CC BY
48
© Е. А. Кушнарева, А. А. Кушнарев
удк 611. 631. 3/. 44:616. 681-007. 41]-003. 93-02 -089. 882-092. 9 Е. А. Кушнарева, А. А. Кушнарев
трансплантация семенника
гу «днепропетровская медицинская академия» мОЗ украины
(г. днепропетровск)
вступление. В настоящее время наблюдается снижение рождаемости населения, что связано с большим количеством бесплодных браков (1520%), причиной которых почти в половине случаев является нарушение фертильности мужчин [12]. Мужская половая система является наиболее восприимчивой к действию химических и физических негативных факторов внешней среды, что ведет к снижению андрогенной функции яичек, угнетению сперматогенеза и бесплодию [1, 6]. Проблема восполнения гормонального дефицита остается до конца нерешенной. [1, 4, 5, 7, 13, 16, 17]. У больных гипогонадизмом при приеме гормональных препаратов зачастую наступает привыкание к андрогенным препаратам,требуемые дозировки увеличиваются, а эффективность снижается. Кроме этого, у некоторых больных отмечается невосприимчивость к экзогенно вводимым гормональным препаратам, что делает безуспешной заместительную терапию [1, 7, 16].
Существуют новые принципы восполнения андрогенного дефицита, а именно компенсация дефицита гормонов не экзогенным их введением, а трансплантацией мужской половой железы или трансплантацией ее культур клеток и тканей [2, 3, 4, 5, 8, 9, 12, 14].
целью нашего исследования явилось изучение способа свободной ортотопической трансплантации семенника неполовозрелого донора.
Объект и методы исследования. Для исследования послужили донорские семенники 15 неполовозрелых белых крыс-самцов линии Wistar в возрасте 5-7 суток, трансплантированные в семенники реципиентов. Реципиентами послужили 30 взрослых белых крыс-самцов линии Wistar, которым была произведена предварительная гемикастрация. Трансплантант помещался под белочную оболочку оставшегося семенника реципиента согласно методике [11]. Контролем послужили 10 взрослых белых крыс- самцов линии Wistar.
Всех животных после трансплантации выводили из эксперимента на 14, 30, и 90 сутки наблюдения. Для световой и электронной микроскопии ткань семенника фиксировали и заливали в парафин и эпоксидные смолы. Производилось окрашивание гематоксилин-эозином, толуидиновым синим; свежезамороженные срезы окрашивались суданом III и ставилась реакция на щелочную фосфатазу.
результаты исследований и их обсуждение.
Эффективность проведенной трансплантации семенника наблюдалась в 25 случаях из 30 операций. Неудачи в 5 случаях мы связываем с техническими погрешностями операции.
На 14 сутки наблюдения единичные семенные канальцы и кровеносные сосуды сохранялись только по периферии трансплантанта возле его белочной оболочки, эпителий сохранившихся семенных канальцев был представлен сустентоцитами и спер-матогониями. Интерстициальная ткань была представлена молодыми фибробластами. Центральная часть трансплантированного семенника характеризовалась запустением и отсутствием сосудов.
На 30 сутки наблюдения между белочными оболочками донорского и трансплантированного семенников отмечалось появление капилляров, арте-риол и венул; одновременно наблюдался ангиогенез и в строме самого трансплантанта с образованием новых капилляров, что свидетельствовало о рева-скуляризации трансплантанта. В паренхиме трансплантанта отмечалась частичная дифференцировка извитых семенных канальцев, наблюдался сперматогенез на разных стадиях. Интерстициальная ткань содержала молодые фибробласты, кровеносные сосуды с располагающимися возле них группами зрелых клеток Лейдига. Количество клеток Лей-дига достигало 1,6±0,3 в поле зрения (в контроле 2,9±0,1) (p<0,05). Средний объем ядер составлял 48,9±1,7 мкм3 (в контроле 49,3±1,7) (p<0,05).
Наряду с этим, по периферии, возле белочной оболочки трансплантанта наблюдались и новообразованные единичные незрелые семенные канальцы, эпителий которых состоял только из клеток Сертоли и гоноцитов. Согласно данных некоторых зарубежных авторов [15], образование незрелых эмбриональных семенных канальцев у млекопитающих и регенеративные процессы в семеннике происходят за счет возникновения эмбриональных семенных канальцев, образующихся путем инволюции зрелых дифференцированных семенных канальцев. В ряде других работ указывается на то, что процессы образования эмбриональных семенных канальцев происходят за счет реактивных изменений и пролиферации эпителия rete testis и, как следствие, в результате образования и почкования из него незрелых семенных канальцев эмбрионального типа [10]. В наших наблюдениях мы не
отмечали пролиферации эпителия rete testis. Возможно, в новообразовании незрелых семенных канальцев трансплантанта непосредственное участие принимает белочная оболочка трансплантированного семенника.
На 90 сутки наблюдения отмечалось приживление и дифференцировка трансплантанта с образованием в части дифференцировавшихся извитых семенных канальцев зрелых сперматозоидов. Интерстициальная ткань содержала кровеносные сосуды с располагающимися возле них группами клеток Лейдига. Количество клеток Лейдига достигало 2,4±0,2 в поле зрения (в контроле 2,9±0,1) (p<0,05). Средний объем ядер составлял 49,2±1,8 мкм3 (в контроле 49,3±1,7) (p<0,05). Цитоплазма клеток Лейдига была светлой, с многочисленными вакуолями, что указывало на их гормонопродуцирующую функцию. Реакция отторжения трансплантанта отсутствовала.
выводы. Данные настоящего исследования позволяют сделать выводы об эффективности способа
трансплантации неполовозрелого семенника, способствующего преодолению реакции тканевой несовместимости и отторжения трансплантата. Это обусловливается тем, что в извитых семенных канальцах неполовозрелого яичка отсутствуют спер-матоциты первого порядка и дифференцированные половые клетки, являющиеся антигенными как для собственного организма, так и для организма реципиента и вызывающие последующую реакцию отторжения трасплантанта. Выполнение трансплантации семенника в ортотопическом положении предусматривает поддержание оптимальной тем-ператутры и васкуляризацию пересаженного яичка. В результате этого достигается восстановление и сохранение гемато-тестикулярного барьера трансплантанта и его последующая защита от воздействия иммунокомпетентных клеток реципиента.
Мы считаем, что свободную трансплантацию неполовозрелого яичка можно рассматривать как один из методов восполнения андрогенного дефицита реципиента.
литература
1. Бондаренко В. О. Гіпоандрогенемія та чоловіча неплідність / Бондаренко В. О., Демченко О. М., Бурма Т. Ю., Скорняков Є. І. . // Сексология и андрология / Под ред. Проф. И. И. Горпинченко. - К. : Ин-т урологии и нефрологии АМН Украины, 2000. - Вып. 5 - С. 112 - 114.
2. Бондаренко Т. П. Коррекция гормонального статуса у кастрированных и с экспериментальным гипогонадизмом крыс путем алло- и ксенотрансплантации органотипических культур / Бондаренко Т. П., Абу-Жаяб Салех, Божок Г. А., Ала-бедалькарим Н. М., Легач Е. И. // Проблеми екології та медицини - 2003 - Т. 7, №1 - 2. - С. 3-7.
3. Грищенко В. И. Криобиология и проблема бесплодия. / Грищенко В. И., Паращук Ю. С., Дахно Ф. В., Юрченко Г. Г. / Киев. : - 1990. - 136 с.
4. Кирпатовский И. Д. Хирургическая коррекция эндокринной импотенции / Кирпатовский И. Д., Горбатюк Д. Л. // Ана-томо-экспериментальные аспекты. - М. : Университет дружбы народов. - 1986. - 17°С.
5. Кирпатовский И. Д. Разработка методики субкапсулярной интратестикулярной пересадки гипофиза / Кирпатовский И. Д., Дендеберов Е. С. // Проблемы репродукции. - 2000. - №5. - С. 75 - 77.
6. Клінічна сексологія і андрологія / За ред. Возіанова О. Ф., Горпинченко І. І. - К. : Здоров’я, 1996. - 536с.
7. Лучицький. В. Є. Андрогенодефіцитний стан у чоловіків, хворих на цукровий діабет 2 типу / Лучицький. В. Є // Ендокринологія. - №2, 2012. - С. 28-36
8. Нехвядович В. З. Сравнительная оценка результатов гомотрансплантации яичек / Нехвядович В. З. // Трансплантация органов и тканей. - Горький, 1970. - С. 176 - 177.
9. Петросьян Ж. Л. Морфофункциональный анализ аллотрансплантированных семенников собак и крыс разного возраста: автореф. дис...канд. мед. наук / Петросьян Ж. Л. - Ин-т морфологии человека АМН СССР - М., 1978. - 21с.
10. Райцина С. С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции / Райцина С. С. // - М. : Медицина, 1985. - 254с.
11. Топка Е. Г., Кушнарьов О. А. Спосіб трансплантації яєчка / Пат. 56412 А України, МПК А61В17/00 №2002032248; Заявл. 21. 03. 2002; опубл. 15. 05. 2003. Бюл. №5. 2 с.
12. Трансплантація культур клітин і тканин сім’яників при гіпогонадизмі / Турчин І. С., Тронько М. Д., Комісаренко І. В. -Київ: “Медекол” МНІЦ БІО-ЕКОС, 1999. - 25с.
13. Aversa A. Efficiacy and safety of different testosterone undecanoate preparations in men with hypogonadism: a single-blind, randomized, placebo-controlled, 12-monts follow-up study / Aversa A., Bruzziches R., Francomano D. // J. Sex. Med., Abstr. of the joint meet FSSM&ISSM. Brussels. - December 7-11, 2008.
14. Bressler R. Differentiaion of peritubular myoid cells of the testis. Effects of intratesticular implantation of newborn mouse testis into normal and hypophisecto-mized adults / Bressler R., Ross M. H. // Biol. Reprod. -1972. -Vol. 6. - №1. -P. 148-159
15. Clegg E. J. Studies on artificial cryptorchidism: Degenerative and regenerative changes in the germinal epithelium of the rat testis / Clegg E. J // J. Endocrinol., 1963. - Vol. 227. - P. 241-251
16. Kitahara S. Secondary treatment failure without anti-human choriogonic gonadotropin antibody in patient with Kallmann syndrome / Kitahara S., Yoshida K., Ishizaka K., Higashi Y, Takagi K., Oshima H. // Int. J. Urol. - 1998. - №5, Vol. 4. - P. 398-400.
17. Parker S. Experience with transdermal testosterone replacement therapy for hypogonadal men / Parker S., Armitage M. // Clin. Endocrinol. Oxf. - 1999. - №1. - P. 57-62.
УДК 611. 631. 3/. 44:616. 681-007. 41]-003. 93-02 -089. 882-092. 9
трансплантация семенников
Кушнарева Е. А., Кушнарев А. А.
резюме При свободной ортотопической трансплантации неполовозрелого семенника наблюдалось приживление трансплантанта с полной дифференцировкой клеток Лейдига, что указывало на их гормонопродуцирующую функцию. Реакция отторжения трансплантанта отсутствовала.
Ключевые слова: трансплантация, семенник, клетки Лейдига.
УДК 611. 631. 3/. 44:616. 681-007. 41]-003. 93-02 -089. 882-092. 9
трансплантація сім’яників
Кушнарьова Е. А., Кушнарьов А. А.
резюме При вільній ортотопічній трансплантації статевонезрілих семенника спостерігалося приживлення трансплантанта з повною диференціюванням клітин Лейдіга, що вказувало на їх гормонопродуцірующіе функцію. Реакція відторгнення трансплантатів була відсутня.
Ключові слова: трансплантація, сім’яників, клітини Лейдіга
UDC 611. 631. 3/. 44:616. 681-007. 41]-003. 93-02 -089. 882-092. 9
Transplantation of TestesKushnaryov E. A., Kushnarev A. A.
Summsry. In free orthotopic transplantation immature testis was a complete healing of the graft with full differentiation of Leydig cells, indicating that their hormone producing function. Transplant rejection reaction was absent.
Key words: transplantation, testis, Leydig cells.
Стаття надійшла 1. 03. 2013 р.
Рецензент - проф. Проніна О. М.
