CC BY
13
Т. В. Азизова, В.Л. Рыбкина, Л. И. Козловская, В.Н. Карпова, Г.В. Адамова, О.В.
Теплякова
УРАЛЬСКИЙ РЕГИОНАЛЬНЫЙ РЕГИСТР ДОНОРОВ КРОВЕТВОРНЫХ
СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГУП Южно-Уральский институт биофизики ФМБА России, г. Озерск
T.V. Azizova, V.L. Rybkina, L.l. Kozlovskaya, V.N. Karpova, G.V. Adamova, O.V. Teplyakova
URALS REGIONAL REGISTRY OF HEMATOPOIETIC STEM CELL DONORS
Southern Urals Biophysics Institute FMBA of Russia, Ozersk
Ключевые слова: регистр доноров кроветворных стволовых клеток, донорский центр, лаборатория HLA-типирования.
Keywords: registry of hematopoietic stem cell donors, donor center, laboratory of HLA-typing.
С 2007 г. на базе Федерального государственного унитарного предприятия «Южно- Уральский институт биофизики» ФМБА России ведется работа по созданию Уральского регионального регистра потенциальных доноров кроветворных стволовых клеток (КСК). Структура регистра, принципы его организации и функционирования были основаны на международных, отечественных и собственных разработках. Привлечение доноров осуществлялось с использованием средств массовой информации, наглядной агитации, при проведением презентаций и индивидуального собеседования. Отбор доноров проводился согласно разработанным критериям. HLA-типирование доноров было проведено с помощью метода сиквенс-специфических праймеров.
Всего агитацией было охвачено около 13100 человек. К донорству КС К было привлечено 4367 лиц, изъявивших желание быть потенциальными донорами КСК; отобрано 2735 потенциальных доноров КСК.
Efforts to establish the Urals Regional Registry of potential hematopoietic stem cell donors at the Southern Urals Biophysics Institute have been initiated since 2007. The international, national and internal institutional design principles underlie the Registry structure, methodology, and operation. Donors are invited through mass media, visual media, presentations, and individual interviews. Donors have been selected based on the developed criteria. The HLA-typing has been performed using the sequence-specific primer technique. Approximately 13,100 individuals have been informed and invited. Total 4,367 individuals, willing to become the potential hematopoietic stem cell donors, have been involved, and 2,735potential donors have been selected.
В последние годы во всех странах мира расширился спектр заболеваний, для лечения которых применяется трансплантация кроветворных стволовых клеток (КСК). Но если в ряде областей медицины эффективность подобных методов лече
ния еще предстоит доказать, то в гематологии существенный прогресс достигнут именно благодаря пересадке аллогенных КСК. Трансплантация аллогенных КСК применяется при терапии злокачественных заболеваний системы крови: хро
нического миелолейкоза, хронического лимфолейкоза, острого лимфобластного и острого миелобластного лейкоза, мие-
лодиспластического синдрома, волоса-токлеточного лейкоза [2,23,25,26,28,31]. Отмечена высокая эффективность трансплантации КСК при незлокачественных заболеваниях крови: остром миелофибро- зе, остеопетрозе, истинной полицитемии, эритрофагоцитарном лимфогистиоцито- зе, анемии Фанкони, тяжелой апластиче- ской анемии, пароксизмальной ночной
гемоглобинурии [4,15,16,21,24,30]. Кроме того, клеточная терапия применяется для лечения первичных иммунодефицитных состояний, включая хронический грану- лематоз и комбинированные иммунодефицита [10,20]. В литературе имеются сведения о применении КСК при метаболических болезнях лейкоцитов [1,17,22]. Появились убедительные, хотя и немногочисленные, данные о благоприятном эффекте трансплантации КСК при лечении аутоиммунных заболеваний (тяжелых форм системной красной волчанки, ревматоидного артрита, рассеянного склероза) [29]. Пересадка КСК применяется для лечения лучевых поражений [9].
Для успешного и эффективного лечения перечисленных выше заболеваний требуется совместимость клеток донора и реципиента, позволяющая существенно снизить риск развития реакции «трансплантат против хозяина». Молекулами, определяющими силу этой реакции, являются антигены главного комплекса ги- стосовместимости, получившего название лейкоцитарные антигены человека — Human leucocyte antigens (HLA). Подбор доноров для пересадки КСК является очень важной задачей. Только для 30% пациентов находят доноров среди родственников, а остальным подбирают «неродственных» доноров КСК. Вероятность подбора наиболее подходящего донора для трансплантации КСК с учетом совместимости по антигенам системы HLA чрез
вычайно мала — от 1: 1000 до 1: 1000000 в зависимости от частоты распространенности аллелей [14].
Для решения проблемы подбора неродственного донора пациенту созданы специализированные организации — регистры доноров КСК, чьей обязанностью является поиск и отбор потенциальных доноров КСК [8,14,19]. Во многих странах успешно работают национальные регистры доноров КСК, объединенные в единый Международный регистр (Bone marrow Donors Worldwide), содержащий в настоящее время информацию о более чем 14 млн. потенциальных доноров [14]. Существующая система позволяет проводить быстрый и эффективный поиск неродственного донора вне зависимости от страны проживания больного, нуждающегося в трансплантации КСК. Основными принципами работы регистров, входящих в Международный регистр, являются добровольность, безвозмездность и анонимность [19]. Результатом эффективной работы международной сети регистров доноров КСК является то, что в настоящее время более чем 100 тысячам человек была проведена трансплантация костного мозга от неродственных доноров [14].
В России неродственные трансплантации КСК проводятся в ограниченном количестве (трансплантации КСК проводят только одному человеку из 30 нуждающихся) и, в основном, с использованием КСК иностранных доноров, поскольку ресурс Российских регистров крайне ограничен [3]. Так, на 10000 населения на Кипре приходится 1394 потенциальных доноров КСК, в Израиле — 753, в Германии - 407, в России — 1,1. Первые шаги по созданию регистров доноров КСК в России были сделаны в Москве, Санкт-Петербурге и Петрозаводске. Совокупная емкость российских регистров,
зарегистрированных в Международном регистре, составляет 16707 человек [14].
Принципы организации Уральского регионального регистра доноров КСК
С 2007 г. на базе Федерального государственного унитарного предприятия «ЮжноУральский институтбиофизики» (ЮУрИБФ) ФМБА России ведется работа по созданию Уральского регионального регистра потенциальных доноров кроветворных стволовых клеток (далее по тексту - УРРД).
Проводимая в ЮУрИБФ работа по созданию УРРД была основана на международных, отечественных и собственных разработках [5 —7,11 — 13,19,27,32].
Структура УРРД включала: базу персональных и базу генетических данных и лабораторию молекулярногенетического
типирования. Кроме того, на базе ЮУрИБФ был создан Донорский центр г. Озерск, который тесно взаимодействовал с УРРД.
Главной целью УРРД на первом этапе его развития являлось накопление персональной и генетической информации о потенциальных донорах КСК. Основными задачами УРРД были: разработка правил и протоколов для всех видов деятельности регистра; разработка структуры и программного обеспечения баз данных; введение в базы данных персональной и генетической информации потенциальных доноров; контроль качества баз данных; постоянное обновление информации о потенциальных донорах; защита данных; обеспечение анонимности доноров.
Ключевой целью Донорского центра г. Озерска являлось привлечение и отбор потенциальных доноров КСК. Основными задачами Донорского центра на первом этапе были: привлечение, информирование и отбор потенциальных доноров; получение и хранение «Информированного согласия» потенциального донора на добровольное участие в регистре и «Согласия на обработку персональных данных»; сбор и хранение медицинских данных донора; сбор и хранение персональной информации о доноре; обеспечение защиты личной жизни донора;
сбор и доставка биологических образцов в лабораторию HLA-типирования; передача персональных данных донора в УРРД. В будущем одной из задач Донорского центра будет являться организация обследования донора перед сдачей КСК, наблюдение за состоянием здоровья донора после сдачи КСК и передача этой информации в УРРД. В донорском центре г. Озерска имелись кабинет для работы с донором, процедурный кабинет для взятия крови, кабинет для административного персонала с базой персональных данных потенциальных доноров КСК [11-14,18,19,27,32].
В структуру УРРД входит лаборатория молекулярно-генетического типирования,
основной целью которой является проведение предварительного HLA-типирования
потенциальных доноров КСК и передача полученных данных в регистр. Задачи лаборатории HLA-типирования системы тканевой совместимости на подготовительном этапе состояли в следующем: разработка и передача в донорский центр протоколов сбора и транспортировки образцов биоматериалов; разработка формы направления на HLA-типирование; разработка системы
идентификации образцов; правил маркировки реагентов; протоколов исследований. Основными функциями лаборатории в процессе работы были проведение HIA-генотипирования; регистрация результатов исследований; контроль качества проводимых исследований; документирование проблем.
Наэтаперекрутированияспециалиста- ми Донорского центра было апробировано несколько методов привлечения доноров: использование средств массовой информации (выступления по радио, телевидению, статьи в газете); привлечение с помощью средств наглядной агитации (листовки, плакаты); презентации на предприятиях и в учебных заведениях; индивидуальные собеседования с жителями города.
Всего агитацией было охвачено около 13100 человек. В результате было при
влечено к донорству КСК 4367 человек (33,3%)-Собственный практический опыт показал, что наиболее эффективным методом привлечения доноров оказались индивидуальные
собеседования с жителями города. Таким способом было привлечено 3064 человека, пожелавших стать потенциальными донорами КСК, то есть 70,16% всех привлеченных лиц. Откликнулись на выступления по радио и телевидению, статьи в газетах 718 человек (16,44%). 355 добровольцев (8,13%) получили информацию о донорстве КСК из средств наглядной агитации (плакаты и листовки). Менее эффективными оказались выступления с компьютерными презентациями на предприятиях, в организациях и учебных заведениях. Эта форма агитации позволила привлечь 193 человека (4,42%). 21 человек (0,48%) получили информацию от знакомых и родственников. С помощью церкви было привлечено 16 добровольцев (0,37%).
Отбор доноров в УРРД проводился согласно разработанным критериям на основе рекомендаций Всемирной ассоциации доноров костного мозга [23]. Отбор доноров проводился врачом-терапевтом донорского центра.
Основными исключающими критериями при отборе потенциальных доноров КСК в УРРД были: возраст моложе 18 лет и старше 55 лет; абсолютные медицинские противопоказания к донорству КСК; перенесенные и имеющиеся профессиональные заболевания, обусловленные облучением: острая лучевая болезнь, хроническая лучевая болезнь и плутониевый пневмосклероз; гипотрофия (индекс массы тела ниже 18), ожирение (индекс массы тела выше 40); работа в условиях пролонгированного внешнего гамма-облучения в дозе более 0,4 Гр в год; содержание плутония-239 в организме более 0,74 кБк; работа в условиях других вредных факторов с превышением ПДК; множественные проколы кубитальных вен (за исключением доноров крови).
Основными абсолютными противопоказаниями к донорству КСК являлись: гемотрансмиссивные инфекции, заболевания крови (гемобластозы, апластическая анемия, наследственные заболевания крови),
злокачественные новообразования, тяжелые заболевания сердечно-сосудистой системы (инфаркты, инсульты, пороки сердца, осложненные сердечной недостаточностью, тромбозы, флебиты), тяжелые заболевания печени и почек при наличии печеночной или почечной недостаточности, тяжелые заболевания желудочно- кишечного тракта и системы дыхания (бронхиальная астма), аутоиммунные заболевания, болезни кожи при наличии распространенного процесса, сахарный диабет, тиреотоксикоз, грыжа позвоночного диска, боли в спине, требующие постоянного приема нестероидных противовоспалительных
препаратов, значительные искривления позвоночника [11-13,18,32].
Характеристика Уральского регионального регистра доноров КСК
На основе вышеуказанных критериев в УРРД было отобрано 2735 потенциальных доноров, пригодных к донорству КСК, то есть 62,63% от всех привлеченных лиц. Противопоказания к донорству КСК имелись у 1632 из 4367 человек (37,37%). Таким образом, в УРРД на 01.01.10 зарегистрировано 1706 мужчин и 1029 женщин. Распределение потенциальных доноров по возрасту представлено на рисунке. Как видно из рисунка, преобладающим большинством лиц, откликнувшихся на призыв стать потенциальными донорами, были молодые люди обоего пола в возрасте от 18 до 40 лет (см. рисунок). Поэтому, на наш взгляд, мероприятия по привлечению доноров необходимо адресовать, прежде всего, молодежи. Это увеличит эффективность привлечения доноров, уменьшит процент отводов, так как у молодых людей существенно меньше противопоказаний к донорству КСК.
Рис. 1. Распределение потенциальных доноров по возрасту
Анализ этнического состава УРРД показал, что в его составе преобладали русские (88,85%). Татары составили 5,04%, башкиры — 4,01%, украинцы — 1,24%. Среди прочих этносов были представлены белорусы, чуваши, удмурты, молдаване, немцы, армяне, узбеки, казахи, евреи, которые в сумме составили 0,77%.
106 потенциальным донорам было проведено HLA-генотипирование методом сиквенс-специфических праймеров. Вся персональная и генетическая информация о потенциальных донорах КСК была введена в базу данных УРРД.
В России до настоящего времени не существует Национального регистра доноров КСК. Создание Национального регистра, на наш взгляд, является крайне важной задачей, прежде всего в связи с генетическими особенностями населения нашей страны и высокой стоимостью поиска и активации донора в зарубежных регистрах. Поскольку Россия имеет огромную территорию, населенную представителями различных этносов, на наш взгляд, представляется целесообразным и эффективным создание региональных регистров доноров КСК. Основна- ой целью региональных регистров доноров КСК будет накопление персональной и генетической информации о потенциальных
донорах КСК и передача ее в Национальный регистр доноров КСК России.
Анализ доступной информации о регистрах и собственный практический опыт позволяют сделать заключение о реальной выполнимости важной государственной задачи — создания Национального регистра доноров КСК Российской Федерации в виде широкой сети региональных регистров.
Литература
1. Бочков Н.П., Никитина В.А., Росло- ва Т.А., Чаушев И.Н., Лакушина И.И. Клеточная терапия наследственных заболеваний//Вести Российской академии медицинских наук. — 2008. — №10. - С. 20-28.
2. Зубаровская Л.С., Сицкая К.О., Ма- ринец О.В., Фрегатова Л.М., Белогурова М.В., Трофимова С.А., Чух- ловин А.В., Афанасьев Б.В. Попытка использования трансплантации аллогенного костного мозга у детей с различными гематологическими неопластическими заболеваниями// Терапевтический архив. - 1998. — Т. 70. -№7, - С. 60-63.
3. Иоффе Ю. Г., Марусенко И.М. Современное состояние и проблемы
создания Российского Национального регистра неродственных доноров
гемопоэтических стволовых клеток// Ученые записки Петрозаводского государственного университета. Серия: естественные и технические науки. — 2009.-Т.99.-С. 69-72.
4. Кулагин А.Д., Лисуков И.А., Крючкова И.В., Сизикова С.А., Гилевич А.В., Денисова В.В., Филимонов П.Н., Ме- няева Е.В., Пронкина Н.В., Кожевников B.C. Черных Е.Р. Козлов В.А. Диагностика и лечение приобретенной апластической анемии//Терапевтиче- ский архив.— 2006. —Т.78— №11.—С.48 - 54.
5. Российская Федерация. Законы. Закон Российской Федерации о трансплантации органов и (или) тканей человека: от 22 декабря 1992 г. № 4180-1// Ведомости СНД и ВС РФ. — 14 января. - С.62.
6. Российская Федерация. Законы. Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан: от 22 июля 1993 г. № 5487-1 //Ведомости СНД и ВС РФ,- 1993,-№33,—С. 13 - 18.
7. Российская Федерация. Законы. Федеральный закон о персональных данных: от 27.июля 2006 г. № 152-ФЗ// Российская газета. Федеральный вы- пуск4131 от 29.07.06.
8. Румянцев А.Г., Аграненко В.А. Достижения и перспективы организации специализированной помощи детям и подросткам с гематологическими и онкологическими заболеваниями // Гематол. и трансфузиол. - 2001. — №3.
- С. 42 - 47.
9. Теоретические основы радиационной медицины/ Под ред. Л.А. Ильина. Т. 1.
- М: Изд. АТ, 2004. - 992 с.
10. Al-Ghonaium. Stem cell transplantation for primary immunodeficiencies: King
Faisal Specialist Hospital experience from 1993 to 2006//Bone Marrow Transplant.
- 2008. - V.42.— Suppl. 1.- S53 - S56.
11. Anderlini P., Korbling М., Dale D., Gratwohl A., et al. Allogenic blood Stem cell Transplantation: Consideration for donors//Blood.— Vol.90.— №3.— 1997. — P.903-908.
12. Anderlini P., Przepiorka D., Korbling М., Champling R. Blood stem cell procurement: donor safety issues//Bone Marrow Transplant. 1998.—Vol.21. — Suppl.3. - P.35 - 39.
13. Bekken R., van Walraven A-М., Egeland T. Donor commitment and patient needs// Bone Marrow Transplantation. — 2004. — Vol.33 .-P.225 - 230.
14. Bone Marrow Donors Worldwide//http:// www. bmdw. org.
15. Dalgaard J., Brinch L., Tjonnfjord G.E. Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria — a rare disease with many faces//Tidsskr Nor Laegerforen. — 2002.— V.122.— №4. — P.374 -378.
16. Domm J. Calder C., Manes B., Crossno C., Correa H., Frangoul H. Unrelated stem cell transplant for infantile idiopathic myelofibrosis//Pediatr Blood Cancer.— 2009.-V. 52,- №7. - P. 893 -895.
17. Froissart R., Moreira da Silva I., Guffon N., Bozon D., Maire I. Mucopolisaccaridosis type II genotype/ phenotype aspects//Acta Paediatr. Suppl.
— 2002,— V.91.— P.82 — 87.
18. Horowits М., Confer D. Evaluation of Hematopoietic Stem Cell Donors// Hematology.— 2005.— №1. — P.46 — 54.
19. Hurley C.K.Raffoux. World Marrow Donor Assoiation: international standards for unrelated hematopoetic stem cell donor registries//Bone Marrow Transplantation. -2004.-V.34.-P.103-110.
20. Kang E.M., Malech H.L. Advances in treatment for chronic granulomatous
disease//Immunol.Res.— 2009.— V.43.— №1—3.P.77 — 84.
21. Kohli-Kumar M., Morris C., Delaat C., Sambrano J.Masterson M., Mueller R., Shahidi N.T., Yanik G., Desantes K., Friedman D.J.,et al. Bone marrow transplantation in fanconi anemia using matched sibling donors//Blood.— 1994,— V.84.— №6,- P.2050 - 2054.
22. KrivitW.Allogenicstemcelltransplantation for the treatment of lysosomal and peroxisomal metabolic diseases. — Springer Semin Immunopathol. — 2004. — V.26. — №1-2.-P. 119-132.
23. Mandelli F., Monteftisco E. Treatment of acute and chronic leukemias. - Recenti Prog Med. -1999. -V. 90.- №1 1.-605 -612.
24. Mesa R.A. New insights into the pathogenesis and treatment of chronic myeloproliferative disorders//Curr Opin Hematol. - 2008,- V.15.-№2,- P. 121 - 126.
25. Milone J.H., Enrico A., Treatment of Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia//Leuk Lymphoma.— 2009.— V.50.— Suppl 2,— P.9- 15.
26. Perel Y., Auvrignon A., Leblanc T., Michel G., Reguerre Y., Vannier J.P., DalleJ.H.,et al. Treatment of childhood acute myeloblastic leukemia:dose intensification improves outcome a
Cooperative Group//Leukemia. — 2005,— V.19.—№12. - P. 2083 - 2089.
27. Rosenmayr A., Hartwell L., Egeland T. Informed consent — suggested procedures for informed consent for unrelated haematopoietic stem cell donors at various stages of recruitment, donor evaluation, and donor workup//Bone Marrow Transplant. — 2003. — V. 31. — P. 539545.
28. Rousselot P. Diagnosis and treatment of chronic myelogenous leukemia//Rev. Prat.- 2005.-V.55. P. 1647 - 1657.
29. Trounson A. New perspectives in human stem cell therapeutic research//BMC Med. - 2009. -V.7. - P.29 - 38.
30. Villa Alcazar M., Benito Bernal A., Diaz Perez M.A., Madero Lopez L. Bone Marrow allogenic transplantation in malignant osteopetrosis//An Esp Pediatr.—1997,— V.47.-№5.-P. 543— 546.
31. Xu L.P., Huang X., Liu K.Y., Chen H., Liu D.H., Han W„ Chen Y.H., Gao Z.Y. Lu J., Wang J.Z., Lu D.P. Allogenic stem cell transplantation from genotypically HLA-identical siblings for 30 patients with myeloblastic syndromes//Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi.- 200(5,- Vi.27.- №8,- e18-52 1.
32. Hematopoietic stem cell donor registries: World Marrow Donors Association recommendations for evaluation of donor health//Bone Marrow Transplantation. - 2008,—.№1. — P.l — 6.
