CC BY
41
DOI https://doi .org/10.46845/2541 -8254-2021 -2(29)-17-17 УДК 597.553.2-12 (470.21)
УСЛОВНО-ПАТОГЕННАЯ БАКТЕРИОФЛОРА ЛЕЩА (ABRAMIS BRAMA L.) ВИСЛИНСКОГО ЗАЛИВА
В.Б. Балычева, студентка, e-mail: balycheva99@mail.ru ФГБОУ ВО «Калининградский государственный технический университет»
О.В. Казимирченко, канд. биол. наук, доц., e-mail: oksana.kazimirchenko@klgtu.ru ФГБОУ ВО «Калининградский государственный технический университет»
Проведено исследование микрофлоры леща (Abramis brama L.) Вислинского залива с видимыми патологиями на кожных покровах. Микробиологический анализ пораженных участков кожи и измененных внутренних органов выявил наличие большого количества штаммов условно-патогенных Аeromonas allosaccharophila и санитарно-значимых dtrobacter freundii бактерий. У леща также отмечено носительство патогенных бактерий Aeromonas hydrophila, обнаруженных в составе микрофлоры кожи. Идентифицированные микроорганизмы при существовании в ассоциациях друг с другом и наличии отрицательно действующих факторов среды способны инициировать инфекционный процесс у леща Вислинского залива.
Ключевые слова: Вислинский залив, лещ, патологии органов, микрофлора, бактериальная септицемия, цитробактериоз, аэромонады, энтеробактерии
ВВЕДЕНИЕ
Лещ - один из главных объектов промысла в Вислинском (Калининградском) заливе и регулярный элемент ихтиофауны водоема. Частота встречаемости данной рыбы в уловах составляет 95 %, а вылов ее в среднем равен 246 т в год [1]. Состояние популяции леща в заливе определяется в первую очередь качеством среды его обитания. Известно, что при повышении уровня загрязнения водоема резко увеличивается численность сапрофитных бактерий, снижается резистентность организма рыбы к воздействию патогенных агентов. Немаловажную роль в процессе развития инфекционных заболеваний могут играть бактерии, входящие в состав естественной микрофлоры рыбы, воды и грунтов. При стрессовых условиях адаптационные возможности рыб ухудшаются, что способствует активизации роста и размножения условно-патогенных микроорганизмов [2, 3].
В Вислинском заливе при проведении мониторинговых исследований качества воды фиксируются превышения некоторых гидрологических и гидрохимических показателей от предельно допустимых, в воде регистрируется высокое содержание хлорорганических пестицидов, полициклических ароматических углеводородов (ПАУ), соединений азота и железа [4-6]. Главные источники загрязняющих веществ - неочищенные стоки промышленных предприятий и объектов коммунального хозяйства, которые поступают с речными водами в залив, суда торгового, нефтеналивного, рыболовного флотов [5].
Органические вещества, поступающие в воду залива в большом количестве, не только являются хорошим субстратом для питания и размножения потенциально опасных бактерий, контаминирующих рыбу, но и влияют на гидрохимический режим водоема в негативную для гидробионтов сторону. Резкое изменение окружающей среды - стрессовый фактор, который
отрицательно сказывается на общей сопротивляемости рыб к болезням, в том числе и инфекционной природы [2-9].
Поэтому проведение мониторинговых бактериологических исследований промысловых видов рыб Вислинского залива, в том числе леща, представляет научную и практическую значимость.
ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектом исследования послужила микрофлора леща. Он был выловлен в двух районах северо-восточной части Вислинского залива в осенний период 2019 года (рис. 1).
Рисунок 1 - Районы отбора проб рыбы для исследования в Вислинском заливе
На клинический осмотр было отобрано 36 экземпляров рыбы, из них 24 с видимыми признаками патологий были подвергнуты неполному бактериологическому анализу, который включал изучение микробного пейзажа кожных покровов, определяемого с помощью бактериологических печаток, залитых селективными средами. Полному бактериологическому анализу, включающему исследование микрофлоры кожи, жабр, печени, почек, селезенки и содержимого кишечника, сердца, желчного пузыря, были подвергнуты три экземпляра леща (1 экз. - контрольный, 2 экз. - с патологиями).
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Целью данной работы было определение состава микробиоценоза леща, выявление групп потенциально опасных бактерий, имеющих значение в инфекционной патологии рыбы.
В ходе работы нами были поставлены следующие задачи: провести клинический и па-тологоанатомический анализ леща, изучить состав его бактериофлоры, а также оценить их-тиопатологическое состояние рыбы по потенциально опасным видам бактерий.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Микробиологическое исследование леща проводили по общепринятым в ихтиопато-логии методикам [10-13]. Видовую принадлежность культур бактерий устанавливали по совокупности признаков на селективных и дифференциально-диагностических питательных средах в среднем по 15-16 тестам [14, 15].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
При клиническом исследовании у 80 % экземпляров леща отмечали патологические изменения кожных покровов, которые проявлялись в обширном покраснении поверхности тела и плавников. У отдельных особей рыбы было зарегистрировано вздутие брюшка, воспаление и выпячивание анального отверстия, частичное выпадение чешуи, у единичных - пучеглазие. При вскрытии у всех лещей наблюдалась сходная патологическая картина: печень
была грязно-желтого или песочного цвета, рыхлой консистенции, при нажатии скальпелем легко распадалась и крошилась, селезенка и желчный пузырь были несколько увеличены, отмечали текучесть почек и их неоднородный цвет. Кишечник рыбы был воспален, набит химусом и покрыт большим количеством жира.
Лабораторные исследования показали, что в составе микрофлоры леща в процентном соотношении преобладали условно-патогенные бактерии рода Aeromonas (51 % штаммов) и санитарно-показательные бактерии рода Citrobacter (45 % штаммов) (рис. 2).
Рисунок 2 - Состав бактериофлоры леща Вислинского залива в осенний сезон 2019 г.
Бактерии данных родов при наличии неблагоприятных факторах среды, таких как загрязнение воды органическими веществами, снижение концентрации растворенного кислорода, могут провоцировать развитие бактериальной геморрагической септицемии, проявляющейся в виде поражений наружных покровов и внутренних органов рыб. Кроме того, кишечные бактерии рода Citrobacter относятся к санитарно-значимой группе микроорганизмов, указывающих на загрязнение воды фекальными отходами [2, 9, 12, 16]. Наименьшую долю в пробах (около 4 % штаммов) составили сапрофитные стафилококки, стрептококки и условно-патогенные псевдомонады.
Анализ видового состава бактериофлоры показал, что 45% штаммов всего микробного состава органов и тканей обследованной рыбы занимали бактерии Citrobacter freundii (рис. 3).
Рисунок 3 - Доминирующие виды бактерий в бактериофлоре леща Вислинского залива в осенний сезон 2019 г.
Согласно данным исследователей [17] отдельные варианты указанного вида бактерий могут быть патогенными для рыб, вызывать их массовую гибель. Бактерии обладают про-теолитической, гемолитической активностью и галотолерантностью. У больных цитробакте-риозом рыб отмечаются обширные геморрагические пятна на коже, у основания плавников, ерошение чешуи, экзофтальмия, патологические изменения во внутренних органах. Имеются данные, что цитробактерии, в частности Citrobacter freundii, могут вызывать пищевые токси-коинфекции у человека [16, 17].
Вторыми преобладающими в микрофлоре (около 38% штаммов из всех идентифицированных микроорганизмов) были подвижные бактерии Aeromonas allosaccharophila, отличающиеся ферментной активностью по отношению к углеводам и аминокислотам, в частности к сахарозе, арабинозе, лизину, аргинину и орнитину. Также в пробах с кожных покровов, отобранных бактериологическими печатками, были идентифицированы патогенные палочки Aeromonas hydrophila. Данные виды аэромонад относятся к этиологическим агентам бактериальной геморрагической септицемии многих видов рыб, в том числе и леща, и могут также инициировать пищевые отравления у человека [16].
Нами была проанализирована частота встречаемости потенциально опасных бактерий в органах и тканях леща (рис. 4).
Рисунок 4 - Локализация видов бактерий в органах и тканях леща Вислинского залива (2019 г.)
В наибольшей степени потенциально опасными бактериями были обсеменены кожа, кровь и желчь леща, в меньших количествах - жабры и почки. Почти все органы рыбы в относительно равном количестве были обсеменены доминирующими в бактериофлоре Citrobacter freundii и Aeromonas allosaccharophila. Обнаруженные в микрофлоре рыбы Aeromonas schubertii и Staphylococcus saprophyticus одновременно встречались в посевах печени, жабр, селезенки и кишечника. Нами было обращено внимание на присутствие в микрофлоре почек и крови бактерий Aeromonas encheleia, что может указывать на их значение в развитии септического процесса у леща в ассоциации с другими видами аэромонад и C. freundii.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведенные исследования показали, что у леща Вислинского залива регистрируются видимые патологии кожных покровов, изменения внутренних органов, характерные для бактериальных заболеваний рыб. Наибольшая концентрация микроорганизмов отмечена в коже, крови и желчи. В бактериофлоре леща выявлены несколько групп потенциально опасных бактерий - C. freundii, A. Allosaccharophila, отличающихся высокой численностью, активными ферментами, которые позволяют бактериям разрушать белковые оболочки тканей и орга-
нов, провоцируя воспаление, и распространяться по организму рыбы. Контаминация бактериями паренхиматозных органов рыбы (печени, селезенки, почек) свидетельствует о протекающем септическом процессе без регистрируемой массовой гибели леща в Вислинском заливе.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Рябчун, В. А. Промыслово-биологическая характеристика и перспективы оптимизации использования продукционных свойств популяции леща (Abramis brama L.) Вислинского залива Балтийского моря: автореф. дис. ... канд. биол. наук / Рябчун Вероника Андреевна. -Калининград, 2011. - 24 с. [Электронный ресурс]. URL: http://aquacultura.org/upload/flles/pdf/biblio/flsh/Рябчун.pdf (дата обращения 03.07.2020)
2. Казимирченко, О.В. Бактерии семейства Enterobacteriaceae (Rahn, 1937) в микрофлоре некоторых видов промысловых рыб из водоемов Калининградской области / О.В. Ка-зимирченко // Водные биоресурсы, аквакультура и экология водоемов: V Балтийский морской форум: Всероссийская научная конференция: труды. - Калининград: Издательство ФГБОУ ВО «КГТУ», 2019. - С. 259-265.
3. Казимирченко, О.В. Условно-патогенная бактериофлора леща (Abramis brama L.) воды и грунтов Куршского залива / О.В. Казимирченко, ЯР. Каримова // Водные биоресурсы, аквакультура и экология водоемов: II междунар. науч.-практ. конф.: труды.- Калининград: КГТУ, 2014. - С. 109-112.
4. Кирилюк, Н.Ю. Исследование состояния Калининградского гидрологического района Вислинского залива по химическим и микробиологическим показателям в 2018 году / Н.Ю. Кирилюк, А.В. Сташко, Н.Н. Чукалова, О.В. Кригер // Вестник молодежной науки. -2020. [Электронный ресурс]. URL: https://cyberlenlnka.ru/artlcle/n/lssledovanle-sostoyanlya-kallnlngradskogo-gldrologlcheskogo-rayona-vlsllnskogo-zallva-po-hlmlchesklm-l-mlkroblologlchesklm (дата обращения: 25.01.2021)
5. Государственный доклад «Об экологической обстановке в Калининградской области в 2019 году». - Калининград, 2020. - С. 37-38.
6. Александров, С.В. Пространственные изменения гидрохимических показателей и солености воды в Вислинском заливе в 2010-2013 годах / С.В. Александров, С.А. Вахрушева, И.Л. Мальфанов, Н.Е. Тренина // Труды АтлантНИРО. Новая серия. - Т. 1. - 2017. - № 3. -
С. 5-21. URL:
http://atlant.vnlro.ru/lmages/storles/flles/Trudl AtlantNIRO/T 1 V 3 2017/1UDK 551 Prostranst venle_lzmenenlj a_gldrohlml4esklh_pokazatelel_2017_Aleksandrov_Vahruweva_Malfanov_Trenln a T1 V3.pdf (дата обращения: 25.01.2021)
7. Ларцева, Л.В. Экологические особенности природных очагов сапронозов в гидроэкосистеме Волго-каспийского региона / Л.В. Ларцева, А.А Истелюева // Естественные науки. - 2010. - № 4. - С. 21-24.
8. Чукалова, Н.Н. Экологические факторы, обуславливающие эпизоотическое состояние леща (Abramis brama L.) в Куршском заливе Балтийского моря: автореф. дис. ... канд. биол. наук / Чукалова Наталия Николаевна. - Калининград, 2008. - 142 с.
9. Ведемейер, Г.А. Стресс и болезни рыб: пер. с англ / Г.А. Ведемейер, Ф.П. Мейер, Л. Смит. - Москва: Легкая и пищевая промышленность, 1981. - 128 с.
10. Головина, Н.А. Практикум по ихтиопатологии: учеб. / Н.А. Головина. - Москва: МОРКНИГА, 2016. - 471 с.
11. Авдеева, Е.В. Методы диагностики болезни рыб. Часть 1. Диагностика инфекционных болезней рыб: учеб. пособие / Е.В. Авдеева, О.В. Казимирченко, М.Ю. Котлярчук. -Калининград: КГТУ, 2010. - 110 с.
12. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / Под ред. А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. - Москва: Медицина, 2004. -576 с.
13. Методы общей бактериологии / Под ред. Ф. Герхардта. - Москва: Мир, 1984. -Т. 3. - 264 с.
14. Определитель бактерий Берджи. - В 2 т.: пер. с англ./ под ред. Дж. Хоулта, Н. Крита, П. Снита [и др.]. - Москва: Мир, 1997. - Т. 1. - 432 с.
15. Пивоваров, Ю.П. Санитарно-значимые микроорганизмы (таксономическая характеристика и дифференциация) / Ю.П. Пивоваров, В.В. Королик. - Москва: Изд-во ИКАР, 2000. - 268 с.
16. Ларцева, Л.В. Микрофлора рыб и других гидробионтов: учеб. пособие / Л.В. Лар-цева, О.В. Обухова, И.А. Лисицкая ; под ред. д-ра биол. наук, проф. Ю.В. Альтуфьева. - Астрахань: Астраханский университет, 2008. - 108 с.
17. Ожередова, Н.А. Особенности проявления цитробактериоза, кандимикоза у рыб и санитарная оценка рыбопродуктов: автореф. дис. ...докт. ветерин. наук / Ожередова Надежда Аркадьевна. - Ставрополь, 2008. - 43 с.
OPPORTUNISTIC BACTERIOFLORA OF BREAM (ABRAMISBRAMA L.) OF VISTULA BAY
V.B. Balycheva, student, e-mail: balycheva99@mail.ru Kaliningrad State Technical University
O.V. Kazimirchenko, PhD, Associate Professor, e-mail: oksana.kazimirchenko@klgtu.ru Kaliningrad State Technical University
Microflora of bream (Abramis brama L.) from Vistula lagoon (bay) with visiable skin damages was studied. Facultative bacteria Aeromonas allosaccharophila and sanitary bacteria Citrobacter freundii were dominant in damaged glein's microflora and microflora of internal fisle organs with pathogenic changes. The presence of pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila revealed in glein's microflora was determined. Revealed group of microorganism in associations are able to imiate the infections process in bream of Vistula bay under negative environmental factors.
Key words: Wislin Bay, bream, pathologies of organs, microflora, bacterial septicemia, citrobacteriosis, aeromonads, enterobacteria
