CC BY
14© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015
А.Д.Шмитько1, М.П.Костинов1, И.И.Бочарова2, А.А.Сависько3, О.О.Магаршак1, В.Б.Полищук1
ТРАНСПЛАЦЕНТАРНЫЕ IgG К ВИРУСУ КОРИ В ПУПОВИННОЙ КРОВИ У НОВОРОЖДЕННЫХ РАЗНЫХ РЕГИОНОВ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва; 2Московский областной НИИ акушерства и гинекологии; 3Ростовский-на-Дону медицинский университет
Цель. Определить содержание протективных трансплацентарных IgG к вирусу кори в пуповинной крови у новорожденных разных регионов РФ. Материалы и методы. Исследовали пуповинную кровь 1147 новорожденных, матери которых ранее не болели корью. Из них 672 образца были отобраны среди новорожденных г. Москва и Московской обл., 475 — г. Ростов-на-Дону. Значения IgG определяли методом ИФА с использованием стандартного набора реагентов фирмы «Вектор-Бест» (ВектоКорь-IgG). Для определения авидности IgG к вирусу кори был использован набор реагентов фирмы Euroimmun — Avidity: Anti-Measles Virus ELISA (IgG). Результаты. Защитные (>0,18 МЕ/мл) IgG к вирусу кори регистрировали у 79,9% новорожденных г. Москва, Московской области и 81,3% новорожденных г. Ростов-на-Дону. Средний уровень IgG в сыворотках пуповинной крови новорожденных в исследуемых регионах был в пределах защитных значений (1,74±0,13МЕ/мл и 1,51+0,09 МЕ/мл соответственно). Отмечали преобладание в анализируемых образцах антител низкого уровня (<1,0 МЕ/мл), однако являющихся высокоа-видными (ИА >60%). У новорожденных от женщин 16 — 25 лет г. Москва и Московской обл. протективные антитела выявляли в 83,6%; 26 — 35 лет — в 75%; женщин 36 — 43 лет
— в 88,2% случаев. Средний уровень IgG в пуповинной крови новорожденных от матерей 36 — 43 лет был в 1,5 раза выше, чем матерей 16 — 25 лет и в 2 раза выше, чем матерей 26
— 35 лет. Заключение. Новорожденные г. Москва, Московской обл. и г. Ростов-на-Дону, аналогичным образом, в 79,9% и 81,3% случаев соответственно защищены против кори. Женщины 26 — 35 лет в 25% случаев составляют группу риска по заболеваемости корью и требуют более пристального внимания при выборе тактики вакцинации до зачатия, а их новорожденные — по достижении декретированных сроков.
Журн. микробиол., 2015, № 1, С. 52—57
Ключевые слова: корь, пуповинная кровь, трансплацентарные IgG, антитела к вирусу кори, авидность антител, новорожденные
A.D.Shmitko1, M.P.Kostinov1, I.I.Bocharova2, A.A.Savisko3, O.O.Magarshak1, V.B.Polischuk1
TRANSPLACENTAL IgG AGAINST MEASLES VIRUS IN UMBILICAL BLOOD OF NEONATES FROM VARIOUS REGIONS OF RUSSIAN FEDERATION
1Mechnikov Research Institute of Vaccines and Sera, Moscow; 2Moscow Regional Research Institute of Obstetrics and Gynecology; 3Rostov-on-Don Medical University, Russia
Aim. Determine content of protective transplacental IgG against measles virus in umbilical blood of neonates of various regions of Russian Federation. Materials and methods. Umbilical blood of 1147 neonates was studied, whose mothers had not previously had measles. 672 samples among those were from neonates of Moscow and Moscow Region, 475 — from Rostov-on-Don. IgG values were determined in EIA using a standard kit from «Vector Best» (VectoKor-IgG). A kit from Euroimmun — Avidity: Anti-Measles Virus ELISA (IgG) was used for determination of avidity of IgG against measles virus. Results. Protective (>0.18 IU/ml) IgG against measles were registered in 79.9% of children in Moscow, Moscow Region and in 81.3% of neonates in Rostov-on-Don. Mean level of IgG in umbilical blood sera of neonates from the studied regions was within protective values (1.74+0.13 IU/ml and 1.51+0.09 IU/ml, respectively). Predominance of low level antibodies was noted in the studied samples (<1.0 IU/ml), those are highly avid though
(AI > 60%). In neonates from women aged 16 — 25 years in Moscow and Moscow Region protective antibodies were detected in 83.6%; 26 — 35 years — in 75%; women aged 36 — 43 years — in 88.2% of cases. Mean level of IgG in umbilical blood of neonates from mothers aged 36 — 43 years was 1.5 times higher than from mothers aged 16 — 25 years and 2 times higher than mothers 26
— 35 years of age. Conclusion. Neonates from Moscow, Moscow Region and Rostov-on-Don, similarly, in 79.9% and 81.3% of cases are protected from measles, respectively. Women aged 26
— 35 years in 25% of cases are a risk group for measles morbidity and require a closer attention during selection of vaccination tactics before conception, and their neonates — on reaching decree terms.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2015, No. 1, P. 52—57
Key words: measles, umbilical blood, transplacental IgG, antibodies against measles, antibody avidity, neonates
ВВЕДЕНИЕ
Одной из главных причин нарушения здоровья детского населения является инфекционная патология, среди которой преобладают заболевания вирусной этиологии, регистрируемые среди детей первого года жизни.
По данным ВОЗ, корь остается преимущественной причиной заболеваемости и смертности детей раннего возраста, несмотря на активные меры борьбы с данной инфекцией. В мире продолжают возникать вспышки заболевания. Так, в 2012 году было зарегистрировано 122 000 случаев смерти от кори — почти 330 случаев в день, или 14 случаев в час [14].
В соответствии со стратегическим планом Европейского регионального бюро ВОЗ от 2002 г. в Российской Федерации реализуется Национальная программа ликвидации эндемичной кори [13]. Однако после достижения минимума случаев заболевания в 2008 г. фиксируется неуклонный рост данного показателя с каждым годом, и к концу 2012 г. заболеваемость корью составила 1,47 на 100 тыс. населения и 4,59 на 100 тыс. детей до 17 лет. Всего было зарегистрировано 2098 случаев кори в 58 субъектах РФ, из них 1202 случаев кори (57,3%) у детей до 17 лет [2].
Следовательно, корь по-прежнему может представлять угрозу здоровью, особенно для такой уязвимой к данной инфекции группы населения, как дети до 1 года [5]. Основным фактором защиты новорожденных и детей первого года жизни являются трансплацентарно переданные материнские IgG [11]. Серонегатив-ные к кори беременные сами могут составлять группу риска по заболеваемости, при этом являясь непрямым источником инфекции для новорожденных. Основная опасность кори во время беременности заключается в более тяжелом ее течении, развитии серьезных осложнений, а данная беременность может закончиться самопроизвольным выкидышем или преждевременными родами. В случае перенесения заболевания на последних сроках гестации при внутриутробном инфицировании возможно развитие врожденной кори, протекающей с тяжелыми последствиями для новорожденного, приводящими к смерти или инвалидизации ребенка [3, 4, 6, 7].
На настоящий момент единственной мерой профилактики возникновения кори и ее осложнений во время беременности, а также инфицирования детей первого года жизни служит ранее проведенная вакцинация и ревакцинация [12]. Однако длительность сохранения поствакцинальных IgG у женщин детородного возраста и степень защиты новорожденных мало изучены. Также вызывает интерес сравнение уровня трансплацентарных IgG к вирусу кори у новорожденных в разных регионах РФ.
Цель работы — определение содержания протективных трансплацентарных IgG к вирусу кори в пуповинной крови у новорожденных разных регионов РФ.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В период с ноября 2011 г. по июнь 2012 г. было исследовано 1147 образца пу-повинной крови новорожденных, матери которых ранее не болели корью. Из них 672 отобраны в Московском областном НИИ акушерства и гинекологии, а 475
— в родильном доме № 2 г. Ростов-на-Дону.
Для определения IgG к вирусу кори в сыворотках пуповинной крови был использован стандартный набор реагентов для иммуноферментного количественного определения иммуноглобулинов класса G фирмы «Вектор-Бест» согласно инструкции. Результат считался отрицательным, если концентрация IgG к вирусу кори в исследуемом образце была менее или равна 0,12 МЕ/мл, положительным
— если более или равна 0,18 МЕ/мл и неопределенным (сомнительным) — если концентрация IgG к вирусу кори находилась в диапазоне от 0,12 до 0,18 МЕ/мл. В последующем полученные результаты интерпретировали как серопозитивные, если уровень защитных IgG был >0,18 МЕ/мл, и серонегативные, если он был <0,18 МЕ/мл.
Оценивались также протективные значения трансплацентарных противоко-ревых IgG. При этом содержание антител в пределах >0,18 и <1,0 МЕ/мл считалось низким, от 1,0 до 5,0 МЕ/мл — средним и >5 МЕ/мл — высоким.
Для определения авидности IgG к вирусу кори в сыворотках пуповинной крови был использован набор реагентов фирмы Euroimmun — Avidity: Anti-Measles Virus ELISA (IgG). Согласно инструкции IgG оценивались как низкоавидные, если индекс авидности (ИА) был <40%, неопределенные (сомнительные или «среднеавидные»), если ИА находился в пределах 40 — 60%, и высокоавидные, если ИА был >60%.
В зависимости от возраста роженицы г. Москва и Московской обл. (МО) были разделены на 3 группы. В I группу вошли 250 (37%) женщин от 16 до 25 лет; во II — 337 (50%) — от 26 до 35 лет; в III — 85 (13%) — от 36 до 43 лет.
Обработка полученных данных выполнялась с помощью пакета статистических программ AtteStat 10.2 интегрированной в Microsoft Excel 2010. Достоверность различий количественных показателей полученных данных с доверительным интервалом — 0,95 вычислялась с помощью непараметрического критерия Смирнова для несвязанных выборок (S).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Исследование пуповинной крови на наличие IgG к вирусу кори выявило, что у 20,1% женщин, проживающих в г. Москва и Московской области, результаты были серонегативными (табл.). Средний уровень IgG в анализируемых образцах был в пределах защитных значений (1,74±0,13МЕ/мл); 18,7% сывороток, принадлежащих женщинам,
проживающим в г. Ростов-на-Дону, также оказались серонегативными. Средний уровень ДО составлял 1,51+0,09 МЕ/ мл.
Анализ не выявил достоверных различий между содержанием IgG к вирусу кори в сыворотках пуповинной крови новорожденных г. Москва, МО и Ростова-на-Дону. Следовательно, соблюдение календаря профилактических приви-
Уровень IgG к вирусу кори у новорожденных
Сравниваемые показатели Москва и МО Ростов-на —Дону
Возраст женщин от 16 до 43 лет от 16 до 42 лет
Всего 672 475
Серопозитивные абс.(%) 537 (79,9) 386 (81,3)
Серонегативные абс.(%) 135 (20,1) 89 (18,7)
Средний уровень АТ (МЕ/мл) 1,74+0,13 1,51+0,09
Значение АТ >0,18 и <1,0 328 (48,8) 205 (43,2)
(МЕ/мл) 1,0—5,0 183 (27,2) 141 (29,7)
абс. (%) >5,0 26 (3,9) 40 (8,4)
Примечание. p>0,05 — различия показателей г. Москва, МО и г. Ростов-на-Дону.
вок, а также выполнение Национальной программы по ликвидации эндемичной кори показывают одинаковые результаты относительно данной иммунной прослойки населения среди двух исследуемых регионов РФ. Можно предположить, что новорожденные Москвы, МО и г. Ростов-на-Дону аналогичным образом защищены против данной вакцино-управляемой инфекции.
Протективный уровень трансплацентарных противокоревых IgG был разделен на низкий — <1,0 МЕ/мл (I группа), средний — от 1,0 до 5,0 МЕ/мл (II группа) и высокий — >5,0 МЕ/мл (III группа) (табл.).
Из полученных результатов следует, что для Москвы, МО и Ростова-на-Дону наблюдается схожая картина распределения IgG в пуповинной крови новорожденных (рис. 1). Отмечается досто-
Рис. 2 Показатель авидности IgG к вирусу кори в пуповинной крови в зависимости от уровня специфических антител (АТ).
* p<0,05 — различия между высокоавидными и среднеавидными АТ, высокоавидными и низкоавидными АТ I группы; ◊ p<0,05 — между высокоавидными и низкоавидными АТ II группы; о p<0,05 — между высокоавидными и низкоавидными АТ, среднеавидными и низ-коавидными АТ III группы.
Рис. 1. Сравнительный анализ протективного уровня IgG к вирусу кори у новорожденных Москвы, МО и Ростова-на Дону.
* p<0,001 — различия между I и II, I и III группами Москвы, МО; # p<0,001 —между I и II, I и III группами Ростова-на Дону.
верно значимое преобладание антител низкого уровня над антителами среднего и высокого уровня (p<0,001).
При оценке иммунного ответа к вирусу кори часто исследуется показатель авидности специфических антител. Авидность характеризует суммарную силу взаимодействия всех активных антигенсвязывающих центров молекулы антитела со всеми антигенными эпитопами, то есть общую стабильность комплекса антиген-антитело [1]. Следовательно, чем выше авидность антител, тем больше сила связывания их с антигеном, а значит, прочнее комплекс, образовавшийся в результате этого взаимодействия.
Выявление большого количества антител низкого уровня в образцах сывороток пуповинной крови диктовала необходимость определить их авидность в зависимости от концентрации IgG, что было сделано на примере рожениц Москвы и МО (рис. 2).
Было отмечено, что во всех образцах, независимо от исходного уровня, регистрировалось большое количество высокоавидных IgG. В то же время, чем выше был уровень антител, тем меньше среди них регистрировали низкоавид-ных. В группе с высоким уровнем низ-
коавидные IgG выявлены не были. Можно предположить, что новорожденные, имеющие исходно высокий уровень IgG, защищены от коревой инфекции в течение первого года жизни, так как большая часть этих антител являются также высокоавидными. В то же время, нельзя исключить, что новорожденные даже с исходно низким уровнем IgG, но в пределах протек-тивных значений, также имея высоко-авидные антитела, могут быть защищены от инфекции в течение первого года жизни.
Учитывая тенденцию к увеличению возраста рожениц, часто коррелирующим с нарушением соматического и репродуктивного здоровья женщины, а также временем, прошедшим после вакцинации и ревакцинации, представляет интерес проанализировать уровень трансплацентарных IgG к вирусу кори у новорожденных детей.
Анализ полученных данных выявил, что число серонегативных результатов во II группе женщин 26 — 35 лет составило 25%, что достоверно в 1,5 и 2 раза выше, чем в I (p<0,01) и III (p<0,001) группах, в которые входили женщины 16 — 25 и 36 — 43 лет. В свою очередь, в
1 и III возрастных группах количество серонегативных результатов было 16,4 и 11,8% соответственно и не имело между собой достоверных различий.
Определение среднего уровня IgG выявило, что в III возрастной группе (36 — 43 года) этот показатель был в 1,5 раза выше (p<0,05), чем в I (16 — 25 лет), и в
2 раза выше (p<0,05), чем во II (26 — 35 лет) группе.
Анализ авидности специфических IgG в сыворотках пуповинной крови новорожденных каждой возрастной группы рожениц (рис. 3) показал, что во II (26 — 35 лет) и III (36 — 43 года) возрастных группах количество высокоавидных IgG выше в сравнении со среднеавидными (p<0,05) и низкоавидными (p<0,01).
Подобные результаты были получены в других работах, согласно которым, показатель авидности антител может коррелировать с возрастом индивидуума [8, 9]. Так, в нашем исследовании, в I группе у женщин в возрасте от 16 до 25 лет регистрировалось одинаковое количество средне- и высокоавидных IgG. С увеличением возраста рожениц отмечалась тенденция к снижению средне- и низ-коавидных, и росту числа высокоавидных антител до достоверных различий внутри исследуемых групп.
ОБСУЖДЕНИЕ
Исследование уровня IgG к вирусу кори среди новорожденных Москвы, МО и г. Ростов-на-Дону показало, что они аналогичным образом защищены против коревой инфекции.
Определение специфических антител в пуповинной крови новорожденных в
Рис. 3. Авидность IgG к вирусу кори в пуповинной крови новорожденных в зависимости от возраста рожениц.
◊ р<0,01 — различия между высокоавидными и низкоавидными АТ II группы, высокоавидными и низкоавидными III группы; * р<0,05 — различия между высокоавидными и сред-неавидными АТ II группы, высокоавидными и среднеавидными III группы.
зависимости от возраста матери показало, что у рожениц до 25 лет имеется достаточно высокое 83,6% количество протективных антител к вирусу кори. С увеличением возраста этот показатель уменьшался до 75% у женщин 26 — 35 лет, а затем снова увеличивался до 88,2% среди рожениц 36 — 43 лет.
Изучение авидности IgG к вирусу кори, напротив, показывает преобладание высоко- и среднеавидных специфических антител среди рожениц 26 — 43 лет. Тем не менее, приоритетным при оценке иммунной прослойки является определение значения уровня антител. Считается, что высокоавидные антитела лучше защищают от чужеродных инфекционных антигенов при условии выявления их в пределах протективных значений [10]. В связи с этим, женщины в возрасте 26 — 35 лет требуют более пристального внимания при выборе тактики вакцинации до зачатия, а их новорожденные при достижении декретированных сроков — для вакцинации против кори. Вероятно, при возникновении эпидситуации новорожденные данной группы женщин могут быть вакцинированы против коревой инфекции ранее двенадцатимесячного возраста. В последующем бустерная вакцинация и ревакцинация должна проводиться в соответствии с Национальным календарем прививок.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Мешкова Р.Я. Клиническая иммунология и аллергология с основами общей иммунологии. М., ГЭОТАР-Медиа, 2012.
2. Онищенко Г.Г. Инфекционная заболеваемость в Российской Федерации за январь — октябрь 2012 г. Медицинский алфавит. Эпидемиология и гигиена. 2012, 4: 3-4.
3. Anselem O., Tsatsaris V., Lopez E. et al. Measles and pregnancy. J. Presse Med. 2011, 40 (11): 1001-1007.
4. Chiba M.E., Saito M., Suzuki N. et al. Measles infection in pregnancy. J. Infect. 2003, 47 (1): 40-44.
5. Ciofi Degli Atti M.L., Filia A., Massari M. et al. Assessment of measles incidence, measles-related complications and hospitalizations during an outbreak in a southern Italian region. J. Vaccine. 2006, 24 (9): 1332-1338.
6. Enders M., Biber M., Exler S. Measles, mumps and rubella virus infection in pregnancy. Possible adverse effects on pregnant women, pregnancy outcome and the fetus. Bundesgesundheitsblatt Gesundheitsforschung Gesundheitsschutz. 2007, 50 (11): 1393-1398.
7. Guillet M., Vauloup-Fellous C., Cordier A.G. et al. Measles in pregnancy: a review. J. Gynecol. Obstet. Biol. Reprod. (Paris). 2012, 41 (3): 209-218.
8. Hickman C.J., Hyde T.B., Sowers S.B. et al. Laboratory characterization ofmeasles virus infection in previously vaccinated and unvaccinated individuals. J. Infect. Dis. 2011, 204 (1): 549558.
9. Kontio M., Jokinen S., Paunio M. et al. Waning antibody levels and avidity: implications for MMR vaccine-induced protection. J. Infect. Dis. 2012, 206 (10): 1542-1548.
10. Mercader S., Garcia P., Bellini W.J. Measles virus IgG avidity assay for use in classification of measles vaccine failure in measles elimination settings. J.Clin. Vaccine Immunol. 2012, 19 (11): 1810-1817.
11. Palmeira P., Quinello C., Silveira-Lessa A.L.et al. IgG placental transfer in healthy and pathological pregnancies (Review Article). Clin. Dev. Immunol. 2012, Article ID 985646, 13 pages doi:10.1155/2012/985646J.
12. White S.J., Boldt K.L., Holditch S.J. et al. Measles, mumps, and rubella. Clin. Obstet. Gynecol. 2012, 55 (2): 550-559.
13. WHO (2013). Progress in global control and regional elimination of measles, 2000—2011. Weekly epidemiological record. 2013, 3 (88): 29—36. Available at: http://www.who.int/wer/2013/ wer8803.pdf.
14. WHO (2014). Measles. Fact sheet No. 286. Updated February 2014. Available at: http://www. who.int/mediacentre/factsheets/fs286/en/.
Поступила 05.06.14
Контактная информация: Шмитько Анна Дмитриевна, 105064, Москва, М. Казенный пер., 5А, р.т. (495)917-49-00
