CC BY
41
УДК 594.3-13
Л. М. Елчиева, Н. Н. Фёдорова
ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АМПУЛЛЯРИИ POMACEA BRIDGESII
В РАННЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ
Введение
В последнее время объемы уловов рыб и водных беспозвоночных имеют стойкую тенденцию к снижению в результате сокращения запасов из-за перелова и ухудшения экологической обстановки. В то же время спрос на беспозвоночных растет, т. к. они являются важным источником белка и обладают ценными пищевыми качествами [1, 2]. В последнее время в аквакультуру Астраханской области внесены новые объекты, в том числе ампуллярии Pomacea bridgesii. Однако, несмотря на то, что эмбриональные ткани моллюсков, особенно в последние годы, стали объектом самых разнообразных исследований, исследования особенностей развития и формирования ампуллярий до сих пор не проводились [3-6].
Материалы и методы исследований
Целью исследований стало поэтапное изучение формирования органов и тканей личинки ампуллярии.
Работа выполнялась в Астраханском государственном техническом университете на кафедре гидробиологии и общей экологии в течение 2007-2010 гг.
Объектом исследования служили: коконы, в которых находились икринки на разных стадиях развития; икра ампуллярий, отобранная в разные промежутки времени; неполовозрелые особи моллюсков Pomacea bridgesii (Reeve, 1856).
Взрослые особи содержались в 70-литровых аквариумах - 1 литр на одну половозрелую особь. Поскольку ампуллярии откладывают икру на поверхность воды, аквариумы не доливались на 10-15 см. В аквариумах поддерживалась постоянная температура воды - 26-28 °С, рН не превышал 7. Воду в аквариумах постоянно аэрировали. Через каждые трое суток производили полную смену воды.
При выполнении работы использовались различные методы исследования: гистологический [7], гидрохимический, статистический.
Результаты исследований и их обсуждение
Личиночный период развития ампуллярии включал в себя четыре этапа: гисто- и органогенез личиночных органов, трохофора, велигер, великонхо. Этап гисто- и органогенеза личиночных органов начинался через 48 часов от начала дробления восьми бластомеров, его продолжительность была равна 24 часам. Этап трохофоры начинался на третьи сутки развития, его продолжительность была равна 72 часам. Этап велигера начинался на седьмые сутки развития личинки, его продолжительность составляла 144 часа. Каждый из данных этапов включал в себя три стадии развития: раннюю, среднюю и позднюю. Размеры зародыша были непостоянными, меняясь от стадии к стадии. На этапе гисто- и органогенеза зародыш увеличился в 1,6 раза, к концу этапа трохофоры - в 2,5 раза; на этапе велигера - в 1,5 раза, на этапе формирования великонхо - в 1,3 раза, к концу этапа формирования постоянных органов - в 1,4 раза. За эмбриональный период зародыш увеличился в 2,3 раза, в личиночный период - в 4,7 раза, в период юного организма - в 1,5 раза; таким образом, от оплодотворения до вылупления произошло увеличение зародыша в 10,7 раза.
Трохофора. Стадия ранняя трохофора. Размеры зародыша: длина - 422,0 ± 4,0 мкм, ширина - 512,0 ± 1,3 мкм, диаметр икринки - 1 100,0 ± 2,1 мкм. Он был грушевидной формы. Центральную часть ранней трохофоры занимал «белковый мешок», диаметр которого составлял
290,0 ± 4,0 мкм, его клетки выполняли функцию печени. Сверху «белковый мешок» был покрыт однослойным призматическим эпителием. Стомодиум начал дифференцироваться на ротоглоточную часть и пищевод. Клетки, выстилающие ротоглоточную часть, были мелкими, имели разную форму, клетки, образующие будущий пищевод, - высокими, плотно прилегающими друг к другу. Началась закладка сердца, имеющего вид трубки, выстланной плоскими клетками, диаметр трубки был равен 8,0 ± 0,8 мкм, длина - 15,0 ± 0,6 мкм. Два зачатка протонефридиев
располагались над «белковым мешком» с правой стороны - от сагиттальной плоскости тела, представляя собой скопления восьми крупных клеток. Клетки были объединены общей оболочкой, диаметр которых был равен 13,0 ± 0,2 мкм. Размеры протонефридиев: длина - 12,0 ± 0,8 мкм, ширина - 8,0 ± 0,5 мкм. Апикальный орган утратил реснички, он заметно увеличился в размере, имел вид бугорка на апикальной стороне зародыша, его высота была равна 149,0 ± 6,0 мкм, ширина - 5,0 ± 0,8 мкм. Сверху апикальный орган был покрыт однослойным многорядным эпителием, который подстилался молодой соединительной тканью - мезенхимой, в ней находились крупные округлые клетки-нейробласты. Нейробласты сгруппировались в два конгломерата, образуя, таким образом, пару церебральных зачатков ганглий. Раковинная железа углубилась, приближаясь к зачатку кишечника, количество клеток, образующих раковинную железу, составляло 56 ± 2 шт. Клетки прототроха утратили реснички.
Стадия средняя трохофора. Зародыш заметно увеличился в кранио-куадальном направлении. Размеры зародыша: длина - 368,0 ± 2,3 мкм, ширина - 651,0 ± 0,2 мкм, диаметр икринки -
900.0 ± 1,8 мкм. Ротовое отверстие открывалось наружу узкой щелью, за ротовым отверстием следовала ротовая полость и радулярный мешок, на дне которого произошла закладка радулы в виде 12 уплощенных округлых клеток. Ротовая полость и радулярный мешок были покрыты однослойным призматическим эпителием. Произошла дифференцировка расширенной части передней кишки в зачаток глотки. Длина пищевода составляла 8,5 ± 0,3 мкм, ширина - 3,5 ± 0,6 мкм. Начальный отдел средней кишки был выстлан однослойным многорядным эпителием. Часть средней кишки дифференцировалась в зачаток желудка. Средняя кишка была короткой -
17.0 ± 0,03 мкм. Зачаток желудка был выстлан однослойным призматическим эпителием, длина желудка была равна 36,0 ± 0,7 мкм, ширина - 20,0 ± 0,9 мкм. Шло образование печеночных канальцев путем разрастания эпителия кишки в полость «белкового мешка». Первый зачаток канальца был сформирован на вегетативном полюсе висцерального мешка. Размеры канальцев: длина - 13,2 ± 1 мкм, ширина - 8,0 ± 0,3 мкм, высота - 2,2 ± 0,2 мкм. Нога развивалась на вентральной стороне зародыша и имела коническую форму, ее длина составляла 270,0 ± 3,0 мкм, ширина - 47,0 ± 4,0 мкм. Мезенхимные клетки дифференцировались в мышечные трубочки. В эпителии, покрывающем основание ноги и центральную часть стомодиума, началась пролиферация нейробластов в зачатки педальных и церебральных ганглиев. Размеры церебральных ганглиев: длина - 8,2 ± 0,3 мкм, ширина - 9,0 ± 0,2 мкм; размеры педальных ганглиев: длина -
15.0 ± 0,7 мкм, ширина - 10,0 ± 0,2 мкм. Зачатки остальных ганглиев еще отсутствовали. Впервые произошла закладка глаз, их диаметр был равен 7,0 ± 0,09 мкм. Раковинная железа имела вид широкой пластинки клеток, выгнутой в сторону наружной поверхности, состояла из двух видов клеток: первый вид был представлен высокими призматическими клетками, плотно прилегающими друг к другу, имеющими зернистую цитоплазму и крупное светлое ядро; второй вид - округлые, более мелкие клетки, с маленьким ядром в центре клетки: длина - 10,0 ± 0,6 мкм, диаметр клеток - 2,4 ± 0,11 мкм. Прототрох к этой стадии полностью редуцировался. Количество канальцев протонефридиев увеличилось до 12. Канальцы выстилал однослойный кубический эпителий, лежащий на базальной мембране.
Стадия поздняя трохофора. Длина зародыша составила 502,0 ± 3,2 мкм, диаметр -
762.0 ± 4 мкм, диаметр желтка - 762,0 ± 2,1 мкм. Зародыш был округлым. Рот переходил в довольно широкую ротовую полость, которая вела в глотку, имеющую полость. Длина глотки была равна 6,6 ± 0,3 мкм, ширина - 4,1 ± 0,4 мкм. Глотка переходила в пищевод, его длина была равна - 9,0 ± 0,4 мкм, ширина - 4,1 ± 0,6 мкм. Из расширения пищеварительной трубки продолжал формироваться желудок, который располагался на вентральной стороне зародыша. Длина желудка составила 40,0 ± 1,0 мкм, ширина - 21,0 ± 0,6 мкм. Передний отдел пищеварительной системы выстилал однослойный цилиндрический эпителий. Среднюю кишку выстилал однослойный многорядный ресничный эпителий, клетки располагались на базальной мембране, некоторые клетки эпителия имели реснички. Длина средней кишки была равна 20,0 ± 0,1 мкм, ширина - 14,0 ± 0,09 мкм. Начиная с данной стадии развития расположение органов висцерального комплекса менялось под воздействием торзионного процесса. Так, желудок стал поворачиваться влево от сагиттальной плоскости, зачаток кишечника начал делать петлю. Кишечник стал открываться наружу. Нога заметно увеличилась в размере, её длина составила 303,0 ± 6,6 мкм, ширина - 50,0 ± 1,3 мкм. Сверху ногу покрывал однослойный многорядный ресничный эпите-
лий, который подстилался рыхлой волокнистой неоформленной соединительной тканью. Межклеточное вещество соединительной ткани состояло из коллагеновых волокон и большого количества основного аморфного вещества. В центральной части ноги имелся конгломерат клеток педальной железы. Впервые на данной стадии развития появились зачатки жаберных лепестков, которые располагались на левой стороне зародыша, у головного отдела, в количестве 8 ± 2 шт. Жаберные лепестки были покрыты однослойным многорядным ресничным эпителием, лежащим на базальной мембране. Внутри жаберных лепестков находился тонкий сосуд. Размеры жаберных лепестков были следующими: длина - 33,0 ± 0,4 мкм, ширина - 7,51 ± 0,5 мкм, длина жаберного аппарата - 493,0 ± 1,0 мкм. В цефалических пластинках продолжалось преобразование церебральных зачатков в ганглии, шло формирование нервных стволов. Длина церебральных ганглиев была равна 14,0 ± 4,0 мкм, ширина - 10,0 ± 5,0 мкм. Формирование нервных ганглиев начиналось с выделения из состава эктодермы специальных клеток - нейробластов. Диаметр глаз увеличился до 21,0 ± 0,05 мкм.
Велигер. Этап формирования велигера включает в себя три стадии развития: раннюю, среднюю, и позднюю. Продолжительность этапа составляла 144 часа, что равно шести суткам, за этот этап зародыш увеличился в 1,4 раза.
Стадия ранний велигер. Форма зародыша была овоидной. Диаметр зародыша -
540.0 ± 2,0 мкм, длина - 897,0 ± 5,2 мкм. Диаметр икринки был равен 605,0 ± 1,8 мкм. Передняя часть ротового отверстия была представлена ротовыми дольками или валиками, размер которых составлял 6,0 ± 0,6 мкм. Шло образование радулы. Желудок на данном этапе находился на правой стороне, постепенно смещаясь кпереди. Длина желудка была равна 43,4 ± 2,6 мкм, ширина -
24.0 ± 2,3 мкм. Передний отдел пищеварительной системы выстилал однослойный многорядный эпителий, лежащий на базальной мембране. В средней кишке площадь ресничного эпителия заметно увеличилась, увеличились также размеры средней кишки, ее длина составляла уже
22.0 ± 0,12 мкм, ширина - 15,0 ± 0,04 мкм, высота клеток эпителия была равна 1,1 ± 0,2 мкм. Клетки «белкового мешка» утратили функцию и начали редуцироваться. Нога увеличилась в размере, ее длина была равна 470,0 ± 5,2 мкм, ширина - 54,0 ± 4,0 мкм. В ней происходила дифференцировка мышечных клеток, расположенных продольно. Сердце имело грушевидную форму, желудочек и предсердие отличались по форме и размерам, оно переместилось под левый каналец протонефридия. Полость сердца выстилали плоские клетки эндотелия, лежащего на базальной мембране. Размеры сердца: длина предсердия - 12,3 ± 2,1 мкм, желудочка - 11,0 ± 0,6 мкм; ширина предсердия - 14,0 ± 0,3 мкм, желудочка - 15,9 ± 0,09 мкм. Количество ламелл в жабрах увеличилось до 12. Основой жаберных лепестков являлся кровеносный сосуд. Их покрывал однослойный многорядный ресничный эпителий. Длина жаберных лепестков увеличилась, была равна - 36,0 ± 0,4, ширина - 10,0 ± 1,2 мкм. Длина жаберного аппарата стала равной
503.0 ± 3,0 мкм. Началось образование почечного целомического мешка, сформировалось незначительное число извитых канальцев, выстланных однослойным кубическим эпителием, с крупными округлыми ядрами. Размеры целомического мешка были следующими: длина -130 ± 2,0 мкм, ширина - 110 ± 2,0 мкм. Педальные ганглии были соединены комиссурой, имелись зачатки париетальных, висцеральных и плевральных ганглиев. Длина церебральных ганглиев составляла 28,0 ± 2,0 мкм, ширина - 17,6 ± 1,3 мкм. Размеры педальных ганглиев: длина -
22.0 ± 2,0 мкм, ширина - 15,0 ± 3,3 мкм. Диаметр глаз увеличился, он составлял 34,0 ± 0,04 мкм, хрусталики не были сформированы. Эпителий глаз был представлен однослойным низким кубическим эпителием.
Стадия средний велигер. Зародыш сохранял овоидную форму, его диаметр составлял
723.0 ± 2,5 мкм, длина - 1 010,0 ± 3,8 мкм. Диаметр икринки составлял 510,0 ± 5 мкм. Шло разделение желудка на два отдела: жевательный и пилорический. Мезенхимные клетки ноги продолжали дифференцироваться и превращаться в мышечные трубочки. Длина желудка была равна 47,0 ± 3,0 мкм, ширина - 26,0 ± 1,1 мкм. Сердце располагалось в сагиттальной плоскости, имело грушевидную форму. Длина предсердия составила 14,5 ± 0,5 мкм, ширина - 14,7 ± 0,5 мкм, длина желудочка - 15,0 ± 0,4, ширина - 16,0 ± 0,1 мкм. Полость сердца была выстлана плоскими клетками эндотелия, лежащими на базальной мембране. Стенки сердца образованы кардиомиоци-тами. Количество ламелл в жабрах постепенно увеличилось и составляло 22 ± 1 шт., увеличились также размеры лепестков, их длина составляла 40,0 ± 0,3 мкм, ширина - 14,0 ± 0,3 мкм. Ламеллы
были выстланы однослойным многорядным ресничным эпителием. Почечный мешок увеличился в размере за счет увеличения количества канальцев, которое составило до 16 ± 2 шт. Шло образование реноперикардиального канала, его размеры: длина - 170,0 ± 2,0 мкм, ширина -
126,0 ± 0,5 мкм. Канальцы почки были выстланы однослойным кубическим эпителием с крупными округлыми ядрами. Часть клеток протонефридиев утратила свои функции и редуцировалась. Комиссуры педальных ганглиев соединились между собой. Кроме того, педальные ганглии связались с церебральными ганглиями двумя коннективами, образуя подглоточную нервную петлю. Шло формирование плевральных, париетальных, висцеральных ганглиев. Начал формироваться глазной хрусталик, был установлен активный рост глазного щупальца.
Стадия поздний велигер. Личинка приобрела форму взрослого моллюска. Ее диаметр стал равным 750,0 ± 1,5 мкм, длина - 1 070,0 ± 2,9, диаметр икринки - 410,0 ± 4,4 мкм. Клетки печени состояли из трех типов: ферментные, собственно клетки канальцев печени и известковые клетки. Клетки «белкового мешка» полностью редуцировались. Эпителий средней кишки был весь выстлан однослойным высокопризматическим ресничным эпителием. Большую часть мускулатуры ноги на данной стадии развития составляли мышечные трубочки, расположенные продольно. Сердце располагалось в перикардиальной полости; оно продолжало смещаться на правую сторону. Полость сердца была выстлана плоскими эндотелиальными клетками, лежащими на базальной мембране. Почку и перикард связывал формирующийся реноперикардиаль-ный канал. Мерцательные клетки протонефридиев утратили реснички. Количество почечных канальцев заметно увеличилось. Канальцы выстилал однослойный кубический эпителий, лежащий на базальной мембране. Заложились буккальные ганглии. Шло образование нервных стволов, путем разрастания отростков нервных клеток. Произошла пигментация глаза в красный цвет.
Великонхо. Этап формирования великонхо включает в себя одну стадию - великонхо, продолжительность которой была равна 72 часам, стадия наступила на 12 сутки развития. На данном этапе зародыш увеличился в 1,2 раза. Диаметр зародыша составил 923,0 ± 1,3 мкм, длина - 1 120,0 ± 1,6 мкм, диаметр икринки - 300,0 ± 4,1 мкм. Зародыш полностью оброс раковиной. Левая доля печени заняла верхние витки раковины, приобретя, таким образом, форму спирали. Печеночные канальцы были выстланы однослойным многорядным эпителием. Канал состоял из последовательно расположенных трех типов клеток: ферментных, печеночных и известковых. Желудок повернулся вокруг продольной оси вправо и сместился на вентральную сторону к левой доле печени. Желудок имел три ярко выраженные оболочки. Внутренняя оболочка - слизистая, покрытая ресничным эпителием с тонкой собственной соединительнотканной пластинкой. Средняя оболочка - мышечная, довольно толстая, состоящая из двух слоев гладких мышц (косого и циркулярного). Наружная оболочка - соединительнотканная, без четких границ, переходящая в рыхлую волокнистую неоформленную соединительную ткань. Архитектоника мышц ноги полностью сформировалась, мышечная масса состояла из клеток, расположенных в поперечном, продольном, косом направлениях. Мышечные клетки моллюсков имели косую исчерченность. Ганглии соединились между собой при помощи коннектив и ко-миссур. Коннективы и комиссуры представляли собой отростки нейронов. Ганглии были образованы телами нервных клеток-перикарионов. Сердце располагалось между жаберным аппаратом и почкой на правой стороне личинки. Полость сердца была выстлана плоскими эндотелиальными клетками, лежащими на базальной мембране, размеры сердца составили: длина предсердия - 18,0 ± 4,0 мкм, ширина - 16,0 ± 1,0 мкм; длина желудочка - 21,0 ± 0,9 мкм, ширина -17,6 ± 0,05 мкм. Протонефридий полностью редуцировался.
Период юного организма включал в себя четыре стадии: переход к ножному движению, 16 сутки развития, 17 сутки развития, стадия вылупления.
Стадия вылупления. Длина зародыша составляла 1 160,0 ± 2,0; ширина - 1 860,0 ± 1,5 мкм. Ротовое отверстие находилось между ротовыми дольками, длина которых увеличивалась по мере развития личинки, к моменту вылупления их длина равнялась 25,0 ± 2,0 мкм. В передней части головы располагалась глотка, которая представляла собой расширенную часть передней кишки. Длина глотки была невелика - 18,0 ± 0,2 мкм, что составляло всего 1,1 % от общей длины пищеварительной системы. Глотка заканчивалась небольшим расширением - радулярным влагалищем, размеры которого составили: ширина - 18,0 ± 0,2 мкм, длина - 29,0 ± 0,5 мкм, в нем располагался одонтофор (язык), имеющий форму валика, на поверхности которого лежала
радула. Радула имела следующие размеры: ширина - 15,0 ± 0,5 мкм, высота - 25,0 ± 0,4 мкм. Радула имела «зубы» в виде кутикулярных пластинок эпителиальных выростов, состоящих из плотного слоя кутикулы. У личинки на стадии вылупления радулярный аппарат составлял 1,5 % от длины пищеварительной системы.
На границе между ротовой полостью и глоткой располагалась непарная челюсть. Длина челюсти была равна 22,0 ± 0,6 мкм, ширина - 12,0 ± 1,2 мкм. Далее глотка переходила в короткий пищевод, длина составляла 24,0 ± 0,8 мкм, диаметр - 15,0 ± 0,6 мкм. От общей длины пищеварительной системы пищевод составлял 2,8 %. Пищевод продолжался в зоб. У личинки зоб не был полностью сформирован, представляя собой объемистое расширение пищевода. Передний отдел заканчивался довольно крупным образованием передней кишки - желудком, который имел длину 70,0 ± 2,5 мкм, ширину - 50,0 ± 2,0 мкм; желудок составлял 8,3 % от общего объема пищеварительной системы. Желудок состоял из двух отделов: жевательного и пилорического, которые были разделены продольной перегородкой. Длина жевательного отдела составляла
45.0 ± 2,0 мкм, ширина - 32,0 ± 1,5 мкм. Эпителий жевательного отдела желудка был высоким, призматическим, с округлыми крупными ядрами. Мышечная оболочка жевательного отдела состояла из двух слоев гладких мышц: внутренний слой был представлен циркулярным мышечным слоем, его толщина была равна 8,0 ± 1,2 мкм, наружный состоял из продольной мускулатуры - более мощной, толщина которой составляла 12,0 ± 2,0 мкм; внутренняя оболочка имела слой кутикулы, защищающей эпителий слизистой оболочки. Клетки слизистой оболочки были цилиндрическими, с округлыми ядрами, высота клеток равнялась 1,25 ± 0,25 мкм. Толщина кутикулярного слоя составляла 5,0 ± 0,5 мкм.
Пилорический отдел желудка был короче жевательного, его длина составляла 25,0 ± 0,9 мкм, ширина - 17,0 ± 1,2 мкм. Эпителий пилорического отдела имел длинные реснички - 3,0 ± 0,5 мкм. Пилорический отдел, так же как и жевательный, был покрыт изнутри кутикулярным слоем, который был тоньше, чем в жевательном отделе - 3,0 ± 1,6 мкм.
Передний отдел пищеварительной системы выстилал однослойный многорядный эпителий, лежащий на базальной мембране.
Из желудка выходила средняя кишка, которая располагалась в виде петель вокруг печеночных лопастей. Средняя кишка являлась самым коротким участком кишечника, у личинок на стадии вылупления её длина составляла 7,8 % от длины жулудочно-кишечного тракта и была равной 66,0 ± 0,04, ширина - 44,0 ± 0,01 мкм. Средняя кишка отличалась менее мощной мускулатурой, чем передний отдел пищеварительной системы; была выстлана однослойным многорядным ресничным эпителием, клетки которого располагались на базальной мембране.
Печень закладывалась как непарный орган и в связи с закручиванием раковины у взрослых особей печень находилась с правой стороны. Левая доля печени была больше правой. Длина левой доли была равна 170,0 ± 2,0 мкм, ширина - 150,0 ± 0,5 мкм; длина правой доли
145.0 ± 0,4 мкм, ширина - 120,0 ± 2,0 мкм. Печень личинки составляла около 20,2 % от общего объема пищеварительной системы. Эпителий активно врастал в тело «белкового мешка», образуя печеночные разветвления в виде тонких трубчатых выростов или канальцев.
Основные процессы поглощения питательных веществ происходили в так называемых «печеночных разветвлениях кишечника», которые представляют собой тонкие трубчатые разветвленные выросты кишечника, выстланные однослойным эпителием. Их эпителий состоял из закономерно расположенных трех типов клеток. Наиболее крупные клетки со светлой цитоплазмой занимали вершину и боковые поверхности складок, мелкие базофильные клетки были расположены в их основании. Имелись еще клетки с очень крупными полиплоидными ядрами и резко базофильной цитоплазмой.
Средняя кишка, делая петли, переходила в заднюю. Задняя кишка, так же как и передняя, была покрыта изнутри слизистой оболочкой, снабженной кутикулой, выполнявшей защитную функцию, однако кутикула задней кишки была значительно тоньше кутикулы переднего отдела. Толщина этого слоя составляла 0,5 ± 0,03 мкм. Длина кишки личинки на стадии вылупления была равна 484,0 ± 0,7 мкм, ширина - 91,0 ± 0,2 мкм. Задняя кишка - это самый длинный участок кишечника: у личинки она составляла 57,4 % от общего объема пищеварительной системы. Задняя кишка имела следующие оболочки: слизистую, представленную эпителием, лежащим на базальной мембране, под которой находилась собственная пластинка слизистой оболочки,
и мышечную, участвующую в процессе проталкивания нерастворенной пищи. Толщина мышечного слоя была равна 25,0 ± 0,3 мкм, толщина слизистого слоя - 17,0 ± 2,3 мкм. Клетки, выстилающие полость задней кишки, в процессе онтогенеза претерпели ряд изменений: во-первых, на ранних стадиях развития высота клеток составляла 8,9 ± 0,05 мкм; у личинки к моменту вылу-пления высота клеток эпителия увеличилось до 17,6 ± 0,06 мкм. Во-вторых, на ранних стадиях развития клетки эпителия не имели ресничек, к моменту вылупления все клетки эпителия задней кишки имели на апикальной стороне реснички.
Задняя кишка заканчивалась анальным отверстием, которое располагалось на переднем конце тела. Анальное отверстие выстилал призматический эпителий с большим количеством бокаловидных клеток.
Размеры ноги личинки были следующими: длина - 1 276,0 ± 0,6 мкм, ширина - 171,0 ± 0,6 мкм. В средней части ноги имелась известковая крышечка.
Сверху ногу покрывал однослойный многорядный ресничный эпителий, лежащий на базальной мембране. За базальной мембраной находилась рыхлая неоформленная соединительная ткань, в которой на разной глубине находились железистые клетки различных размеров.
В ноге мышечные клетки располагались следующим образом. Клетки, расположенные продольно на периферии, располагались параллельно поверхности ноги с обеих сторон. Более глубоко были расположены мышечные клетки, проходящие поперечно, в середине ноги широким пластом лежали фронтально проходящие мышечные клетки.
Длина мышечных клеток, расположенных продольно, колебалась в пределах от 2,5 ± 0,5 мкм, толщина - в пределах от 1,5 ± 0,5 до 3 ± 1 мкм. Длина поперечно расположенных клеток была равна 112,0 ± 3,0 мкм, ширина - 11,0 ± 2 мкм.
Сердце было выстлано плоскими клетками эндотелия, который лежал на базальной мембране. Внутри желудочка сердца имелись складки, длина желудочка составляла 36,0 ± 0,6 мкм, ширина - 22,0 ± 0,5 мкм. Под эндотелием находился довольно тонкий слой соединительной ткани, вокруг него была расположена мышечная пластинка из гладких мышечных клеток, которая образовывала продольные и циркулярные мышечные слои. Длина предсердия составляла
27.0 ± 0,5 мкм, ширина - 19,0 ± 0,3 мкм.
Сердце находилось в перикардиальной полости, выстланной целомическим эпителием.
Количество ламелл в жаберном аппарате составляло 56 ± 2 шт. Жабры имели вид вытянутых в длину двоякоперистых придатков (лепестков), заостряющихся к переднему концу, длиной
73.0 ± 2,5 мкм и шириной 44,0 ± 0,2 мкм. Между жаберными лепестками имелись пространства. Каждый лепесток (ламелла) состоял из осевого уплощенного стволика, несущего два ряда лепесточков. Основу столбика составляла рыхлая волокнистая ткань. Ее клетки (фибробласты) имели более темные и мелкие ядра. Внутри жабр имелись приносящие жаберные артерии и выносящие жаберные протоки. Лепесточки были выстланы однослойным многорядным ресничным эпителием. Все клетки эпителия были расположены на базальной мембране. Мелкие клетки, не доходящие до поверхности, являлись замещающими или камбиальными. В эпителии были обнаружены небольшие по размеру бокаловидные клетки.
Почка закладывалась как непарный орган, который находился только на правой стороне личинки в области задней кишки вблизи сердца и жаберного аппарата. Почка являлась довольно крупным образованием длиной 542,0 ± 5,0 мкм и шириной 330,0 ± 2,0 мкм. У личинок почка состояла из целомического мешка, на внутренней стороне которого подоциты образовывали сплетение мочевых канальцев, выстланных крупными кубическими клетками. С левой стороны почка имела реноперикардиальное отверстие, которое с помощью реноперикардиального канала соединялось с перикардом. Полость целомического мешка соединялась с почечными канальцами, количество канальцев было равно 52 ± 2 шт. Длина канальцев составляла 66,0 ± 1,0 мкм. Канальцы были выстланы крупными кубическими клетками (высота клеток - 1,5 ± 0,5 мкм) с округлыми ядрами.
На 16 сутки развития (переход к ножному движению) у личинки ампуллярии были обнаружены первичные половые клетки. Развитие первичных половых клеток происходило в рыхлой неоформленной соединительной ткани ноги личинки. Располагались они в ноге следующим образом: максимальное их количество - 73 % - развивалось в верхней, вентральной части ноги, в нижней, дорсальной части располагалось лишь 27 % первичных половых клеток.
Первичные половые клетки личинок ампуллярий - это крупные клетки, чаще округлой, реже овальной формы, их диаметр колебался от 22,0 ± 0,5 до 30,8 ± 1,5 мкм. В центре клетки располагалось ядро с четкими границами, окруженное цитоплазмой. Ядро было крупным, чаще оно располагалось в центре клетки, но встречались клетки, в которых ядро располагалось на периферии. Диаметр ядер достигал 1,5 ± 0,03 мкм. Ядерно-плазменное соотношение, по сравнению с соматическими клетками, у половых клеток смещено в сторону цитоплазмы. Кроме того, в ядрах, как правило, имелось по 1-2 крупных ядрышка. С дальнейшим развитием личинки количество первичных половых клеток увеличивалось, но их диаметр значительно уменьшался, к стадии вылупления диаметр клеток колебался в пределах от 22,0 ± 0,5 до 17,6 ± 0,09 мкм.
Таким образом, к моменту вылупления личинки из капсулы были развиты все основные жизненно важные системы органов.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Андреев Н. И., Винарский М. В. К фауне моллюсков семейства Lymnaeidae (Gastropoda, Pulmonata) водоемов юга Западной Сибири // Современные проблемы гидробиологии Сибири: тез. докл. Всерос. конф. - Томск, 2001. - С. 13-14.
2. Волкова О. В., Елецкий Ю. К. Основы гистологии с гистологической техникой. - М.: Медицина, 1982. - 256 с.
3. Воронежская Е. Е., Хабарова М. Ю. Функция апикального органа в развитии беспозвоночных // Докл. Акад. наук. - М.: Наука, 2003. - № 390. - С. 231-234.
4. Догел В. А. Зоология беспозвоночных. - М.: Высш. шк., 1981. - 606 с.
5. Заварзин А. А. Основы сравнительной гистологии: учеб. пособие. - Л.: Ленинград, 1985. - 400 с.
6. Мещеряков В. Н. Прудовик Lymmea stagnalis // Объекты биологии развития. - М.: Наука, 1975. -С. 53-94.
7. Моисеев П. А. Аквакультура и ее роль в развитии рыбного хозяйства: тез. докл. Междунар. симпоз. по марикультуре. - Краснодар: Сов. наука, 1995. - С. 3-4.
Статья поступила в редакцию 4.03.2010
CYTOLOGICAL PECULIARITIES OF THE AMPULARIIDAE POMACEA BRIDGESII ON EARLY ONTOGENY
L. M. Elchieva, N. N. Fedorova
The stages of larval development of apple shell such as formation of tro-chophore, veliger (early, middle and last stages), veliconkho and also the fourth stage of young organism period - the stage of emergence are investigated. The cytological peculiarities of each stage are marked. It is stated that the primary gametal cells of apple shell larva are formed in 16 days of development (at the stage of transition to pedal movement). To the moment of emergence from the larva shell all essential systems of organs are developed.
Key words: cell, development, nucleus, tissue, liver, organ, heart.
