© ЛЕМЗА С.В., ХАМАЕВА Н.А., ТОРОПОВА А.А., ПЕТРОВ Е.В. - 2015 УДК 615.322
«тиреотон» как фитокорректор дисфункций митохондрий мозга при экспериментальном гипотиреозе
Сергей Васильевич Лемза, Надежда Антоновна Хамаева, Анюта Алексеевна Торопова, Евгений Васильевич Петров (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор - д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов)
Резюме. Тиреоидные гормоны участвуют в регуляции основного метаболизма и энергетического гомеоста-за в различных органах и тканях. В настоящей работе представлены данные по влиянию растительного средства «Тиреотон» на показатели митохондриального дыхания при экспериментальном гипотиреозе. Эксперименты выполнены на 40 белых крысах линии Wistar. Определена активность показателей антиоксидантной системы глутати-она, каталазы, а также интенсивность скоростей дыхания митохондрий в различных метаболических состояниях. Установлено, что фитосредство повышает содержание восстановленного глутатиона в 1,8 раза, а активность глу-татионпероксидазы и глутатионредуктазы в среднем в 1,3 раза по сравнению с контролем. Кроме того, «Тиреотон» увеличивает сопряженность процессов окисления и фосфорилирования в митохондриях головного мозга, что выражается в увеличении коэффициента дыхательного контроля и отношения АДФ/О в среднем в 1,6 раза по сравнению с данными животных контрольной группы. Таким образом, «Тиреотон» можно рассматривать как перспективный фитокорректор дисфункций митохондрий клеток головного мозга при гипотиреозе.
Ключевые слова: экспериментальный гипотиреоз, «Тиреотон», митохондрии мозга, восстановленный глутати-он, глутатионпероксидаза, глутатионредуктаза, каталаза.
«TIREOTON» AS A pHYTOCORRECTOR OF BRAIN CELL MITOCHONDRIAL DYSFUNCTIONS
in experimental hypothyreosis
S.V. Lemza, N.A. Khamaeva, A.A. Toropova, E.V. Petrov (Institute of General and Experimental Biology, SB RAS, Ulan-Ude, Russia)
Summary. Thyroid hormones regulate basal metabolic rates and organism's energy homeostasis. The paper deals with the influence of phytoremedy «Tireoton» on mitochondrial resperation and parameters of the glutathione system. In total 40 albino Wistar rats of both sexes were taken into the experiments. Mitochondrial resperation rates of different metabolic states, glutathione peroxidase, glutathione reductase and catalase activities as well as the content of reduced glutathione were determined. It has been shown that the phytoremedy 1,8 increases the content of reduced glutathione and glutathione peroxidase and glutathione reductase activities 1,3 time increase compared to control. «Tireoton» also improves the coupling of mitochondrial respiration and oxidative phosphorylation that resulted in 1,6-fold increase of the respiratory control ratio and ADP/O ratio compared to control values. Thus «Tireoton» may be considered as a promising phytocorrector of brain cell mitochondrial dysfunctions in experimental hypothyreosis.
Key words: experimental hypothyreosis, «Tireoton», brain mitochondria, reduced glutathione, glutathione peroxidase, glutathione reductase, catalase.
Известно, что тиреоидные гормоны (ТГ) участвуют в регуляции основного метаболизма и энергетического гомео-стаза в различных тканях организма. Наиболее ярко это проявляется у больных с гипо- и гипертиреозом и связывается с непосредственным влиянием ТГ на метаболически активные органы, такие как печень, сердце, скелетные мышцы, мозг и жировую ткань [10]. В этом отношении митохондрии как «энергетические станции» клетки и как органеллы, обладающие собственным геномом, следует рассматривать основной мишенью тиреоидных гормонов для осуществления их регулирующих функций. Известно, что главными регуляторами биогенеза митохондрий являются ТГ [11] и, что митохондрии, выделенные из крыс с гипертиреозом, значительно быстрее потребляют кислород, а из крыс с гипотиреозом значительно медленнее, чем митохондрии интактных животных [8,12]. При этом недостаток тиреоидных гормонов, кроме нарушения энергетического обмена, ведет к дисбалансу прооксидантно-антиоксидантной системы организма и усилению процессов перекисного окисления биомакромолекул, в частности липидов, формируя состояние окислительного стресса [2], который ведет к лавинообразному накоплению активных форм кислорода (АФК) и развитию дисфункции митохондрий.
Ранее в лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН было разработано комплексное растительное средство, условно названное «Тиреотон», состоящее из сухих экстрактов лапчатки белой (Potentilla alba L.) - 50%, родиолы розовой (Rhodiola rosea L.) - 25% и шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi) - 25%, полученных путем трехкратной экстракции 40% спиртом этиловым, c последующей фильтрацией и вакуумной сушкой при температуре 50-60оС. Предварительные исследования показали, что указанное фи-тосредство обладает выраженной антиоксидантной актив-
ностью в условиях экспериментального гипотиреоза [5].
Целью настоящей работы явилось изучение влияния комплексного растительного средства «Тиреотон» на мито-хондриальное дыхание и биоэнергетику головного мозга белых крыс при экспериментальном гипотиреозе.
Материалы и методы
Исследования были выполнены на белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 180-200 г. Содержание животных соответствовало «Правилам лабораторной практики» (ОЬР) и Приказу Минздрава России №708н от 23.08.2010 г. «Об утверждении правил лабораторной практики». Экспериментальную работу осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Минздрава СССР №755 от 12.08.1977 г.), «Правилами, принятыми в Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986).
Все животные были разделены на 5 групп по 8 животных в каждой: интактная (Н20), контрольная (гипотиреоз + НО), опытная 1 (гипотиреоз+«Тиреотон»), опытная 2 (гипотиреоз+«Эндокринол»), опытная 3 (гипотиреоз+тетрайодтиронин). Модель экспериментального гипотиреоза воспроизводили по методу Л.Г. Чугуновой [6] путем ежедневного перорального введения мерказолила в дозе 10 мг/кг в течение 28 дней. Затем крысы опытной группы 1 получали внутрижелудочно водный раствор «Тиреотона» в дозе 50 мг/кг один раз утром в течение 21 дня, опытной группы 2 - «Эндокринол» в эквивалентной дозе. Крысам опытной группы 3 за 30 минут до забоя вводили тетрайодтиронин (Т4) в дозе 10 нг/кг массы тела внутрибрюшинно. Животные ин-тактной и контрольной групп получали воду, очищенную в
эквиобъёмном количестве по аналогичной схеме. На 21 сутки от начала введения исследуемых средств крыс декапитирова-ли с помощью гильотины под легким эфирным наркозом.
Митохондрии головного мозга выделяли по методу [13]. Функциональное состояние изолированных митохондрий оценивали полярографически («Эксперт-001 МТХ», Россия) по скорости потребления кислорода в разных метаболических состояниях по Б. Чансу. Скорость потребления кислорода рассчитывали до (У40), во время (У31) и после (У41) цикла фосфорилирования добавленного АДФ (150 мкМ). В работе использовалась наиболее подходящая для изучения дыхания митохондрий головного мозга комбинация субстратов: глутамат (10 мМ): малат (2 мМ): пируват (2,5 мМ). Скорость дыхания митохондрий выражали в нанограмм-атом 02/мин/мг белка митохондрий. Об энергетическом статусе митохондрий судили по коэффициентам стимуляции дыхания СД = У31/У40 и дыхательного контроля ДК = У31/ У4Г Сопряженность окислительного фосфорилирования оценивали по отношению АДФ:О.
Активность каталазы определяли в гомогенате головного мозга крыс по методу [1], активность глутатионредук-тазы (ГР), глутатионпероксидазы (ГП) и содержание восстановленного глутатиона (ВГ) - по методам описанным в [3,14,15].
Параметры дыхания митохондрий Группы животных (n=8)
Интактная (H2O) Контрольная (ГТ+Н20) Опытная , (ГТ+«Тиреотон») Опытная 2 (ГТ+«Эндокринол») Опытная 3 (ГТ+ТД)
V4„ 90,8,±4,38 48,40±2,42* 61,92±3,37f 93,25±5,98 104,07±6,87
V3, 438,81±21,11 125,03±5,88* 162,21±8,83f 268,85±,7,24 285,72±15,86
V4, 227,02±9,94 153,27±7,66* 124,78±7,85f 157,50±,0,,0 188,20±12,42
СД 4,83±0,23 2,58±0,13* 2,62±0,,4 2,88±0,,5 2,75±0,18
ДК ,,93±0,09 0,82±0,04* 1,30±0,07f 1,71±0,07 1,52±0,10
АДФ/О 3,68±0,,8 2,22±0,11* 3,54±0,19f 3,11±0,20 3,58±0,24
Примечание. Скорости дыхания выражены - нанограмм-атом О2/мин/мг белка митохондрий. ГТ - гипотиреоз.
Количественное содержание белка определяли методом Брэдфорда [7]. Обработку полярографических данных осуществляли с помощью программы Origin 8.5.
Предварительно все исходные данные были проверены на нормальность с использованием метода Шапиро-Уилка. В последующем их статистическую обработку проводили с помощью пакета программ «Biostat-2006» с использованием t-критерия Стьюдента. Различия между сравниваемыми группами считали статистически значимыми при р<0,05.
Результаты и обсуждение
Известно, что на фоне развития гипотиреоза отмечается активация процессов свободнорадикального окисления биомакромолекул, нарушение проницаемости мембран, что приводит к дисфункции митохондрий и, прежде всего, к разобщению окислительного фосфорилирования.
Действительно, как следует из данных, представленных в таблице 1, наблюдается существенное угнетение показателей системы глутатиона (ВГ, ГП и ГР) и снижение активности каталазы. Так, содержание восстановленного глутатиона снизилось в контрольной группе животных в 1,8 раза, активность ГП, ГР и каталазы на 38, 26 и 65% соответственно по сравнению со значениями в интактной группе животных.
влияние «Тиреотона» на показатели антиоксидантной системы глутатиона по сравнению с препаратом сравнения «Эндокринолом». Таким образом, представленные в таблице 1 результаты подтверждают ранее сделанный нами вывод о выраженной антиоксидантной активности «Тиреотона», обусловленной наличием комплекса биологически активных веществ, таких как флавоноиды (кверцетин, кемпферол, рутин), фенолкарбоновые кислоты, сапонины, а также макро- и микроэлементов, таких как элементарный йод, магний, медь, селен, цинк, железо, алюминий, кремний, кобальт [5].
Введение гормона Т4 за 30 минут до декапитации животных, как и ожидалось, привело к значительному повышению активности ГП, ГР и каталазы, которое в 1,5, 1,9 и 1,2 раза соответственно превосходило действие «Тиреотона». И, тем не менее, эти данные позволяют нам высказать предположение о гормоноподобном действии исследуемого средства «Тиреотон», вероятно, обусловленного наличием в P. alba Альбинина, обладающего тиреотропной активностью [4].
Установлено, что экспериментальный гипотиреоз вызывает снижение скорости потребления кислорода в состоянии покоя (V40) и на стадии активного фосфорилирований (V31) в 1,9 и 3,5 раза соответственно по сравнению с животными интактной группы (табл. 2). По-видимому, снижение данных
Таблица 2
Влияние «Тиреотона» на показатели митохондриального дыхания при экспериментальном гипотиреозе
показателей обусловлено нарушениями в работе электрон-транспортной цепи митохондрий. Действительно, известно, что при гипотиреозе формируется состояние окислительного стресса [2], при котором происходит накопление активных форм кислорода, инактивирующих мембранносвя-занные и липидозависимые ферменты дыхательной цепи. Отмечается также снижение коэффициентов стимуляции дыхания и дыхательного контроля в 1,9 и 2,4 раза соответственно. Показатель сопряженности окислительного фос-форилирования АДФ/О снижался в 1,7 раза по сравнению с интактной группой животных.
На фоне введения «Тиреотона» наблюдается повышение скоростей дыхания в разных метаболических состояниях. Так, начальная скорость окисления и скорость окислительного фосфорилирования внесенного в систему АДФ повысились в 1,3 раза, а коэффициент ДК и АДФ/О - на 37% по сравнению с данными контрольной группы. Наблюдаемая интенсификация митохондриального дыхания, очевидно,
Таблица 1 о^°влен! Влияние «Тиреотона» на показатели системы глутатиона и активность каталазы при экспериментальном гипотиреозе
нием процессов свободно-радикального окисления мембранных структур митохондрий, что ведет к восстановлению функционирования мембра-носвязанных ферментов дыхательных комплексов. Аналогичный эффект наблюдался на фоне введения препарата сравнения «Эндокринол».
При введении живот-
Примечание. Здесь и далее: * - различия между интактной и контрольной группами; t - различия между ным гормона Т скорость контрольной и опытной группой. Различия между группами статистически значимы при р<0,05. ГТ - гипо- окислеНия субстратов
(У40) повышалась в 2,1
Группы животных (n=8) ВГ, нмоль/мг белка ГП, нмоль/мин/мг белка ГР, нмоль/мин/мг белка Каталаза, мкат/мг белка
Интактная (Н20) 44,77±2,35 194,47±10,21 259,18±13,02 4,73±0,25
Контрольная(ГТ+Н20) 24,73±1,30* 121,43±6,37* 190,61±13,40* 1,64±0,09*
Опытная 1 (ГТ+«Тиреотон») 44,09±2,33f 164,00±8,61f 267,46±10,01f 3,01±0,16+
Опытная 2 (ГТ+«Эндокринол») 38,18±2,01 155,11±8,14 245,07±12,86 2,33±0,12
Опытная 3 (ГТ+ТД) 44,59±2,34 248,73±13,06 498,78±26,13 3,70±0,19
тиреоз.
На фоне введения исследуемого фитосредства содержание ВГ возросло в 1,8 раза, активности ГП и ГР повысились в среднем в 1,3 раза, каталазы - в 1,8 раза по сравнению с контролем. При этом следует отметить более выраженное
раза, а скорость фосфори-лирования (У31) в 2,3 раза по сравнению с контролем (табл. 2). В этом случае, вероятно, проявляется краткосрочный эффект гормона Т4, который реализуется через связывание
дииодтиронина (Т2) с 28 kDa c-Erb Aal белком внутренней мембраны митохондрий, стимулируя митохондриальное дыхание [9].
Таким образом, проведенные нами исследования показали, что «Тиреотон» обладает выраженной антиоксидантной активностью, оказывающей благотворное влияние на функциональное состояние митохондрий при экспериментальном гипотиреозе. Наличие в нем альбинина, который проявляет тиреотропную активность, позволяет нам сделать вывод о гормоноподобном действии исследуемого фитосредства.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсут-
ствии конфликта интересов.
Прозрачность исследования. Исследование не имело спонсорской поддержки. Исследователи несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.
Декларация о финансовых и иных взаимодействиях. Все авторы принимали участие в разработке концепции и дизайна исследования и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.
Работа поступила в редакцию: 25.02.2015 г.
ЛИТЕРАТУРА
1. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. -1988. - №1. - С.16-19.
2. Крюк Ю.Я., Махнева А.В., Золотухин С.Е. и др. Особенности проявления оксидативного стресса при гипотиреозе разной степени тяжести в эксперименте // Патология.
- 2011. - Т. 8. №2. - С.62-65.
3. Методы биохимических исследований: липидный и энергетический обмен / Под ред. М.И. Прохоровой. - Л., 1982. - 272 c.
4. Тиреотропное вещество альбинин - ключ к созданию лекарств для лечения заболеваний щитовидной железы нового поколения http://russianstartuprating.ru/startup/view/8c7 28927e5b061ee0b36aaf31bfb7e950119ab6a/.
5. Хамаева Н.А., Лемза С.В., Торопова А.А. и др. Влияние растительного средства «Тиреотон» на энергетический метаболизм головного мозга при экспериментальном гипотиреозе // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2014.
- №4. - С.100-102.
6. Чугунова Л.Г., Рябков А.Н., Савилов К.В. Способ моделирования гипотиреоза // Патент 2165648 Российская Федерация. МПК G 09 В 23128, А 61 К 31/4164. - Рязанский государственный медицинский университет. - №97120428/14. - 2001.
7. Bradford M.M. A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding // Anal. Biochem. - 1976. - Vol. 72. - P.248-254.
8. Hoch F.L. Lipids and thyroid hormones // Progress in Lipid Research. - 1988. - Vol. 27. - P.199-270.
9. Katyare S.S., Rajan R.R. Influence of thyroid hormone treatment on the respiratory activity of cerebral mitochondria from hypothyroid rats. A critical re-assesment // Experimental Neurology - 2005. - Vol. 195. - P.416-422.
10. LopezМ., Alvarez C.V., Nogueiras R., et al. Energy balance regulation by thyroid hormones at central level // Trends in Molecular Medicine. - 2013. - Vol. 19. №7. - P.418-427.
11. Mutvei A., Husman B., Andersson G&N B.D. Thyroid hormone and not growth hormone is the principal regulator of mammalian mitochondrial biogenesis // Acta Endocrinologica. -1989. - Vol. 121. - P.223-228.
12. Nobes C.D., Brown G.C., Olive P.N., et al. Non-ohmic proton conductance of the mitochondrial inner membrane in hepatocytes // Journal of Biological Chemistry. - 1990. - Vol. 265.
- P.12903-12909.
13. Panov A., Dikalov S., Shalbuyeva N., et al. Species- and tissue-specific relationships between mitochondrial permeability transition and generation of ROS in brain and liver mitochondria of rats and mice // Am. J. Physiol. Cell Physiol. - 2007. - Vol. 292.
- P.708-718.
14. Pinto R.E., Bartley W. The effect of age and sex on glutathione reductase and glutathione peroxidase activities and on aerobic glutathioneoxidation in rat liver homogenates // Biochemistry journal. - 1969. - P.109-115.
15. Shaik I.H., MehvarR. Rapid determination of reduced and oxidized glutathione levels using a new thiol-masking reagent and the enzymatic recycling method: Application to the rat liver and bile samples // Anal Bioanal Chem. - 2006. - Vol. 385. №1.
- P.105-113.
REFERENCES
1. Korolyuk M.A., Ivanova L.I., Mayorova I.G., et al. The method for catalase activity determination // Laboratornoe delo. - 1988. - №1. - P.16-19. (in Russian)
2. Kryuk Yu.Ya., Makhneva A.V., Zolotukhin S.E., et al. Special features of oxidative stress manifestation in experimental hypothyreosis of different severity // Patologiya. - 2011. - Vol. 8. №2. - P.62-65. (in Russian)
3. Methods of biochemical researches: lipid and energy metabolism / Ed. M.I. Prokhorova. - Leningrad, 1982. - 272 p. (in Russian)
4. Thyreotropic compound albinin - a key to the development of new drugs for thyroid disease treatment http:// russianstartuprating.ru/startup/view/8c728927e5b061ee0b36aaf3 1bfb7e950119ab6a/. (in Russian)
5. Khamaeva N.A., Lemza S.V., Toropova A.A., et al. The influence of phytoremedy «Tireoton» on the brain energy metabolism in the experimental hypothyreosis // Sibirskij medicinskij zurnal (Irkutsk). - 2014. - №4. - P.100-102. (in Russian)
6. ChugunovaL.G., RyabkovA.N., SavilovK.V. The method for modeling hypothyreosis // Patent 2165648, Russian Federation. IPC G 09 В 23128, А 61 К 31/4164. - Ryazan State Medical University. - №97120428/14. - 2001. (in Russian)
7. Bradford M.M. A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding // Anal. Biochem. - 1976. - Vol. 72. - P.248-254.
8. Hoch F.L. Lipids and thyroid hormones // Progress in Lipid Research. - 1988. - Vol. 27. - P.199-270.
9. Katyare S.S., Rajan R.R. Influence of thyroid hormone treatment on the respiratory activity of cerebral mitochondria from hypothyroid rats. A critical re-assesment // Experimental Neurology - 2005. - Vol. 195. - P.416-422.
10. LopezМ., Alvarez C.V., Nogueiras R., et al. Energy balance regulation by thyroid hormones at central level // Trends in Molecular Medicine. - 2013. - Vol. 19. №7. - P.418-427.
11. Mutvei A., Husman B., Andersson G&N B.D. Thyroid hormone and not growth hormone is the principal regulator of mammalian mitochondrial biogenesis // Acta Endocrinologica. -1989. - Vol. 121. - P.223-228.
12. Nobes C.D., Brown G.C., Olive P.N., et al. Non-ohmic proton conductance of the mitochondrial inner membrane in hepatocytes // Journal of Biological Chemistry. - 1990. - Vol. 265.
- P.12903-12909.
13. Panov A., Dikalov S., Shalbuyeva N., et al. Species- and tissue-specific relationships between mitochondrial permeability transition and generation of ROS in brain and liver mitochondria of rats and mice // Am. J. Physiol. Cell Physiol. - 2007. - Vol. 292.
- P.708-718.
14. Pinto R.E., Bartley W. The effect of age and sex on glutathione reductase and glutathione peroxidase activities and on aerobic glutathioneoxidation in rat liver homogenates // Biochemistry journal. - 1969. - P.109-115.
15. Shaik I.H., MehvarR. Rapid determination of reduced and oxidized glutathione levels using a new thiol-masking reagent and the enzymatic recycling method: Application to the rat liver and bile samples // Anal Bioanal Chem. - 2006. - Vol. 385. №1.
- P.105-113.
Информация об авторах:
Лемза Сергей Васильевич - к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН, 670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; Хамаева Надежда Антоновна - аспирант лаборатории экспериментальной
фармакологии ИОЭБ СО РАН; Торопова Анюта Алексеевна - к.б.н., научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН, e-mail: anyuta-tor@mail.ru; Петров Евгений Васильевич - к.ф.н., старший научный сотрудник
ОБАВ ИОЭБ СО РАН.
Information About the Authors:
Lemza Sergey Vasilyevich - PhD, senior researcher, Laboratory of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS, 670047, Ulan-Ude, Sakhyanovoy str. 6, ph. (3012) 433713; Khamaeva Nadezhda Antonovna - postgraduate student, Laboratory of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS; Toropova Anyuta Alexeevna -PhD, scientific researcher, laboratory of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS, e-mail: anyuta-tor@mail.ru; Petrov Evgeny Vasilyevich - PhD, senior researcher, Laboratory of biologically active substances,
Institute of General and Experimental Biology, SB RAS.
© ЗЫКОВА И.Д., НАЙМУШИНА Л.В., ГАСАНОВ Р.З. - 2015 УДК 615.322:547.913
сравнительный анализ компонентного состава эфирного масла цветков лабазника вязолистного сибирского региона и республики Дагестан
Ирина Дементьевна Зыкова1, Лилия Викторовна Наймушина1, Расул Закирович Гасанов2 ('Сибирский федеральный университет, Красноярск, ректор - акад. РАН, д.б.н., проф. Е.А. Ваганов, кафедра химии, зав. - д.х.н., проф. А.Г. Аншиц; кафедра технологии и организации общественного питания, зав. - д.п.н., проф. Т.Л. Камоза; 2Прикаспийский институт биологических ресурсов Дагестанского научного центра РАН, директор - член-корр. РАН, д.б.н., проф. М-Р.Д. Магомедов)
Резюме. Методом хромато-масс-спектрометрии исследован компонентный состав эфирного масла цветков лабазника вязолистного из Сибири и Республики Дагестан. Сравнительный анализ показал, что качественный состав масла практически не зависит от климатических условий и географии произрастания растения. Выявлено, что состав масел исследуемой части растения представлен в основном кислородсодержащими соединениями и углеводородами. Отмечено повышенное содержание кислородсодержащих соединений в составе эфирного масла цветков лабазника вязолистного из Республики Дегестан. Доминирующим компонентом обоих образцов масла является хамазулен.
Ключевые слова: Filipendula Ulmaria (L) Maхim, цветки, эфирное масло, компонентный состав, хромато-масс-спектрометрия.
comparative analysis of component composition of essential oil from flowers
OF FILIPENDULA ULMARIA L. OF SIBERIAN REGION AND republic OF DAGESTAN
I.D. Zykova1, L.V. Naimuschina1, R.Z. Gasanov2 ('Siberian Federal University, Krasnoyarsk, Russia; 2Caspian institute of biological resources, Makhachkala, Republic of Dagestan)
Summary. By the method of chromatography-mass-spectrometry the component composition of essential oil of flowers of Filipendula Ulmaria from Siberia and the Republic of Dagestan has been investigated. The comparative analysis showed that the qualitative composition of the oil is almost not dependent on geography and climate of plant growth. Revealed that the composition of the oils of studied plants was represented mainly by oxygen-containing compounds and hydrocarbons. Noted the high content of oxygen-containing compounds in the essential oil of flower of Filipendula Ulmaria from Degestan Republic. The dominant component of the both samples of oil is chamazulene.
Key words: Filipendula Ulmaria (L) Maхim, flowers, essential oil, component composition, chromatography-mass-spectrometry.
Цветки лабазника вязолистного (FШpendula Ulmaria (Ь) Maхim) издавна используются в народной медицине многих стран мира. В Российской Федерации и странах Западной Европы настои и отвары на их основе применяют как общеукрепляющее, диуретическое, противогеморройное, антиспастическое и вяжущее средство; в Белоруссии - при злокачественных опухолях и экземе. Отвар оказывает противовоспалительное, противоязвенное, седативное действие, повышает детоксикационную функцию печени, ускоряет регенерацию кожи и тканей желудка [7]. Спиртовый экстракт из цветков F.ulmaria обладает угнетающими ЦНС свойствами, снижает сосудистую проницаемость, оказывает предупреждающее действие в отношении образования экспериментальных эрозий и язв желудка [1,5]. Предполагается, что все вышеуказанные свойства обусловлены действием флавонои-дов, содержащихся в цветках F. ulmaria [6].
Есть мнение, что и эфирное масло цветков лабазника вязолистного содержит биологически активные вещества, определяющие фармакологическую активность растения. Однако существует множество исследований, указывающих на то, что климатические условия и география произрастания какого-либо эфироноса могут существенно влиять на компонентную вариативность эфирного масла и соответственно изменять его фармакологическое действие. В связи
с этим представляет интерес изучение состава химических соединений эфирного масла цветков F. ulmaria, произрастающей в различных климатических зонах.
Целью данной работы является сравнительное исследование компонентного состава эфирного масла цветков лабазника вязолистного, произрастающего в Сибирском регионе и Республике Дагестан, методом хромато-масс-спектрометрии.
Материалы и методы
В работе использовали цветки F.ulmaria, собранные в фазу цветения растения в Березовском районе Красноярского края, и цветки F.ulmaria, собранные в фазу цветения растения в окрестностях Гунибской экспериментальной базы (1650-2000 м над уровнем моря) Дагестанского научного центра РАН. Сырьё сушили воздушно-теневым способом.
Эфирное масло исследуемых образцов получали из воздушно-сухого сырья методом гидродистилляции в течение не менее 10 ч. Хромато-масс-спектрометрический анализ проводили на хроматографе Agilent Technologies 7890 А с квадрупольным масс-спектрометром MSD 5975 С в качестве детектора. Колонка кварцевая HP-5 (сополимер 5%-дифенил - 95%-диметилсилоксан) с внутренним диаметром 0,25 мм.