УДК 619:636.93.55
ТИМУСНЫЕ ТЕЛЬЦА В ОРГАНЕ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
Усенко В.И. - д.б.н., зав. кафедрой; Константинова И.С., Булатова Э.Н.
ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел. (843) 273-9657
Ключевые слова: морфология, тимус, тельца Гассаля, пушные звери, биологически активные вещества.
Key words: morphology, thymus, Gassal corpuscles, fur animals, biologically active substances.
Эндокринная функция в тимусе формируется в эмбриогенезе раньше, чем лимфопоэтическая. Объединение этих функций в органе происходит еще до рождения особи. Окончательное формирование долек с дифференциацией их на корковое и мозговое вещество, а также образование в мозговом веществе тимусных телец происходит в пренатальном онтогенезе (1, 5). В постнатальном онтогенезе при
различных функциональных состояниях тимуса отмечается увеличение количества телец Гассаля с возрастанием в них ШИК-положительного вещества, что является свидетельством гуморальной функции этих
структур (2, 3, 4).
Целью проведенного исследования являлось изучение особенностей микроструктуры тимуса контрольных и подопытных пушных зверей, а также тимусных телец в органе, их численность и состояние после применения биологически активных веществ на фоне общих морфологических изменений тимуса.
Материалы и методы. Тимус для морфологических исследований был получен от клинически здоровых самок соболя после их убоя, который проводился в соответствии с правилами использования экспериментальных животных. Предварительно по принципу аналогов (пол, возраст, живая масса, физиологическое состояние) были сформированы 6 групп самок пушных зверей (5 подопытных и контрольная) по 6 животных в каждой из них. Исследовалось индивидуальное, сочетанное и комплексное применение биологически активных веществ на структуру тимуса. В качестве исследуемых биологически активных веществ (БАВ) использовались сывороточный гонадотропин (1 группа), тималин (2 группа), левотироксин натрия (3 группа), тималин+левотироксин натрия (4 группа), сывороточный гонадотропин + тималин + левотироксин натрия (5 группа). Сывороточный гонадотропин вводили в дозе 5 МЕ на 100 г живой массы, тималин - в дозе 0,5 мг однократно внутримышечно после разведения в 1 мл стерильного
физраствора, левотироксин натрия - 5 мкг задавали вместе с уменьшенной порцией корма. В контрольной группе стерильный физраствор вводили в дозе 1 мл. Продолжительность опытного периода составляла 6 суток. Микроструктура тимуса была изучена после применения обзорных и специальных гистологических, гистохимических и морфометрических методик исследования. В дольках тимуса в условной единице площади среза определяли видовой состав и численность клеток тимуса, ядерноцитоплазматическое отношение (ЯЦО). Дифференциацию тимусных телец осуществляли согласно M. Raica (2006). Статистический анализ проводился с помощью программы Microsoft office Excel-2003.
Результаты исследований и их обсуждение. Тимус контрольных соболей в период активной половой функции у самок сохранял дольчатое строение. Основными клетками тимуса являлись элементы лимфоидного ряда, включающие различные типы клеток и эпителиоретикулоциты. Количество лимфоцитов в тимусе соболя в активный репродуктивный период составляет более 70%. Из других постоянно встречающихся клеток в органе выделяются макрофаги, тканевые базофилы, плазмоциты и эозинофилы. Среди лимфоидных элементов выделяли лимфобласты, большие, средние и малые (светлые и темные) лимфоциты. Их диаметр соответственно равнялся 16,5 ± 0,3 мкм; 12,3 ± 0,4; 9,6 ± 0,3; 5,4 ± 0,2 (светлые) и 4,3 ± 0,1 (темные) мкм, а ЯЦО - 0,7; 0,8; 1,1; 1,8 и 1,6. Диаметр плазмоцитов составлял 9,9 ± 0,3 мкм, а ЯЦО - 0,7. Размер
эпителиоретикулоцитов мозгового вещества превышал таковой в корковом веществе долек, в котором наблюдалась делимфатизация, вследствие чего граница с мозговым веществом слабо просматривалась. В мозговом веществе выявляли до трех телец Гассаля, которые были образованы продолговатыми и веретеновидными клетками с крупным ядром и слабо ацидофильной цитоплазмой. Среди них чаще всего преобладали молодые и зрелые тельца. Молодые тельца имели выраженные дегенеративные изменения в эпителиоцитах, наблюдалось формирование полостей, где выделялись продукты распада клеток и деструктивные эозинофилы. В зрелых тельцах наблюдалось образование кератинового ядра в составе тельца.
После введения сывороточного гонадотропина самкам соболя тимус сохранял дольчатое строение, а размер долек был средним. В большинстве долек корковое и мозговое вещество не имело четкого разграничения между собой и отмечалось обеднение клетками лимфоидного ряда как коркового, так и мозгового вещества. По сравнению с контролем снижалось количество лимфоцитов на условную единицу площади среза долек, прежде всего за счет лимфобластов, повышалось количество макрофагов, тканевых базофилов и деструктивных апоптозных клеточных элементов. Тканевые базофилы имели небольшое количество гранул в цитоплазме, дегранулировали. В мозговом веществе отмечали присутствие
единичных либо юных телец Гассаля, образованных из скопления двухтрех светлых эпителиоретикулоцитов, либо молодых телец с выраженными дегенеративными изменениями в эпителиоретикулоцитах. В некоторых дольках телец Гассаля не обнаруживали. Развитие и функциональное состояние кровеносной системы долек в целом характеризовалось умеренным кровенаполнением сосудов микроциркуляторного русла.
Тимус пушных зверей после введения тималина характеризовался четким разделением долек на корковое и мозговое вещество. В основном выделялись крупные и средние по размеру дольки. Корковое вещество в дольках было плотно заполнено лимфоцитами и на условную единицу площади среза, по сравнению с контролем, отмечалось большее их количество. Площадь среза мозгового вещества возрастала, и в нем отмечали усиление процесса миграции лимфоцитов из паренхимы в сосуды. В мозговом веществе обнаруживали два-четыре тимусных тельца различной структурной организации. Чаще всего тельца относились к молодым с содержанием в полости эпителиоретикулоцитов клеточного детрита и лимфоцитов, но выявлялись и юные на стадии формирования, а также зрелые тельца. Из кровеносных сосудов в паренхиму отмечалась миграция эозинофилов и тканевых базофилов. В мозговом веществе эозинофилы концентрировались вокруг тимусных телец, принимая участие в их формировании, при этом происходила дегрануляция клеток. Периваскулярно располагались темные недегранулированные тканевые базофилы, в паренхиме - светлые частично или полностью дегранулированные клетки. В мозговом веществе возрастало количество эпителиоретикулоцитов, эозинофилов и тканевых базофилов на единицу условной площади среза. Сосудистая реакция в органе усиливалась, наблюдалось сильное кровенаполнение как междольковых артерий и вен, так и сосудов микроциркуляторного русла.
После введения пушным зверям левотироксина натрия дольчатость в тимусе сохранялась, а размер долек был крупным или средним. В корковом веществе отмечались очаги делимфатизации, вследствие чего в некоторых дольках граница между корковым и мозговым веществом становилась неразличимой. В мозговом веществе выявляли 2-3 тимусных тельца. Чаще это были юные из нескольких клеток тельца на стадии формирования, но выделялись и единичные структурно оформленные молодые тельца с клеточным детритом в полости тельца. В мозговом веществе увеличивалось количество эозинофилов и тканевых базофилов на условную единицу площади среза. Тканевые базофилы были частично или полностью дегранулированы. В некоторых дольках в мозговом веществе наблюдали полнокровие сосудов, отечность и эритродиапедез.
При сочетанном применении тималина и левотироксина натрия дольчатость органа была сохранена, а размер долек не имел достоверных
различий по сравнению с индивидуальным применением этих биологически активных веществ. В корковом веществе отмечалось снижение численности лимфоцитов на единицу условной площади среза долек. Количество тимусных телец достигало трех-четырех в дольке. Все они, как правило, относились к зрелым, имели крупные и очень крупные размеры с ШИК-положительным веществом в центральной части телец. Отдельные из телец можно было классифицировать как стареющие, так как они имели признаки разрушения кератинового ядра. Гемодинамика в дольках и междольковой соединительной ткани характеризовалась функциональным напряжением в виде полнокровия сосудов, в отдельных дольках в мозговом веществе отмечался эритродиапедез.
При комплексном применении биологически активных веществ пушным зверям дольки тимуса имели крупные и средние размеры. В дольках четкого разделения на корковое и мозговое вещество не отмечалось. В мозговом веществе долек происходило уменьшение численности лимфоцитов в условной единице площади среза и обнаруживали 2-3 молодых или зрелых тимусных тельца крупных размеров, которые содержали в составе дегранулированные эозинофилы. Отдельные из стареющих тимусных телец содержали в аморфном веществе до 20-ти эозинофилов с признаками их дегрануляции. В паренхиме мозгового вещества обнаруживались малодифференцированные эозинофилы на стадии миелоцитов и метамиелоцитов. Гемодинамика в органе характеризовалась напряжением, что сопровождалось полнокровием сосудов.
Заключение. Таким образом, численность, размеры и состояние телец Гассаля в дольках тимуса самок пушных зверей в период активной репродуктивной функции зависят от экзогенного влияния биологически активных веществ. Сывороточный гонадотропин тормозит образование и развитие телец Гассаля в дольках, левотироксин натрия в слабой степени влияет на образование телец, тималин проявляет активное стимулирующее действие на тимус, сопровождаемое умеренным влиянием на процесс образования и формирования зрелых телец Гассаля. Что касается сочетанного и комплексного применения биологически активных веществ, в схемы которых входил тималин, то наиболее резкая реакция со стороны тимуса отмечается при комплексном введении БАВ. В мозговом веществе долек появляются очень крупные зрелые или стареющие тимусные тельца, содержащие множество дегранулированных эозинофилов, а в паренхиме выявляются очаги пролиферации этих гранулоцитов.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Бабаева, Ж.Н. Размеры вилочковой железы у детей грудного возраста / Ж.Н. Бабаева, О.А. Споров // Вопросы охраны материнства и детства. - 1987. -Т. 32, №8. - С.39-42. 2. Гриневич, Ю.А. Иммунобиология гормонов тимуса / Ю.А. Гриневич, В.Ф. Чеботарев. -Киев : Здоровье, 1989. -154 с. 3. Ломакин, М.С. Гормоны и другие
биологически активные вещества тимуса / М.С. Ломакин, Н.Г. Арцимович // Иммунология. - 1992. -№1.- С. 10-15. 4. Серебров, В.Ю. Эндокринная функция тимуса / В.Ю. Серебров, С.Л. Стуканов. - Томск : Изд-во Томского ун-та, 1993. -128 с. 5. Хлыстова, З.С. Время проявления эндокринной и лимфопоэтической функции тимуса человека в эмбриогенезе / З.С. Хлыстова, И.И. Калинина, С.П. Шмелева, О.П. Рябчиков // Бюлл. эксп. биол. и мед. - 2000.- Т.130, №10. - С. 453-456. 6. Raica, M. Structural heterogeneity and immunohistochemical profile of Hassall corpuscles in normal human thymus / M. Raica, S. Encica, A. Motoc // Ann Anat. 2006. -Vol. 188(4). - P. 345-352.
ТИМУСНЫЕ ТЕЛЬЦА В ОРГАНЕ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
Усенко В.И., Константинова И.С., Булатова Э.Н.
Резюме
Формирование телец Гассаля в дольках тимуса самок соболя в активный репродуктивный период, их количество, размер и состояние зависят от введения в организм экзогенных биологически активных веществ (БАВ). Тималин оказывает умеренное воздействие на формирование молодых телец Гассаля. Схемы совместного применения тималина с другими препаратами (левотироксином натрия и сывороточным гонадотропином) приводят к резкому увеличению размера тимусных телец с включением в их состав лимфоцитов и дегранулированных эозинофилов и появлению в мозговом веществе долек очагов пролиферации эозинофилов при комплексном применении БАВ.
THYMUS BODIES IN THE FUR ANIMALS ORGAN AFTER USING OF BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCES
Usenko V.I., Konstantinova I.S., Bulatova E.N.
Summary
Formation of Gassal corpuscles in the sable females' lobules of thymus at the active reproductive period, there size and condition depends on the introduction of exogenic biologically active substances ( BAS). Thymalinum has a moderate influence on Gassal young corpuscles formation. The outline of thymalinum combined application with other preparations ( levothyroxine sodium and serum gonadotropin) lead to sharp increase of thymus corpuscles including into them the lymphocytes and degranulated eozonophyls and appearing in modullary substance of the lobules the eozonophyls proliferation niduses at complex BAS application.