Улучшение ранней диагностики рака желудка Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ПОСТЕРЫ

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель. Исследование влияния эпителиально-мезенхималь-ного перехода (ЭМП) на химиочувствительность клеток коло-ректального рака к стандартным препаратам, применяемым в клинической практике.

Материалы и методы. На первом этапе работы использованы стандартные клеточные линии колоректального рака человека НСТ116 и НТ29. Установление ингибирующих концентраций (IC50) для иринотекана, оксалиплатина и 5-фторурацила проводили с помощью МТТ-теста через 72 часа. Индукция ЭМП проводилась у HT29 с использованием StemXVivoTM EMT Inducing Media Supplement. Выявление экспресгаи маркеров ЭМП Е-кадгерина, Ki-67 проводили методом иммуноцито-химии. Миграцию клеток изучали по скорости «заживления» монослоя. На втором этапе проведено выделение временных клеточных культур из операционного материала. Для 14 временных культур была установлена химиочувствительность и степень выраженности ЭМП. Окрашивание парафиновых срезов опухолей пациентов на наличие Е-кадгерина проводили стандартными методами иммуногистохимии. Результаты. Установлено, что стандартные клеточные линии НСТ116 и НТ29 отличаются по чувствительности к исследуемым препаратам. Клеточная линия НСТ116 была более чувствительна ко всем препаратам по сравнению с НТ29 и имела признаки ЭМП. Индукция ЭМП у HT29 сопровождалась изменением морфологии клеток, а также усилением скорости миграции («заживление монослоя» у ЭМП-ндуцированной линии проходило в 3 раза быстрее), пролиферации (в 2,3 раза больше ki-67 позитивных клеток) и снижением экспрессии Е-кадгерина. По результатам оценки величины IC50 установлено увеличение химиочувствительности клеточной линии НТ29 в результате индукции ЭМП ко всем тестируемым препаратам. Также установлена более высокая химиочувстви-тельность временных культур клеток с признаками ЭМП, полученных из образцов опухолей пациентов. Наличие ЭМП у временной культуры коррелировало с экспрессией Е-кадге-рина в гистологическом срезе той же опухоли. Заключение. Таким образом, нами впервые была продемонстрирована зависимость химиочувствительности от ЭМП на стандартных клеточных линиях колоректального рака при индукции ЭМП in vitro и на временных первичных культурах клеток, выделенных из опухолей толстой кишки и метастазов в печень. Полученные данные указывают на потенциальную возможность использования Е-кадге-рина в качестве прогностического критерия химиочув-ствительности при выборе химиотерапии для пациентов с колоректальным раком. Работа поддержана РНФ (проект № 14-25-00129-П).

Улучшение ранней диагностики рака желудка

А. Ф. Лазарев'

Место работы: 'Алтайский филиал ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Алтайский государственный медицинский университет e-mail: [email protected]

Несмотря на внедрение новых методов обследования пациентов, в последние годы существенного улучшения ранней диагностики и снижения запущенности рака желудка не произошло. Это связано с тем, что многие методы, позволяющие обнаружить злокачественные новообразования желудка в самом начале своего развития, очень дорогостоящие и для массового применения недоступны, используемые же в рутинной практике выявить рак желудка в ранней стадии в большинстве случаев не могут. Нами предложен двух-

этапный подход к ранней диагностике раке желудка. На первом этапе осуществляется формирование группы пациентов с высоким или абсолютным (100%) онкологическим риском, а затем в ней проводится целевой углубленный поиск злокачественного новообразования желудка. Формирование группы высокого и абсолютного риска рака желудка проводится путем составления индивидуальной карты факторов риска данного заболевания у конкретного пациента, заполнением таблицы влияния этих факторов на развитие заболевания с последующим определением величины онкологического риска по оригинальной формуле. В качестве факторов риска рака желудка взяты все уже доказанные факторы для этого заболевания (отягощенная наследственность, особенности питания, наличие Helicobacter и др.). Определена степень влияния каждого (в баллах). Опытным путем на 10 000 больных злокачественными новообразованиями и 5 000 здоровых (контроль) установлено 6 уровней риска рака желудка: 0 уровень (риск отсутствует) — зарегистрирован у 17,35% в контрольной группе и у 0% больных раком желудка; I уровень (низкий) установлен у 51,1% в контрольной группе и у 7,45% больных; II уровень (пониженный) — 19,5% в контрольной и 14,9% больных; III уровень (среднепопуляционный) — соответственно 4,95% и 11,2%; IV (повышенный) — у 4% и 27,1 %; V (высокий) — у 2,8% и 19,1% и VI (абсолютный) не зарегистрирован в контрольной группе (0%) и обнаружен у 7,5% больных раком желудка. Мы рекомендуем включить во второй этап углубленных исследований пациентов, имеющих III—VI уровни риска, которые наблюдаются у более чем 80% больных раком желудка; в группе здоровых они зарегистрированы лишь у 10%. Предложенный метод позволил сформировать в КГБУЗ АКОД регистр предрака высокого риска (8 278), при углубленном обследовании выявлено 443 больных ЗН, из них с I—II стадией — 97,5%, в том числе при раке желудка — у 44. Данный подход позволит резко снизить контингент пациентов на дорогостоящие, углубленные исследования (в 10 раз) и повысить эффективность проводимых профосмотров.

Анализ мутаций в гене BRAF в циркулирующей опухолевой ДНК с помощью биологических микрочипов

М. А. Емельянова', Е. Н. Телышева2, Г. П. Снигирева2, О. О. Рябая3, К. В. Орлова3, И. С. Абрамов', Л. Г. Гукасян', А. С. Заседателев', Т. В. Наседкина'

Место работы: 'ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта Российской академии наук; 2ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России; 3ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н. Н. Блохина» Минздрава России. e-mail: [email protected]

Цель. Меланома является одной из самых опасных форм рака за счет быстрого прогрессирования. Для ее лечения используют таргетные ингибиторы протеинкиназы BRAF и ее непосредственных эффекторов — MEK1/2. Данные препараты назначаются только пациентам с мутациями в гене BRAF, поэтому его предварительный молекулярно-генетический анализ является обязательным. Как правило, для исследования используется ДНК, выделенная из ткани опухоли, полученной в результате биопсии. Однако такой подход имеет ряд недостатков, прежде всего за счет инвазивности данной процедуры. Анализ циркулирующей опухолевой ДНК (цоДНК)

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org