Цитокиновый профиль лабораторных инбредных и трансгенных мышей в оценке иммунологического статуса и поиске новых фармакологических регуляторов Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

https://doi.org/10.33647/2074-5982-15-2-54-62

(ССУ

BY 4.0

ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ ЛАБОРАТОРНЫХ ИНБРЕДНЫХ И ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ В ОЦЕНКЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА И ПОИСКЕ НОВЫХ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ

РЕГУЛЯТОРОВ

М.С. Дуля*, В.Н. Каркищенко, Д.В. Хвостов, Р.А. Агельдинов, Н.Н. Каркищенко

ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России» 143442, Российская Федерация, Московская обл., Красногорский р-н, п. Светлые горы, владение 1

В статье приведены результаты исследований цитокинового профиля лабораторных мышей, включая впервые установленные данные цитокинового статуса трансгенных мышей NATlhom и NAT2hom. Использована методология анализа цитокинов в сыворотке крови лабораторных животных методом мультиплексного xMAP-анализа на магнитных частицах. Для мышей инбредных линий C57BL/6 и Balb/c представлены данные по изменению количественного содержания цитокинов в плазме крови мышей после однократного введения препаратов полимурамил и такролимус. Изучено влияние на цитокиновый профиль иммуносупрессора — такролимуса и иммуномодулятора — полимурамила. Особое внимание уделено динамике концентрации фактора некроза опухоли (TNF-a) как одному из важнейших критериев биологического действия иммуномодуляторов. Определена продукция TNF-a в условиях экспериментальной иммуносупрессии, подтверждены иммуномодулирующие свойства полимурамила в условиях острого воспаления на модели гриппа у мышей. Предложено использовать трансгенных гуманизированных мышей линий NATlhom и NAT2hom в иммунологических исследованиях и поиске новых фармакологических молекул-регуляторов, метаболизиру-ющихся с участием систем ацетилирования организма. Полученные данные сопоставлены с влиянием на цитокиновый статус ингината — эффективного ингибитора N-ацетилтрансферазы (NAT2), имеющего выраженное иммуномодулирующее действие при продукции ИФН-гамма и ФНО-альфа.

Ключевые слова: цитокиновый профиль, ингинат, магнитные частицы, NATlhom, NAT2hom — трансгенные гуманизированные линии мышей, иммунологический статус, иммуносупрессия, та-кролимус, иммуномодуляторы, полимурамил

Конфликт интересов: авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.

Для цитирования: Дуля М.С., Каркищенко В.Н., Хвостов Д.В., Агельдинов Р.А., Каркищенко Н.Н. Цитокиновый профиль лабораторных инбредных и трансгенных мышей в оценке иммунологического статуса и поиске новых фармакологических регуляторов. Биомедицина. 2019;15(2):54-62. https://doi.org/10.33647/2074-5982-15-2-54-62

Поступила 27.05.2019

Принята после доработки 27.05.2019

Опубликована 10.06.2019

CYTOKINE PROFILE OF LABORATORY INBRED AND TRANSGENIC MICE IN THE EVALUATION OF THE IMMUNOLOGICAL STATUS AND SEARCH FOR NEW PHARMACOLOGICAL REGULATORS

Maxim S. Dulya*, Vladislav N. Karkischenko, Daniil V. Khvostov, Ruslan A. Ageldinov,

Nikolay N. Karkischenko

Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia 143442, Russian Federation, Moscow region, Krasnogorsk district, Settlement Svetlye Gory, building 1

This article presents the results of studies aimed at investigating the cytokine profile of laboratory mice, including novel data on the cytokine status of transgenic mice NATlhom and NAT2hom. The investigation of cytokines in the blood serum of laboratory animals was carried out using multiplex xMAP-ana-lysis on magnetic particles. For mice of inbred lines C57BL/6 and Balb/c, data is presented with respect to changes in the quantitative content of cytokines in the blood plasma after a single injection of the Polymuramyl and Tacrolimus drugs. Effects of the Tacrolimus immunosuppressant and the Polymuramyl immunomodulator on the mouse cytokine profile were estimated.

A particular attention was paid to the dynamics of the concentration of the tumour necrosis factor (TNF-a) as one of the most important criteria of the biological action of immunomodulators. The production of TNF-a in experimental immunosuppression was determined. The immunomodulating properties of Polymuramyl were confirmed under the conditions of acute inflammation by simulating influenza in mice. It is established that transgenic humanized mice of NAT1hom and NAT2hom lines can be successfully used in immunological studies and search for new pharmacological regulatory molecules metabolized with the participation of body acetylation systems. The obtained data are compared with the effect of inginate — an effective inhibitor of N-acetyltransferase (NAT2) — on the cytokine status. This drug is characterized by a pronounced immunomodulating effect on the production of IFN-gamma and TNF-alpha.

Keywords: cytokine profile, inginat, magnetic particles, NATlhom, NAT2hom, transgenic humanized mice, immunological status, immunosuppressive therapy, tacrolimus, immunomodulators, polymuramyl . Conflict of interest: the authors declare no conflict of interest.

For citation: Dulya M.S., Karkischenko V.N., Khvostov D.V., Ageldinov R.A., Karkischenko N.N. Cytokine Profile of Laboratory Inbred and Transgenic Mice in the Evaluation of the Immunolog-ical Status and Search for New Pharmacological Regulators. Journal Biomed. 2019;15(2):54-62. https://doi.org/10.33647/2074-5982-15-2-54-62

Submitted 27.05.2019 Revised 27.05.2019 Published 10.06.2019

Введение

Цитокины представляют собой продуцируемые клетками белково-пептидные факторы, осуществляющие короткодистантную регуляцию межклеточных и межсистемных взаимодействий. Цитокины определяют выживаемость клеток, стимуляцию или ин-гибирование их роста, дифференцировку, функциональную активацию и апоптоз клеток. Способность регулировать перечисленные функции обусловлена тем, что после взаимодействия цитокинов с комплементарными рецепторами на поверхности клеток [6] сигнал через элементы внутриклеточной трансдукции передается в ядро, где активируются соответствующие гены [7, 8]. Белки, продукты активированных цитоки-нами генов, продуцируются клетками и регулируют перечисленные выше процессы.

Действие цитокинов тесно связано с физиологическими и патофизиологическими реакциями организма. При этом происходит модуляция как локальных, так и системных механизмов защиты. Одной из важнейших функций системы цитокинов является обеспечение согласованного действия иммунной, эндокринной и нервной системы в ответ на стресс. Усиление продукции определенных цитокинов воспаления или факторов, стимулирующих рост лимфоцитов, может лежать в основе некоторых заболеваний. В то же время снижение уровня ряда цитокинов также способно провоцировать заболевание. Так, колониестимулирующий фактор (CSF) играет ведущую роль в нормальном гемо-поэзе, и уменьшение его продукции нарушает механизмы защиты против инфекций.

Особенно большую роль цитокины играют в формировании патогенеза опухолевых заболеваний иммунной системы. Эти заболевания развиваются из клеток основных продуцентов и/или потребителей цитокинов. Гены цитокинов сопряженно активируются с онкогенами при хромосомных аберрациях и при ретровирусных инфекциях. Вследствие этого опухолевые клетки продуцируют цитокины, стимулирующие пролиферацию неопластических иммуно-компетентных клеток.

Поскольку цитокины являются локальными медиаторами, более целесообразно измерять их уровни в соответствующих тканях после экстракции тканевых протеинов или в естественных жидкостях — например, в слезе, смывах из полостей, моче, спинномозговой жидкости и т.д. Уровни цитокинов в сыворотке или др. биологических жидкостях отражают текущее состояние работы иммунной системы, т.е. синтез цитокинов клетками организма in vivo. Определение уровней продукции цитокинов мононуклеарами периферической крови (МПК) in vitro показывает функциональное состояние клеток. Спонтанная продукция цитокинов МПК в культуре свидетельствует, что клетки уже инактиви-рованы in vivo. Индуцированный (различными стимуляторами, митогенами) синтез цитокинов отражает потенциальную, резервную способность клеток отвечать на антигенный стимул (в частности, на действие лекарственных препаратов). Сниженная индуцированная продукция цитокинов in vitro может служить одним из признаков иммунодефицитного состояния.

Ранее нами получены экспериментальные данные о биологическом действии препаратов — производных флуорена: ти-лорона и ингината. Препараты выступают как эффективные ингибиторы N-ацетил-трансферазы (NAT) и оказывают иммуно-модулирующее действие при продукции цитокинов ИФН-гамма и ФНО-альфа [1].

Данные наблюдения применимы для поиска производных флуорена как перспективных средств в моделировании противовирусных молекул-кандидатов и иммуностимуляторов. На основе полученных данных in vitro эксперимента по ферментативной активности установлено эффективное ин-гибирующее действие производных флуорена (тилорона и ингината) по ферменту NAT2 человека.

При оценке уровней цитокинов необходимо помнить, что они являются антиген-неспецифическими факторами. Поэтому специфическая диагностика инфекционных, аутоиммунных и аллергических заболеваний с помощью определения уровня тех или иных цитокинов невозможна. Тем не менее, изучение уровней цитокинов позволяет получить информацию о функциональной активности различных типов им-мунокомпетентных клеток [8, 9]; о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и прогнозе; о соотношении процессов активации Т-хелперов 1 и 2 типов, что очень важно при дифференциальной диагностике ряда инфекционных и иммунопатологических процессов; о стадии развития ряда аллергических и аутоиммунных заболеваний. Кроме того, определение уровней цитокинов используется при применении новых иммуномодулирую-щих препаратов на основе рекомбинантных цитокинов и их антагонистов для изучения фармакокинетики этих препаратов, а также их способности индуцировать синтез других цитокинов.

Особый интерес представляет иммунологический статус трансгенных гуманизированных мышей, используемых в качестве биомоделей патогенезов и применяемых в направленном поиске новых фармакологических регуляторов.

Основным путем метаболизма широкого ряда лекарственных средств и ксенобиотиков, включая канцерогены, является N-ацетилирование, которое происходит

при участии ферментов N-ацетилтрансфе-раз (NAT1 и NAT2). Ранее нами получены генетические конструкции с генами человека NAT1 и NAT2 и успешно выведены поколения устойчивых трансгенных линий мышей (NATlhom, NAT2hom), несущих эти гены [1-3]. Методами молекуляр-но-генетического (ПЦР, Вестерн-блоттинг) и биоаналитического анализа (ВЭЖХ-МС, спектрофотометрия) установлено наличие трансгенов и определены экспрессия, активность белков NAT1 и NAT2 человека в тканях гуманизированных мышей [4]. Разработаны новые методы оценки эффективности и безопасности применения перспективных фармакологических средств с использованием трансгенных экспериментальных животных, несущих гены NAT1 и NAT2 человека, а также подходы по скринингу молекул-кандидатов на основе соединений — ингибиторов ферментов N-ацетилтрансфераз человека [5].

Цитокиновый профиль трансгенных гуманизированных мышей ранее в литературе не описан и представляет фундаментальный и прикладной интерес.

Цель работы — исследовать цитокино-вый профиль линий лабораторных мышей C57BL/6, Balb/c и трансгенных гуманизированных NATlhom, NAT2hom методом xMAP-мультиплексного анализа на магнитных частицах. На примере выбранных лекарственных средств (иммуносупрессо-ра — такролимуса и иммуномодулятора — полимурамила) оценить паттерн изменений цитокинового профиля для линий мышей C57BL/6 и Balb/c, фармакодинамику и характер иммунологического действия выбранных модельных препаратов.

Материалы и методы

Цитокиновый профиль плазмы крови всех испытуемых животных определяли с помощью мультиплексного анализа на системе «Bio-Plex Magpix» (Bio-Rad, США).

Данный метод представляет собой мультиплексную иммунную реакцию, протекающую на магнитных микрочастицах, с их последующим проточным флуоресцентным анализом и одновременным определением содержания цитокинов. Пользовались стандартной коммерчески доступной панелью на 23 цитокина (Bio-Plex Pro™ Mouse Cytokine 23-plex Assay, #M60009RDPD). Плазму крови, стабилизированную ЭДТА, вносили в лунки планшета. Дальнейшие операции выполняли в соответствии с протоколом производителя.

Иммунологическое действие лекарственных средств — такролимуса и полимурамила — на цитокиновый профиль определяли на мышах-самцах линии Balb/с и C57B1/6 массой 20±2 г. Первоначально вводили 0,3 мл водно-спиртового р-ра им-муносупрессора — такролимуса в дозе 0,5 мг/мышь. Дальнейшее введение поли-мурамила выполняли спустя 30-40 мин в дозе 10 и 50 мкг/мышь внутримышечно. Группе контрольных животных вводили физ. р-р и р-р полимурамила (10 мкг/мышь) без предварительного введения такролиму-са. Образцы плазмы крови для определения уровня цитокинов отбирали через 1,5 ч от начала эксперимента.

Для определения иммуномодулирующей активности полимурамила по его влиянию на продукцию ФНО-альфа (TNF-a) и др. цитокинов использована модель гриппа на мышах линии Balb/с массой 16-18 г (мышиная модель острого воспаления). Применялся штамм вируса гриппа H5N2, адаптированный к мышам и вызывающий при интраназальном заражении летальную двухстороннюю пневмонию. Полимура-мил вводился ежедневно внутримышечно в объеме 0,5 мл. Длительность введения — 5 дней, начиная со второго дня после заражения (через 16-18 ч после заражения). На подготовительном этапе проводили определение дозы вируса гриппа H5N2 для интраназального заражения: была

подобрана доза, вызывающая гибель 80% мышей в контрольной группе (без введения препарата). Действие полимурамила изучали в трех дозах: 50, 10 и 2 мкг/мышь (~ 900, 180 и 36 мкг/кг). Забор плазмы крови проводили у выживших животных на 5-е сут после начала эксперимента в аналогичных первой части исследования условиях.

Результаты исследований

Получен массив первичных данных, позволяющий оценить цитокиновый статус трансгенных гуманизированных мышей NAT1hom, NAT2hom, а также характер и динамику иммунобиологического воздействия лекарственных средств — на примере препаратов иммуносупрессивного действия (такролимус) и иммуномодулиру-ющего (полимурамил) действия — по изменению содержания 23 цитокинов и хемо-кинов во времени.

Сопоставление полученного нами цито-кинового профиля плазмы крови трансгенных мышей NAT1hom, NAT2hom с открытыми базами данных цитокинового статуса (рис. 1) инбредных линий мышей и человека (CytReg и др.) отражает иммунологическую близость генетически-модифициро-ванных линий к цитокиновому профилю человека.

Анализ динамических изменений профиля цитокинов для инбредных линий С57В1/6 и Ва1Ь/с показывает, что при введении животным полимурамила формируется отчетливый цитокиновый ответ. При этом наиболее выраженная реакция касается таких цитокинов и хемокинов, как ^-1Ь, ^-5, МСР-1, ^-6, ЮТ-а, G-CSF, RANTES, М1Р-1Ь и шч-у.

Типичная динамика содержания TNF-а в плазме крови испытуемых животных представлена на рис. 2.

Рис. 1. Сравнительная гистограмма цитокинового профиля плазмы лабораторных трансгенных животных NAT1hom, NAT2hom и C57Bl/6.

Fig. 1. Comparative histogram of the plasma cytokine profile of laboratory transgenic animals NAT1hom, NAT2hom and C57BI/6.

Рис. 2. Динамика концентрации ФНО-альфа (TNF-a) в плазме крови мышей C57BI/6 через 5-10-15-30-45 мин, 1-1,5-2-3-8-24 ч после однократного введения полимурамила в дозе 50 мкг/мышь.

Fig. 2. Dynamics of the concentration of TNF-alpha (TNF-a) in the blood plasma of C57BI/6 mice after 5-10-15-3045 min, 1-1.5-2-3-8-24 h after a single injection of Polymuramil at a dose of 50 ¡ig per mouse.

Установлено, что фармакодинамика полимурамила, оцениваемая по уровню ФНО-альфа, имеет несколько максимумов: первый после в/м введения (50 мкг/мышь) по ФНО-альфа наблюдается при 10 мин, следующий — при 45-60 мин и максимальный — на 24 ч (рис. 2). Подобный волнообразный характер продукции TNF-a и ряда др. цитокинов (1Ъ-6, ГЬ-10) является отличительной особенностью фармакокине-тики и фармакодинамики иммуномодули-рующего действия препарата. Причинами таких закономерностей могут быть поли-компонентность состава полимурамила, отличающая его от индивидуальных соединений мурамилпептидов (МДП, глюкоза-минил-МДП и др.).

Нами установлено, что полимурамил в условиях иммуносупрессивной модели оказывает восстанавливающее действие на уровень циркулирующего ФНО-альфа, увеличивая в рамках эксперимента продукцию цитокина в 10-30 раз по сравнению с группой животных, получивших только иммуносупрессор — такролимус. Замечено, что данные эффекты развиваются в короткие

промежутки времени (до 2 ч) и сопряжены с выживаемостью животных (рис. 3).

В качестве модели острого воспаления использовалась модель экспериментального гриппа на мышах. Было показано, что у животных с экспериментальным гриппом внутримышечное введение полимурамила в дозе 10 мкг/мышь подавляет продукцию ТЫБ-а, приближая его значение к уровню продукции TNF-a интактных животных.

Выводы

Впервые получены данные цитокинового профиля трансгенных гуманизированных мышей NAT1hom, NAT2hom. Выявлена иммунологическая сопоставимость данных цитокинового статуса трансгенных линий с открытыми базами данных по цитокино-вому статусу человека.

Впервые получены экспериментальные данные фармакодинамики иммунологического лекарственного средства — полимурамила.

Результаты исследования фармакодина-мики полимурамила по изменению уровней

Модель иммуносуппресивного воздействия Такролимуса (0,5 мг/мышь)

2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200

1248.49

J

110.76

1764.73

1

ПМв/м после ПМв/м после Контроль (физ. р-р) Такролимус per os Контроль (ПМ без Такролимуса (50 Такролимуса (10 (0,5 мг/мышь) Такролимуса)

мкг/мышь) мкг/мышь)

Рис. 3. Уровень ФНО-альфа в образцах плазмы крови мышей после введения полимурамила (ПМ), 50 и 10 мкг/мышь, с предварительно индуцированной иммуносупрессией введением такролимуса.

Fig. 3. Levels of TNF-alpha in mouse plasma samples after administration of Polymuramil (PM), 50 and 10 fg per mouse, with pre-induced immunosuppression with Tacrolimus.

TNF-a (Модель гриппа, ПМ)

600

500

481.38

326.21

155.23

-

ПМ, в/м, 10 мкг/мышь

Контроль

Норма

Рис. 4. Уровень TNF-a в плазме крови мышей Balb/c (ПМ, в/м, 10 мкг/мышь — уровень TNF-a в плазме крови мышей после заражения гриппом и 5 ежедневных введений препарата полимурамил внутримышечно в дозе 10 мкг/мышь. Контроль — уровень TNF-a в плазме крови мышей после заражения гриппом. Норма — уровень TNF-a в плазме крови здоровых мышей).

Fig. 4. Levels of TNF-a in Balb/c mouse plasma (PM, IM, 10 fg per mouse — the level of TNF-a in the mouse blood plasma after infecting with influenza viruses and 5 daily Polyrammyl injections intramuscularly at a dose of 10 fg per mouse. Control — the level of TNF-a in the mouse blood plasma after infecting with influenza viruses. Norm — the level of TNF-a in the blood plasma of healthy mice).

ряда цитокинов и хемокинов (ФНО-альфа, !Ь-6, !Ь-10) в плазме крови подтверждают иммуномодyлирующее действие препарата. Наличие нескольких максимумов концентрации большинства изученных цитокинов в плазме крови после введения полимура-мила может отражать наличие в составе этого иммуномодулятора трех действующих

компонентов и объясняться фазным включением в высвобождение/продукцию цито-кинов разных по локализации в организме клеток-продуцентов. Первый пик, вероятно, связан с выбросом цитокинов в зоне первичного введения препарата и клетками крови, второй пик — с высвобождением цитокинов в тканях в результате тканевого распределе-

ния полимурамила из системного кровотока. Третий пик, обнаруженный в отношении ФНО-альфа и некоторых других цитокинов через 24 ч после введения препарата, можно трактовать как активацию синтеза этих молекул de novo.

Эксперимент на мышиной модели гриппа подтверждает иммуномодулирующую активность полимурамила при внутримышечном введении в условиях острого воспаления. Внутримышечное введение поли-мурамила достоверно снижает избыточную

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ | REFERENCES

1. Каркищенко В.Н., Дуля М.С., Хвостов Д.В., Агельдинов Р.А. К фармакодинамике производных флуорена — тилорона и ингината — на основе ингибирования N-ацетилтрансфераз и продукции цитокинов. Биомедицина. 2017;(4):34-45. [Karkischenko V.N., Dulya M.S., Khvostov D.V., Ageldinov R.A. K farmakodinamike proizvodnykh fluorena — tilorona i inginata — na osnove ingibiro-vaniya N-atsetiltransferaz i produktsii tsitokinov [To the pharmacodynamics of fluorene — thylorone and ininate derivatives — based on inhibition of N-acet-yltransferases and cytokine production]. Biomedicine. 2017;(4):34-45. (In Russian)].

2. Каркищенко В.Н., Рябых В.П., Каркищенко Н.Н., Дуля М.С., Езерский В.А., Колоскова Е.М., Лазарев В.Н., Максименко С.В., Петрова Н.В., Столярова В.Н., Трубицина Т.П. Молекулярно-генетиче-ские аспекты технологии получения трансгенных мышей с интегрированными генами N-ацетил-трансферазы (NAT1 и NAT2) человека. Биомедицина. 2016;(1):4-18. [Karkischenko V.N., Ryabykh V.P., Karkischenko N.N., Dulya M.S., Ezerskiy V.A., Koloskova E.M., Lazarev V.N., Maksimenko S.V., Petrova N.V., Stolyarova V.N., Trubitsyna T.P. Molekulyarno-geneticheskiye aspekty tekhnologii po-lucheniya transgennykh myshey s integrirovannymi genami N-atsetiltransferazy (NAT1 i NAT2) cheloveka [Molecular and genetic aspects of technology for producing transgenic mice with integrated N-acetyltrans-ferase genes (NAT1 and NAT2) in humans]. Biomedicine. 2016;(1):4-18. (In Russian)].

3. Каркищенко Н.Н., Рябых В.П., Колоскова Е.М., Каркищенко В.Н. Создание гуманизированных мышей для фармакотоксикологических исследований (успехи, неудачи и перспективы). Биомедицина. 2014;(3):4-22. [Karkischenko N.N., Ryabykh V.P., Koloskova E.M., Karkischenko V.N. Sozdanie guman-izirovannykh myshey dlya farmakotoksikologiches-kikh issledovaniy (uspekhi, neudachi i perspektivy)

продукцию провоспалительного цитокина TNF-a.

На модели иммуносупрессии, индуцированной такролимусом, полимурамил оказывал восстанавливающее действие на уровень циркулирующего ФНО-альфа, увеличивая в рамках эксперимента продукцию цитокина в 10-50 раз по сравнению с группой животных, подверженных иммуносупрессии. Установлено, что данные эффекты развиваются в короткие промежутки времени (до 2 ч).

[Creation of humanized mice for pharmacotoxicolog-ical studies (successes, failures and prospects)]. Biomedicine. 2014;(3):4-22. (In Russian)].

4. Петрова Н.В., Слободенюк В.В. Молекулярно-эпи-генетические исследования трансгенных мышей с интегрированными генами NAT1 и NAT2 человека в фармакологии. Экспериментальная и клиническая фармакология. Прил. Мат-лы к 6-й Межд. конф. «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам». 2015;78:49. [Petrova N.V., Slobodenyuk V.V. Molekulyarno-epigeneticheskiye issledovaniya trans-gennykh myshey s integrirovannymi genami NAT1 i NAT2 cheloveka v farmakologii [Molecular and epigenetic studies of transgenic mice with integrated human NAT1 and NAT2 genes in pharmacology]. Eksperimental'naya i klinicheskaya farmakologiya. Pril. Mat-ly k 6-j Mezhd. konf. «Biologicheskiye os-novy individual'noy chuvstvitel'nosti kpsikhotropnym sredstvam» [Experimental and clinical pharmacology. Application. Materials for the 6th International Conference "Biological Basis of Individual Sensitivity to Psychotropic Drugs"]. 2015;78:49. (In Russian)].

5. Рябых В.П., Колоскова Е.М., Езерский В.А., Трубицина Т.П., Максименко С.В. О перспективах получения трансгенных мышей-биомоделей для фармакологических и токсикологических исследований. Проблемы биологии продуктивных животных. 2015;2:5-22. [Ryabykh V.P., Koloskova E.M., Ezerskiy V.A., Trubitsyna T.P., Maksimenko S.V. O pers-pektivakh polucheniya transgennykh myshey-biomod-eley dlya farmakologicheskikh i toksikologicheskikh issledovaniy [On the prospects for obtaining trans-genic mice-biomodels for pharmacological and toxi-cological studies]. Problemy biologii produktivnykh zhivotnykh [Problems of the biology of productive animals]. 2015;2:5-22. (In Russian)].

6. Хаитов Р.М., Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Роль паттерн-распознающих рецепторов во врожден-

ном и адаптивном иммунитете. Иммунология. 2009;30:66-76. [Khaitov R.M., Pashchenkov M.V., Pi-negin B.V. Rol' pattern-raspoznayushchikh retseptorov vo vrozhdennom i adaptivnom immunitete [The role of pattern-recognizing receptors in innate and adaptive immunity]. Immunology. 2009;30:66-76. (In Russian)].

7. Banchereau J., Briere F., Caux C., et al. Immunobiology of dendritic cells. Annu. Rev. Immunol. 2000;18:767-811.

8. Bernasconi N.L., Onai N., Lanzavecchia A. A role for Toll-like receptors in acquired immunity: up-regulation of TLR9 by BCR triggering in naive B cells and constitutive expression in memory B cells. Blood. 2003;101:4500-04.

9. Beutler B. Inferences, questions and possibilities in Toll-like receptor signaling. Nature. 2004;430:257-263.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ | INFORMATION ABOUT THE AUTHORS

Дуля Максим Сергеевич*, ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России»; e-mail: mdulya@gmail.com

Каркищенко Владислав Николаевич, д.м.н., проф., ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России»; e-mail: scbmt@yandex.ru

Хвостов Даниил Владиславович, ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России»; e-mail: daniil hvostov@mail.ru

Агельдинов Руслан Андреевич, ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России»; e-mail: ageldinov@gmail.com

Каркищенко Николай Николаевич, д.м.н., проф., чл.-корр. РАН, акад. РАРАН, ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России»;

e-mail: niknik2808@yandex.ru

Maxim S. Dulya*, Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; e-mail: mdulya@gmail.com

Vladislav N. Karkischenko, Dr. Sci. (Med.), Prof., Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; e-mail: scbmt@yandex.ru

Daniil V. Khvostov, Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; e-mail: daniil hvostov@mail.ru

Ruslan A. Ageldinov, Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; e-mail: ageldinov@gmail.com

Nikolay N. Karkischenko, Dr. Sci. (Med.), Prof., Corresponding Member of the Russian Academy of Sciences, Academician of the Russian Academy of Rocket and Artillery Sciences, Scientific Center of Biomedical Technologies of the Federal Medical and Biological Agency of Russia; e-mail: niknik2808@yandex.ru

* Автор, ответственный за переписку / Corresponding author