CC BY
67
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016
УРОВЕНЬ БЕТА-1-ДЕФЕНЗИНА, БАПНА-АМИДАЗНОЙ И ЭЛАСТАЗНОЙ АКТИВНОСТИ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ ПЕРИОДОНТИТОМ
КОЛЧАНОВА Н.Э., ОКУЛИЧ В.К., ДЕНИСЕНКО А.Г.
УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», г.Витебск, Республика Беларусь
Вестник ВГМУ. - 2016. - Том 15, №2. - С. 102-109.
THE LEVEL OF BETA-1-DEFENSIN, BAPNA-AMIDASE AND ELASTASE ACTIVITY IN THE SALIVA OF PATIENTS WITH CHRONIC PERIODONTITIS
KOLCHANOVA N.E., OKULICH V.K., DENISENKO A.G.
Educational Establishment «Vitebsk State Order of Peoples' Friendship Medical University», Vitebsk, Republic of Belarus Vestnik VGMU. 2016;15(2):102-109.
Резюме.
В современных концепциях патогенеза воспалительных заболеваний периодонта значительное внимание уделяется эндогенным антимикробным пептидам (АМП) и протеолитическим ферментам, которые являются важной составляющей врожденного иммунитета, обеспечивающего защиту против патогенов. Цель исследования - определить уровень бета-1-дефензина, БАПНА-амидазной и эластазной активности ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом и ее взаимосвязь с периодонтологическим статусом.
Материал и методы. Проведено комплексное обследование 89 пациентов с хроническим периодонтитом и 25 практически здоровых человек. В день обращения (проба 1) перед проведением лечебных мероприятий и после окончания лечения (проба 2) производился забор ротовой жидкости за час до еды в стерильные пробирки.
Результаты. Установлено, что при развитии хронического периодонтита увеличивается уровень бета-1-дефензина, а также БАПНА-амидазная и эластазная активность ротовой жидкости повышается относительно показателей здоровых лиц. К моменту окончания лечения уровень БАПНА-амидазной и эластазной активности снижается до показателя доноров.
Заключение. В результате изучения активности эластазы ротовой жидкости разработан неинвазивный метод, позволяющий оценить тяжесть течения хронического периодонтита и эффективность проводимого лечения.
Ключевые слова: БАПНА-амидазная и эластазная активность, ротовая жидкость, хронический периодонтит, бета-1-дефензин.
Abstract.
In modern concepts of the pathogenesis of inflammatory periodontal diseases considerable attention is paid to the endogenous antimicrobial peptides (AMPs) and proteolytic enzymes, which are an important component of the innate immunity, providing protection against pathogens.
The purpose of the research is to determine the level of beta-1-defensin, BAPNA-amidase and elastase activity in the saliva of patients with chronic periodontitis and its correlation with the periodontological status. Material and methods. Complex examination of 89 patients with chronic periodontitis and 25 practically healthy people was done. On a visit day (sample 1) prior to carrying out treatment measures and after completed treatment (sample 2) one hour before meals the saliva was taken into sterile test tubes.
Results. It has been established that during the development of chronic periodontitis the level of beta-1-defensin
increases, and BAPNA-amidase and elastase activity in the saliva also increases with regard to the indices of healthy individuals. By the end of the treatment the level of BAPNA-amidase and elastase activity reduces up to the value of donors.
Conclusions. As a result of studying elastase activity in the saliva we have developed a non-invasive method enabling the assessment of the severity of chronic periodontitis course and the effectiveness of the provided treatment.
Key words: BAPNA-amidase and elastase activity, saliva, chronic periodontitis, beta-1-defensin.
Значительная распространенность заболеваний периодонта среди населения и отсутствие тенденции к их снижению — одна из актуальных проблем современной стоматологии [1].
Эндогенные антимикробные пептиды (АМП) и литические ферменты играют важную роль в защитной системе организма, являются составляющей врожденного иммунитета, который обеспечивает защиту против патогенов (широкого спектра бактерий, грибов, вирусов), а также участвуют в развитии процессов воспаления, поддержания и регуляции адаптивной иммунной системы. В настоящее время охарактеризованы сотни антимикробных пептидов и литических ферментов, которые выявляются в эпителиальных тканях, фагоцитирующих клетках и биологических жидкостях человека [2].
Дефензины представляют собой небольшие катионные пептиды, среди которых выделяют две основные группы: альфа и бе-та-дефензины. Альфа-дефензины (HNP 1-6) содержатся в азурофильных гранулах нейтрофи-лов, в то же время основными продуцентами бета-дефензинов (HBD 1-4) являются эпители-оциты слизистых оболочек. HBD-1 экспресси-руется у человека конструктивно, в то время как hBD-2 и hBD-3 являются индуцибельными пептидами, активирумыми микроорганизмами или провоспалительными цитокинами. Де-фензины отличаются по силе бактерицидной активности к различным группам патогенных бактерий. HBD-1 обладает антибактериальной активностью по отношению к перио-донтопатогенным микроорганизмам, таким как Porphyromonas. gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum, хотя и менее активен, чем hBD-2 и hBD-3. HBD-1 играет особое значение в предотвращении перехода коммен-сальных бактерий в оппортунистические патогены [3-5].
Ранее проведенные исследования доказали, что экспрессия различных АМП варьирует в зависимости от наличия воспаления в тканях десны и периодонта. Анализ уровня экспрессии ЬБВ-1 и ЬБВ-2 у пациентов с гингивитом, агрессивным и хроническим периодонтитом показал значительно более высокий уровень ЬБВ-1 в группе с хроническим периодонтитом [6].
При изучении уровня ЬБВ-1 ротовой жидкости и сравнении его концентрации в слюне у детей с атопическим дерматитом при наличии и отсутствии гингивита статистических различий не выявлено, а значения показателей были в пределах 7,1 нг/мл и 6,9 нг/ мл [7]. По данным других авторов, при параллельном анализе количества альфа и бета-де-фензинов в слюне, уровень АМП наблюдался в диапазоне от 1 до 10 мкг/мл и от 1 до 33 нг/ мл, соотвественно [8].
Эластаза нейтрофилов - основная сери-новая протеиназа человека, главным образом присутствует в азурофильных гранулах ней-трофилов. Этот фермент способен расщеплять широкий спектр субстратов экстрацеллюляр-ного матрикса, включая эластин, протеино-гликаны, коллаген и фибронектин. Роль этих ферментов в патогенезе зависит от баланса между ферментом и ингибитором фермента в ткани. Повышение уровня эластазы в зубо-десневой жидкости связано с активной потерей периодонтального прикрепления, поэтому уровень эластазы считают маркером прогрес-сирования заболевания периодонта [2].
БАПНА-амидазная (трипсиноподобная) активность является одним из видов проте-олитической активности ротовой жидкости, для изучения которой в качестве субстрата используют натрий-бензоил-ОЬ-аргинин-4(р)-нитроанилида гидрохлорида (БАПНА).
В клинической лабораторной практике определение уровней АМП и литических ферментов может быть полезно в качестве марке-
ров системной активации нейтрофилов, при мониторинге течения инфекционных и воспалительных заболеваний [2].
Цель исследования - определить уровень бета-1-дефензина, БАПНА-амидазную и эластазную активность ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом и ее взаимосвязь с периодонтологическим статусом.
Материал и методы
Для определения БАПНА-амидазной и эластазной активности в исследование включены 89 человек с хроническим периодонтитом. Из них для определения уровня бета-1-дефензина в ротовой жидкости была сформирована отдельная группа пациентов с хроническим периодонтитом до и после лечения - 20 человек, и контрольная группа - 10 человек.
При обследовании пациентов сформированы 3 группы в зависимости от степени тяжести в соответствии с рекомендациями Американской академии периодонтологии и рентгенологическими симптомами: 24 - c легкой, 42 - средней и 23 - тяжелой степенью. Контрольную группу составили 25 практически здоровых человек без явлений воспаления в тканях периодонта, сопоставимых по полу и возрасту с пациентами исследуемой группы.
Всем пациентам было проведено клиническое и рентгенологическое исследование состояния тканей периодонта с определением индекса зубного налета Силнесс-Лоэ (PI Silness - Loe, 1964), индекса кровоточивости десневой борозды (SBI, Muhlleman, 1971) в модификации Cowell (1975), периодонтального индекса (PI, Pussel, 1956), индекса интенсивности кариеса (КПУ), определения глубины периодонтального кармана.
Все пациенты в день обращения получали традиционное лечение в соответствие со степенью тяжести заболевания, включающее профессиональную гигиену полости рта, устранение местных факторов, способствующих скоплению и активации действия микроорганизмов, местную противовоспалительную терапию, закрытый кюретаж периодонтально-го кармана.
В день обращения перед проведением лечебных мероприятий (проба 1) и в день завер-
шения лечения (проба 2) производился забор ротовой жидкости за час до еды в стерильные пробирки.
Для определения уровня бета-1-дефензина в ротовой жидкости был использован набор Human DEFbl, ELISA Kit (Houston, USA) в соответствии с инструкцией.
Для определения активности эластазы нами была модифицирована методика Бэй-ли Дж. определения эластазной активности в биологических жидкостях [9].
Для определения БАПНА-амидазной активности ротовой жидкости в качестве субстрата протеолиза использовали бензоил-аргинин-р-нитроанилид [10].
Статистическая обработка результатов проведена с помощью пакета прикладных программ «Statistica 10.0», «MS Excel». Для оценки данных применены методы параметрической статистики, представлены в виде среднего значения (М) и среднего квадратичного отклонения (s), непараметрической статистики, представлены в виде значений медиан (Ме) с указанием нижнего 25-й (LQ) и верхнего 75-й квартилей (UQ). Для анализа статистических различий в двух зависимых группах по количественному признаку применялись параметрический метод t-критерий Стьюден-та для зависимых групп и непараметрический критерий Вилкоксона. Для сравнения двух независимых групп по количественному признаку применялся параметрический метод t-критерий Стьюдента для независимых групп, непараметрический критерий Манна-Уитни. Корреляционные зависимости оценивали с помощью ранговой корреляции Спирмена (r); связь считалась слабой при r<0,25, умеренной при 0,25<r<0,75 и сильной при r>0,75. Для всех видов анализа результаты считали статистически значимыми при p<0,05 [11].
Результаты и обсуждение
Результаты индексной оценки перио-донтального статуса и уровня интенсивности кариеса у пациентов с хроническим периодонтитом и контрольной группы представлены в таблице 1.
У пациентов с хроническим периодонтитом отмечаются достоверно более низкие показатели уровня гигиены ротовой полости (индекс PI Silnes-Loe), высокие показатели,
Таблица 1 - Значение стоматологических индексов у пациентов с хроническим периодонтитом и контрольной группы (Ме, LQ - и^)
Индекс Контрольная группа (n=25) Хронический периодонтит (n=89)
PI Silnes-Loe 0,43; 0,34-0,58* 1,98; 1,7-2,9*
SBI 0,25; 0,24-0,42* 2,3; 1,74-2,9*
PI Pussel 0,1; 0-0,19* 3,25; 2,4-3,75*
Глубина ПК, мм 1,7; 0,75-1,85* 5,2; 3,5-6,5*
КПУ 12; 8-17,5* 19; 15-23*
Примечание: * - р<0,001.
Таблица 2 - Концентрация бета-1-дефензина в ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом в сравнениии с контрольной группой
Группа пациентов Уровень дефензинов, нг/мл, M±s р
до лечения после лечения
Контрольная группа (n=10) 2,7±1,2*
Хронический периодонтит (n=20) 4,37±1,1* 4,31±1,2* р>0,05
Примечание: * - р<0,01.
Таблица 3 - Активность эластазы ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом
Группа пациентов Активность эластазы, пкат Ме, LQ - UQ р
до лечения после лечения
Контрольная (n=25) 0 0,0009; 0,0002 - 0,0013 р<М>0,05 р0-<0,001 р0-3<0,001
Хронический периодонтит (n=89) легкая (n=24) 1 0,0012; 0,00057-0,0028 1.1 0,0011; 0,00027-0,0022 Pj 2<0,001 Р1 3<0,001 Рмл>0,05 P0-1.1>0,05
средняя (n=42) 2 0,0079; 0,0033-0,015 2.1 0,0012; 0,00053-0,0022 P2-3<0,01 Р2-21<0,01 Рс-2.1>0,05
тяжелая (n=23) 3 0,025; 0,0094-0,034 3.1 0,0011; 0,00014-0,0064 Р3-3 1<0,001 Рп-3,>0,05
характеризующие состояние тканей периодонта (SBI, PI Pussel, глубина периодонтального кармана) и интенсивности кариеса (КПУ), чем у контрольной группы.
При исследовании уровня бета-1-дефензина в ротовой жидкости были получены следующие результаты: концентрация бета-1-дефензина в слюне в контрольной группе составила 2,7±1,2 нг/мл, показатели у паци-
ентов с хроническим периодонтитом до лечения 4,37±1,1 нг/мл и после - 4,31±1,2 нг/мл не имели статистически достоверных различий (р>0,05). При сравнении с контрольной группой уровень бета-1-дефензина у пациентов с хроническим периодонтитом (р<0,01) был достоверно выше (табл. 2).
Результаты определения активности эла-стазы ротовой жидкости у пациентов с хрони-
ческим периодонтитом разной степени тяжести представлены в таблице 3.
При сравнении активности эластазы ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом с активностью эластазы контрольной группы выявлена статистически значимая более высокая активность фермента у пациентов с тяжелой и средней степенью тяжести течения заболевания (р<0,001), в день обращения у пациентов с легкой степенью статистических отличий не выявлено (р>0,05). Таким образом, при развитии хронического периодонтита активность эластазы ротовой жидкости повышается относительно показателя здоровых лиц.
После завершения курса лечения активность эластазы ротовой жидкости у пациентов с патологией периодонта статистически значимо не отличалась от показателей группы сравнения (р>0,05), таким образом происходила нормализация данного показателя.
При сравнении активности эластазы ротовой жидкости пациентов с хроническим периодонтитом разной степени тяжести выявлено статистически значимое повышение активности фермента в зависимости от тяжести воспалительного процесса. Так, в день обращения у пациентов с тяжелой формой данный показатель составил 0,025; 0,0094-0,034 пкат, а у пациентов со средней и легкой степенью тяжести - 0,0079; 0,0033-0,015; 0,0012; 0,000570,0028 пкат соотвественно (р<0,001).
На основании полученных данных установлено, что активность эластазы ротовой жидкости повышается при развитии хронического периодонтита, так как возникает инфицированный очаг, в который преимущественно мигрируют нейтрофилы и за счет секреции ферментов и своей гибели повышают уровень эластазы в слюне. При купировании воспалительных процессов уровень нейтрофилов резко уменьшается и падает концентрация эластазы до показателей здоровых лиц. Тем самым определение ее активности позволяет оценить эффективность проводимого лечения.
Результаты изучения БАПНА-амидаз-ной активности представлеены в таблице 4.
На основании проведенного исследования БАПНА-амидазная активность ротовой жидкости в контрольной группе составила 2,82±1,3 пкат, у пациентов с хроническим периодонтитом 2,96±1,15 пкат для легкой степени тяжести, 4,39±1,28 пкат для средней и 5,57±1,46 пкат для тяжелой. Нами было отмечено снижение трипсиноподобной (проте-олитической) активности ротовой жидкости у пациентов с патологией периодонта после проведенного лечения. В то же время у пациентов с легкой степенью тяжести хронического периодонтита статистически достоверных отличий от показателей контрольной группы не выявлено.
Отмечается положительная корреляция стоматологических индексов (Р1 ЗНиез-Ьое,
Группа пациентов БАПНА-амидазная активность, пкат М±б р
до лечения после лечения
Контрольная (п=25) 0 2,82±1,3 РО-1>0,05 ро-2<0,01 ро-з<0,001
Хронический периодонтит (п=89) легкая (п=24) 1 2,96±1,15 1.1 2,93±0,9 РЬ2<0,01 р1 <0,001 Р1-11>0,05 Ро-1.1>0,05
средняя (п=42) 2 4,39±1,28 2.1 3,1±0,84 Р2-3<0,05 Р2-2 1<0,01 Ро-2.1>0,05
тяжелая (п=23) 3 5,57±1,46 3.1 3,93±1,59 Рз-зл<0,05 Ро-31<0,05
Таблица 4 - БАПНА-амидазная активность ротовой жидкости пациентов с хроническим периодонтитом
Таблица 5 - Корреляция стоматологических индексов с БАПНА-амидазной и эластазной активностью ротовой жидкости
Индекс Эластазная активность БАПНА-амидазная активность
Коэффициент Спирмена
PI Silnes-Loe 0,699* 0,61***
SBI 0,656* 0,601***
PI Pussel 0,638* 0,582***
Глубина ПК, мм 0,786* 0,596***
КПУ 0,03** 0,00004**
Примечания: * - р<0,001, ** - р>0,05, *** - р<0,05.
Таблица 6 - ЯОС-анализ данных, полученных при исследовании эластазной активности ротовой жидкости для пациентов с хроническим периодонтитом
Сравниваемые группы, хронический периодонтит Диагностический критерий, пкат Специфичность, % Чувствительность, % Диагностическая эффективность, %
средняя/контрольная >0,0013 80 100 91-100
средняя/легкая >0,0015 60,87 100 91-100
средняя до/после лечения >0,0016 70,3 97,6 87-99,6
средняя/тяжелая >0,019 69,5 85,7 57-84
тяжелая/контрольная >0,0041 100 91,3 71-98
тяжелая до/после лечения >0,0065 82,3 86,9 66-97
8Б1, Р1 Ршзе1, Глубина ПК) и БАПНА-амидаз-ной и эластазной активности ротовой жидкости. Данные корреляционного анализа представлены в таблице 5.
При сравнении БАПНА-амидазной и эластазной активности ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом и индексов Р1 ЗНиез-Ьое, 8Б1, Р1 Рш8е1 выявлена умеренная корреляция (г=0,699; 0,656; 0,638 соотвественно для эластазной и г=0,61; 0,601; 0,582 для БАПНА-амидазной активностей), глубины периодонтального кармана с эла-стазной активностью - сильная корреляция (г=0,786), с БАПНА-амидазной активностью - умеренная корреляция (г=0,596). Корреляции между БАПНА-амидазной и эластазной активностью ротовой жидкости и индекса интенсивности кариеса не выявлено.
Установлено, что БАПНА-амидазная и эластазная активность ротовой жидкости находятся в прямой корреляционной зависимости между собой (г=0,596, р<0,05), что связано с активизацией протеиназ при воспалительных процесах в тканях периодонта и позволяет ис-
пользовать данные факторы для диагностики и оценки тяжести течения воспалительного процесса при хроническом периодонтите.
При изучении взаимосвязи уровня бета-1-дефензина с БАПНА-амидазной и эластаз-ной активностью ротовой жидкости выявлена слабая обратная корреляционная зависимость: г=-0,254 и г=-0,237, р<0,05 соответственно.
С целью оценки чувствительности и специфичности метода для диагностики степени тяжести хронического периодонтита, был проведен ЯОС-анализ полученных данных.
ЯОС-анализ полученных результатов представлен в таблице 6.
ЯОС-анализ для легкой степени тяжести не проводился, т.к. статистически значимых отличий у пациентов с легкой степенью хронического периодонтита от контрольной группы не выявлено.
Применение ЯОС-анализа позволяет отнести пациентов с уровнем активности эла-стазы ротовой жидкости выше 0,019 пкат к группе пациентов с тяжелой степенью хронического периодонтита, при показателях выше
0,0015 пкат, но ниже 0,019 пкат - к пациентам со средней степенью тяжести. Критерием выздоровления является снижение показателя активности эластазы у пациентов с тяжелой степенью более 0,0065 пкат и со средней степенью более 0,0016 пкат.
Заключение
1. При развитии воспалительного процесса в тканях периодонта происходит повышение уровня бета-1-дефензина в ротовой жидкости по сравнению с контрольной группой лиц без патологии периодонта в анамнезе. Однако при изучении взаимосвязи уровня бета-1-дефензина с БАПНА-амидазной и эластазной активностью ротовой жидкости выявлена слабая обратная корреляционная зависимость: r=-0,254 и r=-0,237, р<0,05 соответственно.
2. Уровень активности эластазы ротовой жидкости выше 0,019 пкат соответствует группе пациентов с тяжелой степенью хронического периодонтита, а при показателях выше 0,0015, но ниже 0,019 - пациентам со средней степенью тяжести. Критерием выздоровления является снижение показателя активности эла-стазы у пациентов с тяжелой степенью более 0,0065 пкат и со средней степенью более 0,0016 пкат.
3. БАПНА-амидазная и эластазная активность ротовой жидкости повышается при развитии хронического периодонтита, при устранении воспалительного процесса в пери-одонтальных тканях активность данных ферментов снижается до показателей здоровых лиц, что позволяет оценить эффективность проводимого лечения. Выявлена зависимость уровня БАПНА-амидазной и эластазной активности ротовой жидкости от тяжести течения хронического периодонтита.
4. При сравнении БАПНА-амидазной и эластазной активности ротовой жидкости у пациентов с хроническим периодонтитом и индексов PI Silnes-Loe, SBI, PI Pussel выявлена умеренная корреляция (r=0,699; 0,656; 0,638 соотвественно для эластазной и r=0,61; 0,601; 0,582 для БАПНА-амидазной активностей), глубины периодонтального кармана с эла-стазной активностью - сильная корреляция (r=0,786), с БАПНА-амидазной активностью - умеренная корреляция (r=0,596).
Статья выполнена при выполнении НИР «Изучение патогенеза развития воспалительных заболеваний периодонта», договор с БРФФИ М15М-075 от 4.05.2015 г.
Литература
1. Борисенко, Л. Г. Диагностика и комплексное лечение заболеваний периодонта : учеб.-метод. пособие / Л. Г. Борисенко, Е. А. Мирная. - Минск : БГМУ, 2014. - 63 с.
2. Эндогенные антимикробные пептиды и белки [Электронный ресурс] // Русский медицинский сервер : [сайт]. - Режим доступа: http://www.rusmedserv.com/ files/labdiag/35_AMP.pdf. - Дата доступа: 24.02.2016.
3. Абатуров, А. Е. Катионные антимикробные пептиды системы неспецифической защиты респираторного тракта: дефензины и кателицидины. Дефензи-ны - молекулы, переживающие ренесанс (часть 2) [Электронный ресурс] / А. Е. Абатуров // Здоровье ребенка. - 2011. - № 8. - Режим доступа: http://www. mif-ua.com/archive/article/26089. - Дата доступа: 06.04.2016.
4. Chung, W. O. Periodontal Disease and Gingival Innate Immunity - Who Has the Upper Hand? / W. O. Chung, J. An // Periodontal Diseases - A Clinician's Guide / ed. J. Manakil. - InTech, 2012. - Chapter 3. - P. 69-92.
5. Абатуров, А. Е. Катионные антимикробные пептиды системы неспецифической защиты респираторного тракта: дефензины и кателицидины. Дефензи-ны - молекулы, переживающие ренесанс (часть 3) [Электронный ресурс] / А. Е. Абатуров // Здоровье ребенка. - 2012. - № 1. - Режим доступа: http://www. mif-ua.com/archive/article/26053. - Дата доступа: 06.04.2016.
6. Human P-defensin-1 and -2 expression in the gingiva of patients with specific periodontal diseases / S. Vardar-Sengul [et al.] // J. Periodontal. Res. - 2007 Oct. - Vol. 42, N 5. - P. 429-437.
7. Кулакова, Е. В. Эндогенные антимикробные пли-пептиды - факторы неспецифической защиты организма / Е. В. Кулакова, В. М. Елизарова, А. Н. Пам-пура // Рос. стоматол. журн. - 2012. - № 6. - С. 42-45.
8. Comprehensive defensin assay for saliva / M. S. Gardner [et al.] // Anal. Chem. - 2009 Jan. - Vol. 81, N 2. - P. 557-566.
9. Бэйли, Дж. Методы химии белков : пер. с англ. / Дж. Бэйли ; под ред. А. Е. Браунштейна. - М., 1965. - 284 с.
10. Определение БАПНА-амидазной активности микроорганизмов, сывороток крови и иммуноглобулинов класса G : (инструкция по применению) : утв. М-вом здравоохранения Респ. Беларусь № 6-0101 от 17.05.2002 г. / В. К. Окулич [и др.]. - Витебск : Витеб. гос. мед. ун-т, 2002. - 8 с.
11. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных: применение пакета прикладных программ STATISTIKA / О. Ю. Реброва. - М. : Медиа Сфера, 2002. - 305 с.
Поступила 02.03.2016г.
Принята в печать 15.04.2016г.
References
1. Borisenko LG, Mirnaya EA. Diagnostika i kompleksnoe lechenie zabolevanii periodonta [Diagnostics and complex treatment disease periodontium]: ucheb-metod posobie. Minsk, RB: BGMU; 2014. 63 p.
2. Endogennye antimikrobnye peptidy i belki [Endogenic antimicrobial peptides and proteins] [Elektronnyi resurs]. Russkii meditsinskii server: [sait]. Rezhim dostupa: http://www.rusmedserv.com/files/labdiag/35_ AMP.pdf. Data dostupa: 24.02.2016.
3. Abaturov AE. Kationnye antimikrobnye peptidy sistemy nespetsificheskoi zashchity respiratornogo trakta: defenziny i katelitsidiny. Defenziny - molekuly, perezhivaiushchie renesans (chast' 2) [Cationic antimicrobial peptides of system of nonspecific protection of a respiratory tract: defenzina and katelitsidina. Defenzina - the molecules enduring the Renaissance (part 2)] [Elektronnyi resurs]. Zdorov'e rebenka. 2011;(8). Rezhim dostupa: http://www.mif-ua. com/archive/article/26089. Data dostupa: 06.04.2016.
4. Manakil J, ed. Periodontal Diseases - A Clinician's Guide. InTech; 2012. Chapter 3, Chung WO, An J. Periodontal Disease and Gingival Innate Immunity -Who Has the Upper Hand?; p. 69-92.
5. Abaturov AE. Kationnye antimikrobnye peptidy sistemy nespetsificheskoi zashchity respiratornogo trakta: defenziny i katelitsidiny. Defenziny - molekuly, perezhivaiushchie renesans (chast' 2) [Cationic antimicrobial peptides of system of nonspecific protection of a respiratory tract: defenzina and katelitsidina. Defenzina - the molecules enduring the
Renaissance (part 2)] [Elektronnyi resurs]. Zdorov'e rebenka. 2012;(1). Rezhim dostupa: http://www.mif-ua. com/archive/article/26053. Data dostupa: 06.04.2016.
6. Vardar-Sengul S, Demirci T, Sen BH, Erkizan V, Kurulgan E, Baylas H. Human ß-defensin-1 and -2 expression in the gingiva of patients with specific periodontal diseases. J Periodontal Res. 2007 Oct;42(5):429-37.
7. Kulakova EV, Elizarova VM, Pampura AN. Endogennye antimikrobnye plipeptidy - faktory nespetsificheskoi zashchity organizma [Endogenic antimicrobial plipeptida - factors of nonspecific protection of an organism]. Ros Stomatol Zhurn. 2012;(6):42-5.
8. Gardner MS, Rowland MD, Siu AY, Bundy JL, Wagener DK, Stephenson JL. Comprehensive defensin assay for saliva. Anal Chem. 2009 Jan;81(2):557-66.
9. Beyli Dzh, Braunshteyn AE, red. Metody khimii belkov [Methods of chemistry of proteins]: per s angl. Moscow, RF; 1965. 284 p.
10. Okulich VK, Kosinets AN, Senkovich SA, Konopelko EA Opredelenie BAPNA-amidaznoi aktivnosti mikroorganizmov, syvorotok krovi i immunoglobulinov klassa G [Determination of BAPNA-amidazny activity of microorganisms, blood sera and immunoglobulins of a class G]: (instruktsiia po primeneniiu): utv M-vom zdravookhraneniia Resp Belarus' № 6-0101 ot 17.05.2002 g. Vitebsk, RB: Viteb gos med un-t; 2002. 8 p.
11. Rebrova OYu. Statisticheskii analiz meditsinskikh dannykh: primenenie paketa prikladnykh programm STATISTIKA [Statistical analysis of medical data: use of a package of the STATISTIKA application programs]. Moscow, RF; 2002. 305 p.
Received 02.03.2016 Accept 15.04.2016
Сведения об авторах:
Колчанова Н.Э. - аспирант кафедры клинической микробиологии УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Окулич В.К. - к.м.н., доцент кафедры клинической микробиологии УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»;
Денисенко А.Г. - к.м.н., доцент кафедры судебной медицины УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет».
Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь, 210023, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», кафедра клинической микробиологии. E-mail: natali.kolchanova777@gmail.com - Колчанова Наталья Эдуардовна.
