CC BY
9
Литература. Градостроительные меры борьбы с шу-мом./Осипов Г. А., Прутков Б. Г., Шишкин И. А. и др. М., 1975, с. 99—107. Карагодина И. Л. Борьба с шумом и вибрацией в городах. М„ 1979, с. 75-81.
Ничков С., Кривицкая Г. Н. Акустический стресс и це-
ребровнецеральные нарушения. М., 1969, с. 22—47. Тейлор Р. Шум. М.. 1978, с. 94—95. Чедд Г. Звук. М„ 1975, с. 172—173.
Поступила 04.08.82
УДК 628.322
Г. А. Багдасарьян, Т. В. Доскина
УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА ИНДИКАЦИИ ЭНТЕРОВИРУСОВ В ПОЧВЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ УЛЬТРАЗВУКА
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
В СССР и за рубежом в настоящее время достаточно широко используются почвенные методы обезвреживания бытовой сточной жидкости. В этих условиях энтеровирусы адсорбируются на почвенных частицах и, несмотря на отсутствие репродукции, сохраняют свою инфекционность, создавая потенциальную опасность дальнейшего распространения в окружающей среде (Л. В. Григорьева и Е. Н. Гончарук). Для осуществления вирусологического контроля за санитарным состоянием почвы небходимы чувствительные ме-, тоды индикации вирусов в почве.
Известно, что вирусы при определенных условиях сопособны образовывать белково-вирусные и вирусно-вирусные агрегаты, нередко адсорбированные в сточной жидкости на твердых частицах. Поступая в почву, эти агрегаты, адсорбируясь на почвенных частицах, образуют сложные комплексы. В связи с тем что вирусы могут располагаться как на поверхности, так и внутри комплексов, наиболее ответственными моментами при выделении вирусов из почвы являются предварительная обработка, направленная на десорбцию вирусов с почвенных частиц, а также дезагрегирование сложных почвенно-вирусных комплексов, вирус-но-вирусных и впрусно-белковых агрегатов. Для этих целей на этапе предварительной подготовки почвы нами был использован низкочастотный ультразвук, который применяется в саннтарно-внрусологической практике за рубежом для снятия вирусов с мембран при индикации вирусов в воде (Berg и соавт.; Рапа и соавт.).
В связи с отсутствием данных о влиянии ультразвуковых волн низкой частоты на устойчивость .энтеровирусов первично было исследовано влияние ультразвука на вирусную популяцию и отработан режим, обеспечивающий эффект максимального дезагрегирования.
Эксперименты проводили с использованием РНК-содержащего бактериофага MS2, который в настоящее время рассматривается рядом исследователей как модель энтеровирусов при экспериментальных исследованиях (Kott и соавт.; Ви-ras). Суспензию микроорганизма в концентрации сотен бляшкообразующих соединений на 1 мл, приготовленную на физиологическом растворе,
«озвучивали» при различных параметрах работы отечественного диспергатора УЗДН-1 с экспоненциальным излучателем; контролем служила суспензия, не подвергавшаяся ультразвуковой обработке. Эффект дезагрегирования рассчитывали в процентах по отношению к контролю, принятому за 100. Титрование бактериофага проводили методом Грация на газоне Е. coli HLP.
Установлено, что действие ультразвука на бактериофаг неоднозначно, при этом осуществляются параллельно два процесса — гибель клеток и дезагрегирование. Преобладание одного процесса над другим — снижение и повышение концентрации фаговых частиц в суспензии — зависит от параметров работы ультразвуковой установки.
Анализ полученных результатов позволил определить оптимальный режим, при котором наблюдается максимальное возрастание титра бактериофага: сила тока 0,44 А, частота ультразвука 44 кГц, интенсивность 22 Вт/см2, время «озвучивания» 15 мин. При апробации этого режима на суспензии вируса полиомиелита типа I, штамм LS с 2 ав, выявлено увеличение титра вируса на 1 lg по сравнению с контролем.
Этот режим использован на этапе первичной обработки почвенной суспензии. Методика постановки экспериментов была следующей: в 5 г почвы вносили 1 мл бактериофага в концентрации порядка тыс БОЕ на 1 мл. После 30-минутного контакта (в течение которого, по нашим данным, от 96 до 98 % бактериофага адсорбируется на почвенных частицах), добавляли 10 мл десорбен-та 199 с 5 % бычьей сыворотки (pH 8,5) и суспензию «озвучивали». Были выбраны интервалы времени 5, 15 и 30 мин, исходя из результатов предварительных исследований, а также с учетом возможного экранирующего действия почвенных частиц. После «озвучивания» суспензию центрифугировали при 4000 об/мин в течение 15 мин и супернатант исследовали на наличие вируса. В качестве контроля использовали суспензию, не подвергнутую обработке на ультразвуковой установке. Степень десорбции рассчитывали в процентах по отношению к контролю, взятому за 100.
Эффективность десорбции вирусов с различных типов почв при обработке низкочастотным ультразвуком (в % к контролю)
Тип почвы Концентрация бактериофага (БОЕ/мл) при времени «озвучивания» Контроль
5 мин 15 мин 30 мин
Серозем 25±2,1 20,7±6 38±4 33,6d:5
73,4 61,3 113 100
Торф 48,8±4,05 28,4±4,05 32,6±4,2 44,75±7,05
109,4 63,4 78,3 100
Чернозем 24,4±5,3 29,6±4,5 22,0±7,05 43,8±3,6
55,7 67,6 50,2 100
П р и м е ч а н и е. Числитель — абсолютные числа, знаменатель — процент по отношению к контролю.
Проведены 12 серий опытов с использованием различных типов почв СССР (см. таблицу). Установлено, что при индикации бактериофага с серозема выделяется от 61,3 до 113% от вносимого количества модельного микроорганизма, с торфа—от 63,4 до 109,4 %, с чернозема — от 50,2 до 67,6 % в зависимости от времени «озвучивания». Таким образом, наиболее высокая эффективность была достигнута при выделении вирусов с серозема и торфа, менее чувствительным методом оказался при обработке чернозема. Установлено, что при единых параметрах ультразвуковой установки время «озвучивания» необходимо дифференцировать в зависимости от типа почв — для серозе-
ма оптимальны 30 мин, для чернозема — 15 мин и для торфа — 5 мин.
На модели серозема и чернозема была проведена сравнительная оценка эффективности двух методов выделения вирусов из почвы — с использованием механических приемов десорбции (согласно «Методическим указаниям по микробиологическому исследованию почвы» Минздрава СССР, 1977) и с применением ультразвуковых волн низкой частоты. Анализ полученных данных ^ показал, что эффективность последнего метода в среднем в l'/г раза выше.
Выводы. 1. Разработанный метод с использованием ультразвуковой обработки эффективен при выделении вирусов из почвы.
2. Оптимальные режимы работы ультразвуковой установки должны быть дифференцированы в зависимости от типа почв.
3. Ультразвуковая обработка при индикации вирусов в почве (на модели серозема и чернозема) более эффективна, чем механическая обработка.
Литература. Григорьева Л. В., Гончарук Е. И. — Гнг.
и сан., 1966, № Ii, с. 6—9. Berg С., Düttlings D. К-, Berman D. — Appl. Microbiol.,
1971, v. 22, p. 608-614. Buras N. — Water Res.. 1976. v. 10, p. 295—299. Kott Y„ Rose Л'., Sperber S. et al. — Ibid., 1974, v. 8, p. 165—171.
Pana A., Caslello C„ Piano M. — Nuovi Ann. Ig. Microbiol., 1974, (1975), v. 25, p. 298—305.
Поступила 02.08.82
Обзоры
УДК 615.916.171.1/. 175(048.8)
В. Ф. Журавлев, М. М. Цапков (Москва) ТОКСИЧНОСТЬ НИТРАТОВ И НИТРИТОВ
Нитраты образуются в природе в результате деятельности нитрифицирующих бактерий в качестве промежуточной стадии образования нитритов. В процессе хранения свежих овощей при комнатной температуре возможно микробиологическое превращение нитратов в нитриты, концентрация последних может достигать 3600 мг на 1 кг сухого вещества. Нитраты и нитриты нашли широкое применение как удобрения, в значительных количествах используются в пищевой, стекольной, металлообрабатывающей, резиновой и текстильной промышленности, в производстве органических красителей, для получения взрывчатых веществ, ракетного топлива и пиротехнических смесей.
Как нитраты, так и нитриты широко применяются при производстве и консервировании мяс-
ных изделий и некоторых рыбных продуктоз. Нитраты присутствуют в почве, природных водах, во всех растительных материалах и мясе. В невысоких концентрациях (1—40 мкг/м3) они также содержатся в атмосферном воздухе в результате его загрязнения. Количество их в возделываемых почвах и водоемах не превышает 10 мг/л, но оно может возрастать вследствие применения азотсодержащих удобрений. Содержание нитратов в сельскохозяйственных культурах определяется видом растения и практикой ведения сельского хозяйства. Для некоторых культур характерно чрезвычайно высокое (1000 мг/кг и более) содержание нитратов.
Вследствие миграции нитратов и нитритов по пищевым биологическим цепочкам возможно поступление их с пищей и водой в организм жнвот-
