Научная статья на тему 'ТРАНСЛОКАЦИЯ t(111)(p32q23) С ОБРАЗОВАНИЕМ ХИМЕРНОГО ГЕНА MLL-EPS15 ПРИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗАХ У ДЕТЕЙ И ВЗРОСЛЫХ'

ТРАНСЛОКАЦИЯ t(111)(p32q23) С ОБРАЗОВАНИЕМ ХИМЕРНОГО ГЕНА MLL-EPS15 ПРИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗАХ У ДЕТЕЙ И ВЗРОСЛЫХ Текст научной статьи по специальности «Медицина и здравоохранение»

CC BY
32
18
Поделиться

Похожие темы научных работ по медицине и здравоохранению , автор научной работы — Цаур Г. А., Попов А. М., Плеханова О. М., Кустанович А. М., Алейникова О. В., Гиндина Т. Л., Демина А. С., Друй А. Е., Ковалев С. Ю., Кондратчик К. Ю., Мисюрин А. В., Мякова Н. В., Ригер Т. О., Савельев Л. И., Сокова О. И., Стренева О. В., Сучкова М. В., Финашутина Ю. П., Флейшман Е. В., Шориков Е. В., Юцкевич Р. И., Meyer C., Marschalek R., Фечина Л. Г.,

Текст научной работы на тему «ТРАНСЛОКАЦИЯ t(111)(p32q23) С ОБРАЗОВАНИЕМ ХИМЕРНОГО ГЕНА MLL-EPS15 ПРИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗАХ У ДЕТЕЙ И ВЗРОСЛЫХ»

Цаур Г. А.12, Попов А. М.1,2, Плеханова О. М.1, Кустанович А. М.3, Алейникова О. В.3, Гиндина Т. Л.4, Демина А. С.1,2, Друй А. Е.1,2,5, Ковалев С. Ю.6, Кондратчик К. Ю.7, Мисюрин А. В.8, Мякова Н. В.8, Ригер Т. О.12, Савельев Л. И.1,2,5, Сокова О. И.9, Стренева О. В.12, Сучкова М. В.10 Финашутина Ю. П.8, Флейшман Е. В.9, Шориков Е. В.1,2, Юцкевич Р. И.3 Meyer C.11, Marschalek R.11, Фечина Л. Г.1,2

1 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Свердловской области «Областная детская клиническая больница № 1», Екатеринбург, Россия.

2 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Свердловской области «Институт медицинских клеточных технологий», Екатеринбург, Россия.

3 Государственное учреждение «Республиканский научно-практический центр детской онкологии, гематологии и иммунологии», Минск, Беларусь.

4 «Институт детской гематологии и трансплантологии имени Р. М. Горбачевой» Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Санкт-Петербугский госудасртвенный медицинский университет имена академика И. П. Павлова», Санкт-Петербург, Россия.

5 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Уральская государственная медицинская академия», Екатеринбург, Россия.

6 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение учреждение высшего профессионального образования «Уральский Федеральный университет имени первого Президента России Б. Н. Ельцина», Екатеринбург, Россия.

7 Морозовская детская городская клиническая больница Департамента здравоохранения г. Москвы, Москва, Россия.

8 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии Министерства здравоохранения России имени Д. Рогачева», Москва, Россия.

9 Федеральное государственное бюджетное учреждение

«Российский онкологический научный центр им. Н. Н. Блохина РАМН», Москва, Россия.

10 Федеральное государственное бюджетное учреждение

«Гематологический научный центр Министерства здравоохранения России» , Москва, Россия.

11 Diagnostic Center of Acute Leukemia, Institute of Pharmaceutical Biology /ZAFES, Goethe-University of Frankfurt, Франкфурт-на-Майне, Германия.

ТРАНСЛОКАЦИЯ ^1;11)(р32;д23) С ОБРАЗОВАНИЕМ ХИМЕРНОГО ГЕНА МЫ-ЕРБ15 ПРИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗАХ У ДЕТЕЙ И ВЗРОСЛЫХ

Транслокация ^1^1)^32^23) с образованием химерного гена МЬЬ-ЕРБ15 выявляется примерно в 3 % случаев от общего числа перестроек гена МЬЬ. На основании собственных исследований (6 пациентов) и данных литературы (27 случаев) нами проведена клинико-лабораторная характеристика острых лейкозов с транслокацией t(1;11)(p32;q23)/MLL-EPБ15. Установлено, что наиболее часто транслокация t(1;11)(p32;q23) обнаруживается у детей первого года жизни (медиана возраста — 9 мес). При остром лимфобластном лейкозе лица мужского пола болеют реже (соотношение 1:3), при остром миелоидном лейкозе соотношение полов 1:1. Транслокация ^1^1)^32^23) как единственная аномалия кариотипа лейкозных клеток выявлена в 20 из 32 случаев с инфор-

мативным цитогенетическим исследованием (59 %). Дополнительные хромосомные аномалии (ДХА) в опухолевых клетках пациентов с наличием ^^11)^32^23) и информативным цитогенетическим исследованием выявлены у 12 из 32 пациентов (38 %). В трех случаях обнаружены только количественные ДХА, в шести — только структурные; в трех случаях — сочетание количественных и структурных. Наиболее частой количественной ДХА являлась трисомия 8 (3 случая). Комплексный кариотип обнаружен у 4 из 11 пациентов (36 %) с ОМЛ и транслокацией t(1;11)(p32;q23). Наиболее часто зоной разрывов в ДНК гена ЕРБ15 является интрон 1. Описано 4 типа химерных транскриптов МЬЬ-ЕРБ15. Создана и успешно применена комбинация праймеров, флуоресцентных зондов и плазмиды для

ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ,, том IX, № 2, 2013

мониторирования химерного транскрипта МЬЬ-ЕРБ15 методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Подобраны условия и проведен мониторинг минимальной остаточной болезни по индивидуальным точкам разрыва в геномной ДНК у пациентов с наличием химерного гена МЬЬ-ЕРБ15. Сравнение данных определения минимальной остаточной болезни в геномной ДНК и кДНК показало высокую качественную сопоставимость результатов (92 %). Прогностическое значение ^1;11)(р32^23) / МЬЬ-ЕРБ15 проанализировано у 18 пациентов

с известными исходами заболевания (12 с ОЛЛ, 6 с ОМЛ). Общая выживаемость (ОВ) составила 0,37 ± 0,12 с медианой наблюдения 38 мес. (диапазон 5—140 мес.), а бессобытийная выживаемость (БСВ) — 0,33 ± 0,11. ОВ и БСВ в исследуемой группе не зависели от типа ОЛ и возраста пациентов. Однако при более детальном разделении на группы было показано, что ОВ и БСВ в группе мальчиков с ОЛЛ младше 1 года были достоверно ниже, чем у девочек с ОЛЛ этой же возрастной группы (0 и 0,64 ± 0,21 р = 0,033; 0 и 0,46 ± 0,18 р = 0,049, соответственно).

Черных Ю. Б.1, Шушанов С. С.2, Рыбалкина Е. Ю.2, Трифонова Е. В.1, Высоцкая Л. Л.1, Седов К. В.1, Белоусов К. А.1, Клинушкина Е. Ф.1, Катаева Е. В.1, Дудина Г. А.1,

Луцкая Т. Д.1, Митина Т. А.1, Голенков А. К.1

1 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области

«Московский областной научно-исследовательский клинический институт имени М. Ф. Владимирского», Москва.

2 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский онкологический научный центр имени Н. Н. Блохина» Российской академии медицинских наук, Москва.

ИССЛЕДОВАНИЕ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ У РЕЗИСТЕНТНЫХ ПАЦИЕНТОВ С МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ

Множественная лекарственная устойчивость является закономерным событием в развитии солидных и гематологических опухолей существенно влияющим на непосредственные и отдаленные результаты лечения. В связи с этим возникает интерес к исследованию этой проблемы при множественной миеломе (ММ), которая характеризуется выраженными клиническими признаками опухолевой прогрессии, главным из которых является отсутствие или потеря ответа на проводимое противоопухолевое лечение. Целью нашей работы было определение экспрессии мРНК генов, ответственных за развитие множественной лекарственной устойчивости (МЛУ), таких как МОШ, МЯР1, ЬЯР, БСЯР при множественной миеломе (ММ) у резистентных пациентов до начала терапии бортезомиб-содер-жащими программами.

Исследовалась группа из 16 больных (9 мужчин и 7 женщин) с множественной миеломой III стадии. Возраст пациентов составлял от 52 до 78 лет. Изучение экспрессии генов проводили в клетках мононуклеарной фракции костного мозга, содержащей плазмациты, выделенной из аспирата костного мозга. С этой целью клетки костного мозга наслаивали на 3 мл Ficoll и центрифугировали при 1500 об/мин 30 мин., после чего на границе раздела фаз отбирали монону-клеары. Далее отобранные клетки переносили в

пробирку с 8 мл раствора Эрла и переосаждали центрифугированием при 1500 об/мин 10 мин. и отмывали в 2-3 мл раствора Эрла. К осадку клеток добавляли 1 мл тризола (Trizol, “Sigma”, США). Процедуру выделения РНК проводили согласно стандартному протоколу. Экспрессию мРНК исследуемых генов определяли полуко-личественным методом ОТ-ПЦР(полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией). Синтез кДНК с матрицы РНК и реакцию амплификации проводили на амплификаторе «Терцик» («ДНК-технология», Россия). Продукты реакции ОТ-ПЦР анализировали с помощью электрофореза в 2 % агарозном геле с добавлением 0,5 мкг/мл бромистого этидия. Размеры фрагментов оценивали в соответствии с расположением полос маркерной ДНК, а их интенсивность оценивали денситометрированием с использованием компьютерной программы Scion Image. Для удобства и наглядности уровень экспрессии мРНК исследуемых генов представлены в виде знаков «+» и «-». При этом, «-» означает, что экспрессия гена отсутствует; «+» — слабая экспрессия гена (отчётливо видимая полоска в агарозном геле); «++», «+++», «++++» — экспрессия гена повышена (++ — в 2 раза, +++ — в 3 раза и более раз).

Экспрессия мРНК генов MDR1, MRP1, BCRP была выявлена у 16/16 (100%) больных ММ. мРНК гена LRP была выявлена у 13/16 (81%) боль-