CC BY
8Ветеринарный врач. 2022. № 3. С. 46-52. The Veterinarian. 2022; (3):46-52.
Научная статья УДК 619:615.849
DOI 10.33632/1998-698Х.2021_46_52
Усовершенствование способов получения специфических антирадиотоксических глобулинов, используемых при конструировании серологических тест-систем
Римма Владимировна Нефедова \ Руслан Рустамович Гайнуллин 2, Рамзи Низамович Низамов 3, Мулланур Максутович Шакуров 4, Зиля Ренатовна Камалова 5
1, 2, 3, 4, 5 Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, отделение радиобиологии, Казань, Россия
1 nefedova.rimma1968@mail.ru,
2 gairuslan 10@mail.ru,
3 r.n.nizamov@mail.ru,
4 m.m.shakurov @mail.ru,
5 zikama01@mail. ru
Автор, ответственный за переписку: Римма Владимировна Нефедова, nefedova.rimma1968@mail.ru
Аннотация. В связи с необходимостью усовершенствования способов получения специфических антирадиотоксических диагностических глобулинов, используемых при конструировании серологических тест-систем, нами были предприняты настоящие исследования, целью которых являлась разработка альтернативных, более эффективных методов получения антигенных радиотоксических материалов и схем гипериммунизации для получения наиболее высокоспецифического диагностического сырья.
Ключевые слова: глобулины, хиноидные радиотоксины, антителогенез, диагностические средства
Improvement of methods for obtaining specific antiradiotoxic globulins used in the design of serological test systems
Rimma V. Nefedova1, Ruslan R. Gainullin2, Ramzi N. Nizamov 3, Mullanur M. Shakurov 4, Zilya R. Kamalova 5
1 2, 3 4, 5 Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan, Russia, department of radiobiology, Kazan, Russia
1 nefedova.rimma1968@mail.ru,
2 gairuslan10@mail.ru,
3 r.n.nizamov@mail.ru,
4 m.m.shakurov @mail.ru, 5zikama01@mail.ru
Corresponding author: Rimma Vladimirovna Nefedova, nefedova.rimma1968@mail.ru
Abstract. In connection with the need to improve the methods for obtaining specific antiradiotoxic diagnostic globulins used in the construction of serological test systems, we undertook these studies, the purpose of which was to develop alternative, more effective methods for obtaining antigenic radiotoxic materials and hyperimmunization schemes to obtain the most highly specific diagnostic raw materials. Keywords: globulins, quinoid radiotoxins, antitelogenesis, diagnostic tools
Введение. В связи с активной мировой пострадиационого воздействия на биологи-
тенденцией развития атомной промышлен- ческие системы.
ности, расширением зон внедрения радиобио- В условиях радиационного воздействия
логических технологий (РБТ) в народное хо- на биосистемы, в особенности в первые
зяйство возникает необходимость форми- 3-5 суток после облучения, большинство кли-
рования комплекса мероприятий по выявле- нических признаков лучевого воздействия
нию и нейтрализации токсических продуктов отсутствуют. Традиционные методы диагнос-
ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССИОНАЛОВ ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ
тики лучевой патологии - дозиметрические, патоморфологические [7, 8] не дают полного представления о степени поражения организма. Составить достоверную картину протее-кания лучевой патологии возможно лишь на основе оценки биохимических, иммунохи-мических показателей [2, 4, 18, 8, 21, 17, 24].
В проблеме биологического действия облучения важное значение придают образованию радиотоксических веществ и их роли в лучевом поражении [11]. Благодаря многочисленным исследованиям [1, 3, 6, 10, 12, 13, 14], в радиобиологии утвердились современные представления о патогенетическом значении токсических агентов, образующихся при облучении биологических систем.
На сегодняшний день стало особенно очевидно, что радиотоксины (РТ), какова бы ни была их природа, включаются как одно из важнейших звеньев в цепи патологических изменений, ведущих к различным последствиям лучевого воздействия и апоптозу клеток-мишеней радиационного поражения -лимфоцитов и клеток костного мозга [25, 3, 2, 5, 15].
С учетом изложенного были проведены исследования, в результате которых разработаны иммунохимические тест-системы: им-мунофлуоресцентная, иммуноферментная, серологическая [6] для иммунодиагностики лучевых поражений.
В практических условиях наиболее приемлемым и удобным является РНГА-тест с использованием эритроцитарного диагности-кума. Вместе с тем, воспроизводимость РНГА ограничивается высокой чувствительностью эритроцитов к колебанию факторов внешней среды (рН, температура, наличие химических веществ), ведущих к инактивации эритроцитарного препарата [9]. Для преодоления указанных технологических трудностей нами были использованы химические сорбенты, в частности, бентониты, которые в реакции бентонитовой флокуляции (РБФ) значительно превосходили по своей активности РНГА по таким важнейшим параметрам как чувствительность, стабильность и время исследования.
В то же время необходимо отметить, что эффективность методов диагностики также зависит от активности и специфичности одного из компонента тест-системы, выделенной из антирадиотоксической сыворотки крови -глобулиновой фракции, имеющей важное значение в механизме защиты организма от факторов внешней и внутренней среды.
Сказанное обосновывает необходимость проведения дальнейших исследований с целью поиска технологических решений в области разработки иммунологических тест-систем нового поколения (более высокочувствительных, стабильных, экспрессных) для индикации радиоиндуцированных токсических веществ (РТВ) в объектах растительного и животного происхождения.
Учитывая вышеизложенное, целью настоящих исследований явилась разработка технологии, позволяющей получить более активную и специфичную глобулиновую фракцию путем подбора доз облучения при получении антигенных материалов, а также схемы проведения процесса гипериммунизации.
Материалы и методы. В качестве специфических лучевых антигенов использовали хиноидные радиотоксины фитогенного происхождения.
Для получения радиотоксинов использовали клубни картофеля, которые облучали на установке «Исследователь» с источниками ионизирующего излучения Со в дозах 0,8 кГр, 10 кГр, 30 кГр, 40 кГр и 50 кГр. В качестве отрицательного контроля использовали необлученный картофель. Облученные и необлученные образцы после экспозиции в течение 24 часов при температуре от 22 оС до 26 оС, подвергали этаноловому экстрагированию по С. К. Мельниковой [16]. Для этого с клубней картофеля снимали 2-3 мм внешнюю оболочку (шкурку), а полученную сердцевину плода перетирали до образования гомогенной массы, разбавляли растворителем-экстраген-том 96 %-ным этанолом в соотношении 1:5 и экстрагировали на магнитной мешалке в течение 3-4 часов. Полученную взвесь осаждали от стромы центрифугированием при скорости 4000 об/мин в течение 45 минут. Для удаления экстрагента супернатант подвергали выпариванию на роторном вакуумном испарителе.
Полученный осадок (водная фракция лучевого антигена) не является полноценным иммуногеном, поскольку он является гап-теном. Для получения полноценного антигена-иммуногена сконструировали конъюгирован-ный антиген, который перемешивали до образования эмульсии при плюс 37 оС с неполным адъювантом Фрейнда в соотношении 1:1 и использовали его в качестве иммунизирующего агента.
Для получения диагностических сывороток животных (овец) подвергали гипериммунизации полученным по вышеописанной
методике конъюгированным лучевым антигеном с использованием двух схем, предполагающих вариацию состава инъекционного материала (иммунизирующего агента), места введения, интервалов между введениями, доз облучения источника антигенов, кратности введения и сроков получения сывороток после последней инъекции антигена.
Перед введением препараты подогревали до температуры 37 оС и вводили подкожно во внутреннюю часть бедер обеих задних конечностей животных (овец).
Для контроля синтеза образования антител (уровня активности ответной реакции организма в виде активизации синтеза гло-булиновой фракции в периферической крови) в первый день иммунизации и, далее на 19, 36, 50 сутки у животных брали кровь из яремной вены в стерильные пробирки. Сыворотку отделяли по общепринятой методике. Контроль активности полученной сыворотки определяли в РБФ с антигенным бентонитовым диагности-кумом.
Из полученных образцов гипериммунных сывороток выделяли глобулиновую фракцию по методике Ф. Е. Кендала в нашей модификации: к сыворотке небольшими порциями добавляли равный объем насыщенного раствора сульфата аммония, через 40-50 мин смесь центрифугировали при скорости 4000 об/мин в течение 45 минут, надосадочную жидкость сливали, затем осадок растворяли в том же объеме 50 %-ного раствора сульфата аммония и вновь осаждали 45 минут при скорости 4000 об/мин. Так повторяли 3 раза до полного прос-
ветления осадка (до серо-белого цвета). После последнего центрифугирования осадок растворяли до половины первоначального объема физиологическим раствором.
Далее при температуре плюс 4 оС проводили диализ осадка (глобулинов) против физиологического раствора в соотношении 1:100 в течение трех суток, меняя раствор два раза в день. Остаточное количество ионов соли в диализном буфере определяли 10 %-ным раствором ВаС12 с добавлением двух капель указанного раствора к 5 мл диализата. При наличии большого количества сульфат ионов в диализате, ВаС12 вызывал активное помутнение белого цвета с выпадением белого осадка через 5-10 минут. Диализ прекращался, если в пробирке с диализной жидкостью не наступало помутнения.
Специфичность полученного глобулина проверяли антигенным бентонитовым диагностикумом (АТБД) в РБФ с использованием антигенов, полученных с использованием экспериментальных доз облучения. Белки крови определяли с использованием метода рефрактометрического анализа.
Результаты исследований. Для определения сравнительной активности различных антигенов, полученных известным и предлагаемым способами, нами были испытаны различные схемы гипериммунизации овец с использованием различного состава антигенов, которые представлены в таблицах 1 и 2.
Взятие крови осуществляли на 8 сутки после последней инъекции в количестве 250-300 мл/гол.
Таблица 1 - Стандартная схема гипериммунизации овец с использованием антигенов,
полученных известным способом
Номер схемы Состав инъекции Доза облучения АГ, кГр Кратность/интервал
1 АГ (40 кР) 3 мл + НАФ (3 мл) 0,4 4/14
2 АГ (80 кР) 3 мл + НАФ (3 мл) 0,8 4/14
Таблица 2 - Опытные схемы гипериммунизации овец с использованием антигенов,
полученных путем экспериментального подбора доз облучения
Номер схемы Состав инъекции Доза облучения АГ, кГр Кратность/интервал
1 АГ (0,8 кГр) 3 мл + НАФ 3 мл 0,8 3/14+1/21+1/21
2 АГ (10 кГр) 3 мл + НАФ 3 мл 10 3/14+1/21+1/21
3 АГ (30 кГр) 3 мл + НАФ 3 мл 30 3/14+1/21+1/21
4 АГ (40 кГр) 3 мл + НАФ 3 мл 40 3/14+1/21+1/21
5 АГ (50 кГр) 3 мл + НАФ 3 мл 50 3/14+1/21+1/21
Взятие крови осуществляли на 14 сутки Результаты ранее проведенных испы-
после последней инъекции в количестве таний эффективности различных схем гипер-
250-300 мл/гол иммунизации показали, что радиоиндуциро-
ванные антигены растительного происхождения обладают более высокой специифи-чностью и активностью. В связи с этим в качестве специфических лучевых антигенных субстанций использовали радиотоксины растительного происхождения.
Общепринятая (стандартная) в отделении радиобиологии ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» схема гипериммунизации животных обеспечивала синтез противолучевых иммуноглобулинов с концентрацией белка в них до 5,5 г/л при активности и специфичности в РБФ 1:64-1:128.
Использование экспериментальных
схем гипериммунизации с применением фито-антигенов на основе облучения источника антигенов в исследуемых дозах (0,8; 10; 30; 40 и 50 кГр) приводило к увеличению синтеза белка и специфических антирадиотоксических глобулинов в гипериммунных сыворотках овец. При этом полученные варианты АТБД-тест-систем, при конструировании которых использовали антирадиотоксические и специфические иммуноглобулины, в РБФ показали увеличение их активности и позволили провести индикацию антигенов растительного происхождения в диапазоне шагов разведения от 1:128 до 1:2048 (таблица 3).
Таблица 3 - Активность АТБД в РБФ с использованием экспериментальных схем
гипериммунизации
Наименование антигена Уровень общего белка в сыворотке крови после гипериммунизации (г/л) Уровень белка в глобулине (г/л) Титры АТ на АГ в РБФ (шаг разведения)
АГ (0,8 кГр) 62 6,5 7 (1 128)
АГ (10 кГр) 65 7,0 8 (1 256)
АГ (30 кГр) 69 12,0 9 (1 512)
АГ (40 кГр) 70 14,0 9 (1 512)
АГ (50 кГр) 72 20,0 11 (1 2048)
Заключение. Таким образом, проведенные исследования показали, что концентрация глобулинов в крови овец, гиперимму-низированных антигенным материалом растительного происхождения, зависит от дозы его облучения и схемы введения. Установлено, что с повышением дозы облучения увеличивается как уровень общего белка в сыворотке крови, так и уровень специифического, противолучевого белка (глобулина). Полученные результа-
ты могут быть применены для производства более высокоспецифичных серологических диагностических тест-систем, которые будут использованы не только для радиационного иммуномониторинга животных, содержащихся на территориях с различным уровнем загрязнения радионуклидами, но и для индии-кации радиотоксинов в сельскохозяйственной продукции, произведенной с использованием радиациионно-биологических технологий.
Список источников.
1. Барабой, В. А. Стресс в развитии радиационного поражения. Роль регуляторных механизмов / В. А. Барабой, С. А. Олейник // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1999. -Т. 39, № 4. - С. 431-443.
2. Башарин, В. А. Биологическая дозиметрия - современные возможности и перспективы диагностики острых радиационных поражений / В. А. Башарин, В. В. Зацепин, М. А. Карамуллин, Ю. С. Чеховских, А. В. Завирский, С. В. Гайдук, А. Е. Антушевич // Вестник Военно-медицинской академии. - 2019. - № 4 (68). - С. 228-234.
3. Бурлакова, Е. Б. Система окислительно-восстановительного гомеостаза в радиационно-индуцированной нестабильности / Е. Б. Бурлакова, В. Ф. Михайлова, В. К. Мазурик // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2001. - Т. 41, № 5. - С. 489-499.
4. Гайнуллин, Р. Р. Получение наноразмерного бентонита и перспектива его использования с целью конструирования диагностикума для индикации радиоиндуцированных токсических соединений / Р. Р. Гайнуллин, С. М. Хантимеров, Р. Н. Низамов // Нанотехнологии: образование, наука, инновации. -Курск, 2020. - С. 40-41.
5. Гайнуллин, Р. Р. Влияние органоминеральной композиции на развитие радиоиндуцированной аллергии / Р. Р. Гайнуллин, Р. Н. Низамов, Н. М. Василевский, Д. Т. Шарифуллина, З. Р. Камалова // Ветеринарный врач. - 2021. - № 5. - С. 4-9.
6. Гончаренко, Е. Н. Химическая защита от лучевого поражения / Е. Н. Гончаренко, Ю. Б. Кудряшов. - М. : МГУ, 1985. - 275 с.
7. Злобин, В. Н. Перспективные средства индикации на основе иммунофлюоресцентного анализа / В. Н. Злобин, Н. С. Осин, В. Г. Помелова // Микросистемная техника. - М., 2002. - № 3. - С. 33-40.
8. Каральник, Б. В. Эритроцитарные диагностикумы / Б. В. Каральник. - М. : Медицина, 1976. -
164 c.
9. Конюхов, Г. В. Молекулярно-биологические принципы разработки противорадиационных диагностических и лечебно-профилактических средств / Г. В. Конюхов, Н. Б. Тарасова, Р. Н. Низамов, Н. М. Василевский, Р. М. Асланов, В. И. Великанов // Ветеринарный врач. - 2016. - № 3. - С. 3-8.
10. Конюхов, Г. В. Усовершенствование технологии получения радиозащитных препаратов на основе b.bifidum и e.coli в сочетании с биополимером и оценка их эффективности на сельскохозяйственных животных / Г. В. Конюхов, Р. Н. Низамов, Т. Р. Гайнутдинов, А. М. Идрисов, М. М. Шакуров, Д. Т. Шарифуллина // Ветеринарный врач. - 2017. - № 6. - С. 31-35.
11. Кудряшов, Ю. Б. Основы радиационной биофизики /Ю.Б. Кудряшов. - М., 1982. - 219 с.
12. Кузин, А. М. Структурно-метаболическая гипотеза в радиобиологии / А. М. Кузин. - М. : Наука, 1970. - 222 с.
13. Кузин, А. М. Синергизм действия гамма-радиации и радиотоксинов / А. М. Кузин,
B. В. Медведкова // Радиобиология. - 1981. - Т. 21, № 3. - С. 348-351.
14. Кузин, А. М. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии / А. М. Кузин. - М. : Наука, 1986. - 284 с.
15. Кузин, А. М. Вторичное биогенное излучение гамма-облучений крови человека /А. М. Кузин, Г. Н. Суркинова, А. В. Будоголовский // Радиационная биология. Радиоэкология.- 1997. - Т. 37, № 6. -
C.134-138.
16. Мельникова, С. К. Количественные закономерности образования хинонов в гамма-облученной растительной ткани / С. К. Мельникова // Доклады АНН СССР. - 1965. - Т. 164, вып. 6. - С. 1409-1412.
17. Низамов, Р. Н. Концептуальные основы конструирования иммунотерапевтических средств при многофакторной экопатологии / Р. Н. Низамов, Ж. Р. Насыбуллина, К. Н. Вагин, Р. Р. Гайнуллин. -Казань, 2021. - 301 с.
18. Олтеану, В. Липидные радиотоксины дрожжевых клеток / В. Олтеану, Е. Н. Гончаренко,
A. Г. Конопляников // Радиотоксины. - М. : Атомиздат, 1966. - С. 135-140.
19. Омельчук, Н. Н. Актуальные вопросы профилактики острой лучевой болезни // Национальное здоровье. - 2018. - № 1. - С. 70-75.
20. Патент № RU 2731521 C1 Российская Федерация. Способ диагностики радиационных поражений организма и способ получения противолучевого антительного бентонитового препарата для диагностики радиационных поражений организма : № заявки 2019110695 : заявл. 10.04.2019 : опубл. 03.09.2020 / Низамов Р. Н., Нефедова Р. В., Конюхов Г. В., Рахматуллина Г. И., Шарифуллина Д. Т., Василевский Н. М., Курбангалеев Я. М., Ишмухаметов К. Т., Юнусов И. Р., Гурьянова
B. А., Гайнуллин Р. Р. - 7 с.
21. Ушаков, И. Б. Лекарственные средства и природные антиоксиданты как компоненты противорадиационных контрмер в космических полетах / И. Б. Ушаков, М. В. Васин // Медицинская радиология и радиационная безопасность. - 2017. - Т. 62, № 4. - С. 66-78.
22. Azmatullah, Khan Antioxidants, its role in preventing free radicals and infectious diseases in human body // Pure and Applied Biology (PAB). - 2019. - Vol. 8, No. 1. - P. 380-388.
23. Kavindra, K. K., Niraj K. Jha. Free Radical Biology and Environmental Toxicity // Molecular and Integrative Toxicology. - 2021. - 394 р.
24. Mothersill, C. Low doses and nontargeted effects in environmental radiation protection; where are we now and where should we go? // Environ. Res. - 2017. - Vol. 159. - P. 484-490.
25. Rekha, B. Antioxidants: a brief review // Journal of Drug Delivery & Therapeutics. - 2018. - No. 8 (6-s). - P. 373-376.
References
1. Baraboy, V. A. Stress in the development of radiation damage. The role of regulatory mechanisms / V. A. Baraboy, S. A. Oleinik // Radiation biology, Radioecology. - 1999. - Vol. 39, No. 4. - Р. 431-443.
2. Basharin, V. A. Biological dosimetry - modern possibilities and prospects for the diagnosis of acute radiation injuries / V. A. Basharin, V. V. Zatsepin, M. A. Karamullin, Yu. S. Chekhovskikh, A. V. Zavirsky, S. V. Gaiduk, A. E. Antushevich // Bulletin of the Military Medical Academy. - 2019. - No. 4 (68). - Р. 228-234.
3. Burlakova, E. B. System of redox homeostasis in radiation-induced instability / E. B. Burlakova, V. F. Mikhailova, V. K. Mazurik // Radiation biology, Radioecology. - 2001. - Vol. 41, No. 5. - P. 489-499.
4. Gainullin, R. R. Obtaining nanosized bentonite and the prospect of its use to design a diagnosticum for the indication of radioinduced toxic compounds / R. R. Gainullin, S. M. Khantimerov, R. N. Nizamov // Nanotechnologies: education, science, innovations. - Kursk, 2020. - P. 40-41.
5. Gainullin, R. R. Influence of organomineral composition on the development of radioinduced allergy / R. R. Gainullin, R. N. Nizamov, N. M. Vasilevsky, D. T. Sharifullina, Z. R. Kamalova // The Veterinarian. -2021. - No. 5. - P. 4-9.
6. Goncharenko, E. N. Chemical protection against radiation injury / E. N. Goncharenko, Y. B. Kudryashov. - M. : MGU, 1985. - 275 p.
7. Zlobin, V. N. Promising means of indication based on immunofluorescent analysis / V. N. Zlobin, N. S. Osin, V. G. Pomelova // Microsystem technology. - M., 2002. - No. 3. - P. 33-40.
8. Karalnik, B. V. Erythrocyte diagnosticums / B. V. Karalnik. - M. : Medicine, 1976. - 164 p.
9. Konyukhov, G. V. Molecular biological principles of development of anti-radiation diagnostic and therapeutic and prophylactic agents / G. V. Konyukhov, N. B. Tarasova, R. N. Nizamov, N. M. Vasilevsky, R. M. Aslanov, V. I. Velikanov // The Veterinarian. - 2016. - No. 3. - P. 3-8.
10. Konyukhov, G. V. Improving the technology for obtaining radioprotective drugs based on b. bifidum and e. coli in combination with a biopolymer and evaluating their effectiveness on farm animals / G. V. Konyukhov, R. N. Nizamov, T. R. Gainutdinov, A. M. Idrisov, M. M. Shakurov, D. T. Sharifullina // The Veterinarian. - 2017. - No. 6. - P. 31-35.
11. Kudryashov, Yu. B. Fundamentals of radiation biophysics / Yu. B. Kudryashov. - M., 1982. - 219 p.
12. Kuzin, A. M. Structural-metabolic hypothesis in radiobiology / A. M. Kuzin. - M. : Nauka, 1970. -
222 p.
13. Kuzin, A. M. Synergism of action of gamma radiation and radiotoxins / A. M. Kuzin, V. V. Medvedkova // Radiobiology. - 1981. - No. 21 (3). - P. 348-351.
14. Kuzin, A. M. Structural and metabolic theory in radiobiology / A. M. Kuzin. - M. : Nauka, 1986. -
284 p.
15. Kuzin, A. M. Secondary biogenic radiation of gamma irradiation of human blood / A. M. Kuzin, G. N. Surkinova, A. V. Budogolovsky // Radiation biology, Radioecology. - 1997. -Vol. 37. - P. 134-138.
16. Melnikov, S. K. Quantitative regularities of the formation of quinones in the gamma-irradiated plant tissue / S. K. Melnikov // DUNN of the USSR. - 1965. - Vol. 6. - P. 1409-1412.
17. Nizamov, R. N., Nasybullina Zh. R., Vagin K. N., Gainullin R. R. Conceptual basis for the design of immunotherapeutic agents in multifactorial ecopathology. - Kazan, 2021. - 301 p.
18. Olteanu, V. Lipid radiotoxins of yeast cells / V. Olteanu, E. N. Goncharenko, A. G. Konoplyanikov // Radiotoxins. - M. : Atomizdat, 1966. - P. 135-140.
19. Omelchuk, N. N. Topical issues of prevention of acute radiation sickness // National Health. -2018. -No. 1. - P. 70-75.
20. Patent No. RU 2731521 C1 Russian Federation. A method for diagnosing radiation damage to the body and a method for producing an anti-radiation antibody bentonite preparation for diagnosing radiation damage to the body; Application No. 2019110695 : Appl. 04/10/2019 : publ. 09/03/2020 / Nizamov R. N., Nefedova R. V., Konyukhov G. V., Rakhmatullina G. I., Sharifullina D. T., Vasilevsky N. M., Kurbangaleev Ya. M., Ishmukhametov K. T. ., Yunusov I. R., Guryanova V. A., Gainullin R. R. - 7 р.
21. Ushakov, I. B. Drugs and natural antioxidants as components of anti-radiation countermeasures in space flights / I. B. Ushakov, M. V. Vasin // Medical radiology and radiation safety. - 2017. - Vol. 62, No. 4. -P. 66-78.
22. Azmatullah, Khan Antioxidants, its role in preventing free radicals and infectious diseases in human body // Pure and Applied Biology (PAB). - 2019. - Vol. 8, No. 1. - P. 380-388.
23. Kavindra, K. K., Niraj K. Jha. Free Radical Biology and Environmental Toxicity // Molecular and Integrative Toxicology. - 2021. - 394 р.
24. Mothersill, C. Low doses and nontargeted effects in environmental radiation protection; where are we now and where should we go? // Environ. Res. - 2017. - Vol. 159. - P. 484-490.
25. Rekha B. Antioxidants: a brief review // Journal of Drug Delivery & Therapeutics. - 2018. - No. 8 (6-s). - P. 373-376.
Вклад авторов:
Нефедова Р. В. - концепция исследования, развитие методологии. Гайнуллин Р. Р. - концепция исследования, развитие методологии. Низамов Р. Н. - научное руководство, итоговые выводы. Шакуров М. М. - написание исходного текста, доработка текста. Камалова З. Р. - участие в постановке экспериментальных исследований. Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Contribution of the authors:
Rimma V. Nefedova - the concept of the study, methodology development. Ruslan R. Gainullin - the concept of the study, methodology development. Ramzi N. Nizamov - scientific guidance, final conclusions. Mullanur M. Shakurov - writing the original text, finalizing the text. Zilya R. Kamalova - participation in the formulation of experimental studies. Contribution of the authors: the authors contributed equally to this article. The authors declare no conflicts of interests.
Статья поступила в редакцию 24.03.2022 г.; одобрена после рецензирования 11.03.2022 г.; принята к публикации 08.06.2022 г.
The article was submitted 24.03.2022 г.; approved after reviewing 11.03.2022 г.; accepted for publication 08.06.2022 г.
© Нефедова Р. В., Гайнуллин Р. Р., Низамов Р. Н., Шакуров М. М., Камалова З. Р. 2022
