Научная статья на тему 'Цитоархитектоника и фагоцитарная активность нейтрофилов больных раком шейки матки при фемтосекундном лазерном излучении in vitro'

Цитоархитектоника и фагоцитарная активность нейтрофилов больных раком шейки матки при фемтосекундном лазерном излучении in vitro Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
158
39
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
НЕЙТРОФИЛЫ / СКАНИРУЮЩИЙ ЗОНДОВЫЙ МИКРОСКОП / ФЕМТОСЕКУНДНОЕ ЛАЗЕРНОЕ ИЗЛУЧЕНИЕ / NEUTROPHILS / ATOMIC-FORCE MICROSCOPE / FEMTOSECOND LASER RADIATION

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Абакумова Т. В., Генинг Т. П., Антонеева И. И., Арсланова Д. Р., Светухин В. В.

В данной работе представлены результаты влияния высокоинтенсивного фемтосекундного лазерного излучения на морфофункциональное состояние нейтрофилов периферической крови практически здоровых женщин и при раке шейки матки на Ia стадии. Полученные данные позволяют предполагать, что реакция нейтрофилов больных раком шейки матки на Ia стадии существенно и значимо отличается от таковой для нейтрофилов доноров, что, видимо, следует учитывать при использовании фемтосекундного лазерного излучения в данной группе больных.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Абакумова Т. В., Генинг Т. П., Антонеева И. И., Арсланова Д. Р., Светухин В. В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

CYTOARCHITECTONICS AND PHAGOCYTIC ACTIVITY OF NEUTROPHILS SICK OF THE CANCER OF THE NECK OF THE UTERUS AT FEMTOSECOND LASER RADIATION IN VITRO

The article presents the results of high-intensive femtosecond laser radiation effect on morphofunctional state of peripheral blood neutrophils of practically healthy women as well as at cervical carcinoma of Ia stage are presented. The obtained data allow assuming that the neutrophils reaction at women with cervical carcinoma of Ia stage essentially and significantly differs from that of the neutrophils donors' one which, probably, is necessary to consider at applying femtosecond laser radiation in the given group of patients.

Текст научной работы на тему «Цитоархитектоника и фагоцитарная активность нейтрофилов больных раком шейки матки при фемтосекундном лазерном излучении in vitro»

щим относить пациента к одной из трех групп выраженности изменений сердца. При этом наглядной является схема «светофора», когда выявляемые состояния по их прогностической значимости делятся на наиболее значимые - «красный», менее значимые - «желтый» и относящиеся к варианту нормы или не имеющие прогностического значения - «зеленый».

Выводы:

1. На основании ЭКГ критериев у лиц молодого и среднего возраста с определенной вероятностью могут быть предположены изменении со стороны сердца, которые найдут подтверждение при эхокардиографии.

2. Критерии, построенные на одном изолированном ЭКГ параметре, позволяют с чувствительностью до 70% и специфичностью до 40% выделять пациентов с невыраженными и выраженными изменениями сердца.

3. Параметры ЭКГ, статистически значимо различающиеся у пациентов с различной степенью выраженности изменений сердца, могут быть объединены в три совокупности по обнаруживаемым различиям: различия во всех трех группах пациентов, различия между группой с невыраженными изменениями и группами со слабовыраженными и выраженными изменениями, различия между группой со слабовыраженными изменениями и группой с выраженными изменениями.

4. Создание автоматизированной системы на основе ЭКГ может быть полезно на доврачебном уровне для выявления лиц с более или менее значимыми изменениями сердечно-сосудистой системы и оптимизации программы обследования пациентов на этапе скрининга.

Литература

1. Приложение №3 к Приказу Минздравмедпрома РФ от 14 марта 1996 года №90 «О порядке проведения предварительных и периодических медицинских осмотров работников и медицинских регламентах допуска к профессии».

THE COMPARISON OF ELECTROCARDIOGRAPHIC AND ECHOCARDIOGRAPHIC PARAMETERS AT THE STAGE OF SCREENING OF CARDIOVASCULAR DISEASES

S.P. CHERNYKH, A.A. VOLKOVA, YU.G. LIPKIN, P.V. STRUCHKOV, O.S. TSEKA

The Russian State Medical University, Department of Medical Cybernetics and Informatics Institute of Postgraduate Education of Federal Medical-Biological Agency Russia, Department of Clinical Physiology and Functional Diagnostics

Federal Medical-Biological Agency RUSSIA Hospital № 85

This article is devoted to the screening use of ECG parameters for the prior identification of the cardiovascular system conditions, are usually detected by echocardiography. Three groups of ECG parameters, which statistically significantly different among the groups in patients with varying severity of echocardiographic displays, were identified. The sensitivity and specificity criteria, which were built in these parameters, were assessed.

Key words: ECG, echocardiography, screening.

УДК 61:577.3+535.3:612.128

ЦИТОАРХИТЕКТОНИКА И ФАГОЦИТАРНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ БОЛЬНЫХ РАКОМ ШЕЙКИ МАТКИ ПРИ ФЕМТОСЕКУНДНОМ ЛАЗЕРНОМ ИЗЛУЧЕНИИ IN VITRO

Т.В. АБАКУМОВА, Т.П. ГЕНИНГ, И.И. АНТОНЕЕВА,

Д.Р. АРСЛАНОВА, В.В. СВЕТУХИН, С.О. ГЕНИНГ*

В данной работе представлены результаты влияния высокоинтенсивного фемтосекундного лазерного излучения на морфофункциональное состояние нейтрофилов периферической крови практически здоровых женщин и при раке шейки матки на Ia стадии. Полученные данные позволяют предполагать, что реакция нейтрофилов больных раком шейки матки на Ia стадии существенно и значимо отличается от таковой для нейтрофилов доноров, что, видимо, следует учитывать при использовании фемтосекундного лазерного излучения в данной группе больных.

Ключевые слова: нейтрофилы, сканирующий зондовый микроскоп, фемтосекундное лазерное излучение.

Изучение возможностей лазерного излучения в онкологии

* Ульяновский государственный университет, ул. Л. Толстого, д. 42, г. Ульяновск, 432017

было начато в РОНЦ РАМН в начале 80 гг. Была доказана высокая эффективность низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) при лечебной эндоскопии у больных предопухолевыми заболеваниями. Как известно, одним из настораживающих моментов в течение хронических воспалительных заболеваний является изменение структуры пораженной ткани, или дисплазия. НИЛИ предотвращает прогрессирование и в большом проценте случаев способствует обратному развитию структурных изменений в тканях на фоне хронического воспаления, что с успехом применяется в лечении предраковых заболеваний женской половой сферы, желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей.

Исследование, проведенное в Онкологическом центре с целью изучения влияния НИЛИ на показатели клеточного и гуморального иммунитета, показало его высокое потенцирующее действие на стимуляцию реактивности организма у онкологических больных [1].

Основные направления, по которым возможно использование лазеров в онкологии - это высокоэнергетическое излучение (разрушающий лазер, применяющийся для рассечения тканей, гемостаза, испарения патологических образований) и фотодинамическая терапия опухолей различных локализаций. Анализ данных литературы [2,4,9] позволяет сформулировать такие положительные качества использования лазеров в хирургии как высокая точность манипуляции, быстрое и бескровное проведение хирургических вмешательств, минимальная реакция окружающих тканей на лазерное воздействие, отсутствие интенсивной воспалительной реакции в краевой зоне операционной раны. И, наконец, абластичность лазерного излучения предупреждает диссеминацию опухолевых клеток, обладающих инвазивным ростом, что особенно важно при лечении рака начальных стадий. Все это позволило методу успешно конкурировать с традиционными оперативными вмешательствами, лучевой терапией у тяжелых соматических больных при минимальных патологических изменениях.

Рак шейки матки (РШМ) занимает в мире первое место среди всех злокачественных новообразований женских половых органов [9]. Неуклонный рост запущенности РШМ, а также отмеченный рост заболеваемости среди женщин молодого возраста диктуют необходимость разработки новых и совершенствование уже существующих методов комбинированного и комплексного лечения. Используются три основных метода лечения: хирургический, комбинированный и сочетанная лучевая терапия. Стремление к улучшению отдаленных результатов радикальной гистерэктомии привело к идее после- и предоперационного облучения, что предоставляет возможность использование высокоэнергетического лазерного излучения (ВИЛИ).

На сегодня установлено угнетение иммунной компетентности РШМ в зависимости от стадии опухолевого процесса. В связи с этим представляет определенный интерес изучение влияния ВИЛИ на иммунологическую реактивность организма. Выбор нейтрофилов в качестве клеток мишеней лазерного облучения обусловлен их полифункциональной ролью в поддержании защитной реакции организма, а также потенциальной возможностью их активации при действии экзогенных физико-химических факторов [4,6].

Основными преимуществами фемтосекундных лазеров является малая длительность импульса, высокая пиковая и малая средняя мощности, вследствие чего возможно отсутствие выраженных термических эффектов. Однако в доступной отечественной и зарубежной литературе нами не обнаружено исследований по оценке влияния фемтосекундного лазерного излучения (ФСЛИ) на Нф человека.

Цель исследования - изучение цитоархитектоники и фагоцитарной активности нейтрофилов больных РШМ при ФСЛИ in vitro.

Материалы и методы исследования. В исследовании использованы Нф доноров (n=15) и больных РШМ на стадии Ia (n=15), выделенные из венозной крови на двойном слое фикол-ла/урографина (1,117 и 1,077 г/см3). Кровь забиралась из локтевой вены натощак с письменным согласием женщин. Нф облучали в пластиковых кюветах высотой 1 см на расстоянии 3 и 5 см от световода фемтосекундного лазера. Был использован фемтосекундный волоконный эрбиевый лазер, который является совместной уникальной разработкой Научного центра волоконной оптики РАН и Ульяновского государственного университета с характеристиками: длительность импульса - 100-10-13; частота следования импульсов - 200-250* 10-13; средняя мощность -

1,25 мВт; пиковая мощность - 6кВт; длина волны - 1,55 мкм.

Расчеты по плотности облучения фемтосекундным лазерным излучением.

Для расстояния 3 см (при диаметре пучка = 0,6 см) и 5 см (при диаметре пучка = 1 см) и исходных энергетических характеристиках лазера плотность энергии на биоткань (Э) рассчитывали по формуле [2]: Э='/8, где W - выходная энергия излучения, Дж; 8 - площадь лазерного пятна на биоткани, см2.

Выходную энергию для импульсно-периодического режима определяли из соотношения: '=Р-(1и/1и+1п)-1;, где Р - выходная

мощность излучения, Вт; 1 - время воздействия, с; ^ - длительность импульса, с; 1п - длительность паузы, с.

Из приведенных зависимостей следует, что плотность потока энергии на биоткани можно менять как за счет изменения мощности излучения, так и за счет изменения размера лазерного пятна (расфокусировки).

Таблица 1

Расчет плотности потока облучения в зависимости от длительности облучения, средней и пиковой мощности фемтосекундного лазера

Плотность энергии на биоткань 1'3см 1'5см З'Зсм 5'3см 3'5см 10'3см 5' 5см 10'5см

Эсредняя, мДж/см2 8,5 23,7 25,4 42,3 71,1 84,5 118,5 237

Эпиковая, КДж/см' 40,3 113 121 202 339 403 443,7 887,4

Для определения фагоцитарной активности применяли стандартную методику с использованием дрожжей. Вычисляли следующие показатели фагоцитоза: фагоцитарное число (ФЧ) по Райту - среднее число захваченных одним фагоцитом частиц, и фагоцитарный индекс (ФИ) по Гамбургеру - процент фагоцитов, принимающих участие в фагоцитозе к общему числу фагоцитов [9].

Для оценки топологии и ригидности мембраны нейтрофи-лов использован метод сканирующей зондовой микроскопии (8о1уєгРго КТ-МЭТ, г.Зеленоград, Россия). Использовались фирменные кремниевые зонды с жесткостью 0,2 К/т, радиус закругления кончика зонда составлял примерно 50 пт. Нейтрофилы, фиксированные глутаровым альдегидом, сканировались в полу-контактном режиме. Ригидность мембран оценивалась по модулю Юнга, который рассчитывали согласно теории Герца [8].

Для выявления различий между данными, полученными в эксперименте и контрольной группе применялся непараметрический и-критерий Манна-Уитни (81а1а 6.0).

Результаты и их обсуждение. В результате проведенных исследований было установлено, что фагоцитарная активность Нф практически здоровых женщин и больных РШМ на 1а стадии после ФСЛИ изменялась волнообразно, однако статистически не значимо за исключением средней интенсивности излучения 23,7 мДж/см2, при которой имело место значимое возрастание фагоцитарного числа как у Нф доноров, так и у Нф больных РШМ (табл.2).

полноценно исследованы и охарактеризованы, в рекогносцировочных реакциях нейтрофилов большое значение принадлежит перестройкам цитоскелета, активации хемо- и механорецепторов [7].

В литературе описано изменение Нф при воздействии НИЛИ, которое, по мнению ряда авторов [3] позволяет выявить потенциальные возможности клеток. В результате влияния НИЛИ показаны изменения в плазматической мембране, характеризующиеся в увеличении микровыростов; гетерохроматин при этом диспергируется, эухроматин занимает всю центральную часть ядра, т.е. проявляются черты, характерные для активации клеток. Со стороны ядерных структур особых изменений не наблюдается. В цитоплазме отчетливо заметна частичная дегрануляция азурофиль-ных и специфических гранул. Часть таких гранул концентрируется около плазмолеммы или небольших вакуолей. Митохондрии увеличены в размерах. Доза непрерывного облучения равная 24,0 Дж/см2 вызывает в Нф деструкцию плазматических мембран и митохондрий. Считается, что при этом происходит изменение в липидных и белковых молекулах мембраны (повышение уровня фосфолипидов, снижение уровня холестерина), и, как следствие, дозозависимое снижение вязкости мембраны.

На рис.1 представлены результаты сканирование препаратов интактных Нф больных РШМ стадии 1а, фиксированных глутаровым альдегидом.

Динамика показателей ФЧ и ФИ в Нф доноров и больных РШМ на стадии 1а после ФСЛИ и различной интенсивности

Рис. 1. Интактные нейтрофилы больных РШМ стадии 1а

На рис.1а видны границы клетки, полиморфное сегментированное ядро и гранулы цитоплазмы, которые выявляются и по боковому сечению клетки. При этом Нф имеют строго округлую форму и клетка распластана по поверхности подложки. На последующих рисунках представлены Нф больных РШМ на стадии 1а после ФСЛИ различной интенсивности.

Табшца 2 На рис. 2 (а,б) представлены нейтрофи-

лы после ФСЛИ средней интенсивности

2

Интенсивность 8,5 мДж/см2 23,7 мДж/см2 25,4 мДж/см2 42,3 мДж/см2 71,1 мДж/см2 84,53 мДж/см2 118,5 мДж/см2 237

Обследуемая группа контроль мДж/см2

ТТ / 1 О ФИ 41,2±6,44 36,7±8,71 49,5±5,23* 45,2±5,89 44,2±5,44 36,6±7,10 46,7±2,887 45,2±7,54 39,0±3,46

ФЧ 1,97±0,174 1,41±0,083 1,56±0,103 1,59±0,072 1,63±0,087 1,64±0,160 1,46±0,028 1,51±0,098 1,33±0,071*

РШМ 1а (п=15) ФИ 39,4±5,75 34,2±3,063 51,1±5,24* 37,4±3,63 44,7±5,14 40,2±7,95 38,4±6,03 48,5±5,07 47,5±7,45

ФЧ 1,49±0,071 1,29±0,062* 1,61±0,115 1,42±0,067 1,29±0,053* 1,32±0,130 1,42±0,065 1,35±0,059 1,49±0,107

Примечание: * - данные статистически значимо отличающиеся от контроля (р<0,05)

При оценке влияния ФСЛИ на Нф больных РШМ было установлено изменение топографии и ригидности в зависимости от интенсивности излучения.

Метод СЗМ позволяет измерять локальные упругие свойства поверхности клеток. Для Нф исследование механических свойств мембраны имеет первостепенное значение, поскольку процессы диапедеза и миграции в тканях и процесс фагоцитоза сопровождаются комплексными упругомеханическими реакциями. Помимо рецепторных

взаимодействий, которые к настоящему времени достаточно

8,5 мДж/см2 и пиковой 40,3 кДж/см2. По сравнению с интактными клетки потеряли округлую форму, граница клетки нечеткие, зернистость слабо выражена. Клетка набухшая и цитоплазма равномерно распределена по всей клетке.

На рис.3. представлены Нф после ФСЛИ в дозе 25,4 мДж/см2 - средняя, 125 кДж/см2 - пиковая. Границы клетки размыты, сама клетка не имеет овальной формы; четко видимые псевдоподии. Гранулы цитоплазмы не определяются даже по боковому сечению, клетка распластана на подложке.

На рис.4 представлены Нф после ФСЛИ в средней дозе 71,7 мДж/см2 и пиковая 339,1 кДж/см2.

Границы клетки размыты, вблизи клетки наблюдаются отдельные гранулы, возможно отшнурованные от основной цитоплазмы. На боковом сечении отмечены по периферии клетки гранулы цитоплазмы.

При облучении Нф больных РШМ 1а стадии и ФСЛИ максимальной дозы (средняя 237мДж/см2 и пиковая - 887,4 кДж/см2) клетки сохраняют свою целостность (рис.5).

А

Б

В

2(> ;х VI г: 34 36 м

зом, при изучении топологии Нф больных РШМ на стадии 1а после высокоинтенсивного ФСЛИ установлено, что даже высокие дозы импульсного фемтосекундного излучения не приводят к деструкции клеточной мембраны. Однако при этом не наблюдается выраженных псевдоподий, за исключением режима 25,4 мДж/см2 на рис.2; а клетки характеризуются набуханием и невозможность дифференцировать границы цитоплазмы и гранулы цитоплазмы даже в боковом сечении профиля клетки. При оценке ригидности в Нф после ФСЛИ показано, что она у больных РШМ стадии 1а до облучения значимо не отличается от ригидности Нф доноров (табл.2).

Рис.2. Нейтрофилы больных РШМ стадии 1а после ФСЛИ средней интенсивности 8,5 мДж/см2 и пиковой 40,3 кДж/см2

10 15 20 25

рт

А

Рис.4. Нейтрофилы больных РШМ стадии 1а после ФСЛИ средней интенсивности 71,7 мДж/см2 и 339,1 кДж/см2 - пиковой

Рис.3. Нейтрофилы больных РШМ стадии 1а после ФСЛИ средней интенсивности 25,4 мДж/см2 и 125 кДж/см2 - пиковой

Изменение ригидности мембраны нейтрофильных гранулоцитов практически здоровых женщин (контроль) и при раке шейки матки на стадии 1а, облученных ФСЛИ

ригидность, Па контроль 8,5 мДж/см2 23,7 мДж/см2 25,4 мДж/см2 42,3 мДж/см2 71,1 мДж/см2 84,53 мДж/см2 118,5 мДж/см2 237 мДж/см2

контроль (п=15) 360,8±14,1 561,7±22,88* 515,9±14,96* 569,6±22,62* 550,1±29,95* 481,6±19,32* 496,3±26,43* 382,0±17,72 937,4±33,09*

1а стадия (п=15) 314,8±23,00 197,9±10,34* 216,7±18,11* 340,8±34,25 200,8±9,34* 274,8±23,60 192,8±10,6* 295,7±23,32 296,9±17,05

Примечание: *- данные статистически значимо отличающиеся от контроля

Рис.5. Нейтрофилы больных РШМ стадии 1а после ФСЛИ средней интенсивности 237мДж/см2 и 887,4 кДж/см2 кДж/см2 - пиковой

Выводы. Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что ФСЛИ изменяет как топологию Нф, так и упругие свойства их мембран у больных РШМ. При этом ригидность мембраны Нф больных РШМ после ФСЛИ существенно и значимо снижены по сравнению с Нф доноров. Фагоцитарная активность при этом значимо изменяются только на средних

дозах ФСЛИ (ФИ растет при средней дозе 23,7 мДж/см2, а ФЧ падает при 8,5 и 42,3 мДж/см2). Полученные данные позволяют предполагать, что реакция Нф больных РШМ на 1а стадии существенно и значимо отличается от таковой для Нф доноров, что, видимо, следует учитывать при использовании ФСЛИ в данной группе больных.

Таблица 3

А

Б

В

А

Б

В

А

Б

Б

В

В

Однако границы клетки размыты, выражено сегментированное ядро и гранулы цитоплазмы по периферии. Таким обра-

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Литература

1. Алиханов, Б.А. Лазерное излучение, гемосорбция, Т-активин, иммуностимуляторы и иммунодепрессанты в лечении ревматоидного артрита: автореф.дис.д.м.н./ Б.А. Алиханов.- М., 1993.- 26 с.

2. Ежов, В.В. Лазерная медицина / В.В. Ежов, А.М. Торчинов, А.В. Гейниц, В.И. Фириченко.- 2008.- Т.12, вып.3.- С.15-17.

3. Медведев, А.Н. Лаб. Дело / А.Н. Медведев, В.В. Чален-ко.- 1991.- №2.- C.19-20.

4. Москвин, С.В. Возможные пути повышения эффективности лазерной терапии с позиций современных представлений о физиологических механизмах действия низкоинтенсивного лазерного излучения /С.В. Москвин// Матер. IV межд. конгр. «Доказательная медицина- основа современного здравоохранения».-Хабаровск: Изд. центр ИПКСЗ, 2005.- С.181-182.

5. Поддубный, Б.К. Современная онкология / Б.К. Поддуб-ный.- 2005.- №3.- С.122-125.

6. Чудновский, В.М. Биологические модели и физические механизмы лазерной терапии / В.М.Чудновский, Г.М.Леонова, С.А.Скопинов.- Владивосток, 2002.- 115с.

7. Шейко, Е.А. Фотохромотерапия как фактор, модулирующий функциональный потенциал нейтрофилов крови больных раком легких / Е.А. Шейко, А.И. Шихлярова, Е.С. Белан //www.oncology.ru/events/2007/11/20/handout/13.pdf

8. Strong, M.S. Laryngoscope / M.S. Strong.- 1975.-Vol.85(8).- P.1286-9.

9. Weiderpass, E. Hormonal risk factors of cancer in human point of cancer epidemiologist / E. Weiderpass //International conference. Hormonal cancerogenesis.- SPb. - 2000.- P. 22-23.

CYTOARCHITECTONICS AND PHAGOCYTIC ACTIVITY OF NEUTROPHILS SICK OF THE CANCER OF THE NECK OF THE UTERUS AT FEMTOSECOND LASER RADIATION IN VITRO

T.V.ABAKUMOVA, T.P.GENING, I.I.ANTONEEVA, D.R.ARSLANOVA, V.V.SVETUKHIN, S.O.GENING

Ulyanovsk State University

The article presents the results of high-intensive femtosecond laser radiation effect on morphofunctional state of peripheral blood neutrophils of practically healthy women as well as at cervical carcinoma of Ia stage are presented. The obtained data allow assuming that the neutrophils reaction at women with cervical carcinoma of Ia stage essentially and significantly differs from that of the neutrophils donors' one which, probably, is necessary to consider at applying femtosecond laser radiation in the given group of patients.

Key words: neutrophils, atomic-force microscope, femtosecond laser radiation.

УДК 615.28

ИССЛЕДОВАНИЕ ГАСТРОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ ДЕАНОЛА АЦЕГЛУМАТА ПРИ СТРЕССЕ

Е.В. БЛИНОВА, Д.С. БЛИНОВ, Т.С. КРУПНОВА, Е.Д.ГОГИНА,

Л.В. ВАНЬКОВА, М.В. ВЕРТЯНКИН*

Статья посвящена результатам опытов на мышах, в ходе которых при стресс-индуцированным эрозивно-язвенном поражении слизистой оболочки желудка установлена профилактическая гастропро-текторная активность деанола ацеглумата при его внутримышечном введении в дозе 250 мг/кг, сопровождающаяся активацией перистальтики кишечника и повышением кровотока в стенке желудка. Ключевые слова: стрессовая гастропатия, деанола ацеглумат, моторика кишечника, кровенаполнение.

Стрессы различной природы являются наиболее частой причиной реактивных изменений органов желудочно-кишечного тракта. Наиболее чувствительными структурами при этом являются слизистые оболочки желудка и 12-перстной кишки. Эрозивно-язвенные поражения слизистой оболочки желудка составляют важнейшую проблему современной гастроэнтерологии [1]. Одним из этиологических факторов развития этой патологии являются хронические стрессорные воздействия различной природы [2,3,4,5]. Не смотря на высокую эффективность имеющихся в

* ФГБОУ ВПО Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва, ул. Болшевистская, д. б8, г. Саранск, 430005

распоряжении клиницистов лекарственных средств, поиск новых гастропротекторов сохраняет свою актуальность. Имеются данные литературы об эффективности препарата дезоксирибонуклеиновой кислоты Деринат, а также данные о его органопротекторных свойствах в отношении ЖКТ [7].

Цель исследования — изучение гастропротекторных свойств дерината при хроническом иммобилизационном стрессе.

Материалы и методы исследования. В работе использовали раствор деанола ацеглумата (жидкая лекарственная форма, ОАО «ВНЦ БАВ», Россия) во флаконах по 100 мл. В качестве препарата сравнения использовали блокатор Н2-гистаминовых рецепторов фамотидин («Квамател», Gedeon Richter, Германия), во флаконах по 20 мг. Работа выполнена на 48 белых мышах распределенных на б экспериментальных групп по 8 особей в каждой. Животные первой группы составили интактный контроль. Животным второй группы моделировали стресс-опосредованную гастропатию, иммобилизируя мышей в положении лежа на спине по 3 часа трое суток. Мыши третьей группы на фоне стресса однократно (в первый день опыта) получали квама-тел (фамотидин) внутрибрюшинно, 0,125 мг/кг). Животные четвертой, пятой и шестой групп в качестве терапии получали внутримышечные инъекции деанола ацеглумата в дозе 250 мг/кг однократно, соответственно перед первым и после третьего сеанса иммобилизации. Животным 5 группы и группы контроля за 1 час до выведения из опыта перорально вводили по 0,3 мл контрастной массы (10% суспензия активированного угля в 1% крахмальном клейстере).

На 5 сутки после начала опыта животных забивали декапи-тацией под эфирным наркозом. При вскрытии макроскопически оценивали состояние слизистой желудка (количество язвенных дефектов, число эрозий, наличие признаков кровотечения) по методу Виноградова В.А. [б]. Рассчитывали такие показатели как тяжесть поражения (ТП), частота поражения (ЧП), язвенный индекс (ЯИ), множественные поражения (МП). У опытных животных 5 группы и контрольных животных проводили измерение (в см) абсолютной длины кишечника и пути, пройденного контрастной массой по нему. В качестве интегрального показателя, характеризующего силу перистальтики ЖКТ, использовали процент длины кишечника, пройденный контрастной массой по отношению к абсолютной длине последнего. Для изучения уровня кровотока в стенке желудка у животных б группы использовали гемоглобинцианидный метод обнаружения гемоглобина в биологических жидкостях [8], модифицированный в 1994 г. профессором Малышевым В.Г. В работе использовали стандартный набор реактивов «Ольвекс - диагностикум», г. Санкт-Петербург. Статистическую обработку полученных результатов проводили методом t-критерия Стьюдента для независимых выборок [9].

Результаты и их обсуждение. У животных группы контрольной иммобилизации макроскопически наблюдали умеренные эрозивно-язвенные поражения слизистой оболочки желудка (табл. 1), которые в сравнении с повреждением при НПВП-гастропатиях были менее выражены [б].

Таблица 1

Характеристика интенсивности повреждения слизистой оболочки желудка при стресс-опосредованных гастропатиях и фармакотерапии у мышей

Исследуемые показатели Стресс-контроль (группа 2) Квамател, 0,125 мг/кг (группа 3) Деанола ацеглумат, 250 мг/кг -(группа 4)

Тяжесть поражения 1,25±0,25а 0,б25±0,18 0*

Частота поражения 0,125 0 0

Множественные поражения 0,б25 0 0

Язвенный индекс 2,0 0,б25 0

Среднее число язв 0,б25±0,б25 0 0

Среднее число эрозий 2,б25±0,532а 1,13±0,40* 0*

Летальность 2 (25%) %■ 0 (0%)

Примечание: а - отличия от соответствующих показателей у интактных животных достоверны при р<0,05; * - отличия от соответствующих показателей у животных группы стресс-контроля достоверны при р<0,05

Гастропротектор квамател в дозе 0,125 мг/кг оказал заметное протективное действие в условиях стресс-опосредованной экспериментальной гастропатии (табл. 1). Данный вывод следует на основании анализа большинства исследуемых показателей. В частности тяжесть поражения, на фоне терапии квамателом была снижена в два раза и, хотя разница относительно контрольного

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.