CC BY
51
Трабектедин - лиганд узкой бороздки ДНК
Г.А. Белицкий, К.И. Кирсанов, Е.А. Лесовая, М.Г. Якубовская
НИИ канцерогенеза ФГБНУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина»; Россия, 115478, Москва, Каширское шоссе, 24
Контакты: Геннадий Альтерович Белицкий [email protected]
Трабектедин (Trabectedin, ET-743, Yondelis) — алкалоид, который был выделен из беспозвоночного обитателя Карибского бассейна Ecteinascidia turbinate, в настоящее время производится синтетически. Его молекула содержит 3 тетрагидроизохинолиновых функциональных домена, 2 из которых ковалентно связываются с гуанином узкой бороздки ДНК и изгибают молекулу в сторону широкой бороздки, а 3-я находится вне дуплекса и препятствует взаимодействию транскрипционных факторов с ДНК. В результате этого индуцируется каскад событий, нарушающих связывание транскрипционных факторов с ДНК и процессы эксцизион-ной репарации. Трабектедин, связываясь с обеими цепями ДНК, вызывает межнитевые сшивки, а кроме того, ингибирует работу топоизомераз. Аддукты трабектедина связывают белки эксцизионной репарации, препятствуя их нормальному функционированию и индуцируя разрывы ДНК. Клетки, дефектные по гомологичной рекомбинации, которая репарирует двойные разрывы, особо чувствительны к трабектедину. По этой причине к трабектедину чувствителен ряд опухолей, и в первую очередь миксоидные липосаркомы, а также рак яичников и молочной железы с мутантными генами BRCA1 и BRCA2. У больных с рецидивами сарком, ставшими резистентными к производным платины, трабектедин также оказал терапевтическое действие. Кроме воздействия на опухолевые клетки, трабектедин ингибирует воспалительный процесс путем апоптоза моноцитов и опухоле-ассоциированных макрофагов, а также опосредованного воздействия на продукцию провоспалительных медиаторов: цитокинов и хемокинов. Трабектедин также ингибирует экспрессию гена MDR-1, ответственного за резистентность опухолевых клеток к химиопрепаратам, и препятствует ангиогенезу.
Ключевые слова: трабектедин, узкая бороздка ДНК, лиганд, злокачественная опухоль, химиотерапия, репарация ДНК, рекомбинация, метаболизм, гепатотоксичность
IA СЧ
СМ
DOI: 10.17650/2313-805X. 2015.2.2.41-49
Trabectedin — the DNA minor groove binder
G.A. Belitsky, K.I. Kirsanov, E.A. Lesovaya, M.G. Yakubovskaya
Research Institute of Carcinogenesis, N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center; 24 Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia
Trabectedin (ET-743, Yondelis) is an alkaloid that was originally isolated from the Caribbean Sea squirt, Ecteinascidia turbinata and is now produced synthetically. Its chemical structure consists in three fused tetrahydroisoquinoline rings. Two of them, A and B, binds covalently to guanine residues in the minor groove of the DNA double helix to bend the molecule toward the major groove and the third ring C protrudes from the DNA duplex, apparently allowing interactions with several nuclear proteins. Binding to the minor groove of DNA, trabectedin trigger a cascade of events that interfere with several transcription factors, DNA binding proteins, and DNA repair pathways in particular nucleotide excision repair. It acts both as a DNA-alkylating drug and topoisomerase poison. Trabectedin-DNA adduct traps the nucleotide excision repair proteins repairing the DNA damage in transcribing genes and induces DNA strand breaks. Cells deficient in homologous recombination pathway which repairs these double-strand breaks show increased sensitivity to trabectedin. The most sensitive of them were myxoid liposarcomas. Trabectedin is also effective in chemotherapy-experienced patients with advanced, recurrent liposarcoma or leiomyosarcoma as well as in women with ovarian cancer and breast cancer with BRCAnessphenotype. Besides of tumor cells Trabectedin inhibits inflammatory cells by affecting directly monocytes and tumor-associated macrophages and indirectly by inhibiting production of inflammatory mediators, the cytokines and chemokines. It inhibits also the MDR-1 gene, which is responsible for the resistance of cancer cells to chemotherapeutic agents and strikes tumor angiogenesis.
Key words: trabectedin, DNA minor groove, ligand, malignant tumor, chemotherapy, DNA repair, recombination, metabolism, hepatotoxicity
Доктор, я изобрел отличное лекарство, подберите к нему болезнь!
Введение
Создание противоопухолевых препаратов идет 2 основными путями. Первый направлен на изучение механизмов злокачественного роста и поиск факторов, отличающих злокачественную клетку от нормаль-
ной. На основе найденных отличий создаются препараты с действием определенной избирательности. Основа второго пути — широкий скрининг активных молекул любого происхождения. При их исследовании на клеточных культурах и перевиваемых опухолях обнаруживаются соединения как с широким спектром действия, так и с относительно узким, избирательно направленным на опухоли со специфическими нару-
1А СЧ
СМ
ж
ш
и
шениями клеточного метаболизма. В таких случаях для них в мозаике человеческой онкопатологии отыскиваются подходящие варианты.
Примером цитостатика, высокоэффективного в отношении узкого круга опухолей, резистентных к другим препаратам, является лиганд узкой бороздки ДНК трабектедин, известный также как ЕйетаБсь ёт-743, Yondelis, ЕТ-743, ШС-684766. Он представляет собой алкалоид тетрагидроизохинолинового ряда, найденный в ткани беспозвоночного обитателя Карибского бассейна Ес1в1па8с1й1а ШгЫпа1а. Экспериментальные данные о высокой противоопухолевой активности трабектедина известны с 1969 г., но разрешение к его применению в странах Европейского союза было получено только через 38 лет, в конце 2007 г., когда обнаружилась его выдающаяся эффективность при лечении сарком мягких тканей.
Механизм связывания с малой бороздкой ДНК
Трабектедин содержит 3 тетрагидроизохинолино-вых функциональных домена (рис. 1) и обладает в общей сложности 7 хиральными центрами и 8 циклами, включая один 10-членный гетероцикл, содержащий остаток цистеина. В отличие от других алкилирующих агентов, связывающихся с гуанином ДНК в положениях N7 или О6 в большой бороздке, трабектедин связывается с N2 экзоциклической аминогруппой гуанина в малой бороздке. Другим отличием является то, что при этом ДНК изгибается в сторону большой бороздки [1, 2].
Связывание с ДНК происходит через иминиевую группу, образующуюся путем дегидрирования карби-ноламиновой группы — домена А (см. рис. 1). Эта группа играет главную роль в механизме связывания трабектедина с гуанином, так как лишенное его производное (ЕТ-745) не образует аддуктов с ДНК и обладает в 100 раз меньшей цитотоксичностью [3].
Как и в случае других узкобороздочных лигандов, связь трабектедина с ДНК дополнительно стабилизируется по механизму ван-дер-ваальсовых взаимодействий и водородных связей доменов А и В с нуклеоти-дами обеих цепей ДНК. Преимущественными сайтами связывания являются триплеты TGG, CGG, AGC и GGC, но не CGA (рис. 2) [5]. Анализ аддуктов тра-бектедина на ДНК показал, что в триплетах он связывается с тем же гуанином, что и цинковый палец транскрипционных факторов типа EGR1, активирующих экспрессию пропролиферативных и провоспа-лительных генов [6].
Рис. 1. Структура трабектедина (А, В и С) и его взаимодействие с гуанином (адаптировано из [4])
Рис. 2. Схема связывания трабектедина с 2 избирательными триплетами: — ковалентная связь; — водородная связь; ТБКТ — трабектедин (адаптировано из [5])
Эксперименты по изучению роли домена С в свойствах трабектедина дали неоднозначные результаты. Этот домен не участвует в связывании с ДНК, так как находится вне дуплекса ДНК. Предполагалось, что такое его расположение препятствует связыванию ДНК с белками репарации и различными транскрипционными факторами и потому необходимо для действия трабектедина.
О роли оригинальной структуры домена С для свойств молекулы трабектедина свидетельствуют результаты ряда работ с его химической модификацией, которая приводила к снижению цитоток-сичности производных и утрате способности избирательно подавлять систему эксцизионной репарации [3, 7]. При этом в одной из работ описано производное, лишенное домена С, которое, по данным авторов, сохранило цитотоксичность трабектедина [8].
Метаболизм трабектедина и проблема лекарственного взаимодействия
Метаболизм трабектедина. Трабектедин является субстратом практически для всех известных изоформ цитохрома Р450 ^^А, 2C9, 209, 2D6, 2Е1, 3А4), кроме CYP1B1, 209 и 4А11. Вследствие этого он преобразуется во множество различных метаболитов. Основные окислительные и деметилирующие изменения происходят в домене А. Домен С подвергается О-де-метилированию [9].
Среди изученных метаболитов, обозначаемых как ЕТ-745, ЕТ-759А, ЕТМ-259, ЕТМ-217, ЕТМ-204 и ЕТ729, последний (Ж-дисметилтрабектедин) привлекает внимание как производное, с которым связано гепатотоксическое действие трабектедина. Во 2-й фазе метаболизма часть производных взаимодействует с конъюгирующими ферментами — глутатион^-трансферазой (GST-M1) и глюкуронозилтрансфера-зой (UGT1A1 2В15). Конечные продукты выводятся из организма в основном с калом, а часть с мочой в виде глюкуронидов. В неизмененном виде выводится не более 1 % трабектедина [10].
Ограниченные экспериментальные возможности в клинике поставили вопрос об адекватности моделей,
используемых для изучения метаболизма и механизма действия трабектедина. Поскольку масштабные исследования в фармакологии проводятся на грызунах, метаболизм трабектедина у крыс сравнивали с метаболизмом собак, обезьян и человека. В микросомах печени человека и обезьян трабектедин метаболизи-ровался главным образом изоформой CYP3A4 и в меньшей степени CYP2C9, CYP2D6 и CYP2E1, а в микросомах крысы и собаки — в основном CYP3A2 и CYP2A2. Наиболее чувствительными к гепатотокси-ческому действию трабектедина оказались самки крыс, у которых морфологические и функциональные изменения в печени были намного более выраженными и длительными, чем у других изученных видов. У пациентов, получавших трабектедин в соответствии с принятыми схемами, эти изменения были менее выражены и нормализовались после отмены препарата. Эти данные послужили основой для коррекции результатов, полученных на крысах. Кроме того, выяснилось, что результаты, получаемые на разных уровнях организации живого: в биохимических системах in vitro, в культуре клеток и на животных — могут существенно отличаться как друг от друга, так и от данных клинических исследований, что ограничивает их прогностическую ценность.
Например, у крыс наблюдаются четкие половые различия в чувствительности к гепатотоксическому действию трабектедина. Самки значительно более чувствительны, чем самцы. Это связано с тем, что у самок в печени образуется и выделяется с желчью в 5 раз больше цитотоксичного производного, чем у самцов. В выделенных микросомах человека также обнаруживаются половые различия в метаболизме трабектеди-на, но в клинике различий в токсичности трабектеди-на у женщин и мужчин нет, т. е. в данном случае модель с учетом сходства по одному из параметров не имеет прогностической значимости для клиники.
Точно так же индивидуальный полиморфизм ферментов CYP (3A4, 2C9, 2D6, 2C19, 2E1, GST-M1, P1, T1 и UGT1A1 2B15), выявленный в препаратах микро-сом из биоптатов больных, не отразился на общих показателях фармакодинамики и фармакокинетики трабектедина [10—12].
Лекарственное взаимодействие. Система ферментов CYP, метаболизирующая трабектедин, активируется и ингибируется многими соединениями, в том числе и лекарственными препаратами. В связи с этим важно знать их влияние на эффективность действия трабектедина для того, чтобы предвидеть последствия лекарственных взаимодействий. В эксперименте было показано, что предобработка крыс индукторами изо-форм типа CYP3A (фенобарбитал, дексаметазон) повышает интенсивность метаболизма трабектедина, тогда как индукция изоформ типа CYP1B1 (20-метил-холантрен) неэффективна. Ингибиторы изоформ CYP3A значительно снижали уровень метаболизма трабектедина, тогда как соединения, ингибирующие
другие изоформы (CYP2E, CYP2C, CYP2A), влияли на него мало [13].
В то же время клинические исследования с использованием некоторых индукторов и ингибиторов системы метаболизма трабектедина показали, что не все активные в эксперименте соединения эффективны для человека. Это относится к индуктору CYP3A4 рифампину (полусинтетический противотуберкулезный антибиотик) и ингибитору кетоконазолу (противогрибковый препарат имидазольного ряда), которые в отличие от дексаметазона не оказали никакого действия на токсичность и метаболизм трабекте-дина у больных, хотя на микросомных препаратах ожидаемый эффект ингибирования и стимулирования был обнаружен [14].
Потенциальными ингибиторами изоформы CYP3A4, совместное применение с которыми может повлиять на фармакокинетику трабектедина и его токсичность, являются итраконазол, кларитромицин, атазанавир, индинавир, нефазодон, нелфинавир, ри-тонавир, саквинавир, телитромицин и вориконазол. Очевидно, что этот список не окончателен, и изучение лекарственного взаимодействия трабектедина с другими препаратами будет продолжено.
Следует иметь в виду, что отдельные продукты питания также способны модифицировать эффекты тра-бектедина. Описан случай, когда больной липосарко-мой «подкреплял» действие трабектедина большим количеством сока черноплодной рябины. Это вызвало у него 2 осложнения: рабдомиолиз и тяжелое нарушение функций печени. Отмена средства домашней медицины привела к восстановлению мышц и нормализации ферментов печени [15].
Способностью ингибировать отдельные изоформы CYP обладают и другие растительные препараты. К ним относят применяемые в качестве психостимуляторов женьшень (ингибирующий CYP2C9, CYP2C19, CY-P2D6, CYP3A) и гинкго билоба (CYP2D6 и CYP3A4), иммуностимуляторы эхинацею (CYP2D6, CYP3A) и алоэ (CYP3A, CYP2C9), антидепрессант зверобой (CYP2D6, CYP3A, CYPB1, CYP1A2), а также продукты питания, такие как зеленый чай (CYP3A, CYP2C9, CYP3A4), чеснок (CYP3A, CYP2C9, CYP2C19) и др.
Механизмы ингибирования роста опухоли
Распространенность в геноме триплетов, с которыми связывается трабектедин, обусловливает множественность его эффектов на опухоль. Наиболее существенными для химиотерапии (ХТ) являются:
♦ индукция разрывов ДНК и предотвращение их репарации путем блокады (nukleotide excision repair, NER), связанной с транскрипцией;
♦ блокирование транскрипционной активности химерных белков;
♦ токсическое действие на мононуклеары и ассоциированные с опухолью макрофаги;
♦ ингибирование ангиогенеза.
IA СЧ
СМ
ж
ш
CJ
IA СЧ
СМ
ж
ш
CJ
Индукция разрывов ДНК и предотвращение их репарации системой NER. Большинство используемых в настоящее время цитостатиков наиболее эффективны в отношении опухолей с нарушенной системой репарации нуклеотидов, связанной с транскрипцией TC-NER, которая необходима для распознавания повреждений структуры ДНК и ее восстановления. Тра-бектедин в отличие от них в несколько раз более токсичен для клеток с функционирующей TC-NER при нарушенной системе гомологичной рекомбинации [16, 17].
Механизм ингибирования TC-NER связан с тем, что на сайтах избирательной посадки трабектедин блокирует белок эксцизионной репарации G (XPGj. При этом образуется прочный функционально неактивный тройной комплекс трабектедина с ДНК и XPG. Это приводит к расщеплению нуклеазой XPF/ERCC1 противоположной нити и, таким образом, к образованию в ранней S-фазе двунитевого разрыва ДНК, который может быть правильно репариро-ван только в процессе гомологичной рекомбинации. Этот процесс при невозможности восстановления ДНК с помощью системы TC-NER инициируется белками BRCA, которые привлекают белки гомологичной рекомбинации к местам разрывов. Опухоли с нарушениями в системе гомологичной рекомбинации особенно чувствительны к трабектедину. К ним, в частности, относят некоторые формы мягкотканных сарком, в наибольшей степени миксоидные липосаркомы. Неожиданно высокая эффективность трабектедина в отношении этой узкой группы опухолей, резистентных к другим цитостатикам, выдвинула его в ряд перспективных и интенсивно изучаемых соединений [18, 19].
Блокирование аберрантных транскрипционных факторов химерньх генов. Особая чувствительность мик-соидных липосарком к трабектедину связана еще и с тем, что геном клеток 95 % этих опухолей содержит транслокацию t(12;16)(q13; p11), в результате которой образуется химерный ген FUS-CHOP, экспрес-сирующий аберрантный белок DDIT3-TLS, или более редкую транслокацию t(12;22)(q13;q12), дающую химерный ген EWSR1-CHOP и белок DDIT3-EWS. Химерные белки, как аберрантные транскрипционные факторы, изменяют экспрессию генов, контролирующих репарацию, пролиферацию, дифференцировку, а также провоспалительные, ангиогенные и другие каскады, что способствует неограниченному агрессивному росту опухоли [20].
Трабектедин блокирует транскрипционную активность онкобелков, конкурируя с ними за связывание с промоторными участками соответствующих генов. В результате этого в клетках миксоидных липосарком среди других процессов, связанных с пролиферацией, нормализуется экспрессия циклинов D1 и E и их ки-наз CDK4 и CDK2, а также уровень P16 — ингибитора CDK4/6 и P27 и P57 — ингибиторов CDK2. Вследствие разобщения связи FUS-CHOP с промотором гена
РТХ3 активируется фагоцитоз апоптотических клеток, а разобщение с промотором гена FN1 восстанавливает нормальную экспрессию фибронектина. Кроме того, трабектедин снимает блокаду онкобелком транскрипции генов, необходимых для дифференцировки ади-поцитов, что приводит к нормализации морфологии опухоли, т. е. в ткани липосарком атипичные формы липобластов заменяются зрелыми. Механизм этого эффекта подлежит тщательному изучению, поскольку может послужить фундаментальной основой для принципиально нового стратегического направления в химиотерапии [21—23].
Из других опухолей соединительной ткани чувствительность к трабектедину обнаружена при юношеской форме саркомы Юинга, клетки которой в результате транслокации !(11;22)(д24;д12) становятся носителями химерного гена EWS-FLI1. Трабектедин блокирует транскрипционную активность экспресси-руемого химерным геном белка EWS-FLI1, который регулирует более 70 генов. Клетки других соединительнотканных опухолей — остеосарком, рабдомио-сарком и синовиальных сарком, не имеющие этой аномалии, значительно более резистентны к трабек-тедину [5, 24]. Среди эпителиальных опухолей сочетание низкой активности гомологичной рекомбинации с сохранением ТС-КЕЯ имеют некоторые формы рака молочной железы (РМЖ) и яичников. В частности, более чем у 20 % больных с наследственной предрасположенностью к этим опухолям гомологичная рекомбинация нарушена в результате герминативных мутаций ВЯСЛ1 и ВЯСЛ2, а при спорадическом РМЖ — примерно у 25 % вследствие соматических мутаций. Клинические испытания показали, что в этих случаях трабектедин значительно более эффективен, чем у больных с диким типом генов ВЯСЛ. В то же время наличие мутаций ХК в этих опухолях значительно снижает эффективность трабектедина по сравнению с диким типом, поскольку в мутантных клетках не происходит надрезание спирали и связывание комплекса трабектедина с ДНК, а следовательно, и образование разрывов [25—29].
С чувствительностью клеток опухоли к трабекте-дину коррелирует также наличие синдрома атаксии-телеангиэктазии или дефект белков, связанных с анемией Фанкони в результате мутаций генов FЛNCЛ, FЛNCC, FЛNCF, FANCG или FЛNCD1 [30, 31].
Среди опухолей кроветворной системы многочисленны варианты с наличием транслокаций и образованием функционально активных химерных генов, причем в ряде случаев это определяет их клинический прогноз [32, 33]. В связи с этим представляется перспективным изучение действия трабектедина на гемо-бластозы в зависимости от наличия в их клетках такого рода транслокаций. Для этой цели в лаборатории механизмов химического канцерогенеза Научно-исследовательского института канцерогенеза ФГБНУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» собрана коллекция долго-
живущих клеточных линий Т- и В-клеточных лейкозов и лимфом. Результаты предполагается верифицировать путем анализа первичных культур клеток лейкозов больных из отделения химиотерапии ФГБНУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина». Вероятно, что подобно тому, как из множества гистологических типов опухолей соединительной ткани был выделен узкий сектор миксоидных липосарком, высокочувствительных к трабектедину, так и среди многообразия гемо-бластозов могут обнаружиться подобные варианты.
Другие факторы, связанные с чувствительностью опухолей к трабектедину. Значительную роль в чувствительности клеток к трабектедину играет опухолевый супрессор TP53. На клетках культуры сарком человека различной гистологической структуры показано, что нарушение функций TP53 в 3 раза повышает токсическое действие трабектедина [34]. Помимо способности блокировать клеточный цикл и пролиферацию трабектедин ингибирует экспрессию провоспалитель-ных медиаторов типа хемокинов CCL2 и CXCL8, ци-токина интерлейкина 6 (IL-6), а также ангиогенного фактора роста эндотелия сосудов (VEGF). Ценное свойство трабектедина — блокировка гиперэкспрессии гена множественной лекарственной резистентности (MDR-1). В связи с этим к цитотоксическому действию трабектедина чувствительны клетки, ставшие в процессе лечения резистентными к другим химио-препаратам (ХП) [35, 36].
Одним из недавно выявленных механизмов терапевтического действия трабектедина является его способность ингибировать функции HMGA — высокомобильной группы негистоновых белков хроматина, регулирующих транскрипцию ряда генов, в том числе гена атаксии-телеангиэктазии (ATM), который связан с репарацией двунитевых разрывов, циклина CCNE1, проапоптотического онкогена E2F1 и регулятора апоптоза Bcl-2. Неупорядоченная гиперэкспрессия HMGA характерна для многих злокачественных опухолей. Она часто коррелирует с их лекарственной резистентностью и отрицательным прогнозом течения заболевания. Трабектедин блокирует взаимодействие HMGA с чувствительными к нему регуляторными районами гена, и его ХТ-дей-ствие на клетки опухолей с высокими показателями экспрессии HMGA более выражено, чем с низкими [37, 38].
Ингибирование NER связывают отчасти с действием трабектедина на топоизомеразу I. Показано, что в миллимолярных концентрациях трабектедин образует стабильный комплекс с этим ферментом и блокирует концы разрывов, т. е. работает как ингибитор топоизомераз. В более низких, но фармакологически эффективных наномолярных концентрациях эта реакция не происходит, что позволяет считать ее минорным компонентом в механизме действия тра-бектедина. Об этом говорит и то, что клетки, резистентные к камптотецину, который предотвращает ли-
гирование ДНК путем ковалентного связывания с топоизомеразой I и ДНК, сохраняют чувствительность к трабектедину [39—41].
Прогноз чувствительности опухоли к трабектедину
Поскольку трабектедин обладает выраженной токсичностью и является дорогостоящим препаратом, важен предварительный прогноз его эффективности в каждом конкретном случае. Для его оценки разрабатываются методы, в числе которых определение количества аддуктов трабектедина и периода их пер-систенции. Последнее особенно важно, так как первоначально в чувствительных и резистентных клетках образуется одинаковое количество аддуктов, но в чувствительных они не репарируются и сохраняются намного дольше.
Другими показателями служат характеристики повреждения ДНК в тесте «ДНК-комет», обнаружение эндонуклеазы RAD51 или визуализация двойных разрывов ДНК по накоплению гистона гамма-Н2АХ, который фосфорилируется вблизи сайта разрыва и маркирует пораженный хроматиновый домен.
Прогностическую ценность имеет и определение активности лигазы CUL4A, которая убиквитинирует белки гомологичной рекомбинации. Высокий уровень экспрессии CUL4A в клетках сарком с нарушенной системой гомологичной рекомбинации коррелирует с положительным прогнозом при их лечении трабек-тедином [5, 42, 43].
Механизмы резистентности к трабектедину
Клетки с нарушенной по разным причинам системой TC-NER резистентны к трабектедину. В частности, причиной резистентности клеток одной из линий карциномы прямой кишки была потеря гетерозигот-ности по 13q33, приводящая к отсутствию функционально активного XPG [16].
Другой вариант приобретения резистентности к трабектедину обнаружен в клетках линии миксо-идной липосаркомы, в которых, в отличие от исходных чувствительных клеток, FUS-CHOP был неспособен связываться с промоторами генов PTX3 и FN1. Кроме того, резистентная линия утратила способность экспрессировать 06-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазу вследствие гиперметилирования ее промотора. В результате эти клетки стали высокочувствительными к темозоломиду, который алки-лирует гуанин в положениях О6 и N7 с последующим аберрантным восстановлением метилового остатка. Эти данные указывают на возможную перспективность изучения соединений, изменяющих профиль метилирования, в качестве препаратов для лечения опухолей, резистентных к трабектедину. Кроме того, в большинстве случаев резистентные к трабектедину клетки проявляют повышенную чувствительность к другим цитотоксическим факторам, например к ультрафиолетовому излучению.
IA СЧ
СМ
ж
ш
CJ
IA СЧ
СМ
ж
ш
CJ
Следует отметить, что ни в одной из линий, резистентных к трабектедину, это свойство не было связано ни с активацией экспрессии белков MDR, ни с транспортом трабектедина, ни с уровнем глутатиона [44].
Токсичность трабектедина и возможности ее снижения
В доклинических испытаниях трабектедина среди серьезных побочных эффектов (анемия, нейтропения, тромбоцитопения) особо отмечена его гепатотоксич-ность. При однократном внутривенном введении крысам 40 мкг/кг трабектедина через 24 ч развивалось тяжелое повреждение печени по типу холангита. Морфология поражения состояла в некрозе эпителия жел-чевыводящих протоков, воспалении и последующем фиброзе. Гепатоциты повреждались в значительно меньшей степени. Холангит сохранялся до 3 мес. При этом повышенный в 7 раз уровень билирубина держался около 1 мес, высокий уровень щелочной фосфатазы и аспартатаминотрансферазы — до 2—3 мес. Активность Р450 А1 /2, CYP2E1 и CYP3A2 была понижена на фоне резкого повышения экспрессии адено-зинтрифосфатсвязывающей кассеты транспортных генов ЛЬеЫа и АЬеЫЬ [45].
Генетические параметры чувствительности к поражению печени трабектедином изучались на мышах, дефектных по основному ферменту метаболизма трабектедина (СУР3А) и транспортерам АЪеЪ1а/1Ъ, АЪее2, и/или АЪееЗ. Нокаут СУР3А увеличил гепатотоксичность трабектедина незначительно. Такой же эффект отмечен у мышей АЪее2—/— и чуть меньше у АЪеЪ1а/1Ъ—/— и АЪее3— /—. Наибольшее поражение печени наблюдалось у мышей АЪеЪ1а/1Ъ/АЪее2—/— и АЪее2/АЪее3—/—, а наименьшее — у животных СУР3а/АЪеЪ1а/1Ъ/АЪее2—/—. Это свидетельствует о том, что образование метаболитов трабектедина изоформой СУР3А является необходимым условием ге-патотоксичности. Дальнейшие исследования показали, что дефект транспортера АЪее2 при работающей СУР3А имеет следствием накопление в печени токсических метаболитов трабектедина, но не исходного соединения. Таким образом, транспортеры ЛЬеЪ1, АЪее2 и АЪее3 освобождают клетку от токсических метаболитов трабектедина, образуемых изоформой СУР3Л. Главную роль играет ЛЪее2, меньшую — ЛЪее3 и минимальную — ЛЪее1. Оптимальный эффект достигается, если они работают все вместе, дополняя эффект друг друга [46].
Это исследование получило подтверждение в клинической практике, когда от обычной дозы трабекте-дина у больного с саркомой, имевшего генетический дефект транспортного белка ЛЪее2, развилось летальное поражение печени. Таким образом, в набор тестов, необходимых для безопасного применения трабекте-дина, следует ввести молекулярно-генетическое исследование состояния ЛВС-транспортеров [47].
Эксперименты, направленные на снижение токсичности трабектедина, показали, что в отличие от опухолевых клеток эффект может быть достигнут
с помощью некоторых индукторов CYP. В частности, предобработка крыс р-нафтофлавоном или фенобарбиталом снижала гепатотоксическое действие трабектедина. Однако модель in vitro, когда культуру ге-патоцитов обрабатывали теми же индукторами, предсказательной силы не имела, так как клетки, обработанные и не обработанные индукторами, были одинаково чувствительны к токсическому действию трабектедина [48].
Наиболее подходящим агентом для снижения токсичности трабектедина оказался дексаметазон. Предобработка самок крыс этим кортикостероидом (5— 20 мг/кг) за 24 ч до введения трабектедина (40 мкг/кг) полностью предотвращала его гепатотоксичность. В то же время дексаметазон не снижал противоопухолевое действие трабектедина на перевиваемую карциному молочной железы и ряд опухолей мышей. Изучение механизма действия дексаметазона показало, что он во много раз увеличивает экспрессию в печени ряда генов CYP3A, в том числе CYP3A11 (в 23 раза), CYP3A16 (в 18 раз), CYP3A25 (в 13 раз) и CYP3A13 (в 10 раз) [49].
Протекторное действие дексаметазона может иметь в своей основе не только изменение метаболизма трабектедина, но и другие процессы, связанные с феноменом множественной лекарственной устойчивости. В частности, изменение транспорта трабекте-дина через мембрану клеток печени, которое связано с активацией экспрессии и функций аденозинтрифос-фатзависимого кассетного транспортного белка, кодируемого геном Mrp2 (Multidrug Resistance-associated Protein), продемонстрировано на первичной культуре гепатоцитов крысы [50]. Предполагается также, что дексаметазон снижает токсичность трабектедина, блокируя воспалительный компонент его действия путем ингибирования NF-kB, который активирует экспрессию провоспалительных генов [35, 51].
Протекторным действием обладал и индол-3-карбинол, содержащийся в капусте и других крестоцветных. Он так же, как и дексаметазон, оказался мощным индуктором CYP3A2 у крыс [52]. Индол-3-карбинол защищал крыс от токсического действия трабектедина при сохранении его терапевтического действия при РМЖ. Существенно, что защитный эффект индол-3-карбинола не сопровождался снижением содержания трабектедина в печени, что указывает на наличие альтернативных путей его деток-сикации [53].
Защитное действие дексаметазона нашло непосредственное применение в клинике, где премедика-ция дексаметазоном (4 мг перорально за 24 ч до тра-бектедина) больных с саркомами резко снижала гепатотоксический эффект и миелосупрессию. В одном из клинических исследований после курса лечения трабектедином в группе плацебо у 34 % больных отмечено повышение трансаминазы, у 24 % — нейтропения, у 25 % — тромбоцитопения. Среди пациентов,
получавших дексаметазон, указанные осложнения имелись у 2, 2 и 0 % соответственно [54, 55].
Действие трабектедина на строму опухоли и ангиогенез
В последнее время значительно возрос интерес к роли опухолеассоциированных макрофагов в прогрессии новообразований. Обильная инфильтрация опухоли макрофагами, которые являются основным источником провоспалительных медиаторов, коррелирует с метастазированием и резистентностью к ХТ. Их ингибирование в эксперименте приводило к замедлению роста опухоли и большей эффективности как цитотоксической, так и антиангиогенной терапии [56-58].
Экспериментальные и клинические данные показали, что даже в нетоксичной дозе трабектедин избирательно ингибирует мононуклеарные фагоциты, в том числе ассоциированные с опухолью. Их апоптоз происходит путем активации каспазы 8. При этом нейтрофилы и лимфоциты не поражаются, так как в отличие от моноцитов у них иначе происходит экспрессия рецепторов фактора некроза опухоли TRAIL, продуцируемых у человека геном TNFSF10. В результате гибели ассоциированных с опухолью макрофагов в опухоли прекращается продукция медиаторов воспаления CCL2 и IL-6. Первый считается ведущим фактором привлечения моноцитов в опухоль, а второй - ростовым фактором. Помимо этих медиаторов, трабектедин ингибирует в культуре клеток миксоидных липосарком продукцию провоспа-лительного хемокина CXCL8 и белка острой фазы воспаления пентраксина 3 (PTX3). Такие же изменения обнаруживаются и в ксенографтах сарком от больных, получавших трабектедин. В них наряду со снижением инфильтрации опухоли макрофагами отмечен низкий уровень продукции ее клетками VEGF, а также маркера миграции и пролиферации клеток эндотелия сосудов CD31 [59-61].
Комбинация трабектедина с другими цитостатиками
Как известно, наибольший эффект противоопухолевых цитостатиков проявляется при первых курсах терапии, особенно в случае опухолей с нарушенной системой репарации. В ходе лечения отбираются клоны с повышенной ее активностью, которые удаляют аддукты из алкилированных цепей ДНК, в результате чего чувствительность к препарату падает. Этот механизм ингибируется трабекте-дином, поскольку он избирательно токсичен для такого рода клонов. В связи с этим в настоящее время успешно используется комбинация трабектедина с производными платины и доксорубицином при лечении рецидивов опухолей различного происхождения [29, 62-64]. Активно исследуются также и другие комбинации трабектедина с традиционными и новыми ХП [65, 66].
Перспективы использования узкобороздочных лигандов в химиотерапии
Удельный вес узкобороздочных лигандов среди используемых в настоящее время противоопухолевых ХП невелик. Это, с нашей точки зрения, отчасти объясняется тем, что их перспективность была скомпрометирована существующей парадигмой выбора ХП, при которой в результате скрининга отбираются соединения, способные ингибировать злокачественный рост на различных моделях. В то же время хорошо известно, что некоторые агенты, не обладающие самостоятельной цитотоксичностью, могут многократно усиливать ее у других ХП при комбинированном применении. В этом смысле узко борозд очные лиганды представляют особый интерес, поскольку они, располагаясь на узкой бороздке ДНК и связываясь с ее последовательностями, важны для экспрессии генов «домашнего хозяйства» и могут блокировать репарацию ДНК-клеток, поврежденных другими агентами. Такой подход, возможно, даст повышенный терапевтический эффект не только в случае комбинации узкобороздочных лигандов с известными ХП, но и при одновременном действии этих лигандов, каждый из которых оказывает слабое действие или вообще неэффективен. В этом плане представляется перспективным исследование комбинированного действия узкобороздочных лигандов, разрешенных к клиническому использованию в качестве антимикробных, ан-типротозойных и противовирусных препаратов типа диариламинов (DAPI, беренил, пентамидин) и бис-бензимидазолов типа Hoechst 33258. В клетках опухолей такие препараты, как Hoechst 33258 и дистамицин, препятствуют конденсации хромосом, особенно в АТ-богатых участках гетерохроматина, и вызывают апоп-тоз путем индукции летальных цитогенетических изменений. Пентамидин, применявшийся ранее для лечения протозойных инфекций, используется в настоящее время при опухолях желудочно-кишечного тракта для ингибирования так называемых фос-фатаз регенерирующей печени (PRL-фосфатаз), которые стимулируют пролиферацию и миграцию злокачественных клеток [67, 68].
Особый интерес представляет изучение возможности воспроизвести действие трабектедина на опухоли путем комбинации узкобороздочных лигандов различной тропности к последовательностям ДНК в целях подавления эксцизионной репарации и конкуренции с белками химерных генов.
В настоящее время появились данные об успешном применении малых молекул, ингибирующих поли(аденозиндифосфатрибоза)-полимеразу (PARP), для лечения опухолей различного гистогенеза, особенно дефектных по белкам гомологичной рекомбинации (BRCA, RAD51D, ATM PALB2, RAD51C, BRIP1). Эти молекулы подобно трабектедину образуют стабильный комплекс с PARP и ДНК, что, прекращая работу эксцизионной репарации, дает многочи-
IA СЧ
СМ
ж
ш
CJ
in сч см
сленные однонитевые разрывы, которые в процессе репликации становятся двойными и не репарируются [69, 70].
Ранее нами было показано, что классические уз-кобороздочные лиганды (беренил, пентамидин, DAPI, Hoechst 33342 и 33258) способны ингибировать ДНК-
зависимый путь активации PARP in vivo и in vitro. В настоящее время мы предполагаем провести исследование влияния на этот путь вновь синтезированных димерных производных бисбензимидазолов, а также их комбинаций с классическими узкобороздочными лигандами [19, 71].
Работа была поддержана грантами 15-04-04006, 13-04-01707, 15-04-09216Российского фонда фундаментальных исследований, грантом № ДП-Б-27/15 Фонда некоммерческих программ Дмитрия Зимина «Династия».
ЛИТЕРАТУРА
ж
ш
CJ
1. Pommier Y., Kohlhagen G., Bailly C.
et al. DNA sequence- and structure-selective alkylation of guanine N2 in the DNA minor groove by ecteinascidin 743, a potent antitumor compound from the Caribbean tunicate Ecteinascidia turbinata. Biochemistry 1996;35(41):13303-9.
2. Zewail-Foote M., Hurley L.H. Ecteinascidin 743: a minor groove alkylator that bends DNA toward the major groove.
J Med Chem 1999;42(14):2493-7.
3. David-Cordonnier M.H., Gajate C., Olmea O. et al. DNA and non-DNA targets in the mechanism of action of the antitumor drug trabectedin. Chem Biol 2005;12(11):1201-10.
4. Basmadjian C., Zhao Q., Bentouhami E. et al. Cancer wars: natural products strike back. Front Chem 2014;2:20.
5. D'Incalci M., Galmarini C.M. A review
of trabectedin (ET-743): a unique mechanism of action. Mol Cancer Ther 2010;9(8): 2157-63.
6. Marco E., Garcia-Nieto R., Mendieta J. et al. A 3.(ET743)-DNA complex that both resembles an RNA-DNA hybrid and mimicks zinc finger-induced DNA structural distortions. J Med Chem 2002;45(4):871-80.
7. Guirouilh-Barbat J., Antony S., Pommier Y. Zalypsis (PM00104) is a potent inducer of gamma-H2AX foci and reveals the importance of the C ring of trabectedin for transcription-coupled repair inhibition. Mol Cancer Ther 2009;8(7):2007-14.
8. Erba E., Cavallaro E., Damia G. et al. The unique biological features of the marine product Yondelis (ET-743, trabectedin)
are shared by its analog ET-637, which lacks the C ring. Oncol Res 2004;14(11-12): 579-87.
9. Vermeir M., Hemeryck A., Cuyckens F. et al. In vitro studies on the metabolism of trabectedin (YONDELIS) in monkey and man, including human CYP reaction phenotyping. Biochem Pharmacol 2009;77(10):1642-54.
10. Beumer J.H., Rademaker-Lakhai J.M., Rosing H. et al. Metabolism of trabectedin (ET-743, Yondelis) in patients with advanced cancer. Cancer Chemother Pharmacol 2007; 59(6):825-37.
11. Reid J.M., Kuffel M.J., Ruben S.L. et al. Rat and human liver cytochrome P-450
isoform metabolism of ecteinascidin 743 does not predict gender-dependent toxicity in humans. Clin Cancer Res 2002;8(9): 2952-62.
12. Brandon E.F., Sparidans R.W., Guijt K.J. et al. In vitro characterization of the human biotransformation and CYP reaction phenotype of ET-743 (Yondelis, Trabectidin), a novel marine anti-cancer drug. Invest New Drugs 2006;24(1):3-14.
13. Brandon E.F., Meijerman I., Klijn J.S. et al. In vitro cytotoxicity of ET-743 (Trabectedin, Yondelis), a marine anti-cancer drug, in the Hep G2 cell line: influence of cytochrome P450 and phase II inhibition, and cytochrome P450 induction. Anticancer Drugs 2005;16(9):935-43.
14. Machiels J.P., Staddon A., Herremans C. et al. Impact of cytochrome P450 3A4 inducer and inhibitor on the pharmacokinetics of trabectedin in patients with advanced malignancies: open-label, multicenter studies. Cancer Chemother Pharmacol 2014;74(4):729-37.
15. Strippoli S., Lorisso V., Albano A., Guida M. Herbal-drug interaction induced rhabdomyolysis in a liposarcoma patient receiving trabectedin. BMC Complement Altern Med 2013;13:199.
16. Takebayashi Y., Pourquier P., Zimonjic D.B. et al. Antiproliferative activity of ecteinascidin 743 is dependent upon transcription-coupled nucleotide-excision repair. Nat Med 2001;7(8):961-6.
17. Damia G., D'Incalci M. Targeting DNA repair as a promising approach in cancer therapy. Eur J Cancer 2007;43(12):1791-801.
18. Herrero A.B., Martin-Castellanos C., Marco E. et al. Cross-talk between nucleotide excision and homologous recombination DNA repair pathways in the mechanism
of action of antitumor trabectedin. Cancer Res 2006;66(16):8155-62.
19. Горбунова В.А. Новые направления лекарственного лечения сарком мягких тканей. Вестник РОНЦ 2009;11:2-3. [Gorbunova V.A. New ways of drug therapy of soft tissues sarcomas. Vestnik RONC = Bulletin of RCRC (Russian Cancer Research Center) 2009;11:2-3. (In Russ.)].
20. Olofsson A., Willen H., Goransson M. et al. Abnormal expression of cell cycle regulators in FUS-CHOP carrying
liposarcomas. Int J Oncol 2004;25(5): 1349-55.
21. Forni C., Minuzzo M., Virdis E. et al. Trabectedin (ET-743) promotes differentiation in myxoid liposarcoma tumors. Mol Cancer Ther 2009;8(2):449-57.
22. Charytonowicz E., Terry M., Coakley K. et al. PPARgamma agonists enhance ET-743-induced adipogenic differentiation
in a transgenic mouse model of myxoid round cell liposarcoma. J Clin Invest 2012;122(3): 886-98.
23. Di Giandomenico S., Frapolli R., Bello E. et al. Mode of action of trabectedin in myxoid liposarcomas. Oncogene 2014;33(44):5201-10.
24. Grohar P.J., Griffin L.B., Yeung C. et al. Ecteinascidin 743 interferes with the activity of EWS-FLI1 in Ewing sarcoma cells. Neoplasia 2011;13(2):145-53.
25. Peto J., Collins N., Barfoot R. et al. Prevalence of BRCA1 and BRCA2 gene mutations in patients with early-onset breast cancer. J Natl Cancer Inst 1999;91(11): 943-9.
26. Turner N., Tutt A., Ashworth A. Hallmarks of 'BRCAness' in sporadic cancers. Nat Rev Cancer 2004;4(10):814-9.
27. Delaloge S., Wolp-Diniz R., Byrski T. et al. Activity of trabectedin in germline BRCA1/2-mutated metastatic breast cancer: results of an international first-in-class phase II study. Ann Oncol 2014;25(6):1152-8.
28. Massuti B., Cobo M., Camps C. et al. Trabectedin in patients with advanced non-small-cell lung cancer (NSCLC) with XPG and/or ERCC1 overexpression and BRCA1 underexpression and pretreated with platinum. Lung Cancer 2012;76(3):354-61.
29. Monk B.J., Ghatage P., Parekh T. et al. Effect of BRCA1 and XPG mutations
on treatment response to trabectedin and pegylated liposomal doxorubicin in patients with advanced ovarian cancer: exploratory analysis of the phase 3 OVA-301 studydagger. Ann Oncol 2015;26(5):914-20.
30. Guirouilh-Barbat J., Zhang Y.W., Pommier Y. Induction of glutathione-dependent DNA double-strand breaks by the novel anticancer drug brostallicin. Mol Cancer Ther 2009;8(7):1985-94.
31. Casado J.A., Rio P., Marco E. et al. Relevance of the Fanconi anemia pathway
in the response of human cells to trabectedin. Mol Cancer Ther 2008;7(5):1309-18.
32. Chang M., Raimondi S.C., Ravindranath Y. et al. Prognostic factors
in children and adolescents with acute myeloid leukemia (excluding children with Down syndrome and acute promyelocytic leukemia): univariate and recursive partitioning analysis of patients treated on Pediatric Oncology Group (POG) Study 8821. Leukemia 2000;14(7):1201-7.
33. Port M., Böttcher M. Thol F. et al. Prognostic significance of FLT3 internal tandem duplication, nucleophosmin 1, and CEBPA gene mutations for acute myeloid leukemia patients with normal karyotype
and younger than 60 years: a systematic review and meta-analysis. Ann Hematol 2014;93(8):1279-86.
34. Moneo V., Serelde B.G., Fominaya J. et al. Extreme sensitivity to Yondelis (Trabectedin, ET-743) in low passaged sarcoma cell lines correlates with mutated p53. J Cell Biochem 2007;100(2):339-48.
35. Jin S., Gorfajn B., Faircloth G.,
Scotto K.W. Ecteinascidin 743, a transcription-targeted chemotherapeutic that inhibits MDR1 activation. Proc Natl Acad Sci USA 2000;97(12):6775-9.
36. Ganjoo K.N., Patel S.R. Trabectedin:
an anticancer drug from the sea. Expert Opin Pharmacother 2009;10(16):2735-43.
37. Fusco A., Fedele M. Roles of HMGA proteins in cancer. Nat Rev Cancer 2007;7(12):899-910.
38. D'Angelo D., Borbone E., Palmieri D. et al. The impairment of the High Mobility Group A (HMGA) protein function contributes to the anticancer activity of trabectedin. Eur J Cancer 2013;49(5):1142-51.
39. Pommier Y. DNA topoisomerase I inhibitors: chemistry, biology, and interfacial inhibition. Chem Rev 2009;109(7):2894-902.
40. Martinez E.J., Corey E.J., Owa T. Antitumor activity- and gene expression-based profiling of ecteinascidin Et 743 and phthalascidin Pt 650. Chem Biol 2001;8(12):1151-60.
41. Tavecchio M., Simone M., Erba E. et al. Role of homologous recombination
in trabectedin-induced DNA damage. Eur J Cancer 2008;44(4):609-18.
42. Garcia M.J., Saucedo-Cuevas L.P., Munoz-Repeto I. et al. Analysis of DNA repair-related genes in breast cancer reveals CUL4A ubiquitin ligase as a novel biomarker of trabectedin response. Mol Cancer Ther 2013;12(4):530-41.
43. Soares D.G., Escarqueil A.E., Poindessous V. et al. Replication and homologous recombination repair regulate DNA double-strand break formation by the antitumor alkylator ecteinascidin 743. Proc Natl Acad Sci USA 2007;104(32): 13062-7.
44. Uboldi S., Bemasconi S., Romano M. et al. Characterization of a new trabectedin-resistant
myxoid liposarcoma cell line that shows collateral sensitivity to methylating agents. Int J Cancer 2012;131(1):59-69.
45. Donald S., Verschoyle R.D., Edwards R. et al. Hepatobiliary damage and changes
in hepatic gene expression caused by the antitumor drug ecteinascidin-743 (ET-743) in the female rat. Cancer Res 2002;62(15): 4256-62.
46. van Waterschoot R.A., Eman R.M., Wagenaar E. et al. ABCC2, ABCC3, and ABCB1, but not CYP3A, protect against trabectedin-mediated hepatotoxicity. Clin Cancer Res 2009;15(24):7616-23.
47. Laurenty A.P., Thomas F., Chatelut E. et al. Irreversible hepatotoxicity after administration of trabectedin to a pleiomorphic sarcoma patient with a rare ABCC2 polymorphism: a case report. Pharmacogenomics 2013;14(12):1389-96.
48. Donald S., Verschoyle R.D., Greaves P. et al. Comparison of four modulators of drug metabolism as protectants against the hepatotoxicity of the novel antitumor drug yondelis (ET-743) in the female rat and
in hepatocytes in vitro. Cancer Chemother Pharmacol 2004;53(4):305-12.
49. Donald S., Verschoyle R.D., Greaves P. et al. Complete protection by high-dose dexamethasone against the hepatotoxicity
of the novel antitumor drug yondelis (ET-743) in the rat. Cancer Res 2003;63(18):5902-8.
50. Lee J.K., Leslie E.M., Zamek-Gliszczynski M.J., Brouwer K.L. Modulation of trabectedin (ET-743) hepatobiliary disposition by multidrug resistance-associated proteins (Mrps) may prevent hepatotoxicity. Toxicol Appl Pharmacol 2008;228(1): 17-23.
51. Minuzzo M., Marchini S., Broqqini M.
et al. Interference of transcriptional activation by the antineoplastic drug ecteinascidin-743. Proc Natl Acad Sci USA 2000;97(12):6780-4.
52. Leibelt D.A., Hedstrom O.R., Fischer K.A. et al. Evaluation of chronic dietary exposure
to indole-3-carbinol and absorption-enhanced 3,3'-diindolylmethane in sprague-dawley rats. Toxicol Sci 2003;74(1):10-21.
53. Donald S., Verschoyle R.D., Greaves P.
et al. Dietary agent indole-3-carbinol protects female rats against the hepatotoxicity of the antitumor drug ET-743 (trabectedin) without compromising efficacy in a rat mammary carcinoma. Int J Cancer 2004;111(6):961-7.
54. Grosso F., Dileo P., Sanfilippo R. et al. Steroid premedication markedly reduces liver and bone marrow toxicity of trabectedin
in advanced sarcoma. Eur J Cancer 2006;42(10):1484-90.
55. Paz-Ares L., Lopez-Pousa A., Poveda A. et al. Trabectedin in pre-treated patients with advanced or metastatic soft tissue sarcoma:
a phase II study evaluating co-treatment with dexamethasone. Invest New Drugs 2012;30(2):729-40.
56. Murray P.J., Wynn T.A. Protective and pathogenic functions of macrophage subsets.
Nat Rev Immunol 2011;11(11):723-37.
57. Allavena P., Mantovani A. Immunology in the clinic review series; focus on cancer: tumour-associated macrophages: undisputed stars of the inflammatory tumour microenvironment. Clin Exp Immunol 2012;167(2):195-205.
58. Qian B.Z., Li J., Zhang H. et al. CCL2 recruits inflammatory monocytes to facilitate breast-tumour metastasis. Nature 2011;475(7355):222-5.
59. Germano G., Frapolli R., Simone M. et al. Antitumor and anti-inflammatory effects
of trabectedin on human myxoid liposarcoma cells. Cancer Res 2010;70(6):2235-44.
60. Germano G., Frapolli R., Belqiovine C. et al. Role of macrophage targeting in the antitumor activity of trabectedin. Cancer Cell 2013;23(2):249-62.
61. Allavena P., Germano G., Belgiovine C. et al. Trabectedin: A drug from the sea that strikes tumor-associated macrophages. Oncoimmunology 2013;2(6):e24614.
62. Stevens E.V., Nishizuka S., Antony S. et al. Predicting cisplatin and trabectedin drug sensitivity in ovarian and colon cancers. Mol Cancer Ther 2008;7(1):10-8.
63. Lopez-Guerrero J.A., Romero I., Poveda A. Trabectedin therapy as an emerging treatment strategy for recurrent platinum-sensitive ovarian cancer. Chin J Cancer 2015;34(1):41-9.
64. Pautier P., Floques A., Chevreau C. et al. Trabectedin in combination with doxorubicin for first-line treatment of advanced uterine or soft-tissue leiomyosarcoma (LMS-02):
a non-randomised, multicentre, phase 2 trial. Lancet Oncol 2015;16(4):457-64.
65. Kawano M., Mabuchi S., Kishimoto T.
et al. Combination treatment with trabectedin and irinotecan or topotecan has synergistic effects against ovarian clear cell carcinoma cells. Int J Gynecol Cancer 2014;24(5): 829-37.
66. Riccardi A., Meco D., Ubezio P. et al. Combination of trabectedin and irinotecan is highly effective in a human rhabdomyosarcoma xenograft. Anticancer Drugs 2005;16(8):811-5.
67. Stephens B.J., Han H., Gokhale V.,
Von Hoff D.D. PRL phosphatases as potential molecular targets in cancer. Mol Cancer Ther 2005;4(11):1653-61.
68. Cai X., Gray P.J. Jr, Von Hoff D.D. DNA minor groove binders: back in the groove. Cancer Treat Rev 2009;35(5):437-50.
69. Coward J.I., Middleton K., Murphy F. New perspectives on targeted therapy
in ovarian cancer. Int J Womens Health 2015;7:189-203.
70. Collins I.M., Thomas D.M. Novel approaches to treatment of leiomyosarcomas. Curr Oncol Rep 2011;13(4):316-22.
71. Kirsanov K.I., Kotova E., Makhov P. et al. Minor grove binding ligands disrupt PARP-1 activation pathways. Oncotarget 2014;5(2):428-37.
in
СЧ
CM
Ж
Ш
CJ
