CC BY
43
■ Mil
ш
Новости клеточных технологий. Клеточная трансплантология
18
лась без обсуждения причина такого выбора маркеров. Насколько правомочно лишь по экспрессии 0090+ декларировать что полученные клетки являются МСК? Тем более, что экспрессия этого антигена признаётся большинством исследователей на гемопоэтических предшественниках [6]. Несмотря на мощный арсенал примененных современных методов исследования, были сделаны достаточно скромные выводы о том, что системное введение клеток культуры способствует более раннему формированию рубца, некоторому увеличению доли эластических волокон в нем (данный вывод, к сожалению, не базируется на результатах собственных исследований), улучшению васкуляризации зоны бывшего инфаркта. К сожалению, остались без тщательного обсуждения возможные механизмы воздействия пересаженных клеток на поврежденный миокард. От себя добавим, что в настоящее время большинство исследователей склоняется к регулирующей функции пересаженных клеток и стимуляции ими ангиоге-неза в зоне повреждения. Вопрос о значении васкуляриза-ции зоны ишемии, на наш взгляд, требует особого рассмотрения. Сложился стереотип: чем больше в зоне рубца
сосудов, тем лучше прогноз для пациента. Однако, рубец с малым количеством сосудов или с большим все равно останется рубцом - афункциональной тканью сердца. Морфогенез инфаркта миокарда сложен. После наступления гибели части кардиомиоцитов в данном локусе закономерно развивается асептическое воспаление. На месте некроза формируется «грануляционная ткань» - провизорная структура весьма богатая сосудами. Дальнейшая их редукция связана с апоптозом эндотелиоцитов по мере формирования и созревания рубца. Пусковые механизмы этого процесса пока не выяснены. Исходя из этого, если уж и стремиться сохранить повышенную васкуляризацию зоны инфаркта, то не путем вживления клеток-предшественников, в т.ч. эндотелиоцитов, а путем блокировки апоптоза. На данный механизм, как один из возможных в действии клеточного трансплантата, указывают и авторы статьи, однако без должного анализа. Исходя из качества представленных исследований, приходится констатировать, что проделанная работа не всегда направлена на поиск истины, часто имеет место наукообразная реклама коммерческих клеточных технологий.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Дедух Н.В., Панков Е.Я. Скелетные ткани. В кн.: Руководство по гистологии. Т.1. СПб.: СпецЛит; 2001. С. 284-336.
2. Кругляков П.В., Соколова И.Б., Аминева Х.К. и др. Терапия экспериментального инфаркта миокарда у крыс с помощью трансплантации сингенных мезенхимальных стволовых клеток. Цитология 2004; 46; 12: 1043-54.
3. Barbash I.M. et al. Systemic delivery of bone marrow-derived mesenchymal stem cells to the infarcted myocardium: feasibility, cell migration, and body distribution. Circulation. 2003; 108; 7: 863-8.
4. Horwitz M.E. et al. Granulocyte colony-stimulating factor mobilized peripheral blood stem cells enter into G1 of the cell cycle and express higher levels of amphotropic retrovirus receptor mRNA. Exp Hematol 1999; 27; 7: 1160-7.
5. Orlic D. et al. Transplanted adult bone marrow cells repair myocardial
infarcts in mice. Ann NY Acad Sci 2000; 938: 221-9.
6. СD Markers. http://www.pathologyoutlines.com/ cdmarkers.html#cd90
7. Берсенев А.В. Клеточная кардиомиопластика аутологичными CD133+ клетками, мобилизированными в периферический кровоток.
http://celltranspl.ru/journal/news/ ?MESSAGES[1]=SH0W_NEWS&NEWS_ID=702.
8. Берсенев А.В. Биология AC133+ клеток - новые данные. http://celltranspl.ru/journal/news/ ?MESSAGES[1]=SHOW_NEWS&NEWS_ID=646.
9. Потапов И.В. К вопросу о сравнительной эффективности метода интрамиокардиальной клеточной трансплантации. http://celltranspl.ru/journal/news/ ?MESSAGES[1]=SHOW_NEWS&NEWS_ID=593.
Подготовил Р.В. Деев; по материалам Цитология 2004; 46; 12: 1043-54.
Тканевая инженерия пороков развития ушной раковины
Возможность использования аутогенного клеточного материала для регенерации пораженного органа является «красивой идеей» современной пластической, реконструктивной и косметической хирургии врожденных пороков развития. Поскольку ткани пораженного органа часто бывают подвержены дисморфогенезу и дисплазии, то можно предположить, что клетки этих тканей также могут отличаться от нормальных и иметь в себе отрицательные признаки, такие, как нарушения синтеза белков внеклеточного матрик-са и адгезии, или те или иные нарушения, приводящие к развитию клинических признаков заболевания. Так, например, микротия - врожденный порок развития ушных раковин - возникает вследствие воздействия тератогенных факторов во время закладки 1-й и 2-й пар жаберных дуг. В связи с тем, что данный порок развития представляет собой выраженный косметический дефект и коррекция требует дополнительного пластического материала, то возникает вопрос о его источнике. В настоящее время в клинической практике, для этой цели широко применяются местные ткани и реберный хрящ [1-3]. Технологии ткане-
вой инженерии могли бы обеспечить достаточное количество пластического материала, не прибегая к расширению оперативного вмешательства. Однако возникает вопрос, можно ли использовать в качестве источников клеток те ткани, которые подверглись дисплазии и тератогенезу? Исследовательская группа Уасапй С. попыталась найти ответ на этот вопрос. От 6-ти здоровых детей, оперированных по поводу лопоухости, и от 6-ти детей с микротией были получены образцы хрящевой ткани ушных раковин. Клетки хряща были выделены и культивированы по стандартным протоколам [4-6]. После первого же пассажа отмечено, что в культуре, полученной от детей с микротией, наблюдается большее количество фибробластоподобных клеток. Затем хондроциты были заключены в гель из оксида полиэтилена и оксида полипропилена в соотношении 70:30 и помещены под кожу 4-х-недельных бестимусных мышей на срок до 8 недель в концентрации 30-40 млн/мл. После выведения животных из эксперимента, полученные образцы были исследованы с помощью гистологических методов. Через 8 недель хондроциты, выделенные от обеих групп
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия № 1, 2005
J_CTTE_pages_approved_v6_.pmd
25.08.2005, 17:10
18
гттт
ri
ш
Новости клеточных технологий. Клеточная трансплантология
■
детей, сформировали хрящевую ткань. Никаких значимых различий в морфологическом строении ткани обнаружено не было.
Таким образом, исследователи делают вывод, что хон-дроциты, выделенные от детей с микротией, могут сформировать правильную трехмерную структуру нормальной хрящевой ткани, следовательно, они могут быть использованы в качестве источника для реконструкции ушной раковины методами тканевой инженерии. Это исследование касается лишь тканей, подвергнувшихся действию тератогенных факторов. Нельзя пока сказать то же самое о тканях, клетки которых несут поврежденные гены. Возможность использования аутологичных тканей, несущих «генетические поломки» остается предметом будущих исследований.
Рис. Культура хондроцитов после первого пассажа,
а - от здоровых детей; б - от детей, страдающих микротией. Сканирующая электронная микросопия. Из Laryngoscope 2004; 114: 12 с изменениями.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Милешина Н.А. Особенности функциональной реабилитации врожденных пороков развития органа слуха у детей. Вестник оториноларингологии 2003; 5: 19-22.
2. Солониченко В.Г., Красовская Т.В. Клиническая дисморфология хирургических болезней у детей. Детская хирургия 1998; 4: 4-9.
3. Brent B. Microtia repair with rib cartilage grafts: a review ofpersonal perience with 1000 cases. Clin Plast Surg 2002; 29: 257-71.
Rodriquez A. et al. Characteristics of cartilage engineered from human pediatric auricular cartilage. Plast Reconstr Surg 1999; 103: 1111-9.
Kamil S.H. et al. In vitro tissue engineering to generate a human-sized auricle and nasal tip. Laryngoscope 2003; 113: 90-4. Kamil S.H. et al. Expansion of the number of human auricular chondrocytes: recycling of culture media containing floating cells. Tissue Eng 2004; 10: 139-44.
Подготовил А.В. Волков; по материалам Laryngoscope 2004; 114: 12.
Создание функционирующей ткани слюнной железы человека в эксперименте
+
Около 500000 человек в мире страдает гипофункцией слюнных желез. Ежегодный прирост заболевших составляет от 20000 до 40000 человек. Гипофункция слюнных желез возникает в результате поражения железистой ткани во время лучевой терапии онкологических заболеваний лица и шеи, аутоиммунных поражений, хронических воспалительных заболеваний и пороков развития. Чаще всего на фоне этих состояний, развивается гипосиалия (снижение количества слюны) и ксеростомия (сухость слизистой оболочки полости рта), постепенно прогрессирующая со временем. Больных беспокоит периодическая или постоянная
сухость полости рта. С целью коррекции этого состояния прибегают к пожизненной терапии препаратами группы пилокарпина. Однако постепенно развивающиеся побочные эффекты лишь ухудшают качество жизни пациентов [1-9]. Современные клеточные технологии позволяют создавать органы и ткани de novo. Ранее уже были опубликованы работы по изоляции, культивированию и изучению функции in vitro железистого эпителия слюнных желез [10-14]. В журнале The Laryngoscope опубликовано исследование группы Atala A., демонстрирующее возможность получения функционирующей ткани слюнной железы человека. В качестве
Рис. Первичная культура клеток слюнной железы человека, выделенных из биоптатов,
а - иммуноцитохимическое окрашивание на аквапорин-5; б - иммуноцитохимическое окрашивание на цитокератины AE1/AE3. Из Laryngoscope 2005; 115: 244-48 с изменениями.
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия № 1, 2005
J_CTTE_pages_approved_v6_.pmd
19
25.08.2005, 17:10
4
Б.
