CC BY
70
игинальные иссле
в а н и я
1ФГБУ «Научно-исследовательскй институт ревматологии им. В.А. Насоновой» РАМН,
2ГБОУ ВПО «Первый
Московский
государственный
медицинский
университет
им. И.М. Сеченова»,
Москва
1V.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow;
2I.M. Sechenov First State Medical University, Moscow
Контакты: Мария Эдуардовна Цанян [email protected]
Contact: Maria Eduardovna Tsanyan [email protected]
Поступила 05.09.13
Цитокиновый профиль у больных системной красной волчанкой
М.Э. Цанян1, 2, С.К. Соловьев1, А.А. Новиков1, Е.Н. Александрова1, С.И. Глухова1, Е.Л. Насонов1
Цель — исследовать уровни цитокинов у больных системной красной волчанкой (СКВ), определить корреляцию с активностью СКВ и поражением органов, а также динамику на фоне терапии ритуксимабом (РТМ). Материал и методы. В исследование включено 26 больных СКВ (5 мужчин и 21 женщина) медиана (Ме) возраста больных 27 [23; 40] лет, длительность СКВ от 9 до 300 мес (Ме 72 [36; 108] мес), и 30 здоровых доноров, сопоставимых по полу и возрасту с обследованными больными. Активность заболевания оценивали по индексу SLEDAI2K. В сыворотке определяли уровни 27 цитокинов с использованием технологий Х-МАР на приборе BioPlex200 (Bio-Rad, США). Больные были разделены на две группы по 13 человек: с волчаночным нефритом (ВН) и без поражения почек. Все больные, включенные в исследование, получили терапию РТМ. Результаты. Выявлено статистически достоверное повышение концентраций интерлейкина 13 (ИЛ13) и G-CSF у больных СКВ по сравнению со здоровой контрольной группой (р=0,03 и р=0,003 соответственно). В группе больных с ВН выявлено статистически значимое повышение концентраций ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13 и G-CSF по сравнению с больными без ВН (р=0,039; р=0,03; р=0,037; р=0,03 и р=0,028 соответственно). Проведенный ROC-анализ установил чувствительность и специфичность этих показателей в группе больных ВН. Площадь под ROC-кривой для всех показателей была одинаковой. Наиболее высокая специфичность в группе больных с ВН отмечена у ИЛ13 (85%). Чувствительность у данных цитокинов была одинаковой (70%), кроме ИЛ13 (62%). Заключение. У больных с ВН статистически значимо повышены концентрации ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13 и G-CSF. Полученные результаты свидетельствуют об ассоциации данных цитокинов с ВН.
Ключевые слова: системная красная волчанка, цитокины, волчаночный нефрит, ритуксимаб.
Для ссылки: Цанян МЭ, Соловьев СК, Новиков АА и др. Цитокиновый профиль у больных системной красной волчанкой. Научно-практическая ревматология. 2013;51(5):507—13.
CYTOKINE PROFILE IN PATIENTS WITH SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS M.E. Tsanyan1, 2, S.K. Solovyev1, A.A. Novikov1, E.N. Aleksandrova1, S.I. Glukhova1, E.L. Nasonov1
Objective: to investigate the levels of cytokines in patients with systemic lupus erythematous (SLE) and to determine their correlation with SLE activity and organ damage, as well as their changes during rituximab (RTM) therapy. Subjects and methods. The trial enrolled 26 patients (5 men and 21 women) with a median (Me) age of 27 [range 2340] years and a SLE duration of 9 to 300 months (Me 72 [range 36-108] months and 30 healthy donors marched with the examinees for gender and age. Disease activity was assessed using the SLEDAI-2K index. The serum levels of 27 cytokines were measured utilizing X-MAP technologies on a BioPlex 200 device (Bio-Rad, USA). The patients were divided into 2 groups of 13 persons in each: lupus nephritis (LN) and no renal injury. All the patients included in the trial received RTM therapy.
Results. A statistically significant elevation in the concentrations of interleukin 13 (IL-13) and G-CSF was found in the patients with SLE versus the healthy control group (p = 0.03 and p = 0.03, respectively). The LN group displayed a statistically significant increase in the concentrations of IL-4, IL-6, IL-7, IL-13, and G-CSF as compared with the non-LN group (р = 0.039, р = 0.03, р = 0.037, р = 0.03, and р = 0.028, respectively). ROC analysis established the sensitivity and specificity of all indices in the LN group. The area under the ROC curve was equal for all indicators. The highest specificity of IL-13 (85%) was observed in the LN group. These cytokines other than that of IL13 (62%) showed the same sensitivity (70%).
Conclusion. The patients with LN had statistically significantly elevated concentrations of IL4, IL6, IL7, IL13, and G-CSF. The findings suggest that these cytokines are associated with VN.
Key words: systemic lupus erythematous, cytokines, lupus nephritis, rituximab.
For reference: Tsanyan ME, Solovyev SK, Novikov AA et al. Cytokine profile in patients with systemic lupus erythematosus. Rheumatology Science and Practice. 2013;51(5):507—13.
DOI: http://dx.doi.org/10.14412/1995-4484-2013-1541
Системная красная волчанка (СКВ) — системное аутоиммунное заболевание, которое характеризуется потерей толерантности к ядерным антигенам, нарушением активации Т- и В-лимфоцитов с последующей поликлональной активацией циркулирующих В-лимфоцитов, продуцирующих аутореактивные аутоантитела, формированием иммунных комплексов, которые приводят к повреждению различных тканей и органов [1]. Это сложный иммунологический процесс, в котором участвуют различные цитокины, хемоки-ны, сигнальные молекулы и рецепторы.
Цитокины представляют собой группу низкомолекулярных белков с молекулярной массой от 8 до 80 кДа. Их действие может осуществляться аутокринно (т. е. направлено на
клетку, которая их продуцирует) или пара-кринно (на клетки, расположенные вблизи). Образование и высвобождение цитокинов обычно происходят кратковременно и регулируются. К настоящему времени у человека идентифицировано уже более ста различных цитокинов, и постоянно появляются сообщения об открытии новых [2].
В последние годы появление передовых технологий, таких как комплексный анализ цитокинов, предоставило возможность изучения цитокинового профиля при различных заболеваниях, в том числе СКВ, и новых механизмов патогенеза СКВ. Получение новых неинвазивных прогностических маркеров является ключевой задачей в разработке новых методов лечения СКВ [3].
Ор игинальные иссле д о в а н и я
В научной литературе имеются противоречивые данные об участии цитокинов в патогенезе СКВ и поражении различных органов и систем. По данным J.M. Urra и соавт. [4], интерлейкин 6 (ИЛ6), интерферо-ны (ИФН), ИЛ10, ИЛ17, фактор некроза опухоли а (ФНОа) играют важную роль в повреждении почек и центральной нервной системы (ЦНС) у больных СКВ. В исследовании D.M. Chang и соавт. [5] обнаружены повышенные концентрации ИФНу у больных СКВ с поражением суставов, ИЛ4 — у больных с поражением ЦНС и серозитами. Другими авторами обнаружена ассоциация ИЛ6 с поражением ЦНС [6]. S. Hirohata и соавт. [7] показали высокую чувствительность (87,5%) и специфичность (92,3%) ИЛ6 цереброспинальной жидкости у больных СКВ с психозом. В исследовании A.A. Sabry и соавт. [8] обсуждается участие ИЛ6 в патогенезе волча-ночного нефрита (ВН).
Цель — исследовать концентрации цитокинов у больных СКВ, определить корреляцию с активностью заболевания и поражением органов.
Материал и методы
В исследование было включено 26 пациентов с достоверной СКВ согласно критериям Американской коллегии ревматологов (ACR), пересмотренным в 1997 г. [9]. Характеристика больных представлена в табл. 1. Контрольную группу составили 30 здоровых доноров, сопоставимых по полу и возрасту с обследованными больными. Из 26 больных было 5 мужчин и 21 женщина в возрасте 27 [23; 40] лет. Длительность СКВ составляла 72 [36; 108] мес. Для характеристики вариантов течения использовали классификацию В.А. Насоновой (1972) [10]. У половины больных (n=13) было острое течение, из остальных 13 больных у 9 (34,6%) было хроническое течение, а у 4 (15,4%) — подострое течение. Активность СКВ оценивали по шкале активности SLEDAI2K. До включения в исследование средний показатель по SLEDAI2K составил 13 [8; 19] баллов. Больные, включенные в исследование, соответствовали II и III степени активности СКВ — n=7 (27%) и n=19 (73%) соответственно. У половины больных, включенных в исследование, показанием к назначению анти-В-клеточной терапии являлся ВН, резистентный к ранее проводимой терапии ГК и цитостатиками. У двух больных было тяжелое поражение ЦНС в виде энцефаломиелополирадикулоневропатии, у одной больной — мигренеподобные головные боли, сопровождающиеся нарушением зрения; у 9 больных наблюдалось поражение кожи (у двоих из них отмечено поражение легких); у одной больной на первом плане было поражение легких с высокой иммунологической активностью.
Все больные, включенные в исследование, получили терапию ритуксимабом (РТМ). Шестнадцати больным до начала анти-В-клеточной терапии проводилось лечение ЦФ. После проведения первого курса терапии РТМ 4 больных продолжали получать ЦФ, 6 больных получали ММФ,
5 — АЗА, одна больная — ЦсА, 4 больных получали гидро-ксихлорохин, остальные 6 больных находились на монотерапии ГК (см. табл. 1).
Концентрацию цитокинов сыворотки определяли с помощью мультиплексной технологии хМАР на анализаторе Bio-Plex200 (Вю-Rad, США). Уровень провоспали-тельных и противовоспалительных цитокинов в сыворотке
крови был изучен у 26 больных СКВ до начала терапии РТМ и через 1, 3 и 6 мес. Контрольная группа состояла из 30 здоровых доноров, сопоставимых по полу и возрасту с обследованными больными. Исследовали корреляцию уровней цитокинов с активностью заболевания, поражением органов и систем, различными лабораторными показателями активности СКВ.
Концентрации антител кдсДНК, 8ш-антигену, гис-тонам, нуклеосомам, рибонуклеопротеидам (РНП) в крови больных определяли иммуноферментным методом с помощью коммерческих наборов реагентов (0^еП;ес Diagnostica, Германия). Концентрации С3-и С4-компонентов комплемента определяли методом нефелометрии с использованием анализатора ВМРггерес (Siemens, Германия).
Статистическую обработку данных проводили с использованием программы Statistica 6.0 (StatSoft, США), включая общепринятые методы параметрического и не-
Таблица 1 Характеристика больных СКВ (n=26)
Показатель Значение
Средний возраст, годы* 27 [23; 40]
Пол, ж/м, п (%) 21 (80,8)/5 (19,2)
Длительность СКВ, мес* 72 [36; 108]
Активность, п (%):
II 7 (27)
III 19 (73)
Течение, п (%):
острое 13 (50)
подострое 4 (15,4)
хроническое 9 (34,6)
SLEDAI2K* 13 [7; 19]
Поражение органов, п (%):
поражение кожи 10 (38,5)
поражение слизистых оболочек 5 (19,2)
поражение почек 13 (50)
нейролюпус 3 (11,5)
поражение суставов 4 (15,4)
серозиты 7 (27)
алопеция 10 (38,5)
васкулит 8 (30,8)
лихорадка 1 (3,8)
поражение легких 3 (11,5)
полинейропатия 5 (19,2)
Гематологические нарушения, п (%):
анемия (НЬ<120 г/л) 7 (27)
лейкопения (<3П09/л) 2 (7,7)
тромбоцитопения (<100П09/л) -
Иммунологические нарушения, п (%):
повышение уровня а-дсДНК 17 (65,4)
снижение уровня С3-компонента комплемента 10 (38,5)
снижение уровня С4-компонента комплемента 2 (7,7)
CD19+ В-лимфоциты* 3,35 [0,6; 8,9]
Поддерживающая терапия, п (%):
монотерапия ГК 6 (23,1)
гидрокисихлорохин 4 (15,4)
АЗА 5 (19,2)
ЦФ 4 (15,4)
ММФ 6 (23,1)
ЦсА 1 (3,8)
Примечание. * - данные представлены в формате: медиана [25-й; 75-й перцентили]. НЬ - гемоглобин, а-дсДНК - антитела к двуспиральной ДНК, ГК -глюкокортикоидны, АЗА - азатиоприн, ЦФ - циклофосфан, ММФ - микофе-нолата мофетил, ЦсА - циклоспорин А.
OP
игинальные иссле
в а н и я
парметрического анализа. При сравнении базальных уровней цитокинов в контрольной группе и у больных СКВ использовали критерий Манна-Уитни. При оценке динамики концентраций цитокинов использовали тест Вилкоксо-на. Результаты представлены в виде медианы (Ме) с интер-квартильным интервалом [25-й; 75-й перцентили]. Корреляционный анализ проводили по методу Спирмена. Различия считались достоверными при р<0,05. С целью определения чувствительности и специфичности показателей проведен ЯОС-анализ.
Результаты
В результате проведенного исследования обнаружено статистически достоверное повышение концентраций ИЛ13 и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF) у больных СКВ по сравнению со здоровыми донорами до начала терапии РТМ (р=0,03 и р=0,003 соответственно). У больных СКВ выявлены пониженные концентрации ИЛ1Ра, ИЛ4, ИЛ12, эотаксина по сравнению со здоровой контрольной группой, однако данные статистически недостоверны (р=0,06; р=0,8; р=0,5 и р=0,9 соответственно; табл. 2).
С целью оценки взаимосвязи концентраций цито-кинов и поражения почек больные, включенные в исследование, были разделены на две группы: с ВН (п=13) и без поражения почек (п=13). По результатам нашего исследования у больных с ВН обнаружено статистически
значимое повышение уровней ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13 и G-CSF по сравнению с больными без поражения почек (р=0,039; р=0,03; р=0,037; р=0,03 и р=0,028 соответственно; табл. 3).
С целью определения чувствительности и специфичности данных цитокинов при ВН проведен ROC-анализ. Построение ROC-кривой позволило оценить диагностическую значимость показателей и сравнивать их информативность между собой. Наиболее высокими значениями чувствительности и специфичности у больных с ВН характеризовались показатели ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13 и G-CSF (табл. 4, см. рисунок, а—д). Площадь под ROC-кривой у всех показателей была одинаковой. Наиболее высокая специфичность в группе больных с ВН отмечена у ИЛ13 (85%). Чувствительность у данных цитокинов была одинаковой (70%), кроме ИЛ13 (62%).
Проведен корреляционный анализ базальных концентраций цитокинов с клиническими и лабораторными проявлениями у больных СКВ до начала анти-В-клеточ-ной терапии. Определялась положительная корреляция провоспалительных цитокинов с клинико-лабораторными проявлениями активности СКВ до начала терапии РТМ. В частности, выявлена статистически достоверная корреляция ИЛ6 с поражением почек, суставов, а также с лейкопенией, суточной протеинурией, наличием антител к гис-тонам, нуклеосомам и отрицательная корреляция с концентрацией общего белка сыворотки (табл. 5 и 6). Отме-
Таблица 2 Концентрации цитокинов в сыворотках крови у больных СКВ до начала терапии РТМ и здоровой контрольной группы,
Ме [25-й; 75-й перцентили], пг/мл
Цитокин Больные СКВ (n=26) Здоровые доноры (n=30) р
ИЛ1 в 4,5 [3,6; 5,5] 4,1 [2,6; 4,9] 0,07
ИЛ1Ра 82,6 [20,3; 234,5] 150,6 [111,2; 253,8] 0,06
ИЛ2 11,5 [11,1; 12,2] 10,7 [5,5; 13,9] 0,2
ИЛ4 2,5 [1,9; 2,9] 3,3 [0,2; 5,8] 0,8
ИЛ5 3,0 [2,7; 3,5] 2,9 [0,2; 5,2] 0,8
ИЛ6 8,4 [2,8; 13,7] 7,8 [4,5; 13,0] 0,7
ИЛ7 11,6 [7,2; 22,3] 8,1 [0,5; 21,5] 0,2
ИЛ8 12,1 [8,9; 20,5] 12,4 [4,7; 16,2] 0,3
ИЛ9 36,4 [34,3; 41,3] 34,1 [26,3; 42,3] 0,1
ИЛ10 17,6 [17,1; 17,8] 13,2 [5,8; 37,5] 0,4
ИЛ12 4,2 [3,6; 14,3] 5,77 [2,2; 9,9] 0,5
ИЛ13 18,3 [18,1; 18,6] 16,7 [9,9; 22,4] 0,03
ИЛ15 8,9 [8,5; 9,7] 6,7 [3,9; 17,4] 0,4
ИЛ17 26,1 [25,3; 32,3] 22,8 [5,2; 90,3] 0,94
Эотаксин 92,3 [53,5; 294,2] 102,4 [19,3; 585,6] 0,9
FGF basic 29,5 [28,9; 30,9] 27,2 [19,3; 44,3] 0,4
G-CSF 20,4 [19,5; 21,5] 10,8 [2,4; 21,2] 0,003
GM-CSF 42,7 [36,4; 57,7] 39,9 [21,6; 61,3] 0,48
ИФНу 344,4 [301,6; 429,5] 285,3 [112,3; 1037,9] 0,6
IP10 1934,1 [1330,3; 3394,8] 717,8 [188,7; 4064,8] 0,15
МСР1 76,1 [38,5; 106,5] 48,6 [22,3; 120,7] 0,16
М1Р1а 12,0 [10,1; 14,3] 10,8 [8,8; 18,1] 0,5
MIP1b 67,5 [46,6; 106,7] 66,0 [49,3; 99,4] 0,9
PDGF-BB 24 529,8 [17 850,2; 38138,0] 26 024,5 [5854,7; 58 715,0] 0,7
ФНОа 48,7 [40,5; 59,9] 38,9 [17,2; 64,8] 0,15
VEGF 206,1 [83,9; 313,8] 205,5 [63,8; 312,7] 0,9
игинальные иссле
в а н и я
Таблица 3 Уровни цитокинов у больных с ВН и без поражения почек до начала терапии РТМ, Ме [25-й; 75-й перцентили], пг/мл
Цитокин Группа с ВН (п=13) Группа без ВН (п=13) р
ИЛ4 2,8 [2,1; 3,2] 2,2 [1,7; 2,6] 0,039
ИЛ6 11,2 [7,7; 15,8] 5,2 [2,3; 9,2] 0,03
ИЛ7 20,6 [7,8; 23,4] 7,2 [5,5; 12,6] 0,037
ИЛ13 18,8 [18,0; 19,2] 17,3 [16,8; 18,1] 0,03
G-CSF 20,8 [20,2; 21,5] 19,9 [19,2; 20,5] 0,028
Таблица 4 Данные ЯОС-анализа цитокинов у больных с ВН
Цитокин Чувствительность, % Специфичность, % Точка разделения Площадь под ИОС-кривой р
ИЛ4 70 77 2,44 0,74 0,039
ИЛ6 70 77 4,1 0,75 0,03
ИЛ7 70 61 7,34 0,74 0,037
ИЛ13 62 85 7,4 0,75 0,03
G-CSF 70 69 18,55 0,75 0,028
тим, что статистически достоверной корреляции исходных концентраций цитокинов и индекса активности SLEDAI2K, а также а-дсДНК до начала анти-В-клеточной терапии не обнаружено.
На фоне проводимой терапии РТМ выраженных изменений концентраций цитокинов не отмечено. Наблюда-
лось статистически достоверное повышение концентраций М1Р1Ь с 67,5 [46,6; 106,7] до 92,1 [72,4; 143,1] пг/мл через 1 мес после начала анти-В-клеточной терапии (р=0,009). Концентрации М1Р1Ь сохранялись повышенными в течение 6 мес наблюдения, однако данные статистически недостоверны (р=0,3). Также наблюдалось повы-
Специфичность
г
Специфичность
д
Специфичность
Специфичность
ЯОС-кривые для ИЛ6 (а), ИЛ4 (б), G-CSF (в), ИЛ13 (г) и ИЛ7 (д)
Специфичность
б
а
в
Ор игинальные иссле д о в а н и я
шение концентраций ИЛ1Ь, ИЛ1Ра и ИЛ2 через 1 мес после начала анти-В-клеточной терапии, но и в этом случае данные статистически недостоверны (р=0,059; р=0,07 и р=0,058 соответственно).
Обсуждение
Данные об участии цитокинов в патогенезе СКВ противоречивы [11]. Проводились разные исследования с целью определения соотношения ТЫ- и ТИ2-цитоки-нов при СКВ [12, 13]. СКВ считается «1Ъ2-заболевани-ем» в связи с продукцией специфических антител к собственным антигенам, в котором участвуют 1Ъ2-цитоки-ны (ИЛ4, ИЛ5, ИЛ6, ИЛ10, ИЛ13). Однако по данным ряда исследований в сыворотке больных СКВ выявляются также и ТЫ-цитокины, такие как ИЛ2, ФНОа, ИФНу [14-17].
В нашем исследовании мы обнаружили статистически достоверное повышение концентраций ИЛ13 и G-CSF (р=0,03 и р=0,003 соответственно) у больных СКВ по сравнению со здоровыми донорами и достоверное повышение концентраций ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13 и G-CSF у больных с ВН по сравнению с больными СКВ без поражения почек (р=0,039; р=0,03; р=0,037; р=0,03 и р=0,028 соответственно).
ИЛ4 является цитокином ТИ2-типа. Приводит к активации Т- и В-лимфоцитов, макрофагов, фибробластов и гломерулярных клеток, связываясь с рецепторами на их поверхности [18]. В результате активации В-клеток происходит продукция антител, ^Е и IgG4 [19-21]. N. СИаг1е8 и соавт. [22] обнаружили повышенные концентрации ИЛ4 у больных СКВ. Авторы предположили, что активированные базофилы секретируют ИЛ6 и ИЛ4, которые приводят к активации В-лимфоцитов и продукции аутоантител. Сходные данные получены в других исследованиях [23-26]. Проводились различные исследования с целью выявления ИЛ4 у больных ВН. А. Gigante и соавт. [27] обнаружили, что экспрессия ИЛ4 в почках коррелирует с гематурией, концентрацией креатинина и морфологическим индексом хронизации. Авторы предположили, что ИЛ4 может быть маркером ВН.
Таблица 5 Корреляционный анализ базальных уровней цитокинов и клинико-лабораторных проявлений СКВ (р<0,05)
Клинико-лабораторные проявления
Цитокины
Клинические проявления Поражение почек ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13, G-CSF
Васкулит ИЛ12
Поражение суставов ИЛ6
Поражение кожи ИЛ15
Поражение слизистых оболочек ИЛ10, MIPIb
Полинейропатия ИЛ10, ИЛ12, ИЛ17, GM-CSF, FGF basic
Лабораторные проявления Протеинурия ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13, G-CSF
Цилиндрурия GM-CSF, ФНОа
Гипокомплементемия MIP1a, VEGF
Лейкопения ИЛ6, ИЛ10, MIP1a, VEGF
Анемия ИЛ1 в
Криоглобулинемия IP10
ИЛ6 продуцируется различными клетками, как лимфоидными (CD4+ Т-лимфоцитами ТИ2-подтипа и В-лимфоцитами), так и нелимфоидными (макрофаги, эндотелиальные клетки). ИЛ6 является многофункциональным цитокином, который воздействует на многочисленные клетки-мишени: участвует в воспалительном процессе (стимулирует синтез белков острой фазы), в гемопоэзе и иммунном ответе [28-30]. ИЛ6 также приводит к гиперактивации поликлональных В-лимфоцитов и выработке антител при СКВ. Более того, он ответственен за пролиферацию и дифференциацию активированных Т-лимфоцитов, продукцию ИЛ2 и экспрессию рецептора ИЛ2 (ИЛ2Р), дифференциацию и активацию цитотоксических Т-лим-фоцитов [31].
Таблица 6 Корреляционный анализ базальных уровней цитокинов и лабораторных показателей у больных СКВ (р<0,05)
Показатели Цитокины
Показатели крови
|дм ИЛ1р*, ИЛ2*, ИЛ10*, ИЛ17*, FGF basic*, MIP1a*
№ ИЛ13*
|дА MIP1a*
аВ2ГП1-1дв ИЛ1Ра, ИЛ2,ИЛ4, ИЛ7, ИЛ17, FGF basic, IP10*, MIP1 в
аВ2ГП1-1дМ ИЛ1Ра, ИЛ5*, ИЛ7, ИЛ10, ИЛ13, ИЛ17, FGF basic, G-CSF
АКЛ 1дв G-CSF
АКЛ 1дМ GF E V IP1 MI
АТ к гистонам ИЛ6
АТ к нуклеосомам ИЛ6, IP10
вчСРБ ИЛ6, MIP1 в
анти-Ио GF E V IP1 MI
анти-1_а ИЛ8*, ИЛ9, MCP1*, VEGF*
А-СЦ ИЛ9
С4 ИЛ15*, MIP1 в
АТ к РНП ФНСа*
СОЭ ИЛ1р*, ИЛ10*, ИЛ12*, MCP1*
Мочевина ИЛ1р, IP10*, MIP1 в
Эритроциты крови ИЛ1Ра, ИЛ7, ИЛ12, ИЛ13
Тромбоциты крови ИЛ1Ра, ИЛ4, ИЛ7, ИЛ9, ИЛ13, FGF basic
Лейкоциты крови ИЛ4, ИЛ10, MIP1 в
Креатинин крови ИЛ1Ра*, ИЛ10*, ИЛ-2*, ИЛ17*, FGF basic*, GM-CSF*, PDGFbb*, ФНСа*
Общий белок ИЛ6*
Альбумин крови ИЛ13
Гамма-глобулины ИЛ13* Показатели мочи
Суточная протеинурия ИЛ6
Белок в ОАМ ИЛ7, G-CSF
Гематурия MIP1 в
СКФ ИЛ2, ИЛ5, ИЛ12, ИЛ17, FGF basic, GM-CSF, ФНСа
Примечание. АКЛ - антитела к кардиолипину, АТ - антитела, ОАМ - общий анализ мочи, СКФ - скорость клубочковой фильтрации. * - отрицательная корреляция показателей.
Ор игинальные иссле д о в а н и я
В ряде проведенных исследований выявлено, что у больных СКВ повышено количество ИЛ6-продуцирую-щих мононуклеарных клеток, а также концентрации ИЛ6 в периферической крови, которые коррелируют с индексом активности SLEDAI, концентрацией а-дсДНК, СОЭ и уровнем С-реактивного белка (СРБ) [32—38]. Однако в нашем исследовании корреляции концентраций ИЛ6 с а-дсДНК и индексом активности SLEDAI2K не получено. Е. Peterson и соавт. [39] исследовали 56 больных СКВ, но не обнаружили корреляции концентраций ИЛ6 крови с активностью заболевания.
Обращает на себя внимание следующий факт: по результатам нашего исследования выявлено, что ИЛ6 крови статистически достоверно коррелирует с ВН. Сходные данные получены в исследовании Е.М. Davas и соавт. [40]. S. Hirohata и Т Miyamoto [41] обнаружили повышенные концентрации ИЛ6 в цереброспинальной жидкости у больных СКВ с поражением ЦНС.
ИЛ7 в организме человека синтезируется стро-мальными (эпителиальными) клетками тимуса, костного мозга и селезенки, а также эпителиальными клетками тонкого кишечника, печени, эндотелия, кератиноцита-ми и дендритными клетками. Клетками-мишенями ИЛ7 являются Т- и В-лимфоциты и дендритные клетки. Биологическая активность связана с пролиферацией и созреванием предшественников Т- и В-лимфоцитов [42].
ЛИТЕРАТУРА
1. Heinlen LD, McClain MT, Merrill J et al. Clinical criteria for systemic lupus erythematosus precede diagnosis, and associated autoantibodies are present before clinical symptoms. Arthritis Rheum. 2007;56(7):2344—51. DOI: http://dx.doi.org/10.1002%2Fart.22665.
2. Ройт А, Бростофф Дж, Мейл Д. Иммунология. Москва: Мир; 2000. 230.
[Royt A, Brostoff Dzh, Meyl D. Immunologiya. Moscow: Mir; 2000. 230.]
3. Yu ShL, Kuan WP, Wong Ch K et al. Immunopathological roles of cytokines, chemokines, signaling molecules and pattern-recogni-tion receptors in systemic lupus erythematosus. Clin Dev Immunol. 2012;2012:715190. DOI: 10.1155/2012/715190. Epub 2012 Jan 23.
4. Urra JM, De La Torre M. Cytokines and systemic lupus erythematosus. Systemic Lupus Erythematosus 2012. Published online
21, March, 2012.
5. Chang DM, Su WL, Chu SJ. The expression and significance of intracellular T helper cytokines in systemic lupus erythematosus. Immunol Invest. 2002;31(1):1-12. DOI: http://dx.doi.org/10.1081%2FIMM-120003217.
6. Fragoso-Loyo H, Richaud-Patin Y, Orozco-Narvaez A et al. Interleukin-6 and chemokines in the neuropsychiatric manifestations of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. 2007;56(4):1242-50. DOI: http://dx.doi.org/10.1002%2Fart.22451.
7. Hirohata S, Kanai Y, Mitsuo A et al. Accuracy of cerebrospinal fluid IL-6 testing for diagnosis of lupus psychosis. A multicenter retrospective study. Clin Rheumatol. 2009;28(11):1319-23. DOI: 10.1007/s10067-009-1226-8. Epub 2009 Jul 12.
8. Sabry AA, Kalil AM, Rahim MA et al. Proinflammatory cytokines (TNF alpha and IL-6) in egiptian SLE patients with lupus nephritis. Is it correlated with disease activity? Eur J Gen Medicine. 2005;2(4):153-8.
9. Hochberg MC. Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. 1997;40(9):1725. DOI: http://dx.doi.org/10.1002%2Fart.1780400928.
В последние годы обсуждается участие ИЛ7 в патогенезе некоторых заболеваний, таких как ревматоидный артрит, сахарный диабет 1-го типа, множественный склероз и СКВ [43].
ИЛ 13 образуется ТИ2-лимфоцитами и играет важную роль в активации моноцитов, макрофагов и В-лим-фоцитов [44]. В нашем исследовании обнаружено статистически достоверное повышение концентраций ИЛ 13 в сыворотке больных СКВ по сравнению со здоровыми донорами (р=0,03). Сходные данные получили Z. Хи и соавт. [45], которые исследовали концентрации ИЛ13 в сыворотке 35 больных СКВ и 15 здоровых доноров. Авторы обнаружили, что у больных СКВ концентрация ИЛ 13 значительно повышена (92,69+9,87 пг/мл) по сравнению со здоровыми донорами (35,20+12,70 пг/мл; р<0,01). Авторы предположили, что ИЛ13 может участвовать в патогенезе СКВ. По результатам нашего исследования выявлено статистически достоверное повышение концентраций ИЛ13 в крови больных ВН по сравнению с больными без ВН (р=0,03). Сходные данные получены в других исследованиях [44, 46].
Таким образом, проведенное исследование показало, что наибольшей чувствительностью и специфичностью при ВН обладают ИЛ4, ИЛ6, ИЛ7, ИЛ13 и G-CSF. Полученные результаты свидетельствуют об ассоциации данных цитокинов с ВН.
10. Насонова ВА. Системная красная волчанка. Москва: Медицина; 1972.
[Nasonova VA. Sistemnaya krasnaya volchanka. Moscow: Meditsina; 1972.]
11. Sabry AA, Kalil AM, El-Rahim MA et al. Proinflammatory cytokines (TNF-a and IL-6) in egyptian SLE patients with lupus nephritis. Is it correlated with disease activity? Eur J Gen Medicine. 2005;2(4):153-8.
12. Viallard JF, Pellegrin JL, Ranchin V et al. Th1 (IL-2, interferon-gamma (IFN-y)) and Th2 (IL-10, IL-4) cytokine production by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from patients with systemic lupus erythematosus (SLE). Clin Exp Immunol. 1999;115(1):189-95. DOI:
http://dx.doi.org/10.1046%2Fj.1365-2249.1999.00766.x.
13. Miyake K, Akahoshi M and Nakashima H. Th subset balance in lupus nephritis. J Biomed Biotechnol. 2011;2011:980286. DOI: 10.1155/2011/980286. Epub 2011 Aug 28.
14. Dean GS, Tyrrell-Price J, Crawley E et al. Cytokines and systemic lupus erythematosus. Ann Rheum Dis. 2000;59(4):243-51. DOI: http://dx.doi.org/10.1136%2Fard.59.4.243.
15. Tokano Y, Morimoto S, Kaneko H et al. Levels of IL-12 in the sera of patients with systemic lupus erythematosus (SLE)-relation to Th1- and Th2-derived cytokines. Clin Exp Immunol. 1999;116(1):169-73. DOI:
http://dx.doi.org/10.1046%2Fj.1365-2249.1999.00862.x.
16. Davas EM, Tsirogianni A, Kappou I et al. Serum IL-6,
TNFa,p55 srTNFa, p75 srTNFa,srIL-2a levels and disease activity in systemic lupus erythematosus. Clin Rheumatol. 1999:18(1):17-22.
17. Apostolidis SA, Lieberman LA, Kis-Toth K et al. The dysregula-tion of cytokine networks in systemic lupus erythematosus.
J Interferon Cytokine Res. 2011;31(10):769-79. DOI: 10.1089/jir.2011.0029. Epub 2011 Aug 30.
18. Furusu A, Miyazaki M, Koji T et al. Involvement of IL-4 in human glomerulonephritis: an in situ hybridization study of IL-4 mRNA and IL-4 receptor mRNA. J Am Soc Nephrol. 1997;8(5):730—41.
19. Новиков АА, Александрова ЕН, Диатроптова МА, Насонов ЕЛ.
Ор
игинальные иссле
в а н и я
Роль цитокинов в патогенезе ревматоидного артрита. Научно-практическая ревматология. 2010;2:71-82.
[Novikov AA, Aleksandrova EN, Diatroptova MA, Nasonov EL. Role of cytokines in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. Nauchno-prakticheskaya revmatologiya. 2010;2:71-82.]
20. Wu MQ Huang CM, Tsai JJ et al. Polymorphisms of the interleukin-4 gene in chinese patients with systemic lupus erythematosus in Taiwan. Lupus. 2003;12(1):21—5.
21. Albuquerque DA, Saxena V, Adams DE et al. An ACE inhibitor reduces Th2 cytokines and TGF-beta1 and TGF-beta2 isoforms in murine lupus nephritis. Kidney Int. 2004;65(3):846-59. DOI: http://dx.doi.org/10.1111%2Fj.1523-1755.2004.00462.x.
22. Charles N, Hardwick D, Daugas E et al. Basophils and the
T helper 2 environment can promote the development of lupus nephritis. Nat Med. 2010;16(6):701-7. DOI: 10.1038/nm.2159. Epub 2010 May 30.
23. Kaveri SV, Mouthon L, Bayry J. Basophils and nephritis in lupus. N Engl J Med. 2010;363(11):1080-2. DOI: 10.1056/NEJMcibr1006936.
24. Ogawa N, Itoh M, Goto Y. Abnormal production of B cell growth factor in patients with systemic lupus erythematosus. Clin Exp Immunol. 1992;89(1):26—31. DOI: http://dx.doi.org/10.1111%2Fj.1365-2249.1992.tb06872.x.
25. Linker-Israeli M, Deans RJ, Wallace DJ et al. Elevated levels of endogenous IL-6 in systemic lupus erythematosus: a putative role in pathogenesis. J Immunol. 1991;147(1):117—23.
26. Llorente L, Richaud-Patin Y, Wijdenes J et al. Spontaneous production of interleukin-10 by B lymphocytes and monocytes in systemic lupus erythematosus. Eur Cytokine Netw.
1993;4(6):421 —30.
27. Gigante A, Gasperini M, Afeltra A et al. Cytokines expression in SLE nephritis. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2011;15(1):15—24.
28. Viallard J, Taupin J, Miossec V et al. Analysis of interleukin-6, interleukin-10 and leukemia inhibitory factor (LIF) production by peripheral blood cells from patients with systemic lupus erythematosus identifies LIF as a potential marker of diseases activity. Eur Cytokine Netw. 1999;10(1):17-24.
29. Baraczka K, Nekam K, Pozsonyi T et al. Investigation of cytokine (tumor necrosis factor-alpha, interleukin-6, interleukin-10) concentrations in the cerebrospinal fluid of female patients with multiple sclerosis and systemic lupus erythematosus. Eur J Neurol. 2004;11(1):37—42. DOI:
http://dx.doi.org/10.1046%2Fj.1351-5101.2003.00706.x.
30. Cross JT, Benton HP. The roles of interleukin-6 and interleukin-10 in B cell hyperactivity in systemic lupus erythematosus. Inflamm Res. 1999;48(5):255-61. DOI: http://dx.doi.org/10.1007%2Fs000110050456.
31. Avramescu C, Biciusca V, Daianu T et al. Cytokine panel and histopathological aspects in the systemic lupus erythematosus.
Rom J Morphol Embryol. 2010;51(4):633—40.
32. Hagiwara E, Gourley MF, Lee S et al. Disease severity in patients with systemic lupus erythematosus correlates with an increased
ratio of interleukin-10: interferon-gamma-secreting cells in the peripheral blood. Arthritis Rheum. 1996;39(3):379—85. DOI: http://dx.doi.org/10.1002%2Fart.1780390305.
33. Esposito P, Balletta M, Procino A et al. Interleukin-6 release from peripheral mononuclear cells is associated to disease activity and treatment response in patients with lupus nephritis. Lupus. 2009;18(4):1329-30. DOI: 10.1177/0961203309106183. Epub 2009 Oct 22.
34. Grondal G, Gunnarsson I, Ronnelid J et al. Cytokine production, serum levels and disease activity in systemic lupus erythematosus. Clin Exp Rheumatol. 2000;18(5):565—70.
35. Linker-Israeli M, Deans RJ, Wallace DJ et al. Elevated levels of endogenous IL-6 in systemic lupus erythematosus. A putative role in pathogenesis. J Immunol. 1991;147(1):117—23.
36. Sarby AA, Elbasyouni SR, Kalil AM et al. Markers of inflammation and atherosclerosis in Egyptian patients with systemic lupus erythematosus. Nephrology (Carlton). 2006;11(4):329—35.
37. Chun HY, Chung JW, Kim HA et al. Cytokine IL-6 and IL-10 as biomarkers in systemic lupus erythematosus. J Clin Immunol. 2007;27(5):461—6. Epub 2007 Jun 21. DOI: http://dx.doi.org/10.1007%2Fs10875-007-9104-0.
38. Spronk P, Borg E, Limburg P, Kallenberg C. Plasma concentration of IL-6 in systemic lupus erythematosus; an indicator of disease activity. Clin Exp Immunol. 1992;90(1):106-10.
39. Peterson E, Robertson AD, Emilen W. Serum and urinary interleukin-6 in systemic lupus erythematosus. Lupus.
1996;5(6):571-5.
40. Davas EM, Tsirogianni A, Kappou I et al. Serum IL-6, TNF-alpha, p55 srTNFalpha, p75srTNFalpha, srIL-2alpha levels and disease activity in systemic lupus erythematosus. Clin Rheumatol. 1999;18(1):17-22.
41. Hirohata S, Miyamoto T. Elevated levels of interleukin-6 in cerebrospinal fluid from patients with systemic lupus erythematosus and central nervous system involvement. Arthritis Rheum. 1990;33(5):644-9.
42. Бурместер ГР, Пецутто А. Наглядная иммунология. Москва; 2009.
[Burmester GR, Petsutto A. Naglyadnaya immunologiya.
Moscow; 2009.]
43. Wang XS, Li BZ, Hu LF et al. Perspectives of the relationship between IL-7 and autoimmune diseases. Clin Rheumatology. 2013 Aug 11. [Epub ahead of print]. DOI: http://dx.doi.org/10.1007%2Fs10067-013-2360-x.
44. Chen X, Zhang Z, Jiang L et al. Elevated interleukin-13 in patients with active lupus nephritis. Chin Med J (Engl). 2001;114(10):1022-5.
45. Xu Z, Chen Y. Determination of serum interleukin-13 and nerve growth factor in patients with systemic lupus erythematosus and clinical significance. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2005;25(3):360-1.
46. Brugos B, Vincze Z, Sipka S et al. Serum and urinary cytokine levels of SLE patients. Pharmazie. 2012 May;67(5):411-3.
