CC BY
12
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 3, 2019
Материалы и методы. Ребёнок С. 10 лет, с метаболическим синдромом, поступивший на отделение неврологии с диагнозом «преходящие нарушения мозгового кровообращения». Проведено генетическое, анамнестическое и клинико-биохимическое исследование.
Результаты. При исследовании пациента выявлено увеличение уровня гомоцистеина до 7,5 мкмоль/л при верхней границе нормы для данного возраста 5 мкмоль/л. Значимых генетических нарушений, ответственных за нарушение обмена гомоцистеина не установлено. Показатели коагуляционного гемостаза без особенностей, активность естественных антикоагулянтов антитромбина, протеинов С и Б в норме. С учетом патогенетической роли
гомоцистеина в развитии протромботических нарушений в системе гемостаза преходящее нарушение мозгового кровообращения у ребенка с метаболическим синдромом было расценено как результат гипергомоцистеинемии. Назначена патогенетическая терапия в виде комплекса витаминов В9, В12, и В6 в лечебных дозах на срок 3 месяца с последующим обследованием.
Выводы. Несмотря на столь тяжёлые клинические проявления, данная форма тромбо-филии имеет эффективную патогенетическую терапию — витамины В9, В12, и В6 в лечебных дозах, что обосновывает необходимость обязательного исследования уровня гомоцистеина при развитии любых сосудистых нарушений.
Л. П. Папаян, К. А. Папаян, М. А. Ракова, А. С. Морозова, А. А. Шулятьева, Е. А. Квапинская
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Санкт-Петербург
ТРОМБОЗ КАК МУЛЬТИФАКТОРНОЕ СОБЫТИЕ У ДЕТЕЙ НА ПРИМЕРЕ КЛИНИЧЕСКОГО СЛУЧАЯ РЕБЁНКА С ИШЕМИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ
Введение. Своевременная диагностика причин и анализ провоцирующих факторов возникновения тромботических событий остаётся актуальной темой современности, поскольку тромбоз — одна из ведущих причин летальности населения в настоящее время. Необходимо акцентировать внимание на детях с генетически детерминированной тромбофилией ввиду повышения рисков тромбоза в 12 раз при комбинировании наследственных факторов.
Цель исследования. Определить причинные факторы тромботического события у ребенка с острым нарушением мозгового кровообращения (ОНМК) по ишемическому типу в анамнезе и представить мероприятия по дальнейшему его ведению и профилактике рецидивов.
Материалы и методы. Анализ анамнестических данных, молекулярно-генетические исследования полиморфизма генов тромбо-филии, факторов свертывания крови, показателей теста генерации тромбина по Хемкеру, оценка параметров системы гемостаза и уровня гомоцистеина у ребенка 9 лет с ишемическим инсультом в анамнезе от 25.08.16 (в возрасте 7 лет).
Результаты. Из анамнеза заболевания известно, что ребенок перенес ОНМК по ишемическому типу, которому предшествовала
ревакцинация «корь/паротит/краснуха», острый гастроэнтерит с эксикозом и токсикозом тяжёлой степени и длительным периодом иммобилизации в течение 2 недель. На момент тромботического события установлена гипергомоцистеинемия (10 мкмоль/л при рефе-ренсных значениях возрастной нормы 3,0-5,0 мкмоль/л). Затем на консультации генетика в 2017 г. выявлено 5 (МТ^Я, МТЯЯ, РА1-1, FGB, ITGA2-a2) гетерозиготных полиморфизмов минорного риска тромбоза. На момент последней госпитализации (февраль 2019 г.) обнаружено снижение эффективности работы системы протеина С по результатам теста генерации тромбина, а также умеренное снижение активности антикоагулянта протеина С до 74% (при нижней границе нормы 75 %). В качестве рекомендаций мы предположили: коррекцию питания и образа жизни; компенсацию в состояниях, когда гематокрит увеличивается, вторично предрасполагая к тромбозу с точки зрения реологии; а также выполнение развернутой коагулограммы и контроль уровней активности протеина С и гомоцистеинемии при каждом случае госпитализации.
Выводы. Предполагается, что предшествующие тромбозу патологические состояния у исследуемого пациента усилили гемостатическую
Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием
«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»
активность крови и спровоцировали тромботи-ческое событие на фоне полиморфизма 5 генов факторов свертывания крови в гетерозиготном состоянии, гипергомоцистеинемии и сниженной активности системы протеина С. С целью
Санкт-Петербург 30-31 мая 2019 г.
профилактики рецидивов тромботических осложнений рекомендовано динамическое наблюдение за состоянием системы гемостаза и уровнями гомоцистеина и протеина С в крови.
Е. А. Перфилова, Ф. С. Шерстнев, А. А. Костяев, К. А. Ветошкин
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЦИТОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ В ОЦЕНКЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ КРИОПРОТЕКТОРОВ
Введение. Концентрат лейкоцитов, хранившийся при температуре +2 ^ +8 °С, может быть использован для переливания в течение 24 часов. Существенного увеличения срока хранения можно достичь путем замораживания. Щелочная фосфатаза (ЩФ) присуща клеткам гранулоцитарного ряда и наблюдается в основном во вторичных цитоплазматических гранулах зрелых сегментоядерных нейтро-филов. ЩФ необходима для осуществления нормальной фагоцитарной функции лейкоцитов, а также для энергетического обмена. Актуальным остается поиск криоконсерванта, обеспечивающего оптимальную сохранность клеток и ее структур. Подбор криопротектора, оказывающего минимальное влияние на клеточные структуры, возможен по оценке среднего цитохимического коэффициента (СЦК) ЩФ в нейтрофилах.
Цель исследования. Оценить эффективность индивидуального подбора криопротектора по величине активности ЩФ в нейтрофилах.
Материалы и методы. Для исследований использовали пробы венозной крови, полученной от 12 доноров компонентов крови. Медиана возраста составила 37 лет (от 33 до 47). В экспериментах применяли 5 криопротекторов: 15 % раствор гексаметиленбистетраоксиэтил-мочевины (ГМБТОЭМ), 3,3 % раствор глицерина, тромбокриодмац (5 % диметилацетамид — ДМАЦ + 5 % глюкоза), 10 % раствор диметил-сульфоксида (ДМСО), комбинированный раствор — (6 % диметилацетамид — ДМАЦ + 6 % гидроксиэтилкрахмал — ГЭК). Кровь донора разделили на 6 частей. В 5 пробирках опытные пробы с различными криопротекторами, 6 пробирка — аутоконтроль. Кровь в количестве 4 мл смешивали в пробирке с 0,25мл криоконсерванта. Выдерживали 5 минут, делали по 3
мазка, высушивали на воздухе при комнатной температуре. Выявление щелочной фосфатазы проводили методом азосочетания с помощью набора для цитохимического исследования производства НПФ «Абрис+». Активность фермента выражали в виде СЦК по Kaplow. Морфоме-трическую оценку количества клеток со специфической реакцией на ЩФ выполняли с помощью светового микроскопа Olympus System Microcope CX41 с окуляром х10, при объективе х100, используя принцип Астальди, основанный на определении различной степени интенсивности специфической окраски. В зависимости от нее выделяли пробы с отрицательной реакцией (-), слабо положительной (+), положительной (++) и резко положительной (+++). СЦК выражали в условных единицах.
Результаты. Индивидуальный подбор криопротектора проводили путем сравнительных определений СЦК исследуемых и контрольных проб. При этом о возможности применения криоконсерванта и его пригодности к использованию судили в случаях схожих значений СЦК опытной и контрольной проб. При значении исследуемой пробы с гемоконсервантом, отличающемся от контрольной, судили о возможном негативном действии криоконсерванта на клетку и о его непригодности. Для иллюстрации результатов индивидуального подбора криоконсерванта приводим 2 примера. При выявлении у донора СЦК ЛЩФ в пробах с 15 % ГМБТОЭМ равен 1,6, с 3,3 % глицерином — 1,5, с тромбокриодмац — 1,5, с ДМСО — 1,7, с комбинированным препаратом — 1,5, СЦК контрольной пробы составил 1,5. Можно предположить, что оптимальными криопротекторами могут быть: 3,3 % глицерин, тромбокриодмац и комбинированный препарат. СЦК ЛЩФ донора в пробах с 15 % ГМБТОЭМ равен 1,6, с 3,3 %
