CC BY
108
УДК 619:615.322
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА НАСТОЙКИ ЧЕМЕРИЦЫ ЛОБЕЛЯ И ЧЕМЕРИЧНОЙ ВОДЫ
И.Н. НИКОЛАЕНКО УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Витебская обл., Республика Беларусь, 211311
(Поступила в редакцию 20.01.2010)
Введение. Широкий выбор биологически активных веществ дает возможность многосторонне использовать лекарственные растения для лечения больных животных. К их числу относится и чемерица Лобеля.
Препараты чемерицы обладают рвотным, руминаторным, раздражающим, болеутоляющим и противопаразитарным действиями. Алкалоиды растения (протовератрин, протоверин) снижают артериальное давление, увеличивают амплитуду сердечных сокращений [1,2]. М.И. Рабиновичем [8] установлено противовоспалительное действие алкалоидов чемерицы Лобеля. Этот эффект, по-видимому, связан с вызываемой стимуляцией коркового слоя надпочечников. Протоверат-рин также обладает длительным гипотензивным действием, эффективным при лечении эклампсии и острых преэклампсических состояний. Это объясняется его способностью повышать чувствительность баро-рецепторов дуги аорты и синокаротидной зоны.
Имеются данные о благоприятном действии протовератрина при гипертонической болезни. В экспериментах экстракты, настои и отвары оказывали мочегонное и седативное действие, проявляли бактерицидную активность, желчегонные свойства [6].
Цель работы - изучить токсикологические свойства настойки чемерицы Лобеля и чемеричной воды для лабораторных животных.
Материал и методика исследований. Изучение токсичности настойки чемерицы Лобеля и чемеричной воды проводили согласно методическим указаниям «Постановка исследований в объеме первичной токсикологической оценки веществ» [7], «Методическим указаниям по токсикологической оценке новых лекарственных препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных» [4] и «Методическим указаниям по токсикологической оценке химических веществ и фармакологических препаратов, применяемых в ветеринарии» [5].
Для определения острой токсичности использовали белых мышей массой 18-20 г обоего пола и крыс массой 180-200 г. Исследуемые вещества вводили натощак после 12-часовой голодной выдержки внутрижелудочно. Наблюдение за экспериментальными животными после однократного введения препарата вели в течение 14 суток.
Изучение влияния на кожу исследуемых препаратов проводили на крысах массой 180-200 г и кроликах массой 2-3 кг. Для проведения опытов на спине каждого животного выбривали участок кожи у крыс размером 4*4 см, у кроликов 7*8 см и через 24 ч втирали настойку
чемерицы Лобеля и чемеричную воду. Каждый препарат испытывали на 10 крысах и 3 кроликах при соответствующих контролях.
Изучение действия исследуемых препаратов на слизистую оболочку глаза проводили на кроликах. Для этого одну каплю изучаемых препаратов вводили глазной пипеткой в конъюнктивальный мешок правого глаза животных, а во второй глаз (контроль) - одну каплю дистиллированной воды. Каждый препарат испытывали на 3 животных.
Результаты исследований и их обсуждение. Определение острой токсичности чемерицы Лобеля проводили на десяти группах белых мышей и крыс (1-я - 5-я группы подопытные, 6-я - 10-я группы контрольные) клинически здоровых, обоего пола, по 10 особей в каждой группе.
Подопытным животным исследуемый препарат вводили в желудок шприцем посредством инъекционной иглы, на конце которой имеется наплавленное олово. Мышам и крысам контрольной группы вводили 70%-ный этиловый спирт.
Мыши:
- 1-я группа - 0,5 мл настойки чемерицы Лобеля (25 мл/кг массы или 22000 мг/кг массы);
- 2-я группа - 0,25 мл настойки чемерицы Лобеля (12,5 мл/кг массы или 11000 мг/кг массы);
- 3-я группа - 0,25 мл настойки чемерицы Лобеля в разведении дистиллированной водой 1:2 (6,25 мл/кг массы или 5500 мг/кг массы);
- 4-я группа - 0,25 мл настойки чемерицы Лобеля в разведении дистиллированной водой 1:4 (3,125 мл/кг массы или 2750 мг/кг массы);
- 5-я группа - 0,25 мл настойки чемерицы Лобеля в разведении дистиллированной водой 1:8 (1,562 мл/кг массы или 1375 мг/кг массы);
- 6-я группа - 0,5 мл 70%-ного этилового спирта (25 мл/кг массы);
- 7-я группа - 0,25 мл 70%-ного этилового спирта (12,5 мл/кг массы);
- 8-я группа - 0,25 мл 70%-ного этилового спирта в разведении дистиллированной водой 1:2 (6,25 мл/кг массы);
- 9-я группа - 0,25 мл 70%-ного этилового спирта в разведении дистиллированной водой 1:4 (3,125 мл/кг массы);
- 10-я группа - 0,25 мл 70%-ного этилового спирта в разведении дистиллированной водой 1:8 (1,562 мл/кг массы).
Крысы:
- 1-я группа - 8 мл настойки чемерицы Лобеля (40 мл/кг массы или 35200 мг/кг массы);
- 2-я группа - 4 мл настойки чемерицы Лобеля (20 мл/кг массы или 17600 мг/кг массы);
- 3-я группа - 4 мл настойки чемерицы Лобеля в разведении дистиллированной водой 1:2 (10 мл/кг массы или 8800 мг/кг массы);
- 4-я группа - 4 мл настойки чемерицы Лобеля в разведении дистиллированной водой 1:4 (5 мл/кг массы или 4400 мг/кг массы);
- 5-я группа - 4 мл настойки чемерицы Лобеля в разведении дистиллированной водой 1:8 (2,5 мл/кг массы или 2200 мг/кг массы);
- 6-я группа - 8 мл 70%-ного этилового спирта (40 мл/кг массы);
- 7-я группа - 4 мл 70%-ного этилового спирта (20 мл/кг массы);
- 8-я группа - 4 мл 70%-ного этилового спирта в разведении дистиллированной водой 1:2 (10 мл/кг массы);
- 9-я группа - 4 мл 70%-ного этилового спирта в разведении дистиллированной водой 1:4 (5 мл/кг массы);
- 10-я группа - 4 мл 70%-ного этилового спирта в разведении дистиллированной водой 1:8 (2,5 мл/кг массы).
В течение первого дня опыта все мыши и крысы 1, 2 и 6-й групп пали. Падеж мышей и крыс 3-й группы составил 70%, в 7-й и 4-й группах пало 60 и 20 % мышей и крыс соответственно. Мыши и крысы 5-й и 8-й, 9-й и 10-й групп выжили. В первые часы опыта у них отмечалось общее угнетение, вялость, пониженная двигательная активность и ослабленная реакция на раздражители. Впоследствии утерянная активность восстановилась, животные были достаточно подвижны, корм и воду принимали охотно, на внешние раздражители реагировали адекватно.
При осмотре и вскрытии трупов павших мышей и крыс были отмечены: цианоз видимых слизистых оболочек, полнокровие внутренних органов, воспалительные явления геморрагического характера в желудке и слизистой кишечника, отек легких.
Настойка чемерицы Лобеля в дозе 25 мл/кг и 12,5 мл/кг массы животного вызывает гибель 100% мышей, в дозе 6,25 мл/кг массы - 70% мышей, в дозе 3,125 мл/кг массы животного - 20%, в дозе 1,562 мл/кг гибели мышей не вызывает.
Настойка чемерицы Лобеля в дозе 40 мл/кг и 20 мл/кг массы животного вызывает гибель 100% крыс, в дозе 10 мл/кг массы - 70% крыс, в дозе 5 мл/кг массы животного - 20%, в дозе 2,5 мл/кг гибели крыс не вызывает.
ЛД50 настойки чемерицы Лобеля для мышей составляет 4950 мг/кг массы, для крыс - 7920 мг/кг массы животного.
Изучение подострой токсичности настойки чемерицы проводили на 20 белых мышах массой 18-20 г и 10 крысах массой 180-200 г, которые были разделены на 2 группы по 10 особей в каждой, а крысы - по 5 голов в каждой группе. Мышам 1-й группы ежедневно в течение 10 суток вводили в желудок 0,01 мл настойки чемерицы Лобеля, доведенной до объема 0,1 мл дистиллированной водой, что соответствует 0,5 мл/кг массы животного - терапевтическая доза. Крысам 1-й группы ежедневно в течение 10 дней вводили в желудок 0,1 мл настойки чемерицы Лобеля, что соответствует 0,5 мл/кг массы животного - терапевтическая доза.
Мышам и крысам 3-й (контрольной) группы вводили этиловый спирт внутрь в смеси с дистиллированной водой в соотношении 1:250 по 0,5 мл 2 раза в день в течение 10 суток. Это соответствует 0,1 мл/кг массы животного.
За подопытными животными вели ежедневное наблюдение в течение 30 дней. После введения препарата у мышей и крыс подопытных и контрольной групп каких-либо видимых отклонений от физиологической нормы отмечено не было. За время наблюдения гибели мышей не наблюдалось. При осмотре после убоя и вскрытия мышей и крыс всех трех групп, задействованных в опыте, видимых патологических изменений со стороны внутренних органов не обнаружено. Таким образом, рекомендуемая лечебная доза настойки чемерицы Лобеля, которая после десятидневного применения препарата внутрь с интервалом 12 ч, не оказывает видимого действия, составляет - 0,05-0,1 мл/кг массы животного.
В процессе изучения раздражающих свойств настойки чемерицы были получены следующие результаты. Настойка чемерицы при однократном нанесении на кожу кроликов и крыс в дозе 0,5 мл/кг массы животного вызывала временное покраснение, исчезавшее через несколько часов. Признаков воспаления не наблюдали. Спустя 10 суток с момента нанесения препарата кожа покрывалась равномерным шерстным покровом.
При изучении действия настойки чемерицы на слизистую оболочку глаза кролика препарат инсталлировали в нативном виде. Слизистая оболочка левого глаза служила контролем (закапывали одну каплю дистиллированной воды).
В первые сутки после применения препарата отмечали гиперемию слизистой оболочки и слезотечение. Однако уже на третьи сутки воспалительный процесс приостановился, а через 4-5 суток состояние слизистой глаза нормализовалось.
Острую токсичность чемеричной воды изучали на 70 белых мышах массой 18-20 г обоего пола и крысах массой 180-200 г обоего пола. Все животные были разделены на 7 групп по 10 особей в каждой. Чемеричную воду вводили натощак однократно в приведенных ниже дозах.
Мыши:
- 1-я группа - 1 мл (50 мл/кг массы или 49250 мг/кг массы);
- 2-я группа - 0,7 мл (35 мл/кг массы или 34475 мг/кг массы);
- 3-я группа - 0,6 мл (30 мл/кг массы или 29550 мг/кг массы);
- 4-я группа - 0,5 мл (25 мл/кг массы или 24625 мг/кг массы);
- 5-я группа - 0,4 мл (20 мл/кг массы или 19700 мг/кг массы);
- 6-я группа - 0,3 мл (15 мл/кг массы или 14775 мг/кг массы);
- 7-я группа (контрольная) - 0,5 мл.
Крысы:
- 1-я группа - 8 мл (40 мл/кг массы или 39400 мг/кг массы);
- 2-я группа - 7 мл (35 мл/кг массы или 34475 мг/кг массы);
- 3-я группа - 6 мл (30 мл/кг массы или 29550 мг/кг массы);
- 4-я группа - 5 мл (25 мл/кг массы или 24625 мг/кг массы);
- 5-я группа - 4 мл (20 мл/кг массы или 19700 мг/кг массы);
- 6-я группа - 3 мл (15 мл/кг массы или 14775 мг/кг массы);
- 7-я группа (контрольная) - 8 мл.
Наблюдение за подопытными животными проводили в течение 14 дней. Обращали внимание на потребление корма и воды, акт дефекации и мочеотделения, активность и ориентацию в пространстве, состояние видимых слизистых оболочек, зрачков, цвет ушных раковин, состояние кожи и шерстного покрова, тонус скелетных мышц и координацию движений.
В первые несколько часов опыта у животных 4, 5 и 6-й групп мышей и 4-й, 5-й и 6-й групп крыс отмечались общее угнетение, понижение двигательной активности, ослабление реакции на раздражители, корм и воду все животные принимали неохотно. Состояние мышей нормализовалось спустя 20-25 минут, животные были подвижны, хорошо реагировали на раздражители. Корм и воду принимали охотно в течение всего эксперимента.
В 1-й подопытной группе погибли все мыши и крысы в течение суток. У некоторых животных смерть наступала в течение первых часов после введения препарата при явлениях угнетения, одышки, цианоза и асфиксии.
Во 2-й подопытной группе в течение первых двух суток опыта отмечалась гибель 7 мышей и крыс (70%), а в 3 -й - 2 мышей и крыс (20%).
Признаки токсикоза начали проявляться сразу после введения препарата и характеризовались резко выраженным угнетением, западени-ем глаз, мыши и крысы принимали боковое положение, у них наблюдались судороги и гибель в течение 5-10 минут.
При вскрытии 18 вынужденно убитых мышей и крыс (по три с каждой группы) установили, что у животных 1 -й и 2-й групп мышей и крыс отмечались катарально-геморрагический гастроэнтерит и массовые кровоизлияния на слизистой желудка и тонкого отдела кишечника. У животных остальных групп, как крыс, так и мышей, видимых морфологических изменений в тканях легких, сердца, печени и почек не обнаружено. Паренхиматозные органы обычной консистенции, на разрезе имеют обычное строение. Желудок и кишечник содержат остатки корма.
ЛД50 чемеричной воды для мышей составляет 33982,5 мг/кг массы, для крыс - 36198,75 мг/кг массы животного.
Изучение подострой токсичности чемеричной воды проводили на 20 белых мышах массой 18-20 г и 10 крысах массой 180-200 г, которые были разделены на 2 группы по 10 особей в каждой, а крысы - по 5 особей в каждой. Мышам 1-й группы ежедневно в течение 10 суток вводили в желудок 0,1 мл чемеричной воды, что соответствует 5 мл/кг (5000 мг/кг) массы животного - терапевтическая доза. Крысам 1-й группы ежедневно в течение 10 суток вводили в желудок 1 мл чемеричной воды, что соответствует 5 мл/кг (5000 мг/кг) массы животного -терапевтическая доза. Мыши и крысы вторых групп служили контролем и препарат не получали. Наблюдение за животными вели в течение периода дачи препарата.
В результате опыта установили, что чемеричная вода при длительном внутреннем назначении в течение 10 суток не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии белых мышей и крыс. Поведение, аппетит, дыхание на протяжении опыта оставались в пределах нормы. Животные были подвижны, активны, хорошо принимали корм и воду, рефлексы были сохранены.
При вскрытии 6 вынужденно убитых мышей и крыс (по три с каждой группы) макроскопически морфологических изменений внутренних органов и покровов не выявлено.
В результате изучения кожно-резорбтивного действия чемеричной воды на кожу крыс и кроликов получили следующие результаты. Чемеричная вода при однократном нанесении на кожу крыс и кроликов в дозе 5 мл/кг живой массы вызывала временное покраснение, исчезавшее спустя 24 часа. Признаков воспаления или раздражения не наблюдали.
При изучении действия чемеричной воды на слизистую оболочку глаза препарат вводили в конъюнктивальный мешок правого глаза кроликов в нативном виде. Слизистая оболочка левого глаза служила контролем (закапывали одну каплю дистиллированной воды). В первые несколько часов после применения чемеричной воды отмечали слабую гиперемию конъюнктивы и роговицы и слезотечение. Эти признаки исчезали спустя 1-2 суток после введения препарата.
Заключение. Установлена среднесмертельная доза (ЛД50) настойки и чемеричной воды для мышей - 4950 мг/кг и 33982,5 мг/кг массы соответственно и для крыс - 7920 мг/кг и 36198,75 мг/кг массы. Чемеричная вода относится согласно классификации химических веществ по степени опасности (ГОСТ 12.1.007-76) к IV классу, т.е. является малоопасным препаратом (ЛД50 более 5000 мг/кг). Настойка чемерицы Лобеля при однократном оральном введении мышам относится к III классу, т.е. к умеренноопасным веществам (ЛД50 от 151 до 5000 мг/кг), а для крыс - к IV классу опасности, т.е. к малоопасным. При назначении в течение 10 суток препаратов чемерицы Лобеля существенного влияния на организм животных они не оказывают. Кожно-резорбтивное действие на кожу и местно-раздражающее действие на слизистые оболочки глаза настойки чемерицы и чемеричной воды являются слабовыраженными.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ветеринарная токсикология: учебник под ред. И.Г. Арестова. Минск: Ураджай, 2000. 190 с.
2. Государственная фармакопея СССР. 9-е изд. М.: Медицина, 1961. 790 с.
3. Лекарственные средства в ветеринарной медицине: справочник / А.И. Ятусевич [и др.]. Минск: Техноперспектива, 2006. 403 с.
4. Методические указания по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных. Воронеж, 1987. 23 с.
5. Методические указания по токсикологической оценке химических веществ и фармакологических препаратов, применяемых в ветеринарии / А.Э. Высоцкий [и др.]. Минск, 2007. 156 с.
6. Пастушенков, Л.В. Лекарственные растения: использование в народной медицине и быту / Л.В. Пастушенков, А.Л. Пастушенков, В.Л. Пастушенков. Ленинград: Лениздат, 1990. 384 с.
7. Постановка исследований в объеме первичной токсикологической оценки веществ: метод. рекомендации: утв. Минздравом РБ 30.06.1994 г. Минск, 1994. 44 с.
8. Рабинович, М.И. Ветеринарная фитотерапия / М.И. Рабинович. 2-е изд., доп. и перераб. М.: Росагропромиздат, 1988. 174 с.
УДК 636.52/.58.083:636.085.16:665.334.9
ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАТА ВИТАМИНОВ Е И Р ИЗ РАПСОВОГО МАСЛА
НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ
А.П. КУРДЕКО
УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия» г. Горки, Могилевская обл., Республика Беларусь, 213407 П.А.САНДУЛ
УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 211311
(Поступила в редакцию 20.01.2010)
Введение. В промышленном птицеводстве среди всех патологий, обусловленных нарушением технологий содержания и кормления, наибольший удельный вес занимают незаразные болезни молодняка сельскохозяйственной птицы. При этом на одно из первых мест по частоте, массовости и величине экономического ущерба выходят заболевания пищеварительного тракта, в частности болезни печени [1, 8, 9].
Одним из распространенных заболеваний печени у цыплят бройлеров является токсическая дистрофия. Анализ данных по системе крупных птицеводческих хозяйств показывает, что в настоящее время данная болезнь сопровождается значительным падежом в течение всего года (от 20 - 40%) и наносит большой экономический ущерб хозяйствам.
Основной причиной токсической дистрофии печени является окислительный стресс, вызванный продолжительным скармливанием в составе рациона кормов, содержащих повышенные количества продуктов свободнорадикального окисления липидов (перекиси, оксикис-лоты, альдегиды, кетоны), образование которых наблюдается при длительном или неправильном хранении комбикормов или их компонентов, а также другие токсические вещества (микотоксины, нитраты, нитриты, непредельные углеводороды). Попадание в организм этих продуктов вызывает интенсификацию процессов перекисного окисления на уровне клеток и тканей, приводит к сдвигу кислотно-щелочного равновесия в кислую сторону, инактивации ряда ферментов, повреждению мембран клеток и субклеточных органелл вплоть до лизиса клеток, нарушению работы иммунной системы. Липидные перекиси, органические кислоты и альдегиды разрушают все жирорастворимые витамины, находящиеся как в кормах, так и в организме птицы [3, 5].
