CC BY
29
ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
© О. Д. Беляева, 2011 г. УДК 616-056.257:575
О. Д. Беляева
УРОВЕНЬ РЕЗИСТИНА И C-180G-ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА РЕЗИСТИНА У ПАЦИЕНТОВ С АБДОМИНАЛЬНЫМ ОЖИРЕНИЕМ
Кафедра факультетской терапии с курсом эндокринологии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова
В настоящее время ожирение во всем мире достигло масштабов глобальной эпидемии, и его развитие ассоциировано с развитием сердечно-сосудистых заболеваний и сахарного диабета 2 типа [11, 14]. В качестве индикатора риска патологии, связанной с ожирением, наряду с индексом массы тела (ИМТ), используется другой показатель, характеризующий абдоминальное распределение жира, - окружность талии (ОТ).
Хорошо известно, что жировая ткань - эндокринный орган, секретирующий ряд биологически активных молекул, в том числе резистин (РЕЗ). РЕЗ способен активировать некоторые провоспалительные цитокины, активировать нуклеарный фактор кВ, что дает возможность считать его провоспалительным адипоцитокином [15]. На основании результатов экспериментальных исследований, выполненных у мышей, было высказано предположение, что уровень РЕЗ может быть пусковым фактором возникновения метаболических нарушений, связанных с сахарным диабетом 2 типа и ожирением [18]. Однако данные, полученные при изучении обмена РЕЗ у людей, оказались противоречивыми [7, 10]. Вместе с тем ряд исследователей отводит РЕЗ весомую роль в формировании ожирения, метаболических и сосудистых нарушений у человека [13, 16]. Таким образом, в настоящее время биологические и патофизиологические эффекты резистина в организме человека до конца не выяснены.
Причинами, приводящими к изменению уровня РЕЗ, могут быть и полиморфизмы его гена, в частности С-1800-полиморфизм. В литературе обнаружены единичные работы, посвященные изучению С-1800-полимор-физма гена РЕЗ у человека [7, 16, 17].
Таким образом, целью настоящего исследования было определить уровни резистина, изучить распределение генотипов и встречаемость аллелей при С-1800полиморфизме гена резистина и выявить особенности липидного и углеводного профилей у больных абдоминальным ожирением (АО) - носителей различных генотипов гена резистина.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В исследование были включены 480 больных абдоминальным ожирением (АО) в возрасте от 30 до 55 лет (сред-
ний возраст - 45,8±0,3 года). Уровень резистина (РЕЗ) сыворотки крови был определен у 151 больного с АО (115 женщин и 36 мужчин) в возрасте от 30 до 55 лет и у 26 обследованных без АО сопоставимого возраста (первая группа сравнения) методом иммуносорбентного анализа (ELISA), (DRG, США).
По мнению Международной Федерации сахарного диабета (IDF, 2005), критерием АО служит ОТ у мужчин более или равная 94 см и ОТ у женщин более или равная 80 см [2]. В нашем исследовании средние значения ОТ у мужчин составили 108,4±0,9 см, а у женщин - 98,2±0,6 см.
ИМТ рассчитывали по формуле Кетле (кг/м2) [1]. Среди всех больных АО в соответствие с критериями ВОЗ (1997) у 57,0 % больных было диагностировано ожирение различной степени.
Количественное определение глюкозы в плазме венозной крови и показатели липидного спектра сыворотки крови (общий холестерин (ОХ), холестерин ли-попротеинов высокой плотности (ХСЛПВП), холестерин липопротеинов низкой плотности (ХСЛПНП), триглицериды (ТГ)) выполняли на автоматическом биохимическом анализаторе COBAS INTEGRA 400/700/800 стандартными наборами фирмы Roche (Германия). Определение инсулина сыворотки проводили методом иммуносорбентного анализа (DRG, США). Для оценки степени резистентности к инсулину рассчитывали показатель HOMA-IR [12].
Вторую группу сравнения составили 110 детей и подростков, которые рассматриваются как общая популяция города Санкт-Петербурга. У них были проведены генетические исследования С-180G-полиморфизма гена РЕЗ, который является однонуклеотидным полиморфизмом (SNP) -420C/G (-180 C>G) (reference sequence 1862513), и обусловлен заменой цитозина на гуанин, приводящей к потере рестрикционного сайта для эндонуклеазы BpiI (BstV2I). Определение данного полиморфизма проводили методом ПЦР с последующим рестрикционным анализом по методике S. R. Smith et al. (2003) [16].
При статистической обработке использовали программу STATISTICA for Windows (версия 5.5).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
У пациентов с АО уровень РЕЗ был выше, чем значение этого показателя в группе сравнения - у обследованных с нормальной окружностью талии (4,5±0,1 нг/мл и 3,1 ±0,03 нг/мл соответственно; р<0,05), что согласуется с данными других исследователей [3, 4, 10, 13].
В ряде работ РЕЗ отводят значимую роль в формировании метаболических нарушений у человека. В частности, некоторые исследователи рассматривают РЕЗ в качестве маркера, обладающего проатерогенным действием [4, 5]. При проведении корреляционного анализа у больных АО была выявлена отрицательная корреляционная связь между уровнем РЕЗ и ХСЛПВП (r= -0,2; p=0,02), что позволяет рассматривать РЕЗ в качестве участника процесса атерогенеза.
УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ СПбГМУ ИМ. АКАД. И. П. ПАВЛОВА • ТОМ XVIII • N01 • 2011
Таблица
Распределение С-180С-, С-1800- и 0-1800-генотипов и встречаемость -180С- и -1800-аллелей гена резистина у пациентов с абдоминальным ожирением
Генотип и встречаемость аллелей Группа
общая популяция (п=110) больные абдоминальным ожирением (п=451)
С-180С 49,1 % (п=54) 50,1 % (п=226)
C-180G 40,9 % (п=45) 41,7 % (п=188)
G-180G 10 % (п= 11) 8,2 % (п=37)
-180С-аллель 0,70 0,71
-^OG-аллель 0,30 0,29
В литературе обнаружены единичные работы, посвященные изучению полиморфных вариантов гена РЕЗ, в том числе одного из самых изученных - С-1800-поли-морфизма гена РЕЗ. Распределение С-180С-, С-1800-и 0-1800-генотипов и встречаемость -180С- и -1800-алле-лей гена РЕЗ у больных АО и в общей популяции достоверно не различались (табл. 1). Частота аллелей соответствовала распределению Нагёу-МЪтЪе^.
В работе I. Krizova е! а1. (2008) также было установлено, что встречаемость генотипов гена РЕЗ не различалась в группах больных ожирением и в группе сравнения.
Встречаемость -1800-аллеля у больных с ожирением, по литературным данным, варьирует от 0,236 до 0,35 [8, 17]. В нашем исследовании встречаемость -1800-алле-ля у больных АО составила 0,29, что не противоречит данным литературы.
Уровень РЕЗ в проведенном исследовании не отличался у носителей различных генотипов гена РЕЗ, что согласуется с данными других исследователей [6] (табл. 2).
Таблица 2
Уровень резистина, окружность талии, индекс массы тела, показатели липидного спектра крови и углеводного обмена у пациентов с абдоминальным ожирением, носителей С-180С-, С-1800- и 0-1800-генотипов гена резистина
Показатель (M±m) Генотип гена резистина
С-180С п=226 (1) C-180G п=188(2) G-180G п=37(3) C-180C+C-180G п=414 (4) р
РЕЗ, нг/мл 4,4±0,2 4,4±0,2 5,4±0,8 4,4±0,1 Н.д.
Ж 4,8±0,2 4,7±0,3 5,8±0,01 4,7±0,2 Н.д.
М 3,6±0,3 3,7±0,3 2,5±0,8 3,6±0,3 Н.д.
Возраст, годы 46,4±0,5 44,9±0,6 48,9±1,4 45,7±0,4 Н.д.
ИМТ, кг/м2 31,4±0,3 31,1±0,4 32,1±0,9 31,3±0,3 Н.д.
OT, см 101,3±0,8 100,1±0,9 101,3±2,0 101,2±0,8 Н.д.
Ж 98,6±0,9 97,9±1,1 97,5±2,1 98,3±0,7 Н.д.
М 108,0±1,3 109,8±1,5 110,2±4,2 109,6±2,5 Н.д.
ОТ/ОБ 0,9±0,7 0,9±0,01 0,9±0,01 0,9±0,01 Н.д.
HOMA-ИР 4,4±0,3 4,7±0,4 4,8±0,8 4,6±0,2 Н.д.
Глюкоза, ммоль/л 5,4±0,1 5,5±0,1 5,9±0,5 *# 5,5±0,1 <0,05
Инсулин, кМЕ/мл 18,9±0,9 20,4±1,3 19,0±1,6 19,7±0,8 Н.д.
OXC, ммоль/л 5,7±0,1 5,8±0,1 6,1±0,2 5,8±0,1 Н.д.
ХСЛПВП, ммоль/л 1,2±0,03 1,3±0,03 1,3±0,1 1,3±0,02 Н.д.
ХСЛПНП, ммоль/л 3,9±0,1 3,9±0,1 4,0±0,2 3,9±0,1 Н.д.
ТГ, ммоль/л 1,6±0,1 1,6±0,1 1,5±0,1 1,6±0,04 Н.д.
* отличия достоверны по сравнению с 1-й группой; # срав-нению с 4-й группой.
Совокупность средовых факторов может влиять на реализацию того или иного генотипа, и, возможно, этим объясняется отсутствие достоверный различий в уровнях РЕЗ у носителей различных генотипов гена РЕЗ.
Показатели липидного спектра крови, окружности талии, ИМТ и индекс HOMA-ИР у больных АО, носителей различный генотипов гена РЕЗ, достоверно не отличались (табл. 2). Вместе с тем уровень глюкозы быт выше у больных АО - носителей G-1800-генотипа, по сравнению со значением этого показателя в группе пациентов - носителей -180С-аллеля гена РЕЗ (табл. 2).
Данные литературы о связи C-180G-полиморфизма гена РЕЗ с антропометрическими показателями неоднозначны. Так, S. R. Smith et al. (2003) установили связь между носительством G-180G-генотипа гена РЕЗ и более высокими значениями ИМТ, а также содержанием жира по сравнению с гомозиготами по -180С-аллелю. Однако в некоторых работах не было выявлено связи между C-180G-полиморфизмом гена РЕЗ и развитием ожирения [17], что совпадает с результатами проведенной работы.
В ряде исследований быто установлено, что C-180G-полиморфизм гена РЕЗ не ассоциируется с развитием инсулинорезистентности и сахарного диабета 2 типа [17, 19]. В нашем исследовании не быто выявлено связи между различными генотипами гена РЕЗ и уровнем инсулина, индексом HOMA-ИР у больнык АО. Вместе с тем но-сительство G-180G-генотипа гена РЕЗ ассоциировалось с более высоким уровнем глюкозы плазмы крови.
Таким образом, уровень РЕЗ у больных АО выше, чем у обследованных с нормальной окружностью талии. Встречаемость аллелей и распределение С-180С-, С-180G- и G-180G-генотипов гена РЕЗ у больных АО и в общей популяции достоверно не различались. Уровень РЕЗ у носителей различных генотипов гена РЕЗ не отличался. У носителей G-180G-геноти-па гена РЕЗ уровень глюкозы плазмы крови выше, чем у гомозигот по -180С-аллелю и гетерозигот. В настоящее время биологические и патофизиологические эффекты РЕЗ у человека до конца не выяснены, и имеются немногочисленные и противоречивые данные, посвященные ассоциации С-180G-полиморфизма гена РЕЗ с различными метаболическими показателями. Исходя из этого, необходимы дальнейшие исследования, результаты которых позволят определить роль резистина при абдоминальном ожирении.
ЛИТЕРАТУРА
1. Благосклонная, Я. В. Эндокринология : учеб. для мед. вузов / Я. В. Благосклонная, Е. В. Шляхто, А. Ю. Бабенко. - СПб. : Спец-Лит, 2004. - 398 с.
отличия достоверны по
ОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
2. Alberti, G. Introduction to the metabolic syndrome / G. Alberti // Eur. Heart Journ. - 2005. - Vol. 7 (Suppl. D). - P. D3-D5.
3. Banerjee, R. R. Dimerization of resistin and resistin-like molecules is determined by a single cysteine / R. R. Banerjee, M. A. Lazar // J. Biol. Chem. - 2001. - Vol. 276. - № 28. - P. 2597025973.
4. De Luis, D. A. Resistin levels and inflammatory markers in patients with morbid obesity / D. A. De Luis [et al] // Nutr. Hosp. -2010. - Vol. 25. - P. 630-634.
5. Dick, G. M. Resistin impairs endothelium-dependent dilation to bradykinin, but not acetylcholine, in the coronary circulation / G. M. Dick [et al] // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2006. -Vol. 291 (6). - P. H2997-H3002.
6. Dolinkov, M. Polymorphisms of adiponectin and resistin genes in patients with obesity and anorexia nervosa / M. Dolinkov [et al] // Cas. Lek. Cesk. - 2006. - Vol. 145. - № 7. - P. 562-566.
7. Janke, J. Resistin gene expression in human adipocytes is not related to insulin resistance / J. Janke [et al] // Obes Res. - 2002. -Vol. 10. - P. 1-5.
8. J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2002. - Vol. 87. - P. 2407.
9. Krizova, J. Adiponectin and Resistin Gene Polymorphisms in Patients with Anorexia Nervosa and Obesity and its influence on metabolic phenotype / J. Krizova [et al] // Physiol. Res. - 2008. -Vol. 57. - P. 539-546.
10. Lee, J. H. Circulating resistin levels are not associated with obesity or insulin resistance in humans and are not regulated by fasting or leptin administration : cross-sectional and interventional studies in normal, insulin-resistant, and diabetic subjects / J. H. Lee [et al] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2003. - Vol. 88. - P. 48484856.
11. Manson, J. E. The escalating pandemic of obesity and sedendary lifestyle. A call to action for clinicians / J. E. Manson [et al] // Arch. Intern. Med. - 2004. - Vol. 164. - № 3. - P. 249-258.
12. Matthews, D. R. Homeostasis model assessment : insulin resistance and beta-cell function from fasting plasma glucose and insulin concentrations in man / D. R. Matthews [et al] // Diabetologia. -1985. - Vol. 28 (7). - P. 412-419.
13. Mc Ternan, P. G. Resistin and type 2 diabetes : regulation of resistin expression by insulin and rosiglitazone and the effects of recombinant resistin on lipid and glucose metabolism in human differentiated adipocytes / P. G. McTernan [et al] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2003. - Vol. 88. - P. 6098-6106.
14. Poirier, P. Hurst's The Heart / P. Poirier [et al]. - N.-Y. : McGraw-Hill Companies, 2000. - P. 2289-2303.
15. Silswal, N. Human resistin stimulates the pro-inflammatory cytokines TNF-alpha and IL-12 in macrophages by NFkappaB-dependent pathway / N. Silswal [et al] // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2005. - Vol. 334. - P. 1092-1101.
16. Smith, S. R. A promoter genotype and oxidative stress potentially link resistin to human insulin resistance / S. R. Smith [et al] // Diabetes. - 2003. - Vol. 52. - P. 1611-1618.
17. Pizzuti, A. An ATG repeat in the 3'-untranslated region of the human resistin gene is associated with a decreased risk of insulin resistance / A. Pizzuti [et al] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2002. -Vol. 87. - № 9. - P. 4403-4406.
18. Steppan, C. M. The current biology of resistin / C. M. Steppan, M. A. Lazar // J. Intern. Med. - 2004. - Vol. 255. - P. 439-447.
19. Xiaowei, M. A. Genetic Variants at the Resistin Locus and Risk of Type 2 Diabetes in Caucasians / M. A. Xiaowei [et al] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2002. - Vol. 87. - P. 4407-4410.
РЕЗЮМЕ
О. Д. Беляева
Уровень резистина и C-180G полиморфизм гена резистина у пациентов с абдоминальным ожирением
Обследованы 480 больных абдоминальным ожирением в возрасте от 30 до 55 лет. Уровень резистина у больных абдоминальным ожирением выше, чем у обследованных с нормальной окружностью талии. Встречаемость аллелей и распределение С-180С-, C-180G- и G-180G-генотипов гена резистина у больных абдоминальным ожирением и в общей популяции достоверно не различались. Уровень резистина у носителей различных генотипов гена резистина не отличался. У носителей G-180G-генотипа гена резистина уровень глюкозы плазмы крови выше, чем у гомозигот по -180С-аллелю и гетерозигот.
Ключевые слова: абдоминальное ожирение, резистин, ген резистина, C-180G-полиморфизм.
SUMMARY
O. D. Belyaeva
Resistin level and C-180G-gene polymorphism of resistin in patients with abdominal obesity
480 subjects with abdominal obesity in the age interval from 30 up to 55 years were under investigation. Resistin level was higher in the subjects with abdominal obesity than in the control of the comparison group. Allele frequency and distribution of С-180С-, C-180G- and G-180G-resistin gene genotypes in the subjects with abdominal obesity and in general population showed no significant difference. Resistin level in carriers of various resistin gene genotypes had not differed. According to -180С-allele and heterozygotes the plasma glucose level in the carriers of G- 180G resistin gene genotype was higher than in homozygotes.
Key words: abdominal obesity, resistin, resistin gene, C-180G-polymorphism.
