CC BY
39
Журнал фундаментальной медицины и биологии оригинальные статьи
УДК 618.3; 579.61
К.А. Коваленко1,3, Е.В. Машкина1,3, А.Н. Рымашевский2, Т.П. Шкурат1
УРОГЕНИТАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ И ПАТОЛОГИЯ БЕРЕМЕННОСТИ
Научно-исследовательский институт биологии ЮФУ, Ростов-на-Дону 2Ростовский государственный медицинский университет, Ростов-на-Дону
3КДЛ «Наука», Ростов-на-Дону
Цель: исследовать степень инфицированности тканей эндометрия и хориона у женщин с невынашиванием беременности первого триместра.
Материалы и методы: образцы тканей эндометрия и хориона двух групп женщин (контроль (после медицинского аборта) — 51 образец, группу сравнения составили 78 образцов тканей, полученных от женщин с невынашиванием беременности). Методом ПЦР определяли наличие ДНК Chlamydia trachomatis, Ureaplasma spp., Mycoplasma hominis.
Результаты: не выявлено статистически значимых отличий в частоте выявления ДНК Chlamydia trachomatis и Mycoplasma hominis в тканях между двумя группами женщин. Частота выявления ДНК Ureaplasma spp. в абортивном материале женщин с невынашиванием беременности статистически значимо превышает таковой показатель для контрольной группы.
Выводы: выявлена ассоциация между инфицированием тканей эндометрия и хориона Ureaplasma spp. и риском невынашивания беременности первого триместра.
Ключевые слова: беременность, урогенитальные инфекции, невынашивание беременности.
K.A. Kovalenko13, E.V. Mashkina13, A.N. Rimashevsky2, T.P. Shkurat1
GENITOURINARY INFECTION AND PREGNANCY PATHOLOGY
1Research institute of biology, SFU, Rostov-on-Don 2Rostov state medical university, Rostov-on-Don 3CDL «Nauka», Rostov-on-Don
Purpose: To investigate infection frequence in tissue of women with pregnancy loss of the first trimester.
Materials and Methods: Control group included 51 samples of tissues received after medical abortion. The comparison group consisted from 78 samples received from women with pregnancy loss. Presence of DNA Chlamydia trachomatis, Ureaplasma spp., Mycoplasma hominis was defined by PCR method.
Results: Analyzed infectious agents were defined in 39 % of samples of tissue from control group. The given indicator in group with pregnancy loss was 44 %. Frequency of revealing of DNA Ureaplasma spp. in an abortive material of women with pregnancy loss statistically significantly exceeds that indicator for control group.
Summary: found an association between Ureaplasma spp. infection of endometrium and chorion and the risk of miscarriage first trimester.
Keywords: pregnancy, genitourinary infection, pregnancy loss.
оригинальные статьи
Журнал фундаментальной медицины и биологии
Введение
Глубокие гормональные сдвиги во время беременности, измененная иммунологическая реактивность могут активировать воспалительные процессы, оказывать неблагоприятное влияние на течение, исход беременности и новорожденного ребенка. Причины патологии беременности чрезвычайно разнообразны. К ним относят ряд социальных и производственных факторов. Среди биологических причин решающую роль играют нарушения кариотипа, эндокринные нарушения, а также инфекционные заболевания. На долю инфекций урогенитального тракта как причины спонтанных абортов приходится до 4% случаев потери беременности в первом триместре. В основе патогенетических механизмов лежит токсическое воздействие продуктов метаболизма инфекционных агентов, инфицирование плаценты и плода, хроническое инфекционное поражение эндометрия. Возможна активация провоспалительных цитоки-нов, имеющих цитотоксический эффект. Колонизация генитального тракта бактериями приводит к нарушению баланса цитокинов в плаценте прежде всего за счет активации провоспалительных цитокинов — альфа ФНО и интерлейкина 6, что оказывает неблагоприятный эффект на течение беременности. Измененный баланс цитокинов может активировать процессы апоптоза, усиливать продукцию простогландинов, усиливать продукцию металлопротеиназ.
Среди бактериальных инфекционных агентов с повышением риска спонтанного аборта ассоциированы Chlamydia trachomatis, Ureaplasma spp., Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium и др. [1, 2]. Имея в своей структуре антигены, сходные с антигенами человека, они вызывают его иммунологическую «слепоту», одновременно активируя аутоиммунные реакции. Среди бесплодных лиц от 20 до 47% инфицированы хотя бы одним из данных инфекционных агентов [3].
Целью данной работы было исследовать степень инфицированности тканей эндометрия и хориона у женщин с невынашиванием беременности первого триместра.
Материал и методы.
Материалом для исследования послужили образцы тканей эндометрия и хориона двух групп женщин. Контрольную группу составили 51 образец, полученные после медицинского аборта. Группу сравнения составили 78 образцов эндометрия и хориона, полученных от женщин с невынашиванием беременности первого триместра. Все женщины подписали информированное согласие об участии в исследовании.
Выделение ДНК из тканей проводили методом фенол-хлороформной экстракции. Амплификацию ДНК возбудителей урогенитальных инфекций (Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.) выполняли методом гибридизационно-флуоресцентной детекции, используя диагностические наборы «Ампли-сенс» (ЦНИИЭ МЗ РФ, Россия).
Для определения общего уровня инфицирован-ности населения Ростова-на-Дону был проведен анализ лабораторного скрининга за 2010 год по выявлению инфекций, передающихся половым путем (проанализировано 8530 образцов ДНК, выделенной из эпителиальных клеток урогенитального тракта лиц, обратившихся в КДЛ «Наука»).
Результаты и обсуждение.
Анализ результатов лабораторного скрининга на наличие урогенитальных инфекций показал, что в 2010 году частота выявления Chlamydia trachomatis в образцах эпителия урогенитального тракта жителей Ростова-на-Дону составила 7,4% (рис. 1). При этом среди женщин, инфицированных Chlamydia trachomatis, доля беременных составила 9,3%. По данным Всемирной организации здравоохранения за 2007 год у 10—40% женщин, инфицированных Chlamydia, возможно развитие воспалительных заболеваний органов таза, нарушение функций фаллопиевых труб, что может обуславливать до 30—40% случаев женского бесплодия [4]. Частота выявления Mycoplasma genitalium и Trichomonas vaginalis среди жителей Ростова-на-Дону не превышала 3,3%. Neisseria gonorhoeae выявлена в образцах эпителия урогенитального тракта с частотой 1,2%.
В развитии патологических процессов урогени-тального тракта, приводящих к невынашиванию беременности, существенную роль играют не столько патогенные микроорганизмы, сколько условно патогенные бактерии, что, возможно, обусловлено измененной иммунологической реактивностью во время беременности.
Анализ частоты выявления условно-патогенных микроорганизмов показал, что Ureaplasma spp. выявляется в 62,6% случаев, Mycoplasma hominis — в 18% образцов ДНК (рис. 1). Ureaplasma наиболее часто встречалась в концентрации 104 КОЕ/мл (19,9%) и 105 КОЕ/мл (58,8%), что говорит о высокой частоте распространения уреаплазменной инфекции.
При воспалительных процессах в органах уро-генитального тракта могут одновременно находиться ассоциированные инфекции, которые усиливают патогенные свойства друг друга. В нашем исследовании частота одновременного выявления Chlamydia trachomatis и Mycoplasma genitalium составила 0,6%. Гораздо чаще патогенные микроорганизмы выявляются в сочетании с условно-патогенными видами. Так среди женщин, инфицированных Chlamydia trachomatis, 25,9% одновременно инфицированы и Ureaplasma spp. Смешанная инфекция является качественно новой формой инфекционного процесса, а не суммарной составляющей ее моноинфекций, что зависит от количественного соотношения патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, от взаимоотношений между отдельными патогенами и от активации некоторых из них в присутствии других. При смешанных инфекциях одни возбудители могут создавать благоприятные условия для проникновения, персистенции и размножения других микроорганизмов.
Журнал фундаментальной медицины и биологии
оригинальные статьи
Ureaplasma sap.
Mycoplasma hominis
Chlamydia trachomatis
Рисунок 1. Частота выявления инфекций, передающихся половым путем, у жителей Ростова-на-Дону.
Более того, возникают условия, способствующие проникновению инфекционных агентов в верхние отделы полового тракта. Активный транспорт патогенных микроорганизмов осуществляется трихомонадами, которые способны проникать до маточных труб и в брюшную полость. Роль переносчиков микоплазм, гонококков способны выполнять и сперматозоиды. В результате воспалительный процесс поражает слизистую оболочку маточных труб, а в последствии распространяется на соединительный и мышечный слои. Это приводит к непроходимости труб. По данным литературы известно, что у 25% женщин с трубной непроходимостью выявляется Chlamydia trachomatis [5].
Результаты анализа степени инфицированности тканей, полученных после спонтанных или медицинских абортов, представлены на рисунке 2. В целом, в 39% образцов тканей из контрольной
группы выявлен хотя бы один из анализируемых инфекционных агентов. В группе женщин с невынашиванием беременности первого триместра данный показатель равен 44%. Полученный нами уровень инфицированности превосходит данные литературы, согласно которым анализ тканей, полученных после спонтанных абортов, выявил инфицирование хотя бы одним инфекционным агентом в 31,5% случаев.
Не выявлено статистически значимых отличий в частоте выявления генетического материала Chlamydia trachomatis и Mycoplasma hominis в тканях между двумя группами женщин. В то же самое время частота выявления ДНК Ureaplasma spp. в абортивном материале женщин с невынашиванием беременности статистически значимо превышает таковой показатель для контрольной группы (21,6 и 37,2% соответственно, p<0,05).
40 35 30 25 20 15 10
Ureaplasma spp.
Mycoplasma hominis
Chlamydia trachomatis
I ма □ нб
Рисунок 2. Степень инфицированности тканей, полученных после абортов у женщин двух групп (ма - контрольная группа (медицинский аборт); нб - невынашивание беременности).
оригинальные статьи
Журнал фундаментальной медицины и биологии
Анализ по тканям показал, что степень инфицированное™ хориона выше (рис. 3). Это позволяет предположить избирательный тропизм возбудителей к конкретным зародышевым тканям. Большая
восприимчивость хориона к инфекционным агентам создает предпосылки для нарушения процессов плацентации и, следовательно, осложнений беременности.
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 о
№
ЕЕ
эндометрии
хорион
Ureaplasma spp.
эндометрии
хорион
Mycoplasma hominis
I ма □ нб
Рисунок 3. Частота выявления ДНК Ureaplasma spp., Mycoplasma hominis в эндометрии и хорионе у женщин контрольной группы и с невынашиванием беременности первого триместра (ма - контрольная группа (медицинский аборт); нб - невынашивание беременности).
В последние годы во всем мире отмечается увеличение частоты регистрации инфекций, передаваемых половым путем, особенно в возрастной группе до 35 лет. На сегодняшний день число женщин, стадающих инфекциями, передаваемыми половым путем, увеличилось в
4 раза по сравнению с их матерями. По некоторым данным литературы степень инфицирован-ности женщин Chlamydia trachomatis, в анамнезе которых были спонтанные аборты, составляет от
5 до 21% [6]. Еще выше уровень инфицированности мужчин-партнеров данных женщин. В бесплодных парах Chlamydia trachomatis часто выявляется на поверхности мембраны сперматозоидов, а также в цитоплазме яйцеклеток. После оплодотворения возможно распространение данного инфекционного объекта в эмбриональной ткани.
Инфицированность Ureaplasma urealyticum способно оказывать влияние на развитие и жизнеспособность человеческих эмбрионов. Колонизация Ureaplasma urealyticum генитального тракта женщин ассоциирована с неблагоприятным исходом беременности. В ряде исследований показана корреляция между инфицированностью Ureaplasma и повышением уровня антиспермальных антител у женщины. У мужчин Ureaplasma способна негативно влиять на качество спермы: изменяется количество сперматозоидов, их способность к движению и скорость движения, увеличивается доля поврежденных сперматозоидов [7, 8]. In vitro показано, что наличие в эякуляте уреаплазмы увеличивает риск неудачных попыток экстракорпорального оплодотворения. По некоторым данным литературы частота выявления Ureaplasma urealyticum в
сперме фертильных и бесплодных мужчин составляет 7 и 42% соответственно [9].
В исследованиях in vitro показано, что при инфицировании семенной жидкости Ureaplasma urealyti-cum нарушается морфология ядра сперматозоидов, структура хроматина ядра сперматозоидов (хроматин претерпевает преждевременную деконденса-цию), увеличивается частота нарушения структуры ДНК сперматозоида [10]. Это в конечном итоге может приводить к нарушению развития эмбриона и потере беременности. В результате непосредственного воздействия инфекционного возбудителя на плод развивается либо первичная фетопатия, либо из-за поражения плаценты наблюдается плацентарная недостаточность и вторичная фетопатия.
Вывод
Таким образом, нарушения микрофлоры гени-тального тракта играют одну из ведущих ролей в развитии нарушений беременности. Несмотря на то, что M. hominis и Ureaplasma spp. являются частью нормальной микрофлоры влагалища инфицирование эндометрия и тканей хориона данными инфекционными агентами повышают риск прерывания беременности.
Работа выполнена при финансовой поддержке гранта ФЦП «Проведение центром коллективного пользования научным оборудованием «Высокие технологии» Южного федерального университета поисковых научно-исследовательских работ в области создания экологически чистых технологий получения новых активных нано- и микроструктурированных материалов для использования в современной сенсорике», госконтракт № 16.552.11.7024.
Журнал фундаментальной медицины и биологии
оригинальные статьи
ЛИТЕРАТУРА
1. Avasthi K., Garg T., Gupta S. et al. A study of prevalence of Chlamydia trachomatis infection in women with first trimester pregnancy losses. Indian J Pathol Microbiol. 2003;46(1):133-136.
2. Nigro G., Mazzocco M., Mattia E. et al. Role of the infections in recurrent spontaneous abortion. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24: 983-989.
3. Gunyeli I., Abike F., Dunder I. et al. Chlamydia, Mycoplasma and Ureaplasma infections in infertile couples and effects of these infection on fertility. Arch Gynecol Obstet. 2011;283: 379-385.
4. World Health Organization. Global strategy for the prevention and control of sexually transmitted infections:2006-2015: breaking the chain of transmission. Geneva, Switzerland: WHO; 2007.
5. Khron M., Hillier S., Nugent N. et al. The genital flora of women with intramaniotic infection. J Infect Dis.1995; 171:1475-1480.
6. Vigil P., Tapia A., Zacharias S. et al. First-trimester pregnancy loss and active Chlamydia trachomatis infection: correlation and ultrastructural evidence. Andrologia. 2002;34:373-378.
7. Gallegos G., Ramos B., Santiso R. et al. Sperm DNA fragmentation in infertile men with genitourinary infection by Chlamydia trachomatis and Mycoplasma. Fertil Steril. 2008;90(2):328-334.
8. Land J., Van Bergen J., Morre S., Postma M. Epidemiology of Chlamydia trachomatis infection in women and the cost-effectiveness of screening. Hum Reprod Updat. 2010;16(2):189-204.
9. De Jong Z., Pontonnier F., Plante P. et al. Comparison of the incidence of Ureaplasma urealyticum in infertile men and in donors of semen. Eur Urol. 1990;18:127-131.10.
10. Reichart M., Kahane I., Bartoov B. In vivo and in vitro impairment of human and ram sperm nuclear chromatin integrity by sexually transmitted Ureaplasma urealyticum infection. Biology Reprod. 2000;63:1041-1048.
