CC BY
60
Ультраструктура правого предсердия сердца человека в норме
И.М. Байбеков, П.Е. Каракозов, Б.К. Ибадов, Л.С. Ванн*, В.С Чеканов*1 Республиканский Специализированный Центр хирургии им. акад. В. Вахидова Ташкент, Узбекистан
и Институт Сердца Висконсина (США)*
ВВЕДЕНИЕ
Детализированное изучение тонкой структуры правого предсердия (ПП), трехмерной организации его элементов и их взаимодействия настоятельно диктуется нуждами клинической и экспериментальной кардиологии и кардиохирургии (15,16,20,25,26). Знание детальной ультраструктуры ПП необходимо как для понимания происходящих в нем патологических процессов, так и для выявления нарушений локальной микрогемодинамики. Ряд кардиохирургических вмешательств, гемодинамически или анатомически корригирующие многие пороки сердца, особенно врожденные, требуют вмешательства именно на ПП. При этом условия функционирования ПП значительно меняются. Данные о микроанатомии и микротопографии ПП позволяют изучить результаты структурной перестройки его тканей при корригирующих вмешательствах, адекватно прогнозировать их реакцию на изменение внутрипредсердной гемодинамики или микроанатомии в результате хирургической или медикаментозной интервенции. Это немаловажно и при оценке результатов новых реконструктивных операций. Различные вмешательства на проводящих путях сердца также требуют детализированных данных о пространственной ультраструктуре стенок ПП, особенно их внутреннем микрорельефе (4, 11, 17). Бесспорно, что только сканирующая электронная микроскопия (СЭМ) дает возможность изучать микрорельеф поверхности различных органов, тканей и отдельных клеток, получать наиболее реалистичное представление о пространственном строении функционирующих структур.
Исследования пространственной ультраструктуры сердца человека и животных с помощью СЭМ проводятся, начиная с 70-х годов прошлого века (5,7,8,10). Несмотря на проводимые в последние четыре десятилетия достаточно многочисленные исследования
1Адрес для переписки:
Prof. Valery S. Chekanov,
7693 Mission Woods Court, Franklin, Wisconsin 53132, USA
FIMEX, Foundation for International Medical Exchange, Vice President
e-mail: valerichekanov@yahoo.com
Phone 414-427-0056
Статья получена 24 февраля 2009 г.
Принята в печать 23 марта 2009 г.
микрорельефа поверхности различных компонентов сердечно-сосудистой системы, остается множество пробелов. Данные разных авторов, порой, противоречивы и разрозненны, а значительная часть исследуемого материала представлена экспериментальными животными (2,6,9,19). Отсутствуют детальные данные
о пространственной ориентации компонентов микрорельефа различных отделов ПП у человека в норме. Несмотря на многочисленные исследования сосудистой системы сердца, данные о васкуляризации различных отделов ПП у человека также весьма малочисленны (12,13,18,21,22,23). Целью представленного исследования явилось изучение трехмерной микроанатомии и микрососудистого русла различных отделов ПП сердца человека в норме сочетанием методик СЭМ и световой микроскопии.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для исследования послужили участки различных отделов ПП сердца человека. Использовались ткани 18 человек обоего пола (10 мужчин, 8 женщин) в возрасте от 25 до 45 лет, погибших от острых травм, у которых при аутопсии не было обнаружено патологии со стороны сердечно-сосудистой системы. Забор материала производился в Республиканском Бюро судебно-медицинской экспертизы с согласия родственников погибших и не позднее чем через 24 часа после наступления биологической смерти. У 12 человек были произведены реанимационные мероприятия в условиях машины скорой помощи или клиники (длительность реанимации не превышала 45 минут). Использованный материал подвергался комплексному морфологическому изучению с использованием световой микроскопии и СЭМ. Для светооптического исследования материал фиксировали в 10% растворе формальдегида на 0,1 М фосфатного буфера с pH 7,4 в течение 1 - 3 суток. После промывания в растворе фосфатно-солевого буфера с pH 7,4 и дегидратации в растворах этанола возрастающей концентрации, кусочки тканей заключали в парафин. Срезы толщиной 4 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Полученные гистологические препараты изучались и фотографировались в световых
микроскопах «Биолам», «МБИ-15» («ЛОМО», Санкт-Петербург, Россия) и «AXЮSKOP-40» («Карл Цейс», Германия). Для исследования в СЭМ в сердце и сосуды после извлечения из грудной полости вводился 2,5% холодный раствор глутарового альдегида на 0,1 М фосфатного буферного раствора с рН 7,4. После иссечения кусочков из различных отделов ПП, последние дополнительно фиксировались в том же фиксаторе при температуре +4° С в течении 1 суток. Далее, после промывания в растворе фосфатно-солевого буфера, кусочки исследуемых тканей дополнительно фиксировали в 1% растворе четырехокиси осмия, дегидратировали в растворах ацетона возрастающей концентрации и высушивали способом перехода через критическую точку углекислоты в аппарате «НСР-2» («НйасЫ», Япония). Высушенные образцы монтировали на алюминиевые подложки электропроводящим клеем. На исследуемую поверхность наносили тонкий слой химически чистого золота методом ионного напыления в аппарате «1В-3» («НйасЫ», Япония). Одновременно часть кусочков тканей замораживали в жидком азоте и делали сколы-разломы, поверхность которых обрабатывали описанным выше способом. Полученные препараты исследовались и фотографировались в сканирующем электронном микроскопе <^-405А» («Н^асЫ», Япония) при ускоряющем напряжении 15 Кв. Часть препаратов, после исследования в СЭМ, заливалась в эпон-аралдитовую смесь. С полученных блоков на ультрамикротоме («иИгасиЪ>, Reichert-Jong, Австрия) готовили полутонкие срезы толщиной 0,5 - 1,0 мкм. Полутонкие срезы последовательно окрашивали 1% растворами метиленового синего и фуксина, изучали и фотографировали в световых микроскопах «Биолам», «МБИ-15» («ЛОМО», Россия) и «AXЮSKOP-40» («Карл Цейс», Германия). Информация, полученная в сканирующем электронном микроскопе, сравнивалась с изучением исследуемых объектов под световым микроскопом на гистологических и полутонких срезах. Для изучения внутриорганных сосудов сердца и его микро-циркуляторного русла сосудистую систему через коронарные артерии заполняли предпо-лимеризованным метакрилатом. После полимеризации инъекционной массы, иссекали различные отделы ПП и растворяли ткани 30% раствором гидроокиси натрия. Коррозионные слепки сосудистого русла тщательно промывали дистиллированной водой, высушивали в термостате при температуре 37°С. Далее, на поверхность полученных образцов также напыляли тонкий слой химически чистого золота методом ионного напыления и изучали в сканирующем электронном микроскопе <^-405А» («Н^асЫ», Япония).
РЕЗУЛЬТАТЫ Эпикард правого предсердия
Г истологические особенности эпикарда человека в норме варьируют в различных отделах сердца. Это, в первую очередь, относится к поверхностному слою, образованному мезотелиальными клетками. Мезотелиоциты лежат непосредственно на слое рыхлой волокнистой соединительной ткани. На электронно-микроскопическом уровне прослеживается тонкий гомогенный базальный слой мезотелиоцитов. В слое рыхлой волокнистой соединительной ткани располагаются кровеносные и лимфатические микрососуды, нервные волокна. Глубже залегают более крупные сосуды и скопления жировых клеток. Глубокие слои рыхлой соединительной ткани непосредственно переходят в эндомизий миокарда. Наружная поверхность стенки ПП выстлана сплошным слоем мезотелиальных клеток. СЭМ показала, что мезотелиоциты имеют округло-овальную форму. На верхушках возвышений микрорельефа они крупные, тесно прилежат друг к другу и границы между ними не различимы. На склонах же возвышений и в углублениях между ними клетки более мелкие, довольно полиморфные. При больших увеличениях на апикальных поверхностях большинства мезотелиоцитов ПП определяются короткие, редкие, округлоовальной формы выросты типа микроворсинок (рис. 1).
Нередко на апикальных частях мезотелиоцитов располагаются округлые формирования, напоминающие процесс экзоцитоза клеток. При этом здесь располагаются и соединительнотканные клетки, отличающиеся своей электронной плотностью. В то же время, на участках поверхности эпикарда стенки ПП, располагающихся ближе к желудочку, определяются в довольно большом числе мезо-телиоциты, имеющие обычные, удлинённые микроворсинки. Проведенные исследования позволяют считать, что наряду с мезотели-оцитами с округлыми, редкими, короткими микроворсинками и мезотелиоцитами с длинными частыми, равномерно располагающимися на поверхности микроворсинками, встречаются и промежуточные клетки с относительно небольшим числом коротких и отдельных длинных микроворсинок. Микрорельеф наружной поверхности стенки ПП образован различного размера складками, бороздами и отдельными возвышениями и не имеет достаточно четкой ориентированности. Однако все же удается дифференцировать довольно крупные складки I порядка, имеющие сложную пространственную геометрию. На их поверхности определяются более мелкие складки II порядка, не имеющие четкой пространственной ориентации. При больших увеличениях
Рис. 1. Поверхность эпикарда ПП. СЭМ. х 200.
Рис. 3. Поверхность эпикарда ушка ПП. СЭМ. х 60.
На вставке - эпикард ПП. Полутонкий срез.
Окраска метиленовым синим и фуксином. 50 х 10.
на их поверхности определяются еще более мелкие, хаотично расположенные складки III порядка.(рис 2).
В области ушка ПП расположение складок эпикарда существенно отличается от таковых в области его свободной стенки. Микрорельеф сформирован крупными, продольными складками I порядка и, идущими перпендикулярно им, более мелкими поперечными складками
II порядка. На этих складках и разделяющих их бороздах различимы еще более мелкие складки III порядка без четкой ориентации (рис 3).Изучение сколов и светооптических препаратов, особенно ориентированных полу-тонких срезов, показало следующее. Складки
I порядка образованы группами поверхностных пучков кардиомиоцитов, складки II порядка - соединительнотканным слоем эпикарда, а складки III порядка - изгибами базальной мембраны, ядрами и микроворсинками мезо-телиоцитов (рис. 3).
Эндокард правого предсердия
Светооптически основную массу всех стенок ПП составляют миокардиальные мышцы, с вну-
Рис. 2. Поверхность эпикарда ПП. СЭМ. х 60.
Рис. 4. Свободная стенка ПП. СЭМ. х 200.
тренней поверхности покрытые эндокардом. В эндокарде различается эндотелий со слабо развитым базальным слоем (базальной мембраной). Субэндотелиальный слой, относительно тонкий, представлен преимущественно соединительнотканными волокнами, которые контактируют с кардиомиоцитами. В соединительнотканном слое эндокарда практически не определяется кровеносных сосудов.
СЭМ показывает, что относительно тонкий соединительнотканный слой эндокарда сформирован хаотически переплетающимися волокнами. На сколах стенки ПП также не прослеживается развитой базальной мембраны. Внутренняя поверхность свободной стенки ПП выстлана сплошным слоем эндотелиальных клеток с довольно ровной поверхностью и единичными, короткими выступами типа микроворсинок. Эндотелиальные клетки плотно прилегают друг к другу и не формируют на своей границе межклеточных щелей. Внутренняя поверхность свободной стенки ПП имеет достаточно сложный микрорельеф, состоящий из складок, борозд, с возвышениями и впадинами (рис 4). Он, в основном, состоит из трех
типов складок. Первый тип - это довольно крупные складки I порядка, расположенные параллельно друг другу и ориентированные продольно относительно фиброзного кольца правого атриовентрикулярного клапана. На их поверхности определяются более мелкие складки II порядка без четкой ориентации, имеющие извитой ход и разделенные неглубокими бороздами. При больших увеличениях на всей поверхности выявляются очень мелкие, неглубокие, хаотично расположенные складки
III порядка.
Светооптические исследования стенки ушка ПП позволили выявить, что его мышечные тяжи, анастомозируя и переплетаясь друг с другом, формируют сложную сеть. Их внутренняя поверхность выстлана эндотелием и, в целом, эндокард ушка не отличается от такового в других отделах ПП. В толще мышечного слоя располагается довольно большое число микро сосудов. Анастомозы и переплетения мышечных тяжей ушка определяют то, что микрорельеф его внутренней поверхности сложен за счет наличия крупных складок и борозд, которые имеют разную толщину и анастомози-руют между собой, образуя глубокие углубления и полости (рис. 5). Эти крупные складки I порядка ориентированы продольно ходу трабекул. На поверхности этих крупных складок выявляются более мелкие складки II порядка, расположенные, в основном, в косом или перпендикулярном направлении по отношении к складкам I порядка. При больших увеличениях также выявляются и значительно более мелкие, хаотично расположенные складки III порядка. Светооптические исследования меж-предсердной перегородки показывает, что в целом гистоархитектоника её существенно не отличается от изученных зон ПП. В этой области несколько толще субэндотелиальный соединительнотканный слой. Здесь, как и в других отделах предсердия, выявляются микрососуды. Даже на светооптических препаратах отмечается выраженная изрезанность внутренней поверхности межпредсердной перегородки. Микрорельеф внутренней поверхности меж-предсердной перегородки области ПП отличается от рельефа стенки и ушка наличием беспорядочно направленных довольно крупных складок I порядка, анастомозирующих друг с другом. В результате образуются выступающие участки поверхности перегородки в виде островков, отделённых друг от друга глубокими бороздами. Поверхность этих образований мелкобугристая, за счет наличия более мелких, неглубоких складок II порядка и выступающих между ними участков. При больших увеличениях на всей поверхности межпредсердной перегородки выявляются очень мелкие, хаотично расположенные складки III порядка. Клетки эндокарда, покрывающие перегородку, оваль-
ной формы с ровной поверхностью, на которой определяются короткие микроворсинки. Хотя эти микроворсинки не многочисленны, их число несколько больше, чем на поверхности эндотелиоцитов свободной стенки правого предсердия.
При изучении сколов и ориентированных светооптических срезов различных отделов ПП видно, что в образовании его микрорельефа участвуют как соединительнотканные волокна, так и группы миоцитов его стенки. Складки I порядка, также как и в эпикарде, образованы группами поверхностных пучков кардиомиоци-тов, складки II порядка - соединительнотканным слоем эндокарда, а складки III порядка - изгибами базальной мембраны, ядрами и микроворсинками эндотелиоцитов.
Микрососудистая система ПП.
Сосудистая система мышечного слоя свободной стенки ПП состоит, как показывает изучение коррозионных препаратов, из внутриорган-ных сосудов различного калибра, в основном ориентированных по длинной оси предсердия и отходящих от внутриорганных сосудов микрососудов (рис. 6). Число микрососудов ушка несколько выше, чем в других отделах ПП. В пространственной организации микро сосудов ушка ПП прослеживается их определённая ориентированность по его длинной оси. Отмечается множество бифуркаций и анастомозов. Многие капилляры заканчиваются слепо в толще ушка или анастомозируют друг с другом через синусоиды. Микрососудистое русло межпредсердной перегородки характеризуется довольно отчётливо выраженной продольной ориентированностью, наличием расширений отдельных участков, слепых концов и многочисленных анастомозов (рис.7). Количество капилляров больше чем в свободной стенке ПП. Густота капиллярной сети здесь близка к таковой в ушке, но анастомозов тут меньше. При этом, в отличие от других участков ПП, выявляются и микро сосуды в субэндо-телиальном слое. Синусоиды во всех отделах ПП со всех сторон анастомозируют с капиллярной сетью.
Коронарный синус.
Стенка коронарного синуса (КС) имеет гистологическое строение, характерное для крупной вены. Здесь различают тонкий слой интимы, медии и неширокий слой адвентиции. Микрорельеф внутренней поверхности устья КС сформирован некрупными складками и гребнями с довольно округлыми вершинами. В устье КС складки и гребни располагаются циркулярно. В области стенки КС складки и гребни меняют направление на продольное. Многочисленные волокна интимы, как видно на сколах стенки КС, а также на участках,
Рис. 5. Внутренняя поверхность ушка ПП. СЭМ х 75.
Рис. 7. Сосуды межпредсердной перегогодки. Коррозионный препарат. СЭМ х 500.
лишённых эндотелиального покрова и полу-тонких срезах, переплетаясь между собой, образуют крупнопетлистую сеть. Складки и гребни выстланы сплошным эндотелиальным слоем. Просветные поверхности эндо-телиоцитов имеют куполообразную форму (рис.14). Одной из особенностей эндотелиальной выстилки венозного синуса является полиморфизм эндотелиоцитов. Их выступающие в просвет апикальные части в некоторых клетках имеют почти шаровидную форму, в других - более уплощены. На куполообразных поверхностях определяются единичные выросты типа микроворсинок. На поверхности плоских эндотелиоцитов формируются немногочисленные складки. На поверхности эндотелиальной выстилки и в участках лишённых эндотелия располагаются немногочисленные хиломикроны. Они не достигают здесь больших размеров (рис. 8).
Рис. 6. Сосуды свободной стенки ПП.
Коррозионный препарат. СЭМ. х 1000.
Рис. 8. Поверхность стенки коронарного синуса. СЭМ. х 1000.
ОБСУЖДЕНИЕ
Проведенное изучение различных отделов ПП с помощью световой микроскопии и СЭМ, и исследование сосудистой сети на коррозионных препаратах, позволили выявить определённые структурные различия, определяющие их морфологические особенности. Причем, изучение полутонких срезов с препаратов, изученных в СЭМ, позволило верифицировать и более адекватно оценить данные самой СЭМ.
Прежде всего, это касается микрорельефа внутренней поверхности ПП, который от наиболее сложного в ушке переходит в более равномерный на поверхности его свободной стенки. Эндотелий межпредсердной перегородки несёт больше микроворсинок, чем на поверхность эндотелия свободной стенки ПП. В эпикарде выявлено три типа мезотелиоцитов - с округлыми, редкими, короткими
микроворсинками; с длинными, частыми, равномерно располагающимися на поверхности микроворсинками; и промежуточные клетки с относительно небольшим числом коротких и отдельных длинных микроворсинок.
Сеть микрососудов больше развита в ушке и межпредсердной перегородке. Микрососудистые сети в ушке и свободной стенке ориентированы по их длинной оси, а в межпредсердной перегородке такая ориентация отсутствует. Причем, микрососуды субэн-дотелиального слоя определяются только в межпредсердной перегородке.
Проведенные исследования показали, что направление складок внутренней поверхности КС меняется. В устье КС складки ориентированы циркулярно, в стволе синуса - продольно. Другой особенностью коронарного синуса является различное строение про-светной поверхности эндотелиальных клеток. Одни клетки имеют куполообразную поверхность, другие - уплощены. Отличием КС является относительно небольшое число хиломи-кронов, которые имеют небольшие размеры. Выявлено, что различные отделы наружной и внутренней поверхности ПП имеют своеобразный, индивидуальный микрорельеф, представленный разных размеров, формы и направления складками. Причем имеется единый принцип формирования микрорельефа. В его образовании участвуют эндотелиальные или мезотелиальные выстилки и подлежащие им структуры ПП. При этом, выявляются складки I, II и III порядков, различающиеся по направлению, размерам и ориентации, образованные, соответственно, пучками кардио-миоцитов, соединительнотканными слоями эпикарда или эндокарда, базальной мембраной и эндотелиальным или мезотелиальными выстилками. Пространственная ориентация и характер микрорельефа, как и подлежащих соединительнотканных элементов, детерминированы гемодинамикой в этих участках, которая, в свою очередь, обуславливает соответствующую морфологическую структуру. Пространственная геометрия микрорельефа наружной или внутренней поверхностей различных отделов ПП напрямую зависит от таковой образующих его мышечных структур. Это, в первую очередь, касается складок I порядка, сформированных группами кардио-миоцитов. Несколько групп кардиомиоцитов, формируют крупные, видимые глазом трабекулы или мышечные тяжи, которые в целом формируют мышечный слой ПП. Это хорошо прослеживается при сравнении макро- и микроструктур ПП (рис.8). Сложность пространственной геометрии микрорельефа ПП обусловлено в значительной степени именно сложностью трехмерной анатомии его мышечного каркаса. Изменение характерно-
го микрорельефа в процессе реконструкции приводит к нарушением гемодинамики в зоне интервенции по сравнению с исходной, что может привести к соответствующим осложнениям, например тромбозу или микро тромбозу. Использование различных стенок ПП в кардиохирургии должно производиться с учетом не только его макро-, но и микроанатомии и микрорельефа.
Сохранение микрососудистых сетей стенок ПП позволит им адекватно функционировать при реконструктивных операциях, например в качестве лоскутов на ножке.
Список литературы
1. Anderson R.H., Webb S., Moorman A.F., Brown N.A. Morphological correlates of atrial development. John Keith Lecture. Cardiol Young. 2004, 14 (3), 239-54.
2. Anversa P., Capasso J.M. Cellular basis of aging in the mammalian heart.
Scanning Microsc., 1991, 5 (4),1065-73.
3. Baybekov I.M., Karakozov P.E., Wann S.L., Chekanov V.S. Structure of the heart. Men’s normal heart and vessels scanning microscopy. Tashkent, Abu Ali Ibn Sino Publisher, 2004, 896 pp.
4. Cabrera J.A., Sanchez-Quintana D., Farre J. Et al. The inferior right atrial isthmus: further architectural insights for current and coming ablation technologies. J. Cardiovasc. Electrophysiol., 2005, 16 (4), 402-8.
5. Fujita T, Nanaka K., Tokunaga J. SEM atlas of cells and tissues. Tokyo - N.Y, Igaku-Shoin, 1981.
6. Higuchi K., Hashizume H., Aizawa Y, Ushiki T. Scanning electron microscopic studies of the vascular smooth muscle cells and pericytes in the rat heart. Arch. Histol. Cytol., 2000, 63(2),115-26.
7. Ho E., Shimada Y Formation of the epicardium studied with the scanning electron microscope. Dev. Biol., 1978, 66(2),579-85.
8. Kessel R.G., Kardon R.H. Tissues and organs. A Text-atlas of scanning electron microscopy, San Francisco, W.H.Freeman & Co, 1979.
9. Matzuda M., Barbato de Prates N.E.V. Study of the parietal coronary sinus valve under scanning electron microscopy. Rev. Chil. Anat., 1998, 16(2),199-203.
10. Motta P., Andrews P., Porter K. Microanatomy of cell and tissue surfaces: an atlas of scanning electron microscopy, Philadelphia, Lea & Febiger, 1977.
11. Narine K., Van Belleghem Y, Van Nooten G., Taeymans Y Scanning electron microscopic surface topography of ablation catheter perforations and calcific tear in an explanted biopros-thetic heart valve. Ultrastruct. Pathol., 2005, 29(1),9-17.
12. Ono T, Shimohara Y, Okada K., Irino S. Scanning electron microscopic studies on microvascular architecture of human coronary vessels by corrosion casts: normal and focal necrosis. Scan. Electron. Microsc., 1986, ( Pt 1), 263-70.
13. Ono T, Shimoharaand Y, Fujiwara K. Scanning electron microscopic studies on coronary microvascular architecture in diabetic human hearts by corrosion cast Medical Electron Microscopy, Japan, 1998, 31, 177-184.
14. Pauziene N., Dainius H., Pausa D.H., Stropus R. Morphology of human intracardiac nerves: an electron microscope study. J Anat., 2000, 197(Pt 3), 437-459.
15. Rucker-Martin C., Milliez P., Tan S. tt al. Chronic hemodynamic overload of the atria is an important factor for gap junction remodeling in human and rat hearts. Cardiovasc. Res., 2006, 72(1),69-79.
16. Sanchez-Quintana D., Climent V., Ho S.Y, Anderson R.H. Myoarchitecture and connective tissue in hearts with tricuspid atresia. Heart, 1999, 81,182-191
17. Sanchez-Quintana D., Anderson R.H., Cabrera J.A. et al. The terminal crest: morphological features relevant to electrophysiology. Heart, 2002 ,88,406-411.
18. Satoh H., Delbridge L.M., Blatter L.A., Bers D.M. Surface: volume relationship in cardiac myocytes studied with confo-cal microscopy and membrane capacitance measurements: species-dependence and developmental effects. Biophys. J., 1996, 70(3), 1494-1504.
19. Shimada T, Zhang L., Abe K. et al. Developmental morphology of blood and lymphatic capillary networks in mammalian hearts, with special reference to three-dimensional architecture. Ital. J. Anat. Embryol., 2001, 106 (Suppl.1), 203-11.
20. Severs N.J. Cardiac muscle cell interaction: from microanatomy to the molecular make-up of the gap junction. Histol. Histopathol., 1995, 10(2), 481-501.
21. Tandler B., Riva L., Loy F. et al. High resolution scanning electron microscopy of the intracellular surface of intercalated disks in human heart. Tissue Cell,. 2006, 38 (6),417-20.
22. Ushiki T. The three-dimentional ultrastructure of the collagen fibers, reticular fibers and elastic fibers: a review. Kaibogaku Zasshi., 1992, 67 (3), 186-199.
23. Von Ludinghausen M. The venous drainage of the human myocardium. Adv. Anat. Embryol. Cell. Biol., 2003, 168, I-VIII, 1-104.
25. Winter, E., Gittenberger-de Groot A. Cardiovascular development: towards biomedical applicability: Epicardium-derived cells in cardiogenesis and cardiac regeneration. Cellular and Molecular Life Sciences, 2007, 64 (6), 692-703.
26. Whelan N.L., Subramanian R. Jin J., Keith I.M. Intramyocardial arterial cushions of coronary vessels in animals and humans: morphology, occurrence and relations to heart disease. J. Vasc. Res., 1996, 33 (3), 209-224.
