CC BY
37
УДК 619:616.995.1
Ключевые слова: унцинариоз, плотоядные животные, кровь, микрофлора
Key words: uncinariosis, carnivorous animals, blood, microflora
Петров Ю. Ф., Крючкова Е. Н., Шахбиев Х. Х.
УНЦИНАРИОЗ У ПЛОТОЯДНЫХ ЖИВОТНЫХ В ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
uncinariosis of carnivorous animals ineuropeanpart of the Russian federation
'ФГОУ ВПО «Ивановская государственная сельскохозяйственная академия им. академика Д. К. Беляева» Адрес: 153012, г. Иваново, ул. Советская, 45. Тел. (4932) 41-76-84
'Academician D. K. Belyaev Ivanovo state Agricultural Academy Address: '53012, Russia, Ivanovo, sovetskaya street, 45. Tel. +7 (4932) 41-76-84 2ФГОУ ВПО «Чеченский государственный университет» Адрес: 364907, Чеченская Республика, г. Грозный ул. Киевская, 33 2Chechen state university. Address: 364907, the Chechen Republic, Grozny, Kievskaya street, 33
Петров Юрий Филиппович, д. в. н., проф., академик РАСХН, зав. каф. паразитологии1
Petrov Yury F., Doctor of Veterinary science, Professor, Member of the Russian Academy of Agricultural sciences, Head of the Parasitology Dept.' Крючкова Елена Николаевна, к. в. н., доцент каф. паразитологии1 Krjuchkova Elena N., Ph.D., Associate Professor of the Parasitology Dept.' Шахбиев Хасан Хамидович, к. в. н., ассистент каф. физиологии человека и животных2 shakhbiev Hasan H., Ph.D., Assistant of the Dept. of Human and Animal Physiology2
Аннотация. Унцинариоз широко распространен у домашних и диких плотоядных. У собак наблюдается снижение концентрации гемоглобина, эритроцитов, возникает эозинофилия, лимфоцитоз, возрастает концентрация гамма-глобулинов, активность ферментов АлАт, АсАт, щелочной фосфатазы, альфа-амилазы. Развивается дис-бактериоз кишечника.
Summary. uncinariosis is widely spread in domestic and wild carnivorous animals. The reduction of haemoglobin and erythrocytes concentration is observed; eosinophilia and lymphocytosis occur; gamma-globulin concentration, activity of AlAT, AsAT enzymes, alkalinephosphotase, alpha-amilase increase in dogs. Intestinal dysbacteriosis is developing.
Введение
Унцинариоз регистрируется практически повсеместно и относится к одному из наиболее часто встречающихся гельминтозов у плотоядных животных [1-6]. Несмотря на существенные успехи в познании эпизоотологии и патогенеза заболевания, в настоящее время возникает необходимость изучения некоторых вопросов эпизоотологии, патогенеза и клиники унцинариоза в европейской части Российской Федерации.
Материалы и методы
Для изучения распространения унцинариоза в 2000-2010 гг. в Нижнем Поволжье (Волгоградская и Астраханская области), Северном Кавказе (Чеченская республика), в Центральном районе Нечерноземной зоны РФ (Ивановская, Владимирская, Московская, Костромская, Тверская области) пол-
ному гельминтологическому вскрытию подвергли 90 барсуков, 27 енотовидных собак, 52 лисицы, 51 куницу, 22 волка, 115 норок, 39 хорей, 16 шакалов, 7 выдр, 2 горностаев, 189 бесхозных, 48 прифермских, 84 квартирных собак. Кроме того, исследовали пробы фекалий 384 квартирных, 138 прифермских, 85 бесхозных и бродячих собак.
Патогенез унцинариоза изучили в двух опытах на 12 агельминтных щенках 3-месячного возраста. В первом опыте определяли динамику морфологического и биохимического состава крови, во втором - динамику микрофлоры кишечника. В опытах животным первых групп (по 3 головы в каждой) однократно скормили по 500 инвазионных личинок ипстапа stenocephala. Спустя 90 дней инвазии их дегельминтизировали (фен-бендазол, внутрь, индивидуально, двукратно с интервалом 24 часа по 30 мг/кг по ДВ).
Животные вторых групп были контрольными, их не заражали, они антгельминтик не получали. В течение всего опыта щенки содержались в условиях, исключающих спонтанную инвазию. Степень инвазирован-ности животных контролировали ежедневными исследованиями фецес методом Фюл-леборна.
Исследование крови и содержимого прямой кишки проводили за 3 дня до заражения, на 15-30-60-90 сутки инвазии и на 30-6090-120 сутки дегельминтизации. Гематологические исследования проводили общепринятыми методами, общий белок определяли рефрактометрическим методом, отдельные фракции белка - экспресс-методом. Активность аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ) в сыворотке крови определяли по Reitman, Frankel (1957) в модификации Капетанаки (1962), щелочной фосфатазы - по Bodansky (1933), альфа-амилазы - по Покровскому, Щербаковой (1964).
Материалом для бактериологического исследования служило содержимое прямой кишки животных опытной и контрольной групп. Посевы из содержимого прямой кишки (в разведении до 10-9) делали на МПА (для определения общего числа аэробов), солевой МПА (стафилококков), среду Гарро (стрептококков), среду Блаурокка (бифидобактерий), кровяной агар с колистином и налидиксовой кислотой (бактероиды), среду Вильсон-Бле-ра (клостридии), среду ВНИИЖ (лактоба-циллы), среду Эндо (Escherichia coli), среду Чапека (грибы). Посевы инкубировали в термостате при температуре +37,5 °С в течение 18-24 часов в аэробных и анаэробных условиях для определения бактерий, при температуре +20...+22 °С в течение 4 суток - для определения грибов.
У изолированных стафилококков (123 культуры), стрептококков (107 культур) и Escherichia coli (112 культур) изучали гемолитические свойства, способность выделять токсины, патогенность на белых мышах. Для чего суточные культуры изучаемых микробов вводили внутрибрюшинно белым мышам в дозе по 500 млн и 1 млрд микробных тел. Культуры E.coli типизировали моновалентными агглютинирующими сыворотками.
Результаты исследований
На территории европейской части Российской Федерации нематодами ипстапа stenocephala инвазированы барсуки (ЭИ = 87,8 %, средняя ИИ = 53,1 экз.), лисицы (75 % и 31,4 экз.), волки (63,6 % и 54,6 экз.), шакалы (50 % и 13,5 экз.), енотовидные собаки (74,1 % и 23,9 экз.), норки (20,0 % и 7,8 экз.), куницы (7,8 % и 7,6 экз.), хори (28,2 % и 5,5 экз.), горностаи (50,0 % и 2 экз.), выдры (14,3 % и 11 экз.), квартирные (87,5 % и 13,8 экз.), прифермские (100,0 % и 24,8 экз.), бесхозные (100,0 % и 28,8 экз.) собаки.
Среди собак наивысшая инвазия (100 %, 18,2 экз.) регистрируется у плотоядных 1-1,5-годовалого возраста. С возрастом животных интенсивность инвазии постепенно снижается. Так, у собак 2-3-годовалого возраста средняя ИИ составляет 5,2 экз. на голову, у животных 3,5-4-годовалого возраста -4,2 экз., у плотоядных старше четырехлетнего возраста - 2,2 экз.
Унцинариоз регистрируется в течение всего года. Наивысшая инвазия (ЭИ=100 %, средняя ИИ = 16,8 экз.) - в сентябре-октябре-ноябре и июне-июле-августе (100 % и 14,2 экз.), умеренная (100 % и 11,2 экз.) - в декабре-январе-феврале, наименьшая (100 % и 7,2 экз.) - в марте-апреле-мае.
В нашем опыте в крови собак 3-10-месячного возраста контрольной, агельминтной группы концентрация гемоглобина колебалась в пределах 14,6±0,31 - 15,6±0,38 г%, эритроцитов - 6,7±0,26 - 7,3±0,51 млн./мкл, лейкоцитов - 8,4±0,18 - 10,1±0,36 тыс./мкл, общего белка - 6,84±0,26 - 6,96±0,34 г%, альбуминов - 3,76±0,31 - 3,86±0,44 г %, альфа-глобулинов - 0,91±0,07 - 0,98±0,09 г%, бета-глобулинов - 0,95±0,06 - 1,02±0,06 г%, гамма-глобулинов - 1,05±0,21 - 1,19±0,17 г%, активность фермента АлАТ - 1,42±0,18 -1,52±0,36 ед./ммоль, АсАТ - 1,44±0,22 -1,62±0,18 ед./ммоль, щелочной фосфатазы -3,78±0,16 - 4,06±0,44 ед./л, альфа-амилазы -3,42±0,18 - 3,98±0,31 ед./л. В лейкоцитарной формуле контрольных, агельминтных собак базофилы составили 1,2±0,12 - 1,7±0,12 %, эозинофилы - 3,6±0,12 - 4,6±0,31 %, палочко-ядерные нейтрофилы - 4,6±0,31 - 5,4±0,24 %,
сегментоядерные нейтрофилы - 63,0±1,18 -65,6±1,23 %, лимфоциты - 31,8±1,4 -24,2±1,26 %, моноциты - 1,8±0,22 - 3,3± 0,12 %. Отмеченные показатели не выходят за пределы физиологической нормы для животных данной возрастной группы. У контрольных собак в течение всего опыта в фекалиях отсутствовали яйца гельминтов.
В содержимом прямой кишки у контрольных, агельминтных собак общее число стафилококков колебалось в пределах 3,14±0,18 -3,86±0,22 КОЕ log10/i; стрептококков -3,22±0,36 - 3,72±0,26, Escherichia coli -7,46±0,32 - 8,22±0,28, протея - 0,08±0,005 -0,11±0,009, клостридий - 0,08±0,004 -0,13±0,006, грибов - 0,96±0,04 - 1,18±0,05, лактобацилл - 7,82±0,36 - 8,76±0,42, бифи-добактерий - 7,88±0,22 - 8,84±0,23, бактероидов - 3,88±0,27 - 4,16±0,11 КОЕ log10/г. Соотношение индигенной и факультативной микрофлоры кишечника агельминтных собак составило: в 3-4-месячном возрасте -97,0 : 3,0 %, в 5-10-месячном возрасте -97,5 : 2,5 %.
У трехмесячных контрольных собак из изученных 86 культур стафилококков 28,2 % культур вызывали гибель белых мышей, у щенков 4-5-месячного возраста - 29,4 %. Из кишечника агельминтных собак часто изолировали непатогенных для белых мышей Staphylococcus saprophyticus, но встречались и патогенные Staph.haemoliticus, Staph.albus, Staph.citreus, менее патогенные Staph.epidermidis.
Из изученных 87 культур стрептококков 26,8 % культур отнесены к серогруппе А, по 9,7 % - к В и С, 34 % - Д, по 4,7 % - к G и Н, 1,6 % - к L, остальных 8,8 % культур не удалось дифференцировать. У щенков 3-месячного возраста 36 % изученных культур стрептококков вызывали гибель белых мышей, у щенков 4-5-месячного возраста -50 %, у животных 6-8-месячного возраста - 44,8 %, у собак 9-10-месячного возраста - 33,3 %. Наиболее патогенными были Str.haemoliticus, Str.inulinacaeus (60 %), Str. viridans (30 %), Str.cinereus (20 %).
У опытных животных, получивших по 500 инвазионных личинок U. stenocephala, в фекалиях яйца нематод появились на 28-30
сутки инвазии (14,8±1,2 экз./г. фецес), а на 90 сутки их число достигло максимального уровня (74,6±2,8 экз./г.). На 30-60-90-120 сутки после проведенной дегельминтизации фенбендазолом в фекалиях животных яйца гельминтов отсутствовали.
В крови больных унцинариозом собак на 15-30-60-90 сутки инвазии концентрация гемоглобина была на 3,2-4,6 % (Р < 0,05), эритроцитов - на 4,5-12,3 %, общего белка -на 2,9-6,4 % (Р < 0,05), альбуминов - на 9,4-12,6 % меньше, число лейкоцитов было на 54,8 %, гамма-глобулинов - на 9,5-13,6 %, активность ферментов АлАТ - в 3,4-3,5 раза, АсАТ - в 3,5-4,1 раза, щелочной фосфатазы -в 1,3-1,9 раза, альфа-амилазы - в 1,2-2 раза больше показателей контрольных, агель-минтных животных. У больных унцинарио-зом собак отмечали эозинофилию (6,1-7 %), лимфоцитоз (26,8-27,1 %), увеличение па-лочкоядерных нейтрофилов при существенном (Р < 0,05) снижении сегментоядерных нейтрофилов. У больных собак отмечали снижение аппетита, понос, иногда рвоту. В первые 30 дней инвазии у больных плотоядных регистрировали повышение температуры (на 0,5-0,6 °С выше нормы), но затем, на 60-90 сутки болезни, она была в пределах нормы.
На 30-60-90 сутки инвазии U.stenocephala соотношение индигенной и факультативной микрофлоры кишечника у больных собак составило соответственно 96,5 : 3,5 %; 95,5 : 4,5 % и 94 : 6 %. Общее число стафилококков в кишечнике инвазированных плотоядных было в 1,8-2,3 раза, стрептококков - в
1.1-2,4, Е.соН - в 1,2-1,3, протея - в 12,4-20, клостридий - в 12,6-18,1, грибов - в 1,6-1,9 раза больше, число бифидобактерий было в
1.2-1,4 раза, лактобацилл - в 1,3-1,4, бактероидов - в 1,3-1,4 раза меньше показателей контрольных, интактных собак.
В кишечнике инвазированных унцина-риями собак патогенные стафилококки составили 45-65 %, стрептококки - 60-65 %, Е.соН - 50-60 %. Из общего числа изученных стрептококков 38 % отнесли к серогруппе А, 12 % - к В, 8 % - С, 30 % -Д, 3 % - Н, по 2 % - G и L, 5 % культур не дифференцировали.
После освобождения от унцинарий морфологический и биохимический состав крови, количественный и качественный состав микрофлоры кишечника собак постепенно улучшались и на 90 сутки лечения они существенно не отличались от показателей контрольной, интактной группы.
Заключение
В европейской части Российской Федерации унцинариоз у домашних и диких плотоядных животных встречается повсеместно в течение всего года у всех возрастных групп. Тем не менее, наиболее часто заболевание регистрируется у плотоядных до двухлетнего возраста.
При унцинариозе у плотоядных животных в крови снижается концентрация гемоглобина, эритроцитов, возникает эозинофилия, лимфоцитоз, увеличиваются палочкоядерные нейтрофилы при значительном уменьшении сегментоядерных нейтрофилов, возрастает концентрация гамма-глобулинов, активность ферментов АлАТ, АсАТ, щелочной фосфа-тазы, альфа-амилазы. В кишечнике развивается дисбактериоз: резко увеличивается факультативная микрофлора (стафилококки, стрептококки, E.coli, клостридии, протей, грибы), но уменьшается индигенная микро-
флора (лактобациллы, бифидобактерии, бактероиды). Восстановление функций органов и систем у переболевших плотоядных завершается на 90 сутки дегельминтизации.
Список литературы
1. Абалихин, Б. Г. Паразитофауна некоторых куньих в Ивановской области / Б. Г. Абалихин, Е. Н. Крючкова, С. В. Егоров, М. К. Антонов, В. Б. Ястреб // Междунар. научно-практич. конференция [Материалы] - Ставрополь, 2003.
2. Андреянов, О. Н. Паразитофауна хищников семейства псовых в центральном Нечерноземье России / О. Н. Андреянов, Р. Т. Сафиуллин, В. В. Горохов, Е. Н. Крючкова, Б. Г. Абалихин, С. В. Буслаев // Ветеринария. - М., 2009. - № 6. - С. 37-40.
3. Верета, Л. Е. Гельминты и гельминтозы пищеварительного тракта собак в г. Москве и их санитарно-эпидемиологическое значение / Л. Е. Верета //Бюллетень ВИГИС. - М., 1986. - Вып. 43. - С. 25-30.
4. Крючкова, Е. Н. Паразитофауна семейства куньих в Центральном Нечерноземье России / Е. Н. Крючкова, Б. Г. Абалихин, С. В. Егоров, Р. Т. Сафиуллин // Ветеринария. - М., 2008. - № 9. - С.34-36.
5. Шахбиев, Х. Х. Сезонная и возрастная динамика анкилостомоза и унцинариоза собак в Чеченской Республике / Х. Х. Шахбиев // Междунар. научн. конференция ФГОУ ВПО «Ивановская ГСХА имени академика Д.К. Беляева» [Материалы]. - Иваново, 2010. -Т. 2. - С. 81-82.
6. Шинкаренко, А. Н. Гельминтофауна и меры борьбы с основными паразитозами собак в г. Волгограде : дис. ... канд. вет. наук / А. Н. Шинкаренко. -Иваново, 1999. - 106 с.
