CC BY
26УДК 57.012.4:582.282.123.4: 616-018:611.24
УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ASPERGILLUS SPP. ПРИ ИНВАЗИВНОМ АСПЕРГИЛЛЕЗЕ ЛЕГКИХ
Степанова A.A. (зав. лаб.)*, Васильева Н.В. (директор института, зав. кафедрой), 2Чжан Ф. (директор института, зав. кафедрой), 2Тонг Д. (доцент кафедры), 1Авдеенко Ю.Л. (с.н.с.), 1Шадривова О.В. (ассистент кафедры), 1Шагдилеева Е.В. (ассистент кафедры),1Климко Н.Н. (зав. кафедрой)
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова: НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина и кафедра клинической микологии, аллергологии и иммунологии, Санкт-Петербург, Россия; 2Харбинский Медицинский Университет, Харбин, Китай
©Коллектив авторов, 2018
По данным электронной микроскопии, в паренхиме легких пациентки с генерализованным аспергиллезом (Aspergillus spp.) и инвазив-ным кандидозом выявлены, в основном, молодые и зрелые клетки гиф. В тканях легких больной отмечали умеренное количество клеток иммунной системы, которые, судя по их тонкому строению, были не в состоянии «побороть» клетки гиф аспергилла. В паренхиме легких часто можно было наблюдать апикальные сегменты гиф, лишенные внеклеточного матрикса и, таким образом, «доступные» для макрофагов, но совершенно «безразличные» для последних.
Ключевые слова: аспергиллез, компоненты клетки, макрофаги легких, ультраструктура
ULTRASTRUCTURAL ORGANIZATION OF ASPERGILLUS SPP. IN INVASIVE PULMONARY ASPERGILLOSIS
1Stepanova A.A. (head of the laboratory), 1Vasilyeva N.V. (director of the institute, head of the department), 2Zhang F. (director of the institute, head of the department), 2Tong D. (associate professor), ^vdeento Y.L. (senior scientific collaborator), 1Shadrivova O.V. (assistant of the department), 1Shagdileeva E.V. (assistant of the department), 1Klimko N.N. (head of the department) 1North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov: Kashkin Research Institute of Medical Mycology and Department of Clinical Mycology, Allergology and Immunology, St. Petersburg, Russia; 2Harbin Medical University, Harbin, China
©Collective of authors, 2018
According to the electron microscopy in the parenchyma of the patient's lungs with generalized aspergillosis (Aspergillus spp.) and invasive candidosis the young and mature hyphal cells generally were observed. In lungs tissues of the patient the moderate number of the cells of immune system which, according their structure weren't able «to overcome» the aspergillus hyphal cells were revealed. It was possible often to observe in the parenchyma the hyphal apical segments deprived of an «extracellular matriх» and thus «available» for micro-phages, but absolutely «indifferent» for the last.
Key words: aspergillosis, cell's components, macrophages of lung, ultrastructure
Контактное лицо: Степанова Амалия Аркадьевна, e-mail: [email protected]
ВВЕДЕНИЕ
Изучение ультраструктуры клеток вегетативного мицелия патогенных видов аспергиллов in vivo необходимо для выяснения важных фундаментальных вопросов: каким образом преображается строение клеток гриба при переходе его в тканевую форму, какие особенности их внутреннего строения активизируются при этом. Имеется небольшое число работ, посвященных изучению тонкого строения тканевых форм аспергиллов [1-7 и др.].
Цель работы - продолжить начатые нами ранее исследования ультраструктурной организации клеток вегетативного мицелия патогенного гриба в тканях легких пациентки с учетом особенностей иммунного ответа.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
У пациентки (Н., 37 лет) с цитопенией неясного генеза, по данным аутопсии, был установлен патоло-гоанатомический диагноз «генерализованный аспер-гиллез: двусторонняя аспергиллезная пневмония, аспергилезнный очаговый некротический менигоэн-цефалит». При гистологическом исследовании с использованием специфической окраски на грибы (ПАС, Гомори-Грокотт) выявили наличие элементов гриба, морфологически сходных с аспергиллами, в тканях легких и головного мозга.
Кусочки легких аутопсийного материала располагали в биопсийные кассеты, затем фиксировали 6 часов 10%-м забуференным раствором формалина. После этого биопсийные кассеты с материалом помещали в аппарат для гистологической обработки биологических тканей Tissue-Tek®VIPTM 5Jr. для проведения проводки через серию изопропанола (IsoPrep). Последующую заливку в среду Biomix осуществляли с помощью модульной системы заливки Tissue-Tek®TECTM. Срезы толщиной 3 мкм получали на санном микротоме Slide 2003, монтировали на предметные стекла с помощью адгезивной жидкости фирмы Biovitrum. Для выявления грибов использовали окрашивание по методу Гомори-Грокотт. Срезы заключали в заливочную среду Bio Mount. Препараты исследовали в световом микроскопе AxioLab.A1. Для трансмиссионной электронной микроскопии (ТЭМ) из блока, предназначенного для светооптических исследований, скальпелем вырезали участки ткани легкого с наибольшей концентрацией грибов, которую определяли в ходе изучения препаратов в световом микроскопе. Фиксацию для ТЭМ проводили по методике, предложенной и описанной нами ранее [5, 8]. Ультратонкие срезы получали на ультрамикротоме LKB V, собирали на медные сетки без подложки, окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца. Срезы изучали в трансмиссионном электронном микроскопе Jem-100 SX.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В ткани легкого пациентки гифы гриба формировали морфологические образования двух типов: многочисленные скопления в виде палисады (кустообразное разрастание) и редкие очаги радиального роста варьирующего диаметра [9], что позволяет сделать вывод о наличии у больной инвазивной формы аспергиллеза. В описанных скоплениях гриба доминировали молодые и зрелые клетки гиф, тогда как отмирающие и полно-
стью отмершие встречали крайне редко. Молодые и зрелые клетки гиф наблюдали в равной мере.
Маргинальную часть описанных скоплений представляли самые молодые, одиночные, активно растущие апикальным ростом концевые сегменты гиф, которые имели, в среднем, диаметр равный 2,2 мкм. Они содержали небольшое количество одиночных интерфазных ядер, расположенных в центральной части клетки гифы. Ядра округлой формы (в среднем - 1,2 мкм), с одним эксцентричным ядрышком (в среднем -0,25 мкм) и умеренным количеством равномерно распределенного диффузного хроматина. Митохондрии многочисленные (18-22), равномерно распределены на медианном срезе клетки (Рис. 1 а, б), одиночные, округлой формы (от 0,2 до 0,3 мкм), с плотным матриксом и большим числом хаотично ориентированных крист. В некоторых митохондриях встречалась небольших размеров светлая ДНК-зона (Рис. 1 б, стрелка). Ма-трикс митохондрий высокой электронной плотности, что делало их легко различимыми на фоне цитозоля умеренной электронной плотности. Несколько средних размеров светлых вакуолей были расположены вблизи септы (Рис. 1 а), что обусловливало асимметричное строение концевым сегментам гиф. Запасные вещества отсутствовали. Асимметричное строение и отсутствие запасных веществ было отмечено для концевых сегментов гиф других видов аспергиллов [10, 11 и др.]. Секреторные пузырьки редкие, одиночные или в небольших группах, в основном, приурочены к клеточной стенке, светлые или с серым содержимым. Микротельца, одиночные цистерны Гольджи и цистерны эндоплазматического ретикулума не наблюдали. Цитозоль умеренной электронной плотности, содержал многочисленные свободные рибосомы. Клеточные стенки равномерно тонкие (0,2 мкм) на всем своем протяжении, умеренной электронной плотности, тонко-фибриллярной текстуры, лишены внеклеточного матрикса (Рис. 1 а, б). Периплазматическое пространство светлое, неравномерное по толщине.
По основным признакам ультраструктуры (слабая вакуолизация, богатство цитозолем и свободными рибосомами, отсутствие запасных веществ, мелкие митохондрии) концевые апикально растущие клетки гиф аспергилла имели облик, характерный для меристе-матических клеток грибов [12]. Меристематический облик такого типа клеток обусловлен тем, что в них проходит активный непрерывный апикальный рост, сопряженный с делением ядра и формированием отделительной базальной септы.
Зрелые клетки гиф отмечали как в одиночных (Рис. 1 в) гифах, так и в группах по две (Рис. 1 г) и больше. Средний диаметр клеток гиф был равен 3,0 мкм. Они содержали одиночные интерфазные ядра (1,0 мкм), расположенные в толще цитозоля (Рис. 1 д). Размеры и тонкое строение ядер сходно с аналогичными, описанными выше для концевых сегментов гиф. Число митохондрий было заметно больше (35-39 на срезе клетки), чем в концевых сегментах гиф. По особенностям микроморфологии последние были сходны с таковыми молодых клеток. В нашем случае мы не наблюдали в зрелых клетках гиф аспергилла формирование одной гигантской митохондрии или митохондриального ре-тикулума.
Ранее [13] было показано, что зрелые дрожжевые
клетки сильновирулентного штамма (РКП^-1105) Сryptococcus neoformans в тканях мозга мышей, в отличие от культуральных форм гриба, формировали одну гигантскую митохондрию. Аналогичная органелла была характерна и для зрелых гиф вегетативного мицелия Aspergillus fumigatus, инфицирующих легкие пациента [6]. В зрелых клетках слабовирулентного штамма (РКП№1172) A. fumigatus, инфицирующих легкие мышей, происходило существенное увеличение числа митохондрий, однако митохондриальный ретикулум при этом не формировался.
Вакуоли довольно крупные (Рис. 1 е), светлые, занимали большую часть площади среза клетки. Цито-золь умеренной электронной плотности, богат свободными рибосомами, в нем выявлены в небольшом числе запасные вещества в виде липидных включений и фиброзиновых телец. Липидные включения в числе 1-2 на медианном срезе клетки, одиночные, небольших размеров (0,3-0,4 мкм), округлой формы, умеренной электронной плотности, обычно приурочены к клеточной стенке (Рис. 1 ж). Фиброзиновые тельца наблюдали крайне редко, они расположены вблизи клеточной стенки (Рис. 1 з, 2 а), пластинчатой формы, умеренной электронной плотности, расположены в один ряд и представляют собой крайне редкий тип запасного вещества, характерный для клеток грибов. Ранее их выявляли в клетках патогенных грибов в условиях культуры у Aspergillus versicolor [14] и A. candidus [15], а также in vivo в дрожжевых клетках С. neoformans [13].
Отметим, что в паренхиме легких мышей [3] через 5 дней после инфицирования клетки гиф A. fumigatus содержали редкие, мелкие липидные включения, одиночные белковые включения в вакуолях, розетки гликогена и тяжи фибриллярного белка. В то же время клетки гиф аспергилла, локализующиеся в просвете сосудов легких, содержали крупные липидные включения, занимающие основной объем клетки. Отметим, что в условиях культуры тот же штамм A. fumigatus до начала эксперимента содержал аналогичные типы запасных веществ, но их концентрация была намного выше [11], что можно объяснить необходимостью формировать многочисленные конидиогенные аппараты. Не-большое количество типов запасных веществ было выявлено и в клетках зрелых гиф A. fumigatus [5, 6], инфицирующих легкие пациентов. Интересно, что зрелые клетки гиф культуральных форм аспергиллов [10-11, 14-17], в противовес тканевым, были богаты разнообразными запасными веществами.
В анализируемом случае интактные клетки в пределах гиф аспергилла были отделены друг от друга трехслойными септами (Рис. 1 и), толщина которых в средней их части составляла 0,15 мкм. Септы в центральной части имели септальную пору, вблизи которой концентрировались округлой формы (0,15-0,2 мкм) электронно-плотные тельца Воронина. На медианном срезе гифы их число варьировало от 2-х до 4-х. Отметим, что описанные особенности микроморфологии септального порового аппарата характерны для тканевых [3, 5-7] и культуральных [10-17 и др.] форм аспергиллов.
При старении клеток гиф вегетативного мицелия аспергилла первые изменения происходили в строении ядра. Вначале отмечали локальное просветление нуклеоплазмы (Рис. 2 а) и уменьшение количества
Рис.1. Особенности ультраструктурной организации клеток гиф Aspergillus spp. в тканях легких пациентки.
Рис. 2. Ультраструктура клеток гиф Aspergillus spp. и макрофагов в тканях легких пациентки.
диффузного хроматина. Митохондрии уменьшались в числе, сильно разбухали, форма их становилась неправильной, число крист и их протяженность заметно сокращались. Затем снижалось число запасных веществ, происходил разрыв тонопласта, что приводило к глобальному автолизу цитозоля. Плазмалемма исчезала из клеток последней, она распадалась на фрагменты. Часто наблюдали разной протяженности фрагменты клеточных стенок отмерших клеток гиф, несущие темный несколько утонченный внеклеточный матрикс (Рис. 2 б). Надо сказать, что в паренхиме легкого часто сохранялись неправильной формы темные обрывки внеклеточного матрикса некогда живых клеток (Рис. 1 г). Процесс естественного старения клеток гиф аспер-гилла анализируемого случая протекал по сценарию, ранее описанному для других патогенных видов аспер-гиллов, выращенных in vitro [18].
Клетки иммунной системы в паренхиме легких описываемого случая встречались в умеренном числе. Они, в основном, находились на разных стадиях деструкции. Иногда отмечали картины начальных стадий гифоцитоза клеток гиф аспергилла макрофагами (Рис. 2 в, г). В тканях легкого чаще отмечали разрушающиеся макрофаги, находящиеся в контакте с интактными гифами гриба (Рис. 2 д, е). Для последних характерен плотный цитозоль, многочисленные свободные рибосомы, большое число округлой формы мелких (0,4-0,5 мкм) митохондрий, равномерно расположенных по площади клетки. Меристематический облик клеток гиф являлся показателем того, что некогда интактные макрофаги осуществляли гифоцитоз апикальных концевых клеток гиф (Рис. 2 д), что было описано нами ранее для макрофагов легких мышей [19]. Для этих клеток гиф характерно отсутствие запасных веществ и секреторных пузырьков. Их клеточные стенки тонкие (0,1 мкм), однослойные, умеренной электронной плотности, окружены неравномерным по толщине (0,1-0,5 мкм) электронно-плотным внеклеточным матриксом. В разрушающемся макрофаге присутствовало одно асимметрично расположенное компактное ядро с признаками пикнотической дегенерации (Рис. 2 д, е). Ци-тозоль был сильно просветлен, свободные рибосомы в нем отсутствовали. Митохондрии встречались редко, они сильно раздуты, со светлым матриксом и редкими кристами. Вакуоли редкие, светлые, средних размеров, иногда с извилистым тонопластом. Плотный контакт разрушающейся под влиянием апекса концевой клетки гриба макрофага имел вид как-бы «чехла», который являлся препятствием для разрушительной деятельности гидролитических ферментов гриба.
Также наблюдали картины, когда деструктивные
процессы (Рис. 2 ж, з) имели место как в содержимом макрофага, так и в клетках гиф гриба. Довольно часто выявляли скопления макрофагов, лишенные гиф аспергилла и находящиеся на разных стадиях деструкции (Рис. 2 и). Интересно, что разрушение клеток гиф под действием одного макрофага могло проходить асинхронно, только в одной из смежных гиф (Рис. 2 к).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В паренхиме легких пациентки анализируемого случая скоплениях гиф аспергилла состояли из трех основных типов гиф: молодые растущие, зрелые закончившие рост, а также отмирающие и полностью отмершие. Зрелые и молодые клетки гиф доминировали. Наличие небольшого количества отмерших и отмирающих клеток в тканях легких, небольшое число запасных веществ в интактных зрелых клетках гиф, отсутствие спороношения и скоплений зрелых конидий были показателями того, что время развития микоти-ческой инфекции в тканях легких пациентки было не большим.
Согласно ранее проведенным гистологическим исследованиям, в тканях мозга пациентки Н. воспалительная реакция отсутствовала, тогда как в легких имели место зоны некроза с выраженной лейкоцитарной инфильтрацией и наличием большого числа распадающихся нейтрофилов [9]. Данные электронной микроскопии показали присутствие в легких пациентки умеренного количества макрофагов, которые, судя по их строению, находились на стадии деструкции и, таким образом, не были в состоянии «побороть» клетки гиф аспергилла. В данном случае довольно часто можно было наблюдать апикальные сегменты гиф, обычно наиболее активно поглощаемые макрофагами. Такие гифы лишены внеклеточного матрикса и, соответственно, наиболее «доступны» для гифоцитоза микрофагами, но они были совершенно «безразличны» для последних. Очевидно, что у пациентки аспергил-лез, как впрочем, и кандидоз, возникли на фоне сильно угнетенного иммунитета. В анализируемом случае предрасполагающими факторами инфицирования патогенными грибами являлись агранулоцитоз, лим-фоцитопения, нахождение в ОРИТ, а также терапия системными глюкокортикостероидами [8].
БЛАГОДАРНОСТЬ
Авторы выражают благодарность сотрудникам Ленинградской областной клинической больницы Шаховой Л.В., Ермоловой С.О., Борисову М.В., Калинину В.Ю. и Терскову Т.В. за предоставление материалов и помощь в проведении настоящего исследования.
ЛИТЕРАТУРА
1. Beauvais A., Schmidt C., Guadagnini S., et al. An extracellular matrix glues together the aerial-grown hyphae of Aspergillus fumigatus. Cell. Microbiol. 2007; 9: 1588-1600.
2. Muller F.M., Seidler M., Beauvais A. Aspergillus fumigatus biofilms in the clinical setting. Med. Mycol. - 2011; 49 (1): 96-100.
3. Степанова А.А., Босак И.А., Синицкая И.А. Цитологическое исследование Aspergillus fumigatus Fres. в легких мышей. Проблемы медицинской микологии. 2013; 15 (1): 52-58. [Stepanova A.A., Bosak I.A., Sinickaya I.A. Citologicheskoe issledovanie Aspergillus fumigatus Fres. v legkih myshej. Problemy medicinskoj mikologii. 2013; 15 (1): 52-58 (In Russ)].
4. Muszkieta L., Beauvais A., Pähtz V., et al. Investigation of Aspergillus fumigatus biofilm formation by various "omics" approaches. Front. Microbiol. 2013.
5. Степанова А.А., Васильева Н.В., Борзова Ю.В. и др. Электронно-микроскопическое изучение аспергиллеза легких человека на примере архивного материала. Проблемы медицинской микологии. 2014; 16 (3): 70-79. [Stepanova A.A., Vasileva N.V., Borzova YU. V. i dr. Elektronno-mikroskopicheskoe izuchenie aspergilleza legkih cheloveka na primere arhivnogo materiala. Problemy medicinskoj mikologii. 2014; 16 (3): 70-79 (In Russ)].
6. Stepanova А.А., Vasilyeva N.V., Zhang F., et al. Electron-microscopic investigations of invasive aspergillosis caused with Aspergillusfumigatus. Problems in medical mycology. 2015; 17 (3): 38-41.
7. Степанова А.А., Васильева Н.В., Босак И.А. и др. Особенности строения Aspergillus fumigatus при экспериментальном аспергиллезе у мышей. Проблемы медицинской микологии. 2016; 18 (4): 40-52. [Stepanova A.A., Vasil'eva N.V., Bosak I.A. i dr. Osobennosti stroeniya Aspergillus fumigatus pri ehksperimental'nom aspergilleze u myshej. Problemy medicinskoj mikologii. 2016; 18 (4): 40-52 (In Russ)].
8. Stepanova A.A., Vasilyeva N.V., Yamaguchi M., et al. Electron microscopy of autopsy material from the human brain cryptococcosis and aids. Problems in medical mycology. 2015; 17 (1): 35-40.
9. Шагдилеева Е.В., Шадривова О.В., Забиров Н.С. и др. Сочетание инвазивного кандидоза и инвазивного аспергиллеза у больной с цитопенией неясного генеза. Описание клинического случая и результаты проспективного исследования. Проблемы медицинской микологии. 2018; 20 (1): 9-17. [Shagdileeva E.V., Shadrivova O.V., Zabirov N.S. i dr. Sochetanie invazivnogo kandidoza i invazivnogo aspergilleza u bol'noj s citopeniej neyasnogo geneza. Opisanie klinicheskogo sluchaya i rezul'taty prospektivnogo issledovaniya. Problemy medicinskoj mikologii. 2018; 20 (1): 9-17 (In Russ)].
10. Степанова А.А., Синицкая И.А. Ультраструктура клеток Aspergillus niger. Вегетативный мицелий. Проблемы медицинской микологии. 2003; 5 (4): 32-39. [Stepanova A.A., Sinickaya I.A. Ul'trastruktura kletok Aspergillus niger. Vegetativnyj micelij. Problemy medicinskoj mikologii. 2003; 5 (4): 32-39 (In Russ)].
11. Степанова А.А., Синицкая И.А., Авдеенко Ю.Л. Субмикроскопическое изучение клеток вегетативного мицелия Aspergillus fumigatus Fres. Проблемы медицинской микологии. 2004; 6 (3): 34-40. [Stepanova A.A., Sinickaya I.A., Avdeenko Yu.L. Submikroskopicheskoe izuchenie kletok vegetativnogo miceliya Aspergillus fumigatus Fres. Problemy medicinskoj mikologii. 2004; 6 (3): 34-40 (In Russ)].
12. Степанова А.А., Васильев А.Е. Ультраструктурные основы морфогенеза шляпочных грибов. Ашхабад: Изд. «Ылым», 1994: 263 с. [Stepanova A.A., Vasil'ev A.E. Ul'trastrukturnye osnovy morfogeneza shlyapochnyh gribov. Ashkhabad: Izd. «Ylym», 1994: 263 s. (In Russ)].
13. Васильева Н.В., Степанова А.А., Синицкая И.А. Особенности морфогенеза клеток Cryptococcus neoformans в зависимости от вирулентности штаммов. Проблемы медицинской микологии. 2007; 9 (4): 23-30. [Vasil'eva N.V., Stepanova A.A., Sinickaya I.A. Osobennosti morfogeneza kletok Cryptococcus neoformans v zavisimosti ot virulentnosti shtammov. Problemy medicinskoj mikologii. 2007; 9 (4): 23-30 (In Russ)].
14. Степанова А.А., Синицкая И.А. Цитология клеток выращенного in vitro вегетативного мицелия Aspergillus versicolor (Vuill.) Tiraboshi. Проблемы медицинской микологии. 2006; 8 (3): 22-28. [Stepanova A.A., Sinickaya I.A. Citologiya kletok vyrashchennogo in vitro vegetativnogo miceliya Aspergillus versicolor (Vuill.) Tiraboshi. Problemy medicinskoj mikologii. 2006; 8 (3): 22-28 (In Russ)].
15. Степанова А.А., Васильева Н.В., Чжан Ф., Тонг Д. Ультраструктурное исследование клеток вегетативного мицелия Aspergillus candidus Link, выращенных in vitro. Проблемы медицинской микологии. 2016; 18 (2): 23-27. [Stepanova A.A., Vasil'eva N.V., CHzhan F., Tong D. Ul'trastrukturnoe issledovanie kletok vegetativnogo miceliya Aspergillus candidus Link, vyrashchennyh in vitro. Problemy medicinskoj mikologii. 2016; 18 (2): 23-27 (In Russ)].
16. Степанова А.А., Синицкая И.А. Ультраструктура клеток вегетативного мицелия Aspergillus flavus Link, выращенного in vitro. Проблемы медицинской микологии. 2006; 8 (1): 40-45. [Stepanova A.A., Sinickaya I.A. Ul'trastruktura kletok vegetativnogo miceliya Aspergillus flavus Link, vyrashchennogo in vitro. Problemy medicinskoj mikologii. 2006; 8 (1): 40-45 (In Russ)].
17. Степанова А.А., Синицкая И.А. Электронно-микроскопическое изучение клеток вегетативного мицелия Aspergillus terreus Thom. Проблемы медицинской микологии. 2007; 9 (3): 26-33. [Stepanova A.A., Sinickaya I.A. EHlektronno-mikroskopicheskoe izuchenie kletok vegetativnogo miceliya Aspergillus terreus Thom. Problemy medicinskoj mikologii. 2007; 9 (3): 26-33 (In Russ)].
18. Степанова А.А., Синицкая И.А. Ультраструктурные аспекты старения клеток некоторых видов рода Aspergillus. Проблемы медицинской микологии. 2009; 11 (4): 24-29. [Stepanova A.A., Sinickaya I.A. Ul'trastrukturnye aspekty stareniya kletok nekotoryh vidov roda Aspergillus. Problemy medicinskoj mikologii. 2009; 11 (4): 24-29 (In Russ)].
19. Stepanova A.A., Vasilyeva N.V., Yamaguchi M., et al. Ultrastructural aspects of the interactions between the murine lungs macrophages and the Aspergillus fumigatus hyphal cells. Problems in medical mycology. 2016; 18 (1): 20-25.
Поступила в редакцию журнала: 01.03.2018
Рецензент: В.Г. Корнишева
