CC BY
479
VETPHARMA №4 | СЕНТЯБРЬ 2013
ДЕР МАТ О Л О Г И Я
ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МАТЕРИАЛА ИЗ СЛУХОВОГО КАНАЛА.
ПРИМЕНЕНИЕ НА ПРАКТИКЕ
OTIC CYTOLOGY IN PRACTICE
УДК 616.5 - 078
А.Н.Герке
кандидат ветеринарных наук, ветеринарный врач-дерматолог ЗАО «Сеть ветеринарных клиник» член Европейского общества ветеринарных дерматологов (ESVD), Санкт-Петербург
A.N. Gerke
DVM, PhD, Member of the ESVD
Ключевые слова: цитология, наружный отит, кокки, палочки, дрожжеподобные грибы,
ушная сера, диагностика
Key words: су^^у, otitis externa, coccus, rod bacterium, yeast, ear wax, diagnostics
Аннотация
Цитологическое исследование необходимо при диагностике отита у собак и кошек. Это простой и недорогой диагностический тест, дающим быстрый результат, позволяющим обнаружить лейкоциты, а также полуколи-чественно оценить микрофлору. Наличие лейкоцитов подтверждает инфекцию и, как правило, является показанием к проведению дополнительно системной терапии. Повторные цитологические исследования при лечении отита необходимы для отслеживания микробиологичекой картины и оценки терапевтического эффекта.
Summary
Cytology is necessary in dog or cat with otitis externa. Cytology is a simple and inexpensive diagnostic test, that provides rapid results. This makes it possible to detect presence and number of bacteria and yeas and leukocytes. The presence of white blood cells on cytology indicates true infection, that warrants systemic therapy. А repeat cytology examinations during treatment is essential and changes in the microorganisms can necessitate changing medications. Cytology improves of case management, including diagnosis of secondary infections, monitoring progression of disease, and evaluating response to therapy.
Для успешного лечения наружного отита у собак и кошек необходимо воздействовать как на первичные причины (например, элиминационная диета при пищевой аллергии, контроль над атопией, устранение паразитов, хирургическое вмешательство при неоплазии и т.д.), так и поддерживающие факторы (бактерии, грибы, нарушение эпителиальной миграции, бессимптомный средний отит др.). Существует мнение, что сухие тёмные крошащиеся выделения связаны с отодектозом; мажущийся коричневый экссудат - с Malassezia (Kowalski J.J., 1988;
Harvey R.G. et al, 2001; Scott D.W. et al, 2000), жёлтый, белый или зеленоватый - с бактериальным отитом. Проведение лечения только на основании органолептической оценки, зачастую, малоэффективно и нередко способствует возникновению рецидива отита. Это может быть связано с наличием смешанной инфекции. Кроме того, клиническое проявление одной и той же патологии у разных пациентов может варьировать.
Микроскопия должна дополнять осмотр наружного уха во всех случаях отита, поскольку информация, полу-
ченная при исследовании отделяемого из уха, крайне необходима для эффективного лечения отита.
При подозрении на отодектоз, проводят микроскопию отдельно взятого материала. Для лёгкого обнаружения клещей Otodectes, ватную палочку прокатывают по предметному стеклу, предварительно нанеся на него каплю минерального масла или глицерина. Препарат накрывают покровным стеклом и исследуют под малым увеличением микроскопа. Эти препараты, конечно, не пригодны для цитологического исследования. В окрашенных препаратах клещей Otodectes, как правило, обнаружить не удаётся, однако их яйца могут быть случайной находкой. В случаях отодемодекоза постановка диагноза не представляет затруднений, поскольку даже в окрашенных препаратах, клещи Demo-deх хорошо сохраняют свою морфологию (Gotthelf L.N., 2000). Имеются сообщения о случайном обнаружении и других паразитов при отите (Sarcoptes scabiei, Notoed-res cati, Eutrombicula alfreddugesi, Neotrombicula аu-tumnalis) (Gotthelf L.N., 2000).
Материал, полученный из слухового канала, должен быть исследован не только на предмет наличия паразитов, но и проведен его цитологический анализ, включающий полуколичественную оценку цитограммы (лейкоцитов, а также эпителиальных клеток) и микроорганизмов (бактерий, грибов) (Angus, 2004). Материалом для цитологического исследования являются мазки отделяемого из наружного слухового канала. Предпочтительнее исследовать содержимое проксимальной части горизонтального канала, в этом случае контаминация образца микроорганизмами, не являющимися причиной отита, минимальна. Для этого в ухо осторожно вводят пластиковую воронку от отоскопа, а в её просвет, не касаясь стенки вертикального канала, вводят тонкую ватную палочку. При наличии выраженного отёка и пролиферативных изменений введение отоскопической воронки может быть затруднительно и болезненно для пациента, в этих случаях рекомендуется либо получать материал у животных под общей анестезией (если есть необходимость глубокого промывания и проведения отоскопии), либо отсрочить исследование на несколько дней, проводя системную противовоспалительную терапию.
Путём прокручивания ватной палочки, образец содержимого (ушной серы и /или экссудата) оказывается на кончике ватной палочки. При таком подходе, мы избегаем образования конгломератов в слуховом канале, не вызывая уплотнения содержимого. Ватную палочку прокатывают по чистому обезжиренному предметному стеклу.
Всегда подвергают исследованию материал из обоих ушей, даже в случаях одностороннего отита. Отдельно исследуется материал из левого и правого уха, для этого можно использовать разные концы предметного стекла. Автор обычно наносит материал в форме
ЦИТОЛОГИЯ -
ПОЛЕЗНЫЙ ИНСТРУМЕНТ
ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ОТИТА
Анна Герке
кандидат ветеринарных наук, ветеринарный врач-дерматолог член Европейского общества ветеринарных дерматологов (ESVD)
КОЛОНКА НАУЧНОГО РЕДАКТОРА
Цитология является, по мнению многих ведущих ветеринарных дерматологов, необходимым методом исследования при всех случаях наружного отита. Поэтому, в продолжение темы отитов, представляю статью о проведении цитологического исследования материала, получаемого из слухового канала - простом, доступном и информативном методе диагностики. Это исследование должно быть рутинным в повседневной практике ветеринарного врача-дерматолога.
Используя цитологию, становится возможным отслеживать ответ на терапию или, наоборот, вовремя заметить прогрессирование болезни - распространение отита от наружного к среднему уху, или же развитие гнойного отита из бактериального перероста или Malassezia-отита. Отсутствие терапевтического эффекта сопровождается увеличением числа лейкоцитов в цитологических препаратах, наличием фагоцитированных бактерий, что связано с неэффективной антимикробной терапией.
Для успешного лечения отита является очевидным проведение противовоспалительной и противо-микробной терапии, устранение первичных причин, а также воздействие на поддерживающие факторы. В случаях бактериального/дрожжевого перероста, установленного цитологически, применение местных средств является эффективным.
При гнойном отите необходимо сочетать системную терапию с промыванием слухового канала и то-пикальным применением средств.
При написании статьи использованы как материалы из фундаментальных изданий по ветеринарной цитологии, так и данные из собственной практики.
Микроорганизмы Норма Промежуточное значение Патология
Malassezia
собаки ^2 3 -4 £5
кошки ^2 3 - 11 £12
Бактерии
собаки ^5 4 2 - 6 £25
кошки ^4 5 - 14 £15
Таблица 1. Ориентировочное количество микроорганизмов в поле зрения микроскопа с использованием объектива х40 (Gotthelf Louis N. et al. Small animal ear diseases: second edition. USA. 2005)
букв «Л» (из левого уха) и «П» (из правого уха) на одном стекле.
Некоторые руководства рекомендуют фиксировать полученный материал путём нагревания предметных стёкол над пламенем. Это ускоряет процесс окраски в дальнейшем. Однако существует риск разрушения присутствующих клеток. Поэтому этот вопрос остаётся спорным, ряд исследователей выступает против применения нагревания цитологических препаратов, полученных из наружного уха (Toma et al, 2006; Griffin et al, 2007). Во всяком случае, использование бытового фена для быстрого высушивания и фиксации материала на стекле не нарушает репрезентативность образцов.
Препараты окрашивают, используя гематологические красители (Diff-Quik®, Квик-Дифф, красители Райта-Гимзы, Май-Грюнвальда и другие). Выбор метода окраски зависит от наличия реактивов и привычки исследователя. По мнению автора, предпочтительнее использовать погружение стекол в «быстрые» краски (например, «Квик-Дифф Синтакон») или проводить окраску по методу Паппенгейма (на «рельсах»), следующим образом:
1. Краситель гематологический эозин-метиленовый синий (по Май-Грюнвальду) -2 мин.
2. Добавить водный раствор красителя азур-эозина (10 капель красителя Романовского-Гимзе на 10 мл буфера) - 2 мл на одно стекло - 3 мин.
3. Промыть водой.
4. Высушить на воздухе. Для ускорения процесса высушивания можно использовать фен.
5. После высушивания препарата, проводят микроскопию.
Чтобы получить представление о количестве клеток, проводят оценку препарата, начиная с наименьшего увеличениям (объектив х10). Затем проводят исследование на большом увеличении (объектив х40), при этом можно идентифицировать лейкоциты, эритроциты, клетки эпителия, а также неопластические клетки, дрожжи и бактерии. Для более детального рассмотре-
ния используется объектив х100 (под иммерсией), что позволяет рассмотреть цитоплазму нейтрофилов и макрофагов для обнаружения фагоцитированных бактерий как неоспоримого признака инфекции. По этому критерию отличают патогенные микроорганизмы от комменсалов.
Для количественной оценки лейкоцитов и микроорганизмов проводят подсчёт их количества, как минимум, в 10 полях зрения. Количественная оценка поможет в оценке эффективности терапии при повторных исследованиях.
Проводя отбор и обработку цитологического материала подобным образом каждый раз, становится возможным не только выявить микрофлору в слуховом канале, но и оценить динамику патологического процесса при последующих визитах.
Цитология из слухового канала в норме и при патологии
Необходимо отметить, что диагноз «наружный отит» основывается на данных анамнеза, клинических признаках и результатах отоскопии, при этом цитологическое исследование является важным инструментом, позволяющим установить природу экссудата, что оказывает помощь в выявлении вероятных причин отита и факторов, поддерживающих воспалительный процесс. Цитология редко проводится при отсутствии клинических признаков патологии ушного канала (зуд, эритема, выделения и т.д.), однако эти данные необходимы нам для понимания патологии в дальнейшем.
В норме, в наружном ухе присутствует сера в небольшом количестве как продукт модифицированных апокриновых (церуминозных) и сальных желёз. Тонкий слой серы формирует защитный барьер, предотвращающий воздействие микроорганизмов и влаги. В связи с преобладанием липидов в материале, он плохо окрашивается. Ушная сера содержит также слущенные клетки
рогового слоя эпидермиса и резидентные микроорганизмы.
Спущенные клетки эпидермиса всегда присутствуют в некотором количестве, при окрашивании они приобретают слабобазофильную окраску. Кератиноциты могут содержать гранулы меланина, которые выглядят как круглые или овальные структуры желтого или коричневого цвета. Эти гранулы важно отличать от окрашенных пурпурно микроорганизмов (кокков и палочек), хотя их цвет может варьировать.
В наружном ухе собак и кошек в норме присутствуют микроорганизмы, наиболее часто выделяют коагулазо-негативных и коагулазо-позитивных Staphylococcus spp., Streptococcus spp. В крайне редких случаях выделяют палочки и Corynebacterium у клинически здоровых животных (Kowalski J.J. 1988, Scott D.W. et al 2000, Harvey R.G. et al 2001). В любом случае, обнаружение лейкоцитов и палочек в цитологических препаратах отделяемого из наружного уха является признаком отита и служит показанием для проведения терапии. Кроме того обращают внимание на количество микроорганизмов - в большинстве случаев наблюдается идентичная цитологическая картина в мазках из обоих ушей, значительное отклонение в количестве микроорганизмов в левом и правом ухе должно настораживать. Поэтому настоятельно рекомендуется брать образцы из обоих ушей раздельно.
Диаметр большинства кокков составляет 0,3 мкм, длина палочек не превышает 1,5 мкм, поэтому оценку бактериальной флоры предпочтительнее проводить с использованием объективах х40 или х100. В одном отчёте (Clinkenbeard K.D. et al, 1995), посвященном исследованию нормальной флоры наружного уха, описано, что грамм-положительные кокки были выявлены у 42% собак при цитологии и лишь у 25% собак при культуральном исследовании. Это доказывает, что проводить культуральные исследования имеет смысл только после обнаружения признаков инфекционного процесса по цитологии.
Иными словами, отсутствие роста бактерий in vitro не исключает наличие инфекции, а выявление микроорганизма в бактериологии не доказывает наличие воспаления. Однако только бактериология может помощь в случае множественной резистентности к антибиотикам (см. таблицу 2). Чаще всего обнаруживаются крупные кокки, расположенные парами, тетрадами и группами, которые чаще всего являются Staphylococcus spp; мелкие кокки, иногда собирающиеся в короткие цепочки - Streptococcus и Enterococcus spp. Изредка можно обнаружить как в норме, так и при отите Corynebacterium - крупные округлые палочки. Наиболее часто встречающимися патогенными палочками являются Pseudomonas spp. и Proteus spp. причём у собак, живущих в жарком климате, эти палочки часто обнаруживают в здоровых ушах. (Gotthelf Louis N. et al., 2005)
Рис. 1. Материал из здорового уха собаки (об. Х100). Присутствуют кератинизирован-ные эпителиальные клетки и один гриб Mallasesia
Рис. 2. Отодемодекоз, сопровождающийся церуминозным отитом (об. х40). Присутствуют сальные массы и кератинизированные клетки в большом количестве
Рис. 3. Церуминозный отит (присутствуют кератинизированные эпителиальные клетки в большом количестве, при этом встречаются единичные Ма!1азез1а)
Рис. 4. МаЯазега врр. в цитологии из наружного уха при атопии
Рис. 5. Staphylococcus spp.
Рис. 6. Mallasezia spp. (пере-рост) на фоне церуминозного отита
Рис. 7. Г нойный отит кокковой этиологии. Присутствуют дегенеративные нейтрофилы и бактерии
Рис. 8. Бактериальный отит (палочки)
Признак Цитология Бактериология
минимальное время, необходимое для исследования быстро 48 - 72 часа
чувствительность (дрожжи) высокая низкая
чувствительность(бактерии) высокая от умеренной до высокой
чувствительность (лейкоциты) высокая нет
возможность количественной оценки полуколичественная точные данные
значимость при смешанной инфекции да низкая
мониторирование ответа на лечение да нет
определение антибиотикорезистентности нет да
Таблица 2. Сравнение цитологического и бактериологического методов (Gotthelf Louis N. et al. Small animal ear diseases: second edition. USA. 2005)
В дополнение к морфологическим исследованиям необходимо провести полуколичественный подсчёт. В таблице 1 приведены приблизительные данные оценки количества микроорганизмов при использовании объектива х40. По мнению других авторов ^те1 et а1, 2002) - при использовании объектива х100 в норме присутствует 2 бактерии, а более 10 в поле зрения является патологией у собак и, соответственно, 1,6 и 6 для кошек.
В своей практике, автор предпочитает проводить исследование с использованием иммерсионного объектива х100.
Важно различать термины «перерост микрофлоры» и «инфекция». Под термином «перерост» подразумевается увеличение числа резидентных микроорганизмов в дебрисе и на поверхности эпителия наружного уха. Клинически, перерост может имитировать отит, поскольку микроорганизмы выделяют экзотоксины и вызывают раздражение. Однако, при переросте не требуется типизация микроорганизмов, подбор антибиотиков для системной терапии.
Более того, системная терапия при переросте менее эффективна, чем использование местных средств (обычно, сочетание механического удаления дебриса путём промывания с местной противовоспалительной и антимикробной терапией). К бактериальной инфекции относят случаи гнойного воспаления в ответ на внедрение возбудителя, приводящего к нарушению эпителия, его эрозированию и изъязвлению, а такжже колонизации тимпанической полости. Эти случаи требуют долгой высокодозной системной антибиотикотерапии. Бактериальный перерост не распространяется на среднее ухо, в цитологии отсутствуют лейкоциты.
Таким образом, только цитологическое исследование позволяет отличить нормальную микрофлору, перерост и бактериальную инфекцию, несмотря на то, что все эти состояния могут быть вызваны одними и теми же бактериями.
Сравнительная характеристика цитологии и бактериологии приведена в таблице 2. Очевидно, что в резистентных случаях наружного отита бактериология оказывается полезной, поскольку дает представление о чувствительности к антибиотикам. Однако определение чувствительности/резистентности микроорганизмов основывается на минимальной ингибирующей концентрации антибиотика в крови, способной воздействовать на бактерии. Основу терапии наружного отита составляет топикальная (местная) терапия, при этом высокая концентрация препаратов в очаге воспаления позволяет преодолеть порог резистентности. Кроме того, обнаружение 4 - 5 видов бактерий в экссудате, чувствительных к разным антибиотикам, при рутинном бактериологическом исследовании вводит в заблуждение врача в начале лечения. Поэтому, по мнению автора, при первичном обследовании проведение бактериологии нецелесообразно.
Другим микроорганизмом, в норме присутствующим в наружном ухе, является базофильно окрашенный дрожжеподобный гриб Malassezia, который в цитологических препаратах легко узнаваем по характерной форме «матрёшки» или «земляного ореха». Размер Malassezia составляет 2 - 4 мкм х 6 - 7 мкм (в качестве приблизительной линейки можно использовать эритроциты - диаметр эритроцита кошки составляет приблизительно 5 мкм, собаки - 7 мкм). Несмотря на то, что этот микроорганизм относится к резидентной флоре собак и кошек, при чрезмерном размножении он становится важным патогеном-оппортунистом, приводящим к отиту с ярко выраженной клинической картиной.
Поскольку микроорганизмы в норме присутствуют в слуховом канале в некотором количестве, необходимо видеть разницу между нормой и патологией. Обычно по-луколичественную оценку микроорганизмов-оппорту-нистов проводят на основании микроскопии препарата на большом увеличении (под иммерсией). В литературе имеются разные данные о нормальной микрофлоре на-
ружного уха у собак и кошек. Понятие «поле зрения» в разных моделях микроскопа может сильно отличаться, а количество обнаруженных микроорганизмов зависит от толщины мазка, данные о количественной оценке микрофлоры наружного уха отличаются у разных авторов. Поэтому оценку эффективности лечения возможно проводить только при условии, что материал был получен одинаковым образом. В исследовании Tater K.C. с соавторами (2003), проводившими цитологическое исследование у 50 здоровых собак и 52 здоровых кошек, при микроскопии (объектив х40) в поле зрения было выявлено от 0 до 2,6 дрожжей у собак и от 0 до 3,3 у кошек, при этом не выявлено достоверной разницы в количестве микроорганизмов у животных со стоячими и висячими ушами.
Другими грибами, выделенными при наружном отите, являются Candida, Cryptococcus, Rhodotorula, Trichosporon, Saccaromyces. Candida albicans относится к резидентной флоре кожи и желудочно-кишечного тракта у собак и кошек. При определённых обстоятельствах этот дрожжеподобный гриб становится патогенном-оппортунистом. В отличие от Malas-sezia, Candida spp. является редкой причиной патологий ушей. В одном исследовании (Ginel et al, 2002) у трёх из 24 собак (12,5%) и двух из 22 кошек (9,1%) с клиническими признаками наружного отита была обнаружена Candida spp.
Цитологически Candida spp. выглядит как тонкостенный, округло-овальный микроорганизм, размером 2-6 мкм, имеющий тонкую, полупрозрачную капсулу, отталкивающую краску, благодаря которой создаётся ореол вокруг этого дрожжеподобного гриба. Candida spp. может образовывать короткие, тубулярные или септированные псевдогифы, в отличие от Malassezia, которая не имеет капсулы и никогда не образует гифы и псевдогифы. Обнаружение Candi spp. в цитологии из ушей всегда говорит о наличии инфекции и требует проведения противогрибковой терапии (Gotthelf L. N. et al. 2005).
В отличие от бактерий и дрожжей, присутствующих в небольшом количестве в здоровых ушах, лейкоциты появляются в пространстве наружного уха исключительно при воспалении путём экзоцитоза через повреждённый эпителий.
Скопления и пласты вакуолизированных эпителиальных клеток, интенсивно окрашенных, с признаками атипии являются очень редкой находкой, могут свидетельствовать о новообразовании. Неопластические клетки достаточно легко разрушаются, а поскольку нормальный эпителий, подвергаясь воздействию агрессивной среды, которой является экссудат, подвергаются дегенеративным изменениям, поэтому обнаружение атипичных клеток в мазке из наружного уха должно интерпретироваться крайне осторожно. Эти находки могут лишь служить поводом для проведения отоскопии и в
случае обнаружения новообразования, дальнейшей ас-пирационной или гистобиопсии.
Поражения наружного уха в крайне редких случаях могут быть признаком аутоиммунных болезней (например, листовидной пузырчатки), тогда в цитограмме преобладающими типами клеток будут недегенеративные нейтрофилы, макрофаги и акантолитические клетки.
Рассмотрим подробнее некоторые состояния, в диагностике которых важную роль играет цитологическое исследование.
Бактериальный/дрожжевой перерост
Обнаружение в среднем 3-5 кокков или Malassezia в одном поле зрения при большом увеличении (объектив х100) свидетельствует о бактериальном/дрожжевом переросте. Это промежуточное состояние между нормой и отитом, характеризуется увеличением числа микроорганизмов в ответ на изменение свойств ушной серы. Это может быть связано с повышением влажности в слуховом канале, аллергической реакцией, попаданием воды в ухо и т.п. При своевременном устранении этих причин, ситуация обратима. Бактериальному/дрожжевому переросту способствуют морфологические изменения слухового канала, приводящие к плохой вентиляции и нарушению эпителиальной миграции.
Церуминозный отит
Если в мазках присутствует кератинизированные эпителиальные клетки в большом количестве или непро-крашенные сальные массы и при этом встречаются единичные микроорганизмы, нужно сделать заключение о церуминозном неинфекционном отите.
Причиной церуминозного отита являются повышенная секреция серных и сальных желез, а также наличие гиперплазии, кист и новообразований в слуховом канале. В скопившейся в большом количестве сере размножаются бактерии и дрожжи, присутствующие там в норме. В большинстве случаев наружного отита воспалительная реакция и эпидермальная гиперплазия сужают пространство наружного уха, что ещё усиливает воспаление. В случаях, когда это состояние не удаётся купировать при помощи противовоспалительной терапии, методом выбора является хирургическое лечение. Причиной себорейного отита могут быть первичные нарушения кератинизации у собак некоторых пород (бассет-хаунд, ирландский сеттер, шар-пей, немецкая овчарка и другие). В норме в ушном канале у собак эпителий проходит полный цикл приблизительно за 22 дня, включая процессы пролиферации, дифференциации и десквамации. При первичной идиопатической себорее, например, у аме-
риканских коккер-спаниелей, весь цикл составляет 8 дней, что приводит к скоплению церумена в слуховом канале и развитию церуминозного отита. Вторичные нарушения кератинизации могут возникать также при гипотиреозе, недостатке витамина А, цинка и жирных кислот.
Лечение должно быть направлено на устранение, по возможности, первичных причин. Необходимо также контролировать секрецию желёз и вторичную инфекцию.
Эффективной мерой может оказаться регулярная очистка слухового канала при помощи церуминолити-ческих средств (растворяющих серу), содержащих про-пиленгликоль, глицерин, минеральное масло и др., но ввиду ототоксичности, их применение противопоказано при перфорированной барабанной перепонке (Wilhelm S., 2013).
По данным научных исследований, эффективность системного применения кортикостероидов, цитостати-ков, ретинойдов при церуминозном отите сомнительна (Mueller Ralf S., 2000; Scott D.W. et al 2000; Gotthelf L.N., 2000; Harvey R.G. et al 2001). Поскольку местная терапия стероидными препаратами оказывает противовоспалительное, антимитотическое, катаболическое действия, снижает эпителиальную пролиферацию и секрецию желёз, по мнению автора, их топикальное применение вполне обоснованно, по крайней мере, в период обострения воспаления.
Гнойный отит
При гнойном отите материал представлен дебрисом, разрушенными лейкоцитами, иногда содержащими внутриклеточные микроорганизмы, кокки и/или палочки.
Основным инструментом, позволяющим дифференцировать перерост от инфекции, является наличие лейкоцитов, свидельствующее о наличии воспаления (отита). Важным моментом является обнаружение фагоцитированных бактерий, что особенно часто сопутствует микстинфекции. В большинстве случаев, незавершённый фагоцитоз наблюдается при сопутствующем среднем отите вследствие просачивании экссудата из среднего уха в слуховой канал. По данным Jakob T. с соавторами (1995), отит среднего уха вывляется у 16% собак с острым наружным отитом, и 82% собак с хроническими отитами.
Наиболее частыми грам-положительными бактериями, являющимися причиной наружного отита у собак, являются Staphylococcus pseudintermedius, значительно реже выявляются Streptococcus spp., Micrococcus spp., Staphylococcus aureus, Staphylococcus epi-dermidis, Corynebacterium spp., Bacillus spp.
Г рам-отрицательные микроорганизмы при наружном отите представлены Pseudomonas spp., Proteus spp.,
Klebsiella spp., E. coli, Pasteurella spp. Эти бактерии, особенно Pseudomonas, часто являются причиной хронического, тяжело протекающего наружного отита. Синегнойная палочка является мультитрезистентной ввиду низкой проницаемости микробной стенки для антибиотиков.
При лечении бактериального отита обязательно еженедельное промывание с использованием тёплых растворов, например, изотонического раствора натрия хлорида, 0,05% хлоргексидина, 0,5% повидон-йода, 2-2,5% уксусной кислоты. Данная процедура, проводимая в условиях клиники, безопасна, удаляет экссудат, содержащий патогенные микроорганизмы и токсины, обеспечивает контакт препаратов с пораженными тканями.
Промывание слухового канала целесообразно проводить под седацией животного. По мере стихания воспалительного процесса и отёка необходимо провести отоскопию, оценить целостность барабанной перепонки. Staphylococcus и Malassezia часто присутствуют одновременно, поскольку рост Malassezia может поддерживаться продуктами жизнедеятельности Staphylococcus (Mueller Ralf S., 2000).
Заключение
Для выявления микроорганизмов, оценки воспалительной реакции в наружном ухе используется цитологическое исследование, позволяющее дифференцировать перерост бактерий/дрожжей от истинной инфекции, а также диагностировать смешанную инфекцию, когда разные микроорганизмы, присутствующие одновременно в очаге воспаления, могут подавлять рост культуры in vitro, приводя к ложным результатам бактериологии.
В случаях, когда дополнительно к микроорганизмам обнаруживаются нейтрофилы, несмотря на количество микроорганизмов, можно сделать заключение об инфекции и наличии воспалительного процесса.
Однозначным признаком инфекционного отита является фагоцитоз бактерий. Выявление любого количества палочек, как правило, требует проведения медикаментозной терапии. ■
Литература
1. Angus J.C.: Otic cytology in health and disease, Vet. Clin. North. Am Small Anim. Pract. 34:411-424, 2004.
2. Baker R, Lumsden JH: The head and neck. In Baker R, Lumsden JH, eds: Color atlas of cytology of the dog and cat, St Louis, 2003, Mosby.
3. Bond R, Anthony RM, Dodd M, et al: Isolation of Malassezia sympodialis from feline skin, J Med Vet Mycol 34:145147, 1996.
4. Bond R, Howell SA, Haywood PJ, et al: Isolation of Ma-lassezia sympodialis and Malassezia globosa from healthy pet cats, Vet Rec 141:200-201, 1997.
5. Bond R, Saijonmaa-Koulumies LE, Lloyd DH: Population sizes and frequency of Malassezia pachydermatis at skin and mucosal sites on healthy dogs, J Small Anim Pract 36(4):147-150, 1995.
6. Bond R: Pathogenesis of Malassezia dermatitis. In Tho-day KL, Foil CS, Bond R, eds: Advances in veterinary dermatology, vol 4, Oxford, UK, 2002, Blackwell Science.
7. Canine and feline cytology: a color atlas and interpretation.// Second edition. 2010. Guide. 450.
8. Chaudhary M, Mirakhur KK, Roy KS: Histopathologic and histochemical studies on chronic otitis in dogs, Indian J Anim Sci 72(2):128-129, 2002.
9. Chickering WR: Cytologic evaluation of otic exudates, Vet Clin North Am Sm Anim Pract 18:773-782, 1988.
10. Clinkenbeard KD, Cowell RL, Morton RJ, et al: Diagno-sticcytology: bacterial infections, Compend Cont Ed 17(1):71-85, 1995.
11. Cole LK, Kwochka KW, Kowalski JJ, et al: Microbial flora and antimicrobial susceptibility patterns of isolated pathogens from the horizontal ear canal and middle ear in dogs with otitis media, J Am Vet Med Assoc 212:534-538, 1998.
12. Colombini S, Merchant SR, Hosgood G: Microbial flora and antimicrobial susceptibility patterns of dogs with otitis media, Vet Dermatol 2000 11:235-239, 2000.
13. Crespo MJ, Abarca ML, Cabanes FJ: Occurrence of Malassezia spp. in the external ear canals of dogs and cats with and without otitis externa, Med Mycol 40:115-121, 2002.
14. Crespo MJ, Abarca ML, Cabanes FJ: Otitis externa associated with Malassezia sympodialis in two cats, J Clin Microbiol 38:1263-1266, 2000.
15. De Lorenzi D, Bonfanti U, Masserdotti C, et al: Fine-ne-edle biopsy of external ear canal masses in the cat: cytologic results and histologic correlations in 27 cases, Vet. Clin. Pathol. 34:100-105, 2005.
16. Ginel PJ, Lucena R, Rodriquez JC, et al: A semiquanti-tative cytological evaluation of normal and pathological samples from the external ear canal of dogs and cats, Vet Dermatol 13:151-156, 2002.
17. Gotthelf Louis N. et al. Small animal ear diseases: second edition. USA. 2005.
18. Gotthelf LN: Failure of epithelial migration: cerumino-liths. In Gotthelf LN, ed: Small animal ear diseases: an illustrated guide, Philadelphia, 2000, WB Saunders.
19. Greene CE: Otitis externa. In Infectious diseases of the dog and cat, ed 2, Philadelphia, 1998, WB Saunders.
20. Griffin J.S., Scott D.W., Erb H.N.: Malassezia otitis externa in the dog: the effect of heat-fixing otic exudate for cytological analysis, J. Vet. Med. A 54:424-427, 2007.
21. Guillot J, Bond R: Malassezia pachydermatis: a review, Med Mycol 37:295-306, 1999.
22. Harvey RG, Harari J, Delauche AJ: Diagnostic procedu-
res. In Harvey RG, Harari J, Delauche AJ, eds: Ear diseases of the dog and cat, Ames, Iowa, 2001, Iowa State University Press.
23. Harvey RG, Harari J, Delauche AJ: Etiopathogenesis and classification of otitis externa. In Harvey RG, Harari J, Delauche AJ, eds: Ear diseases of the dog and cat, Ames, Iowa, 2001, Iowa State University Press.
24. Harvey RG, Harari J, Delauche AJ: The normal ear. In Harvey RG, Harari J, Delauche AJ, eds: Ear diseases of the dog and cat, Ames, Iowa, 2001, Iowa State University Press.
25. Jakob T, Wright CG, Robinson K, et al: Ototoxicity of topical ticarcillin and clavulanic acid in the chinchilla, Arch Otolaryngol Head Neck Surg 121(1):39-43, 1995.
26. Kowalski J.J.: The microbial environment of the ear canal in health and disease, Vet. Clin. North. Am Sm. Anim. Pract. 18:743-754, 1988.
27. Kumar A, Roman-Auerhahn MR: Anatomy of the canine and feline ear. In Gotthelf LN, ed: Small animal ear diseases: an illustrated guide, Philadelphia, 2000, WB Saunders.
28. Loshe J, Rinder H, Gothe R, et al: Validity of species status of the parasitic mite Otodectes cynotis, Med Vet Ento-mol 16:133-138, 2002.
29. Masuda A, Sukegawa T, Mizumoto N, et al: Study of lipid in the ear canal in canine otitis externa with Malassezia pachydermatis, J Vet Med Sci 62(11):1177-1182, 2000.
30. Moisan P.G., Watson G.L.: Ceruminous gland tumors in dogs and cats: a review of 124 cases, J. Am Anim. Hosp. Assoc. 32:449-453, 1996.
31. Morris DO: Malassezia dermatitis and otitis, Vet Clin North Am Sm Anim Pract 29(6):1303-1310, 1999.
32. Mueller Ralf S. Dermatology for the Small Animal Prac-titioner.USA. 2000.
33. Scott D.W., Miller W.H., Griffin C.E.: Diseases of eyelids, claws, anal sacs, and ears. In Scott D.W., Miller W.H., Griffin C.E., eds: Muller and Kirk's Small animal dermatology, ed.6, Philadelphia, 2000. WB Saunders.
34. Scott DW, Miller WH, Griffin CE: Fungal skin diseases. In Scott DW, Miller WH, Griffin CE, eds: Muller and Kirk's Small animal dermatology, ed 6, Philadelphia, 2000, WB Saunders.
35. Stout-Graham M, Kainer RA, Whalen LR, et al: Morphologic measurements of the external ear canal of dogs, Am J Vet Res 51:990-994, 1990.
36. Tater KC, Scott DW, Miller WH, et al: The cytology of the external ear canal in the normal dog and cat, J Vet Med A 50:370-374, 2003.
37. Toma S., Cornegliani L., Persico P., et al: Comparison of 4 fixation and staining methods for the cytologic evaluation of ear canals with clinical evidence of ceruminous otitis ex-terna,Vet. Clin. Pathol. 35:194-198, 2006.
38. Вильгельм С.: Отит у собак - всё ещё проблема для практикующего ветеринара?// Материалы II Международного ветеринарного дерматологического симпозиума. СПБ, 2013. С. 48 - 53.
