беременность, стресс
Снижение Голод, инфекции, применение гепарина или аскорбиновой кислоты
Увеличение Обезвоживание, хронические воспалительные процессы, аутоиммунные заболевания, миеломная болезнь, обширные ожоги
Общий белок, альбумин Снижение Длительное голодание, патологии почек, нарушение всасывающей функции кишечника, гепатит, обширные кровопотери, наличие паразитов
Увеличение Стрессы, сахарный диабет, патологии поджелудочной железы, гиперфункция щитовидной железы
Глюкоза Снижение Инсулинома, голодание в течение долгого времени, нарушения в работе эндокринной системы, тяжелая интоксикация с поражением функции печени
Общий билирубин Увеличение Патологии печени, непроходимость желчных протоков и застой желчи, лептоспироз, гиповитаминоз В12, гемолиз
Снижение Анемии, фиброз тканей
Лактатдегидрогеназа Увеличение Гемолиз, повреждения скелетной мускулатуры, гепатоцеллюлярные повреждения, инфаркт миокарда, неопластические процессы, острый панкреатит, физическая нагрузка
Снижение Клинически незначимо
Креатинкиназа Увеличение Инфаркт миокарда, послеоперационный период, мышечные травмы, инфекции, судороги, интоксикация успокоительными средствами, чрезмерная физическая нагрузка
Снижение Снижение мышечной массы
labanimalsjournal.ru Лабораторные животные для научных исследований ТТ Том 6, №1 (2023) • Laboratory animals for science 33
мунная система животного стимулирует выработку большого количества антител. Общий белок снижается, если у животного нарушена работа иммунной системы, в результате чего не вырабатываются антитела, а также ввиду неправильного питания, истощения организма, заболевания печени и почек, осложнения сахарного диабета, анемии, последствий кровотечения, прогрессирования онкологических заболеваний, ВИЧ [38, 39].
Альбумин представляет собой белок, вырабатываемый печенью. В организме кошки он выполняет большое количество функций (перенос питательных веществ, сохранение резервных запасов аминокислот для организма, поддержание осмотического давления крови и др.). Ацетилсалициловая кислота в повышенных дозах снижает уровень альбумина. Тестостерон, эстроген и гормон роста могут вызвать легкое увеличение концентрации альбумина в крови. Высокие дозы глюкокор-тикоидов способны привести к незначительному увеличению уровня альбумина. Противо-судорожные и противоопухолевые препараты у кошек не вызывают гипоальбуминемию сами по себе, без соответствующих причин, лежащих в основе снижения уровня альбумина (например, цирроз печени). Содержание альбумина снижается в случае повреждения печени, кишечника или почек [38, 39]. Глобулины делятся на а/р/у. Количество а-глобулинов повышается при острых и подострых поражениях печени, процессах тканевого распада, клеточной инфильтрации, злокачественных новообразованиях и нефротическом синдроме, снижение наблюдается при сахарном диабете и токсических гепатитах. Количество р-глобулинов повышается при заболеваниях печени, нефротическом синдроме, кровоточащей язве желудка, гипотиреозе. Уровень у-глобулинов повышается при хронических заболеваниях, циррозе печени, хроническом лимфолейкозе, эндотелиомах, остеосарко-мах, кандидомикозе. Снижение наблюдается при истощении иммунной системы [38, 39].
Холестерин — структурный компонент, обеспечивающий прочность клеточных структур, принимает участие в синтезе многих жизненно важных гормонов. У кошек редко бывает повышенный уровень холестерина. При некоторых заболеваниях (гипотиреоз, болезнь Ку-шинга, диабет и болезни почек), вызывающих повышенный уровень холестерина, происходит потеря белка с мочой. Высокий уровень холестерина не приводит у кошек к развитию патологий сердца и сосудов, как у людей [38, 40].
Измерение уровня общего билирубина в сыворотке крови кошек проводится при выявлении желтухи, билирубинурии или при подозрении на заболевания печени. При повышении в крови конъюгированного билирубина (например, при патологии гепатобилиарной
системы или обструкции желчных протоков) последний связывается с сывороточными альбуминами ковалентной и нековалентной связью. Ковалентно связанный с альбумином билирубин (дельта-билирубин, или билипро-теин) выводится из организма медленнее других форм билирубина, период его полувыведения примерно равен скорости полувыведения альбумина (8-20 дней), при этом у кошек стойкая гипербилирубинемия и желтуха сохраняются дольше. У кошек не вызванная гемолизом желтуха, как правило, указывает на первичное заболевание печени. Некоторые бактериальные эндотоксины и медиаторы ответа острой фазы подавляют мембранный механизм секреции билирубина в желчные канальцы и вызывают сепсис-ассоциированный холестаз [41].
АЛТ и АСТ — ферменты, вырабатываемые клетками печени, сердца, эритроцитами и скелетной мускулатурой. Пропорция АСТ/АЛТ > 1 свидетельствует о патологии сердца или мышечной ткани; АСТ/АЛТ < 1 — о патологии печени. У кошек самые высокие концентрации АЛТ отмечаются в гепатоцитах. Также этот фермент присутствует, но в меньших концентрациях в почках, поджелудочной железе, кишечнике, скелетной и сердечной мышечных тканях и эритроцитах. У кошек АЛТ превалирует в печеночной ткани, ее сывороточная активность является более специфичным индикатором повреждения печени, чем АСТ. Уровень сывороточной активности АЛТ пропорционален количеству поврежденных клеток, но не всегда связан с тяжестью повреждения тканей. Холестаз и обструкция желчных путей могут увеличить сывороточную активность АЛТ вследствие токсических эффектов солей желчных кислот на гепатоциты. Одновременное исследование уровня щелочной фосфа-тазы и гамма-глютамилтранспептидазы в сыворотке крови помогает выявить возможный холестатический компонент при печеночной патологии. При увеличении активности АЛТ исследование желчных кислот или уровня аммиака в плазме крови дает возможность оценить функцию печени. Увеличение активности АЛТ также отмечается вследствие острых кишечных энтеропатий, внутрисосудистого гемолиза (особенно у кошек), при гипоксии, в результате токсического воздействия на гепатоциты и в ряде других случаев. Период полураспада АЛТ в сыворотке крови кошек составляет 3,5 ч. После тяжелого острого ге-патоцеллюлярного поражения печени (например, воздействие токсичных веществ) уровень фермента значительно увеличивается через 12 ч и достигает пика в течение 1-2 дней. При прекращении воздействия повреждающих факторов скорость нормализации сывороточной активности АЛТ не всегда соответствует ожидаемой, принимая во внимание период полураспада фермента в сыворотке
крови, и составляет 1-3 нед. Такое медленное снижение можно объяснить повышением активности АЛТ в ходе регенерации печеночной ткани. У кошек период полувыведения АСТ короче, чем АЛТ, и составляет около часа. Таким образом, АСТ может быть более чувствительным маркером при значительных повреждениях печени у кошек. Сывороточная АСТ имеет более длительный период полувыведения, чем креатинкиназа, что повышает диагностическую чувствительность во время восстановления от повреждения миоцитов или гепатоцитов. Повышение уровня АСТ может наблюдаться после отравления цинком или употребления ацетаминофена [38-41].
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) — фермент, участвующий в конечном этапе расщепления глюкозы. Мышцы, печень и разрушающиеся эритроциты, как правило, являются источниками высокой активности ЛДГ в сыворотке. После повреждения тканей сывороточная активность ЛДГ достигает пика через 24-48 ч и возвращается к норме в течение 7-10 дней. В случае если образец крови слишком долго отстаивается перед центрифугированием, уровень ЛДГ может быть ложно повышен в результате разрушения эритроцитов, также такое повышение ЛДГ может быть связано с неправильным забором крови. Уровни ЛДГ могут повышаться и после тяжелых физических нагрузок, при наличии некоторых злокачественных опухолей и острого панкреатита [38, 42].
Период полувыведения кишечной, почечной и плацентарной изоформы щелочной фос-фатазы у кошек составляет примерно 2 мин. Таким образом, они вряд ли могут вызвать увеличение активности фермента в сыворотке крови. Увеличение секреции щелочной фос-фатазы и повышение ее активности в сыворотке крови обычно происходит при холеста-зе, повышении активности остеобластов, в результате действия некоторых лекарственных препаратов, а также при некоторых хронических заболеваниях. Период полувыведения фермента в результате холестаза составляет приблизительно 6 ч у кошек. Различные эндокринные заболевания могут быть также связаны с повышенной активностью щелочной фос-фатазы в сыворотке крови животных [43, 44].
У кошек и собак удаление азота из организма происходит посредством экскреции мочевины. Величина реабсорбции мочевины в канальцах зависит от скорости тока мочи по канальцам, уровень мочевины в сыворотке крови используется для оценки скорости клубочковой фильтрации. С ее снижением увеличивается интенсивность реабсорбции мочевины, и возрастает ее уровень в крови. Однако, поскольку уровень мочевины и креа-тинина в сыворотке крови не увеличиваются вплоть до поражения около 70% нефронов, определение концентрации этих показателей не является информативным в ранней диа-
гностике почечной недостаточности. К наиболее распространенным причинам увеличения уровня мочевины в сыворотке крови относятся гиповолемия и желудочно-кишечные кровотечения. К другим причинам увеличения уровня мочевины в крови можно отнести усиление катаболизма белка (например, при употреблении высокобелковой пищи), но при этом, как и при усиленном мышечном катаболизме, азотемии у здоровых животных не возникает. Длительное применение корти-костероидных препаратов также может быть причиной повышения концентрации мочевины в крови [38, 39].
Креатинин — побочный мышечный продукт, выводимый из организма почечной системой. Уровень колеблется в зависимости от состояния выделительной мочевой системы. Отношение мочевина/креатинин (0,08 и меньше) позволяет прогнозировать скорость развития почечной недостаточности. Хотя изменения уровня креатинина обычно связаны с заболеванием почек, при этом многие другие факторы могут тоже влиять на его уровень. К примеру, обезвоживание, шок, болезни сердца, мышечная атрофия или сильная потеря массы тела. Антибиотики также вызывают повышение уровня креатинина [38, 45].
Креатинфосфокиназа — фермент, который в огромном количестве содержится в скелетной группе мышц. У большинства видов животных самая высокая концентрация фермента наблюдается в мышечной ткани. По его наличию в крови можно судить о работе сердечной мышцы, а также о внутренних мышечных травмах. В скелетной мускулатуре активность креатинфосфокиназы в 2-4 раза выше, чем в сердечной мышце, хотя у кошек в этих тканях активность фермента почти одинаковая. Период полувыведения креатинфосфо-киназы из крови у кошек при мышечном повреждении, как и у многих других животных, составляет в среднем 6-7 ч. У кошек значительное повышение активности креатинфос-фокиназы в сыворотке крови отмечается в состоянии анорексии (в результате мышечного катаболизма), при миопатиях различного ге-неза и гипертиреозе. Введение кортикосте-роидных препаратов, стрептокиназы, амфоте-рицина В, пенициллинов и сульфаниламидов может увеличить значение креатинфосфоки-назы [46, 47].
Уровень триглицеридов в крови характеризует работу сердечно-сосудистой системы, а также энергетический обмен и обычно анализируется в комплексе с уровнем холестерина. У некоторых кошек уровень триглицеридов повышается после длительного лечения стероидами. При этом у животных могут появиться жировые отложения на животе и глазах, боль в животе, гиперчувствительность к прикосновениям и даже судороги. Обнаружение гипертриглицеридемии в образце крови после
Таблица 5. Вариабельность биохимических показателей крови русской голубой кошки в сопоставлении со справочными данными для людей1
Показатель CV (кошка, собственные данные), % CVG (человек), %
Креатинин 23,9 12,9
Мочевина 18,6 18,3
Аспартатаминотрансфераза 38,5 17,9
Аланинаминотрансфераза 35,4 41,6
Щелочная фосфатаза 54,4 35,6
Холестерин 20,9 15,2
Триглицериды 55,3 37,2
Общий белок 6,4 4
Альбумин 7,8 4,2
Глюкоза 13,7 7,7
Общий билирубин 46,9 30,5
Креатинкиназа 37,5 40
Лактатдегидрогеназа 34,7 14,7
12-часового периода голодания указывает на стойкую или патологическую гиперлипиде-мию. Патологическая гипертриглицеридемия, как правило, вторична по отношению к основному заболеванию эндокринной системы, поджелудочной железы, печени или почек. Первичная гиперлипидемия встречаются редко и, как правило, вызвана генетическими отклонениями [1, 13, 38, 39].
В конце исследования были рассчитаны коэффициенты вариации рассмотренных биохимических показателей крови кошек, что в грубом приближении соответствует межиндивидуальной вариабельности этих показателей в человеческой популяции. В широком смысле под этим определением подразумевается изменчивость качественных и/или количественных особенностей структуры и/или функций, присущих двум и более отдельным (индивидуальным) животным. Сравнительные данные приведены в табл. 5.
Схожая вариабельность отмечена по таким показателям, как мочевина, АЛТ, общий белок и креатинкиназа. Различия присутствуют среди показателей аспартатаминотрансфера-зы АСТ, щелочной фосфатазы, холестерина, триглицеридов, альбумина, глюкозы, общего билирубина и лактатдегидрогеназы. Рассмат-
риваемые показатели имеют более широкую вариабельность у кошек в отличие от человека. Данная информация может быть полезной при интерпретации полученных значений в доклинических исследованиях.
Заключение
Кошка является важной моделью in vivo в доклинических исследованиях ввиду своей схожести с человеком по некоторым биологическим характеристикам. Рассматриваемый вид животных используется в разработке новых хирургических методов лечения в офтальмологии, неврологии, кардиологии, исследовании этиопатогенеза ретровирусов, наследственных и иммунодефицитных заболеваний, тестировании новых фармакологических агентов. В результате проведенного исследования установлены референтные интервалы биохимических показателей крови кошек породы русская голубая. Данные показатели являются полезным инструментом в области доклинических исследований и могут быть применены для мониторинга здоровья животных, адекватности сформированной патологической модели и изучения токсикологических свойств новых химических веществ.
1 ГОСТ Р 53022.2-2008 Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 2. Оценка аналитической надежности методов исследования (точность, чувствительность, специфичность). Москва, 2008. [GOST R 53022.2-2008 Tekhnologii laboratornye klinicheskie. Trebovaniya k kachestvu klinicheskih laboratornyh issledovanij. CHast' 2. Ocenka analiticheskoj nadezhnosti metodov issledovaniya (tochnost', chuvstvitel'nost', specifichnost'). Moskva, 2008. (In Russ.)].
СПИСОК ИСТОЧНИКОВ
1. Макарова М.Н. Кошки в лабораторных исследованиях. Обзор литературы // Лабораторные животные для научных исследований. 2021. № 1. С. 86-104. [Makarova M.N. Koshki v laboratornyh issledovani-yah. Obzor literatury // Laboratornye zhivotnye dlya nauchnyh issledovanij. 2021. N. 1. P. 86-104. (In Russ.)].
2. Griffin B., Baker H.J. Domestic cats as laboratory animals // Laboratory animal medicine. 2002. P. 459.
3. Miyazawa T. Infections of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus // Frontiers in Bioscience-Landmark. 2002. Vol. 7. N. 4. P. 504-518.
4. Azadian A., Gunn Moore D.A. Age related cognitive impairments in domestic cats naturally infected with feline immunodeficiency virus // Veterinary Record. 2022. P. e1683.
5. Esteves M.I., Schrenzel M.D., Marini R.P. et al. Helicobacter pylori gastritis in cats with long-term natural infection as a model of human disease // The American journal of pathology. 2000. Vol. 156. N. 2. P. 709-721.
6. Freeman L.M., Rush J.E., Stern J.A. et al. Feline hypertrophic cardiomyopathy: a spontaneous large animal model of human HCM // Cardiology research. 2017. Vol. 8. N. 4. P. 139.
7. Liu S.K., Tilley L.P. Animal models of primary myocardial diseases // The Yale Journal of Biology and Medicine. 1980. Vol. 53. N. 3. P. 191.
8. Hoenig M. The cat as a model for human nutrition and disease // Current Opinion in Clinical Nutrition & Metabolic Care. 2006. Vol. 9. N. 5. P. 584-588.
9. Henson M.S., O'Brien T.D. Feline models of type 2 diabetes mellitus // ILAR journal. 2006. Vol. 47. N. 3. P. 234-242.
10. Hoenig M., Thomaseth K., Brandao J., et al. Assessment and mathematical modeling of glucose turnover and insulin sensitivity in lean and obese cats // Domest Anim Endocrinol. 2006. Vol. 31. N. 4. P. 373-389.
11. Schrauwen-Hinderling V.B., Hesselink M.K., Schrau-wen P. et al. IntramyoceUular lipid content in human skeletal muscle // Obesity (Silver Spring). 2006. Vol. 14. N. 3. P. 357-367. DOI: 10.1038/oby.2006.47.
12. Schermerhorn T. Normal glucose metabolism in carnivores overlaps with diabetes pathology in non-carnivores // Frontiers in endocrinology. 2013. Vol. 4. P. 188.
13. Jordan E., Kley S., Le N. A. et al. Dyslipidemia in obese cats // Domestic animal endocrinology. 2008. Vol. 35. N. 3. P. 290-299.
14. Giraudel J.M., Diquelou A., Lees P. et al. Development and validation of a new model of inflammation in the cat and selection of surrogate endpoints for testing anti-inflammatory drugs // Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics. 2005. Vol. 28. N. 3. P. 275-285.
15. Narfstrom K., Holland Deckman K., Menotti-Ray-mond M. The domestic cat as a large animal model for characterization of disease and therapeutic intervention in hereditary retinal blindness // Journal of ophthalmology. 2011. Vol. 2011.
16. Cannon C.M. Cats, cancer and comparative oncology // Veterinary sciences. 2015. Vol. 2. N. 3. P. 111-126.
17. Hansen K., Khanna C. Spontaneous and genetically engineered animal models: use in preclinical cancer drug
development // European Journal of Cancer. 2004. Vol. 40. N. 6. P. 858-880.
18. Walton R.M., Hendrick M.J. Feline Hodgkin's-like lymphoma: 20 Cases (1992-1999) // Veterinary pathology. 2001. Vol. 38. N. 5. P. 504-511.
19. Nascimento C., Ferreira F. Tumor microenvironment of human breast cancer, and feline mammary carcinoma as a potential study model // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) — Reviews on Cancer. 2021. Vol. 1876. N. 1. P. 188587.
20. D'Costa S., Yoon B.I., Kim D.Y. et al. Morphologic and molecular analysis of 39 spontaneous feline pulmonary carcinomas // Veterinary Pathology. 2012. Vol. 49. N. 6. P. 971-978.
21. Marconato L., Buchholz J., Keller M. et al. Multimodal therapeutic approach and interdisciplinary challenge for the treatment of unresectable head and neck squamous cell carcinoma in six cats: a pilot study // Veterinary and comparative oncology. 2013. Vol. 11. N. 2. P. 101-112.
22. Okamatsu G., Kawakami K., Komatsu T. et al. Functional expression and comparative characterization of four feline P450 cytochromes using fluorescent substrates // Xenobiotica. 2017. Vol. 47. N. 11. P. 951-961.
23. Okamatsu G., Komatsu T., Ono Y. et al. Characterization of feline cytochrome P450 2B6 // Xenobiotica. 2017. Vol. 47. N. 2. P. 93-102.
24. Мирошников М.В., Макарова М.Н. Вариабельность биохимических показателей крови и установление референсных интервалов в доклинических исследованиях. Сообщение 4: мыши // Лабораторные животные для научных исследований. 2021. № 3. С. 64-70. [Miroshnikov M.V., Makarova M.N. Varia-bel'nost' biohimicheskih pokazatelej krovi i ustanov-lenie referensnyh intervalov v doklinicheskih issledo-vaniyah. Soobshchenie 4: myshi //Laboratornye zhivotnye dlya nauchnyh issledovanij. 2021. N. 3. P. 64-70. (In Russ.)].
25. Мирошников М.В., Султанова К.Т., Ковалева М.А. и др. Вариабельность биохимических показателей крови и установление референсных интервалов в доклинических исследованиях. Сообщение 5: хорьки // Лабораторные животные для научных исследований. 2021. № 4. С. 29-39. [Miroshnikov M.V., Sultanova K.T., Kovaleva M.A. i dr. Variabel'nost' biohimicheskih pokazatelej krovi i ustanovlenie referensnyh intervalov v doklinicheskih issledovaniyah. Soobshchenie 5: hor'ki // Laboratornye zhivotnye dlya nauchnyh issledovanij. 2021. N. 4. P. 29-39. (In Russ.)].
26. Мирошников М.В., Султанова К.Т., Ковалева М.А. и др. Вариабельность биохимических показателей крови и установление референтных интервалов в доклинических исследованиях. Сообщение 6: яванские макаки // Лабораторные животные для научных исследований. 2022. № 2. С. 14-25. [Miroshnikov M.V., Sultanova K.T., Kovaleva M.A. i dr. Variabel'nost' biohimicheskih pokazatelej krovi i usta-novlenie referentnyh intervalov v doklinicheskih issle-dovaniyah. Soobshchenie 6: yavanskie makaki // Laboratornye zhivotnye dlya nauchnyh issledovanij. 2022. N. 2. P. 14-25. (In Russ.)].
27. Лившиц В.М., Сидельникова В.И. Биохимические анализы в клинике: справ.-3-е изд. 2011.
[Livshits V.M., Side1'nikova V.I. Biokhimicheskie analizy v klinike: sprav.-3-e izd. 2011. (In Russ.)].
28. Ингерлейб М.Б. Медицинские анализы. Самый полный современный справочник / М.Б. Ингерлейб. Москва: Изд-во АСТ, 2015. 416 с. [Inger1eib M.B. Meditsinskie analizy. Samyi po1nyi sovremennyi sprav-ochnik / M.B. Inger1eib. Moskva: Izd-vo AST, 2015. 416 p. (In Russ.)].
29. Biochemistry reference intervals. https://www.uogue1ph.ca/ ah1/biochemistry-reference-interva1s (дата обращения: 10.2022 г.).
30. Reference Intervals. https://www.vet.corne11.edu/ animal-health-diagnostic-center/laboratories/clin-ical-pathology/reference-intervals/chemistry (дата обращения: 10.2022 г.).
31. Paltrinieri S., Ibba F., Rossi G. Haematological and biochemical reference intervals of four feline breeds // Journal of feline medicine and surgery. 2014. Vol. 16. N. 2. P. 125-136.
32. Lin T.L., Chung S.H., Sung C.H. et al. Establishment of feline in-house reference intervals for hematologic and biochemical parameters and potential age-related differences // Polish journal of veterinary sciences. 2019: 599-608-599-608.
33. https://diagnosticservices.avc.upei.ca/reference-guide/reference-intervals (дата обращения:
10.2021 г.).
34. https://vetmed.iastate.edu/vpath/services/diagnostic-services/clinical-pathology/testing-and-fees/reference-interva1s?fie1d_p_type_tid=288 (дата обращения:
10.2022 г.).
35. https://en.wikivet.net/Fe1ine_Biochemistry (дата обращения: 10.2022 г.).
36. Rand J.S., Kinnaird E., Bag1ioni A. et a1. Acute stress hyperg1ycemia in cats is associated with strugg1ing and increased concentrations of 1actate and norepinephrine // Journa1 of veterinary interna1 medicine. 2002. Vo1. 16. N. 2. P. 123-132.
37. Kette1hut I.C., Foss M.C., Mig1iorini R.H. G1ucose ho-meostasis in a carnivorous anima1 (cat) and in rats fed
a high-protein diet // American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 1980. Vol. 239. N. 5. P. R437-R444.
38. Thrall M.A., Weiser G., Allison R.W. et al. (ed.). Veterinary hematology and clinical chemistry. John Wiley & Sons, 2012.
39. Sodikoff C.H., Charles H. Laboratory profiles of small animal diseases: a guide to laboratory diagnosis. Mos-by Inc., 2001. Ed. 3.
40. Watson T.D.G. Lipoprotein metabolism in dogs and cats // Comparative Haematology International. 1996. Vol. 6. N. 1. P. 17-23.
41. Sherlock S., Dooley J. Diseases of the liver and biliary system. John Wiley & Sons, 2008.
42. Terragni R., Morselli-Labate A.M., Vignoli M. et al. Is serum total LDH evaluation able to differentiate between alimentary lymphoma and inflammatory bowel disease in a real world clinical setting? // PLoS One. 2016. Vol. 11. N. 3. P. e0151641.
43. Hoffman W.E., Renegar W.E., Dorner J.L. Alkaline phosphatase and alkaline phosphatase isoenzymes in the cat // Veterinary Clinical Pathology. 1977. Vol. 6. N. 3. P. 21-24.
44. Everett R.M., Duncan J.R., Prasse K.W. Alkaline phosphatases in tissues and sera of cats // American Journal of Veterinary Research. 1977. Vol. 38. N. 10. P. 1533-1538.
45. Kongtasai T., Paepe D., Meyer E. et al. Renal biomar-kers in cats: A review of the current status in chronic kidney disease // Journal of Veterinary Internal Medicine. 2022. Vol. 36. N. 2. P. 379-396.
46. Aroch I., Keidar I., Himelstein A. et al. Diagnostic and prognostic value of serum creatine-kinase activity in ill cats: a retrospective study of 601 cases // Journal of feline medicine and surgery. 2010. Vol. 12. N. 6. P. 466-475.
47. Neumann S. Serum creatine kinase activity in dogs and cats with metabolic diseases // DTW. Deutsche Tierarztliche Wochenschrift. 2005. Vol. 112. N. 9. P. 343-347.
Информация об авторах
М.В. Мирошников, кандидат медицинских наук,
руководитель отдела лабораторной диагностики,
https://orcid.org/0000-0002-9828-3242
К.Т. Султанова, кандидат медицинских наук, руководитель отдела экспериментальной фармакологии и токсикологии, https://orcid.org/0000-0002-9846-8335 М.А. Ковалева, кандидат биологических наук, руководитель научно-методической группы, https://orcid.org/0000-0002-0740-9357 М.Н. Макарова, доктор медицинских наук, директор,
https://orcid.org/0000-0003-3176-6386 АО НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ», 188663, Россия, Ленинградская обл., Всеволжский район, г.п. Кузьмоловский, ул. Заводская, д. 3, к. 245.
Information about the authors
M.V. Miroshnikov, PhD,
Head of Laboratory Diagnostics Department,
https://orcid.org/0000-0002-9828-3242
K.T. Sultanova, PhD, Head of the Department of Experimental Pharmacology and Toxicology, https://orcid.org/0000-0002-9846-8335 M.A. Kovaleva, PhD,
Head of the scientific and methodological group, https://orcid.org/0000-0002-0740-9357
M.N. Makarova, MD, Director, https://orcid.org/0000-0003-3176-6386
Research and manufacturing company "Home of Pharmacy", 188663, Russia, Leningrad oblast, Vsevolozhskiy district, Kuzmolovskiy t.s., Zavodskaya st. 3-245.
Вклад авторов в написание статьи
М.В. Мирошников — анализ научной и методической литературы, написание, редактирование и доработка текста рукописи, ответственность за все аспекты работы, связанные с достоверностью данных.
К.Т. Султанова — написание и редактирование текста рукописи, обобщение результатов исследования, работа с табличным материалом. М.А. Ковалева — анализ научной и методической литературы, научное редактирование текста рукописи.
М.Н. Макарова — идея разработки темы и обоснование актуальности работы, критический пересмотр содержания.
Authors contribution
M.V. Miroshnikov — analysis of scientific literature and guidelines, writing, editing and revision of the text, carrying responsibility for all aspects of the study related to the reliability of the data. K.T. Sultanova — writing and editing of the text, summarising the study results, preparation of the tables.
M.A. Kovaleva — analysis of scientific literature and guidelines, scientific editing of the text of the manuscript.
M.N. Makarova — elaboration of the study idea and justification of its relevance, editing of the text.
Сведения о конфликте интересов
М.Н. Макарова является членом редакционной коллегии журнала «Лабораторные животные для научных исследований». Остальные авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов, требующего раскрытия в данной статье.
Conflict of interest
M.N. Makarova is a member of the editorial board of Laboratory animals for science. The other authors declare no conflict of interest requiring disclosure in this article.
Дата поступления рукописи
в редакцию: 22.11.2022
Дата рецензии статьи: 10.01.2023
Дата принятия статьи к публикации: 30.01.2023
Received: 22.11.2022 Reviewed: 10.01.2023 Accepted for publication: 30.01.2023
