CC BY
55
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2020 - Т. 27, № 4 - С. 102-105
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2020 - V. 27, № 4 - P. 102-105
УДК: 577.151.6 DOI: 10.24411/1609-2163-2020-16679
ЦИТОХРОМ C КАК ФАКУЛЬТАТИВНЫЙ ФЕРМЕНТ-ЛИПОПЕРОКСИДАЗА МИТОХОНДРИЙ
Л.А. РОМОДИН*, Ю.А. ВЛАДИМИРОВ**
*Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина», ул. Академика Скрябина, д. 23, г. Москва, 109472, Россия, e-mail: rla2904@mail.ru **Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», Ленинские горы, д. 1, г. Москва, 119991, Россия, e-mail: yuvlad@mail.ru
Аннотация. Ключевую роль при запуске апоптоза по митохондриальному пути играет цитохром C, который, образуя комплекс с фосфолипидами, приобретает пероксидазную активность. Вследствие катализируемой им пероксидазной реакции происходит разрушение мембран митохондрий. Это приводит к выходу различных проапоптотических факторов в цитоплазму клетки. Цель работы - изучение липопероксидазной активности комплекса цитохрома C с кардиолипином. Материалы и методы исследования. Использован метод активированной хемилюминесценции. Результаты и их обсуждение. До настоящего исследования никем не был оценен возможный вклад свободного негемового железа, которое может находиться в пробе, в хе-милюминесценцию системы комплекс цитохрома C с кардиолипином-перекись водорода. Нами установлено, что хемилюми-несценция данной системы реально обусловлена именно активностью комплекса цитохрома C с кардиолипином, и метод активированной хемилюминесценции на самом деле подходит для его изучения. Также показана пероксидазная активность интакт-ных митохондрий при сравнительном использовании двух активаторов хемилюминесценции: coumarin-334 и coumarin-525. Эти активаторы усиливают хемилюминесценцию, вызванную исключительно реакцией с участием липидных радикалов. Обнаруженная хемилюминесценция суспензии митохондрий в присутствии экзогенной перекиси водорода показывает, что живые митохондрии содержат компонент, обладающий липопероксидазной активностью. Выводы. Результаты исследования позволяют сделать вывод о том, что комплекс цитохрома C с кардиолипином проявляет свойства липопероксидазы не только в составе молекулярной модели in vitro, но и in vivo.
Ключевые слова: цитохром C, кардиолипин, комплекс цитохрома C с кардиолипином, хемилюминесценция, орто-фе-нантролин, этилендиаминтетраацетат пероксидаза хрена, апоптоз, перекись водорода, липопероксидазная реакция.
CYTOCHROME C AS A FACULTATIVE MITOCHONDRIA ENZYME-LIPOPEROXIDASE
L.A. ROMODIN*, Yu.A. VLADIMIROV**
*Federal state budgetary educational institution of higher education Moscow state Academy of veterinary medicine and biotechnology-MBA named after K. I. Scriabin, 23, Academician Scriabin Str., Moscow, 109472, Russia, e-mail: rla2904@mail.ru **Federal state budgetary educational institution of higher education "Lomonosov Moscow State University", Leninskie Gory, 1, Moscow, 119991, Russia, e-mail: yuvlad@mail.ru
Abstract. Many researchers consider a key role in initiation of apoptosis along the mitochondrial pathway to be enhanced by cytochrome c, one of the components of the mitochondrial respiratory chain, which acquires peroxidase activity by forming a complex with phospholipids. Mitochondrial membranes are destroyed affected by the peroxidase reaction catalyzed by this supra-molecular nanopar-ticle, resulting in the release of various pro-apoptotic factors into the cellular cytoplasm, ultimately leading to the development of an apoptosis pathway. The study of lipoperoxidase activity of the cytochrome c with cardiolipin complex is conducted via activated chemi-luminescence. However, prior to this study, no assessment of the potential contribution of free non-heme iron, which can be inserted into the sample, into chemiluminescence of the system of cytochrome c complex with cardiolipin-hydrogen peroxide. It was found during the study process, that chemiluminescence of this system is indeed generated by the activity of the cytochrome c-cardiolipin complex, and the method of activated chemiluminescence is actually suitable for its study. Wealso showed peroxidase activity of intact mitochondria in the comparative application of two chemiluminescence activators: coumarin-334 and coumarin-525. These activators enhance chemiluminescence caused solely by a reaction involving lipid radicals. The detected chemiluminescence of a suspension of mitochondria in the presence of exogenous hydrogen peroxide shows that living mitochondria contain a component with lipoperoxidase activity. This suggests that the cytochrome c-cardiolipin complex exhibits lipoperoxidase properties not only in the molecular model in vitro, but also in vivo.
Keywords: cytochrome c, cardiolipin, cytochrome c-cardiolipin complex, chemiluminescence, ortho-phenanthroline, ethylenedi-aminetetraacetate, horseradish peroxidase apoptosis, hydrogen peroxide, lipoperoxidase reaction.
Введение. Комплекс цитохрома C с кардиолипином играет основополагающую роль при запуске апоптоза по внутреннему, митохондриальному типу, вследствие липопероксидазной активности цитохрома С (Цитр, которую он приобретает вследствие изменения конформации под действием молекул кардиолипина [5]. Главная функция Цит^ -
перенос электронов в дыхательной цепи митохондрий [14], кроме того, свободный Цит^ оказавшись в цитозоле, запускает каспазный каскад реакций апоптоза [16]. Эти две функции Циг^ выполняет, не связываясь с фосфолипидами. Липопероксидазную активность молекула Цит^ приобретает исключительно после изменения конформации в результате
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2020 - Т. 27, № 4 - С. 102-105 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2020 - V. 27, № 4 - P. 102-105
образования комплекса с фосфолипидами, прежде всего кардиолипином [5,7]. Поэтому ЦитС нельзя считать классической пероксидазой по типу перокси-дазы хрена (ПХ), миелопероксидазы и т.п. ЦитС больше подойдёт термин «факультативная перокси-даза», обозначающий, что данный белок в нативном состоянии не обладает пероксидазной активностью, а приобретает её лишь при определенных условиях. В живой клетке этим условием является его связывание с кардиолипином.
Липопероксидазную активность ЦитС-КЛ изучают методом регистрации хемилюминесценции (ХЛ) - сверхслабого свечения в видимой области спектра, возникающего в результате протекания свободнора-дикальных реакций [3,10]. Но заметим, что ХЛ-сигнал, фиксируемый при изучении свойств ЦитС-КЛ, ещё не говорит, строго говоря, о липоперокси-дазной активности ЦитС-КЛ: ведь в образце может протекать радикальное окисление липидов в результате реакции Фентона, катализируемой свободными ионами железа [8]. Этот процесс, к слову, является ключевым фактором при запуске ферроптоза -некрозоподобной запрограммированной гибели клеток [12], впервые описанной в 2012 году в работе [13]. Поэтому появляется необходимость проверки возможной роли свободного (не входящего в гем ЦитС) железа в ХЛ системы, в которой присутствует ЦитС-КЛ. Имеются данные, о разрушении ЦитС при действии перекиси водорода [6] и липидных гидроперекисей [2], что говорит о возможности участия вышедших из гема катионов Fe2+ в наблюдаемой ХЛ изучаемой системы. Поэтому нами было проведено исследование с целью оценки возможной роли негемового железа в ХЛ системы ЦитС-кардиолипин.
При решении данной задачи целесообразно также оценить липопероксидазную активность интактных митохондрий. Это нужно для того, чтобы удостовериться в том, что ЦитС-КЛ проявляет липопероксидаз-ные свойства не только in vitro, в составе молекулярной модели, но и внутри живой митохондрии.
Экспериментальные методики исследования. Исследования по измерению ХЛ проводились на хемилюминометре «Lum-5773» фирмы ООО «ДИ-Софт» (Россия), подключённом к компьютеру с программным обеспечением «PowerGraph». Перед началом каждой серии измерений хемилюминометр калибровался по ураниловому стеклу.
Влияние о-фенантролина и ЭДТА на ХЛ в системе ионы Fe2+- соевый лецитин. В пустую кювету мы добавляли 50 мкл 2 мМ железного купороса (FeSO4) и 50 мкл раствора орто-фенантролина или ЭДТА различных концентраций и начинали регистрацию ХЛ. Через 30 секунд в кювету хемилюминометра мы добавляли 800 мкл раствора, содержащего 25 мкл 1 мМ ме-танольного раствора С-334 и 775 мкл 20 мМ фосфатного буфера. На 60-ой секунде регистрации ХЛ мы добавляли 200 мкл раствора соевого лецитина концентрацией 10 мг/мл. Далее регистрировали свечение в течение необходимого времени.
Влияние о-фенантролина и EDTA на ХЛ в системе
ПХ - соевый лецитин. В пустую кювету мы добавляли 50 мкл 210 мкМ ПХ и 50 мкл раствора орто-фенантро-лина или ЭДТА и начинали регистрацию ХЛ. Через 30 секунд в кювету мы добавляли 800 мкл раствора, содержащего 25 мкл 1 мМ метанольного раствора C-334 и 775 мкл 20 мМ фосфатного буфера. На 60-ой секунде регистрации ХЛ мы добавляли 200 мкл раствора соевого лецитина концентрацией 10 мг/мл. Далее регистрировали свечение в течение необходимого времени.
Влияние о-фенантролина и ЭДТА на ХЛ в системе цитохром C - бычий кардиолипин. В пустую кювету хемилюминометра мы добавляли 50 мкл 210 мкМ Ци^ и 50 мкл растворов орто-фенантролин или ЭДТА различных концентраций и начинали регистрацию хемилюминесценции. Через 30 секунд в кювету мы добавляли 800 мкл раствора, содержащего 25 мкл 1 мМ метанольного раствора ^334 и 775 мкл 20 мМ фосфатного буфера. На 60-ой секунде регистрации ХЛ мы добавляли 100 мкл 6,6 мМ бычьего кардиолипина. Далее регистрировали свечение в течение необходимого времени.
Изучение хемилюминесценции суспензии митохондрий под действием перекиси водорода в присутствии азида натрия. В пустую кювету хемилюминометра мы добавляли 920 мкл суспензии митохондрий, выделенных по описанной ниже методике. Примерно через 230 секунд в кювету мы добавляли 800 мкл раствора, содержащего 25 мкл 1 мМ метанольного раствора ^334 или ^525 или 25 мкл метанола (при измерении собственной ХЛ); примерно на 500 секунде регистрации ХЛ мы добавляли 5 мкл перекиси водорода; на 750-ой секунде мы добавляли 50 мкл 2 мМ азида натрия, после чего на 900-ой секунде от момента начала регистрации ХЛ мы добавляли ещё 5 мкл перекиси водорода. Далее регистрировали ХЛ в течение необходимого времени.
Выделение митохондрий из печени крыс. Митохондрии для исследования мы выделяли из печени самцов крыс линии Wistar, массой (275±25) г. Эвтаназия осуществлялась методом удушения крысы углекислым газом. Образец печени массой около 4 г промывался в буфере выделения (10 мМ ИЕРЕБ, 1 мМ ЭДТА, 70 мМ сахароза и 200 мМ маннитол, рН 7,5), после чего гомогенизировался в 40 мл буфера выделения в присутствии 1 мг/мл дилипидированного бычьего сывороточного альбумина. Далее гомогенат был подвержен центрифугированию при 600 G в течение 5 минут, после чего отобранная надосадочная жидкость центрифугировалась ещё 10 минут при 11000 G, а полученный после этого осадок ресуспензировался в 40 мл буфера выделения. Полученная суспензия снова центрифугировалась в течение 5 минут при 600 G с последующем 10-минутным центрифугированием надосадочной жидкости при 11000 & После полученный осадок мы ресуспензировали в буфере хранения (10 мМ HEPES, 250 мМ сахароза, 1 мМ АТФ, 0,08 мМ АДФ, 5 мМ сукцината натрия и 2 мМ KHPO4, рН 7,5) при температуре 0-4 °С на льду.
ВЕСТНИК НРВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНРЛРГИЙ - 2020 - Т. 27, № 4 - С. 102-105 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2020 - V. 27, № 4 - P. 102-105
Результаты и их обсуждение. Определение возможной роли негемового железа в хемилюминесценции ЦитС-КЛ. Для того, чтобы удостовериться, что данные по пероксидазной активности ЦитС-КЛ, полученные методом измерения ХЛ достоверны, нами была изучена возможная роль негемового железа в хемилюминесценции системы ЦитС-кардиолипин путём регистрации ХЛ трёх систем: соевый лецитин-ионы Fe2+, соевый лецитин-ПХ, ЦитС-кардиолипин, - в присутствии комплексонов на железо (o-фенан-тролина и ЭДТА), взятых в различных концентрациях. Из графиков на рис. 1* чётко видно, что o-фе-нантролин и ЭДТА подавляют Fe2+-индуцированную ХЛ, не подавляя её в системе соевый лецитин-ПХ и ЦитС-кардиолипин.
Изучение липопероксидазной активности митохондрий из печени крысы Rattus norvegicus линии Wistar. В предыдущих работах по изучению липопероксидазной активности ЦитС-КЛ эксперименты ставились на молекулярных моделях, in vitro. На наш взгляд, имеет место необходимость провести ХЛ-исследование липопероксидазной активности митохондрий, т.к. обнаружение их ХЛ в присутствии экзогенной перекиси водорода говорило бы о наличии в них компонента, который проявляет пероксидазную активность, каковым и является ЦитС-КЛ.
Результаты эксперимента представлены на рис. 2. После первого внесения H2O2 видна быстроспадающа-яся вспышка с более высокой амплитудой в пробе с кумарином С-334 или С-525 (чёрные кривые) в сравнении с пробой, не содержащей производного кумарина (красная кривая). Это свидетельствует об обусловленности этой вспышки именно реакцией с участием ли-пидных радикалов, так как С-334 и С-525 - специфические активаторы именно на них. По завершении этой вспышки мы добавили в систему азид натрия, а после этого - перекись водорода в количестве, равном добавленному в первый раз. При этом вспышка ХЛ стала продолжительнее во времени и выше по амплитуде в сравнении с первой вспышкой, как в пробах, содержащих активатор ХЛ, так и в пробе без него.
Более выраженная ХЛ в присутствии азида натрия обусловлено его действием по подавлению митохондриальных каталаз, вследствие чего они не могли разлагать перекись водорода, которая уже целиком шла на участие в реакции разложения, катализируемую ЦитС-КЛ с параллельным образованием радикалов липидов.
Отметим различие формы ХЛ-кривых в присутствии С-334 (рис. 2А) и С-525 (рис. 2Б). Возможно, это обусловлено тем, что С-525 имеет в своей структуре бензимидазольную группировку, которая обуславливает проявление им антиоксидантных свойств [15].
Определение возможной роли негемового железа в хемилюминесценции ЦитС-КЛ. Подозрение на то, что наблюдаемая нами ХЛ в системе ЦитС-кардиолипин, может быть обусловлена ионами Fe2+, - появилось у нас вследствие того, что кинетика ХЛ в присутствии
ЦитС-КЛ оказалась схожей с кинетикой в системе, где ХЛ запускалась ионами Fe2+ [1]. Кроме того, в пользу возможности участия ионов Fe2+ в наблюдаемой ХЛ выступают литературные данные о разрушении ЦитС под влиянием перекиси водорода H2O2 [6] и липидных гидроперекисей [2].
Возможность вклада негемового железа в ХЛ, наблюдаемого в системе ЦитС-кардиолипин в настоящей работе определяли, сравнивая то, как влияли комплексоны на железо (о-фенантролин и ЭДТА) на ХЛ в присутствии липидного субстрата (соевого лецитина), запускаемую ионами Fe2+ или ПХ, с тем, как те же комплексоны влияли на ХЛ, наблюдаемую в системе ЦитС-кардиолипин. Предполагалось, что ком-плексоны будут подавлять запускаемую свободными катионами Fe2+ ХЛ, и не будут подавлять её в случае ферментативной квазилипоксигеназной реакции.
Заметим, что концентрации ПХ и ЦитС были одинаковыми (10 мкМ), а концентрация Fe2+ при этом была равна 91 мкМ. Выбор такой концентрации Fe2+ обусловлен тем, что при ней наблюдается примерно такая амплитуда ХЛ, какую обеспечивают ПХ и ЦитС при концентрациях 10 мкМ: липоксигеназный эффект от свободных катионов Fe2+почти в 10 раз меньше, чем от пероксидаз, а поскольку ПХ является классической пероксидазой, то сходство ХЛ систем ЦитС-кардиолипин и соевый ПХ-лецитин можно вполне считать доказательством того, что ЦитС-КЛ функционально является пероксидазой.
Из ХЛ-кривых на рис. 1 следует, что и ЭДТА, и о-фенантролин дозозависимо подавляют индуцированную свободными катионами Fe2+ ХЛ. Но при этом те же концентрации этих комплексонов не подавляют ХЛ, индуцированную ЦитС-КЛ ПХ. ПХ - это классическая пероксидаза, поэтому наблюдаемую в её присутствии ХЛ рассматривать как ХЛ, обусловленную именно ферментом-пероксидазой, а не свободными катионами Fe2+. Поэтому то, что о-фенан-тролин и ЭДТА не подавляют ХЛ в системе ЦитС -кар-диолипин аналогично системе ПХ-лецитин, на наш взгляд, можно считать достаточным доказательством того, что ХЛ в системе ЦитС-кардиолипин обусловлена именно активностью комплекса ЦитС-КЛ, а не действием свободных катионов Fe2+, которые могли бы появиться в системе вследствие, к примеру, разрушения препарата ЦитС во время хранения.
Изучение липопероксидазной активности в изолированных митохондриях печени крысы Rattus norvegicus линии Wistar. Нами ставилась цель проверить, обладают ли митохондрии липопероксидазной активностью, описанными нами на молекулярной модели -системе ЦитС-кардиолипин, что означало бы то, что описанные нами эффекты для ЦитС-КЛ in vitro имеют место и in vivo.
Наличие квазилипоксигеназной активности проявляется в ХЛ без присутствия в системе перекиси водорода или при низких её концентрациях, липопероксидазной - в ХЛ при высоких концентрациях H2O2
Рисунки данной статьи представлены на обложке 3
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2020 - Т. 27, № 4 - С. 102-105
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2020 - V. 27, № 4 - P. 102-105
[9]. Стоит отметить, что наличие неактивированной ХЛ митохондрий было обнаружено ещё в 1960-х годах Ю.А. Владимировым и О.Ф. Львовой, причем сила свечения коррелировала, по данным авторов [3,4,11] со способностью митохондрий к окислительному фосфорилированию. Предложенным объяснением спонтанной собственной ХЛ митохондрий был недостаток ферментов, катализирующих ^-окисление жирных кислот, приводящий к прямому их окислению молекулярным кислородом, что ведёт к образованию перекисей липидов с дальнейшим испусканием ими квантов света [4]. Но также вполне возможно, что эта ХЛ - результат липоксигеназной активности ЦитС-КЛ, находящимся в митохондриях.
Выводы:
1. Установлена обусловленность ХЛ в системе ЦитС-КЛ-перекись водорода липоксигеназной и ли-попероксидазной активностью ЦитС-КЛ, а не действием свободных катионов Fe2+.
2. Показана липопероксидазная активность митохондрий, усиливающаяся в присутствии азида натрия, что вероятнее всего, вызвано подавлением активности митохондриальных каталаз.
Литература / References
1. Васильева О.В., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Совместное действие флавоноидов, аскорбата и альфа-токоферола на Fe2+-индуцироанное окисление фосфолипидных липосом // Биологические мембраны. 2000. Т. 17, №1. C. 42-49 / Vasil'eva OV, Lyubitskiy OB, Klebanov GI, Vladimirov YuA. Sovmestnoe deystvie flavonoidov, askorbata i al'fa-tokoferola na Fe2+-indutsiroannoe okislenie fosfolipidnykh liposom [Combined effect of flavonoids, ascorbate and alpha-tocopherol on Fe2+ -induced oxidation of phospholipid liposomes]. Biologicheskie membrany. 2000;17(1):42-9. Russian.
2. Викулина А.С. Пероксидация липидов под действием цитохрома c и его комплекса с анионными липидами и её роль в апоптозе. Дисс. к.б.н. М., 2015 / Vikulina AS. Peroksidatsiya lipidov pod deystviem tsitokhroma c i ego kompleksa s anionnymi lipidami i ee rol' v apoptoze [Lipid peroxidation under the action of cytochrome c and its complex with anionic lipids and its role in apoptosis] [dissertation]. Moscow; 2015. Russian.
3. Владимиров Ю.А., Львова О.Ф. Изучение сверхслабых свечений гомогенатов и кашицы печени. Биофизика клетки. М.: Наука, 1965. С. 74-83 / Vladimirov YuA, L'vova OF. Izuchenie sverkhslabykh svecheniy gomogenatov i kashitsy pecheni. Biofizika kletki [Study of ultra-weak luminescence of liver homogenates and mush. Biophysics of the cell]. Moscow: Nauka; 1965. Russian.
4. Владимиров Ю.А., Львова О.Ф., Черемисина З.П. Сверхслабое свечение митохондрий и его связь с ферментативным окислением липидов // Биохимия. 1966. Т. 31, №3. C. 507-514 / Vladimirov YuA, L'vova OF, Cheremisina ZP. Sverkhslaboe svechenie mitokhondriy i ego svyaz' s fermentativnym okisleniem lipidov [Super-weak luminescence of mitochondria and its relation to enzymatic oxidation of lipids]. Biokhimiya. 1966;31(3):507-14. Russian.
5. Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В., Алексеев А.В. Молекулярные механизмы апоптоза. Структура комплекса цитохрома c с кардиолипином. Обзор // Биохимия. 2013. Т. 78, №10. С. 1391-1404 / Vladimirov YuA, Proskurnina EV, Alekseev AV. Molekulyarnye mekhanizmy apoptoza. Struktura kompleksa tsitokhroma c s kardiolipinom. Obzor [Molecular mechanisms of apoptosis. Structure of the cytochrome c complex with cardiolipin. Review]. Biokhimiya. 2013;78(10):1391-404. Russian.
6. Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В., Измайлов Д.Ю.,
Новиков А.А., Брусничкин А., Осипов А.Н., Каган В.Е. Кардиолипин активирует пероксидазную активность цитохрома с, потому что увеличивает доступность гема для H2O2 // Биохимия. 2006. Т. 71, №9. С. 1225-1233 / Vladimirov YuA, Proskurnina EV, Izmaylov DYu, Novikov AA, Brusnichkin A, Osipov AN, Kagan VE. Kardiolipin aktiviruet peroksidaznuyu aktivnost' tsitokhroma s, potomu chto uvelichivaet dostupnost' gema dlya H2O2 [Cardiolipin activates cytochrome C peroxidase activity because it increases heme availability for H2O2]. Biokhimiya. 2006;71(9):1225-33. Russian.
7. Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В., Измайлов Д.Ю., Новиков А.А., Брусничкин А., Осипов А.Н., Каган В.Е. Механизм активации пероксидазной активности цитохрома с кардиолипином // Биохимия. 2006. Т. 91, №9. С. 1215-1224 / Vladimirov YuA, Proskurnina EV, Izmaylov DYu, Novikov AA, Brusnichkin A, Osipov AN, Kagan VE. Mekhanizm aktivatsii peroksidaznoy aktivnosti tsitokhroma s kardiolipinom [The mechanism of activation of the peroxidase activity of cytochrome C cardiolipin]. Biokhimiya. 2006;91(9):1215-24. Russian.
8. Дизрегуляционная патология: Руководство для врачей и биологов. Под. ред. Г.Н. Крыжановского. М.: Медицина, 2002. С. 140151 / Dizregulyatsionnaya patologiya: Rukovodstvo dlya vrachey i biologov. pod. red. GN Kryzhanovskogo [Dysregulatory pathology: a Guide for doctors and biologists. ed. Mr. Kryzhanovsky]. Moscow: Meditsina; 2002. Russian.
9. Дёмин Е.М., Измайлов Д.Ю., Проскурнина Е.В., Владимиров Ю.А. Регуляция радикал-зависимой стадии апоптоза с помощью антиоксидантов. Научный Симпозиум с международным участием Проблемы медицинской биофизики. Москва: факультет фундаментальной медицины МГУ имени М.В. Ломоносова, 2012 / Demin EM, Izmaylov DYu, Proskurnina EV, Vladimirov YuA. Regulyatsiya radikal-zavisimoy stadii apoptoza s pomoshch'yu antioksidantov. Nauchnyy Simpozium s mezhdunarodnym uchastiem Problemy meditsinskoy biofiziki [Regulation of the radical-dependent stage of apoptosis using antioxidants. Scientific Symposium with international participation Problems of medical Biophysics]. Moscow: fakul'tet fundamental'noy meditsiny MGU imeni M.V. Lomonosova; 2012. Russian.
10. Журавлёв А.И. Квантовая биофизика животных и человека: Учеб. пособие. 3-е изд-е. М.: МГАВМиБ, 2009. 474 с. / Zhuravlev AI. Kvantovaya biofizika zhivotnykh i cheloveka: Ucheb. posobie. 3-e izd-e [Quantum Biophysics of animals and humans: Textbook. 3rd ed]. Moscow: MGAVMiB; 2009. Russian.
11. Львова О.Ф., Владимиров Ю.А. Хемилюминесценция митохондрий и её связь с биохимическими процессами // Труды МОИП. 1966. №16. C. 214-217 / L'vova OF, Vladimirov YuA. Khemilyuminestsentsiya mitokhondriy i ee svyaz' s biokhimicheskimi protsessami [Chemiluminescence of mitochondria and its relation to biochemical processes]. Trudy MOIP. 1966;16:214-7. Russian.
12. Chen G., Guo G., Zhou X., Chen H. Potential mechanism of ferroptosis in pancreatic cancer // Oncol Lett. 2020. Vol. 19, N1. P. 579587 / Chen G, Guo G, Zhou X, Chen H. Potential mechanism of ferroptosis in pancreatic cancer. Oncol Lett. 2020;19(1):579-87.
13. Dixon S.J., Lemberg K.M., Lamprecht M.R., Skouta R., Zaitsev E.M., Gleason C.E., Patel D.N., Bauer A.J. Ferroptosis: an iron-dependent form of nonapoptotic cell death // Cell. 2012. Vol. 149, N5. P. 1060-1072 / Dixon SJ, Lemberg KM, Lamprecht MR, Skouta R, Zaitsev EM, Gleason CE, Patel DN, Bauer AJ. Ferroptosis: an iron-dependent form of nonapoptotic cell death. Cell. 2012 ;149(5):1060-72.
14. Heineman W.R., Norris B.J., Goelz J.F. Measurement of enzyme E'values by optically transparent thin layer electrochemical cells // Anal Chem. 1975. Vol. 47, N1. P. 79-84 / Heineman WR, Norris BJ, Goelz JF. Measurement of enzyme E'values by optically transparent thin layer electrochemical cells. Anal Chem. 1975;47(1):79-84.
15. Jiang J., Bakan A., Kapralov A.A., Silva K.I., Huang Z., Amoscato A.A., Peterson J., Garapati V.K. Designing inhibitors of cytochrome c/cardiolipin peroxidase complexes: mitochondria-targeted imidazole-substituted fatty acids // Free Radic Biol Med. 2014. Vol. 71. P. 221-230 / Jiang J, Bakan A, Kapralov AA, Silva K., Huang Z, Amoscato AA, Peterson J, Garapati VK. Designing inhibitors of cytochrome c/cardiolipin peroxidase complexes: mitochondria-targeted imidazole-substituted fatty acids. Free Radic Biol Med. 2014;71:221-30.
16. Liu X., Kim C.N., Yang J., Jemmerson R., Wang X. Induction of apoptotic program in cell-free extracts: requirement for dATP and cytochrome c // Cell. 1996. Vol. 86, N1. P. 147-157 / Liu X, Kim CN, Yang J, Jemmerson R, Wang X. Induction of apoptotic program in cell-free extracts: requirement for dATP and cytochrome c. Cell. 1996;86(1):147-57.
Библиографическая ссылка:
Ромодин Л.А., Владимиров Ю.А. Цитохром С как факультативный фермент-липопероксидаза митохондрий // Вестник новых медицинских технологий. 2020. №4. С. 102-105. БОТ: 10.24411/1609-2163-2020-16679.
Bibliographic reference:
Romodin LA, Vladimirov YuA. Tsitokhrom C kak fakul'tativnyy ferment-lipoperoksidaza mitokhondriy [Cytochrome c as a facultative mitochondria enzyme-lipoperoxidase]. Journal of New Medical Technologies. 2020;4:102-105. DOI: 10.24411/1609-2163-2020-16679. Russian.
