CC BY
44
BicHUK ,fl,mnponeTpoBCBKoro ymBepcmeiy. Bionoria, eKonorifl. Visnik Dnipropetrovs'kogo universitetu. Seria Biologia, ekologia Visnyk of Dnepropetrovsk University. Biology, ecology.
Visn. Dnipropetr. Univ. Ser. Biol. Ekol. 2016. 24(1), 119-123.
doi:10.15421/011614
ISSN 2310-0842 print ISSN 2312-301X online
www.ecology.dp.ua
УДК 582.284.3:577.1
Вплив сульфату та цитрату м1д1 на склад б1омаси лжарського гриба Trametes versicolor (Polyporales, Polyporaceae)
Г.А. Аль-Мааш1, Н.А. Бiсько1, А.М. Остапчук2
Институт ботатки мет М.Г. Холодного НАН Украти, Кшв, Украта 21нститут мжробюлогп та вiрусологil MeHi Д.К. Заболотного НАН Украти, Кшв, Украта
Наведено дат щодо впливу цитрату та сульфату мщ на бюхмчний склад бюмаси цшного лжарського гриба Trametes versicolor (L.) Lloyd, (1920), що зростав на рщкому живильному середовищ1 в умовах глибинно! культури. Результати експеримен-ту свщчать про те, що цитрат та сульфат мщ посилюють синтез бiлкiв за рахунок зменшення вмсту загальних вуглеводiв у бюма-d T. versicolor 353 поршняно гз середовищем без мщ. Обида форми мщ стимулювали накопичення зольних елеменпв у мщели T. versicolor 353 поршняно з контрольним середовищем. Сульфат мщ негативно впливае на накопичення загальних лшщв вщнос-но середовища без мщ та гз цитратом мщ Суттеве зростання бюмаси T. versicolor 353 у рая додавання в середовище для культи-вування цитрату або сульфату мщ впливало на продуктивтсть синтезу окремих компонента. Цитрат мщ та сульфат мщ (порiв-няно з контрольним середовищем без мщ) збiльшували продуктивнють синтезу сирого протешу в мщели T. versicolor 353 на 94% та 63% вщювщно. Продуктивтсть синтезу вуглеводв зростала на 72% (на середовищ1 гз цитратом мщ) та на 43% (на середовищ1 гз сульфатом мщ) вщносно контрольного дослщу. Амшокислотний аналгз мщелто T. versicolor 353 показав, що додавання цитрату або сульфату мщ не впливало на його яюсний склад. Продуктивн1сть синтезу лшщв збiльшувалась тiльки на середовищ1 1з цитратом цинку (на 57%) вщносно контрольного середовища без мщ. Цитрат мiдi суттево не впливав на жирнокислотний склад м1цел1ю T. versicolor 353 порiвняно з контролем. Сульфат мщ зменшував умiст лшолево! та стимулював накопичення олегново! кислоти.
Ключовi слова: лimди; сирий протегн; амiнокислоти; жирнi кислоти
The effect of citrate and sulfate of copper on the biomass composition of the medicinal mushroom Trametes versicolor (Polyporales, Polyporaceae)
G.A. Al-Maali1, N.A. Bisko1, A.M. Ostapchuk2
'Kholodny Institute of botany NAS of Ukraine, Kyiv, Ukraine 2Zabolotny Institute of Microbiology and Virology NAS of Ukraine, Kyiv, Ukraine
The aim of our research was to study the influence of citrate and sulfate of copper on the biomass composition of the mycelium of the medicinal mushroom Trametes versicolor (L.) Lloyd, (1920) cultivated in a liquid medium. The studied strain of Trametes versicolor 353 was obtained from the Culture Collection of Mushrooms (IBK) from M.G. Kholodny Institute of Botany, National Academy of Sciences of Ukraine. Copper citrate was obtained from the Institute of Nanobiotechnologies and Resource Conservation of Ukraine, Kyiv. In this study we used glucose-peptone-yeast extract medium. Cu2+ (sulfate or citrate form) was added to the medium in concentration 4 mg/L. Mycelium was grown in a submerged culture on a rotary shaker (120 rpm) at 26 °C in 250 ml Erlenmeyer flasks, containing 50 ml of liquid media. The biomass was harvested after 9 days of cultivation in the liquid medium, filtered, washed, dried to a constant weight at 105 °C and weighed. Total nitrogen content (Ntotal) in the mycelium determined by the Kjeldahl method, crude protein content was determined as Ntotal x 6.25. The ash was obtained by the standard method. Total lipids were extracted from undried mycelium by a modified method of Bligh and
1нститут ботатки iMeHi М.Г. Холодного НАН Украти, вул. Терещенювська, 2, Кшв, 01601, Укра1на Kholodny Institute of botany NAS of Ukraine, Tereshchenkivska Str., 2, Kyiv, 01601, Ukraine
1нститут мiкробiологiï та eipymrnai iMeHi Д.К. Заболотного НАН Украти, вул. Академжа Заболотного, 154, Knie, 03680, Ущтна Zabolotny Institute of Microbiology and Virology NAS of Ukraine, Acad. Zabolotny str., 154, Kyiv, 03680, Ukraine Tel +38-067-497-49-20 E-mail: galeb.almaali@gmail.com
Dyer. Amino acid composition was analyzed by high-performance liquid chromatography Agilent 1200 (Agilent technologies, USA). The methyl ethers of fatty acids were determined by gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS) Agilent 6890N/5973 inert. The results of our research demonstrated that sulfates and citrates of copper increased the amount of crude protein on the mycelium of T. versicolor 353. Also both form of copper increased the amount of ash by a third relative to the control medium. At the same time, both forms of copper reduced the amount of total carbohydrates on mycelial biomass. But copper sulfate reduced the amount of total lipids relative to the control medium and medium with copper citrate. It should be noted, that given the significant growth of biomass in both cases, the yield of the same biomass compounds (gram per liter of medium) was raised relative to the control medium. So the yield of total carbohydrates was increased by 72% (on the medium with copper citrate) and 43% (on the medium with copper sulfate) relative to the control medium. The yield of crude protein was raised by 94% (on the medium with copper citrate) and 63% (on the medium with copper sulfate) relative to the control medium. Assay of amino acid composition showed that the quality of crude protein didn't change. Thus the yield of essential amino acids was increased in conjunction with the yield of crude protein. The yield of total lipids increased only on the medium with copper citrate (by 57%) and in this case the content of fatty acids was unchanged significantly relative to the control medium. But sulfate of copper decreased the amount of cis-linoleic acids by 7%, in return the amount of oleic acid was increased relative to the control medium without copper.
Keywords: lipids; crude protein; amino acids; fatty acids Вступ
Гриби роду Trametes Fr. (Basidiomycota) мають довгу icropiK) використання у традищйнш схДднш медицин для лДкування та профшакгики захворювань верхнДх дихаль-них шляхДв, сечовивДдно! та травно! систем. СучаснД дослДдження демонструють, що гриби данного роду мають широке лДкарське застосування, протипухлиннД, гепато-протекторт, атибактерДальт та противiруснi властивосп (Cai et al., 2010; Maehara et al., 2012; Patel, 2012). Цд характеристики пов'язують насамперед i3 рДзними фракцДями полюахаридш i протешш (Standish et al., 2008; Zong et al., 2012; Kuan et al., 2013). БДомасу цих грибДв використову-ють як цшну харчову добавку, що мстить багато мшроелеменпв, незамшних амнокислот i ненасичених жирних кислот, використовують для очищення субстратв вДд ксенобютикДв (Ivanova et al., 2010; Fedotov and Chayka, 2015). До того ж, культуральна рДдина Trametes versicolor (L.) Lloyd, (1920) - джерело бютехнолопчно важливих ферменпв: лаккази та пероксидази.
Сучасне промислове культивування лДкарських кси-лотрофних базидiомiцетiв направлене на збДльшення виходу бiомаси та И окремих компонента, у тому числД бюлопчно активних речовин. Вирошування мщелш базидieвиx грибДв на синтетичних редких живильних середовищах рДзного складу дае можливДсть впливати на синтез бДомаси та И бiосингетичнi властивосп. Окремi автори зазначають, що пДд час культивування деяких видав лДкарських грибДв додавання до живильного сере-довища мiкроелементiв, у тому числД мщ, позитивно впливае на бiосинтез екзо- та ендополiсаxаридiв (Zou et al., 2005; Xiao et al., 2006; Zhi-ling, 2009), синтез лаккази та експресДю вДдповДдних генiв (Soden and Dobsen 2001; Vasina et al., 2015), а також змшюе амшокислотний склад мiцелiю (Zou, 2005). ВДдмгтимо особливу роль мщ у фДзюлогп живлення T. versicolor, пов'язану з тим, що Дони мщ входять в активний центр лаккази. КрДм того, мДдь входить до складу низки ферменпв електро-нотранспортного ланцюга та супероксиддисмутази (Banci, 2013; Kroneck and Sosa Torres, 2015).
Зазвичай у культивуваннД грибДв використовують неоргатчт солД металДв, якД мають низьку хДмДчну чистоту та невисоку бюлопчну активнДсть порДвняно з органДчними сполуками металДв. Перспективт з цього погляду солД карбонових кислот, у тому числД цитрати металДв, дозволенД до використання у харчовДй промис-ловостД. Проте традицшт методи отримання карбокси-
лапв трудомютю та енергозатратн1. 1нтенсивний розвиток нанотехнолопй дав змогу створити низку методав для промислового виробництва цитрапв металв i3 високим ступенем чистоти та бюлопчною доступн1стю (Patent of Ukraine for utility model number 39392). Borysevych and Kaplunenko (2010) вщшчають високу бiолоriчну актив-н1сть цитрапв мегалiв щодо рослинних об'eкгiв, мiкроорганiзмiв i тварин. У дослвдженнях I.I. Бандури (Bandura, 2014) зазначаеться, що комплексне добриво «Аватар-1», яке складаеться iз сумiшi цитратiв рiзних меташв, позитивно впливае на плодоношения грибiв iз роду Pleurotus (Fr.) Р. Kumm.
У попередньому дослiджениi вивчали вплив рiзних концентрацiй цитратiв i сульфатiв металiв (залiзо, марга-нець, мщ та цинк) на ркт мiцелiю T. versicolor 353 на рщкому живильному середовищi (Al-Maali, 2015). Отри-манi результати свiдчать, що серед дослвджених металiв иайбiльший вплив на приркт бiомаси T.versicolor 353 мала мщ>.
Мета нашо! роботи - ощнити вплив цитрату та сульфату мщ на бiохiмiчний склад бiомаси лiкарськоrо гриба T. versicolor.
Матерiал i методи досл1джень
Об'ект дослвдження - штам T. versicolor 353 iз Колекцй' культур шапинкових грибiв Iиституту ботанiки iмеиi М.Г. Холодного НАН Украгни (Buchalo et al., 2011). Штам обрано за результатами скритнгу бютехнолопчно цiниих штамiв T. versicolor, проведеного Л.О. Антоненко (Antonenko, 2013).
Мщелш вирощували 9 даб у глибиииiй культурi (120 об./хв) за температури 26 ± 1 °С у колбах Ерленмейера об'емом 250 мл, що мстили 50 мл живильного середови-ща такого складу (контрольне середовище, г/дм3): глюкоза - 25, пептон - 3, дрщджовий екстракт - 3, K2HPO4 - 1, KH2PO4 - 1, MgSO4^7H2O - 0,25, дистильована вода -1 дм3; pH 6,5 (ГПД). 1нокулюм отримували упродовж п'яти дiб за тих самих умов. 1нокулюм додавали з розра-хунку 10% в!д об'ему живильного середовища. У до-слвджуваних варiаитах до середовища додавали цитрат або сульфат мщ у концентраци 4 мг/л Cu2+, оптимальнiй для накопичення бiомаси цього штаму (Al-Maali, 2015). Цитрат мщ отримано методом аквананотехнологи в Украгнському державному науково-дослщному шституп ианобiотехиологiй та ресурсозбереження при Державному агентста резерву Украгни (Patent of Ukraine for utility
model number 39392). Бюмасу, з1брану на 9-ту добу куль-тивування, фшьтрували, промивали, висушували до постшно!' ваги при 105 °C та зважували. Загальний азот (Ntotal) визначали в абсолютно сухш бiомасi методом К'ельдаля, вмiст сирого протешу в мщели визначали за формулою: Ntotal x 6,25 (Cunniff, 1995). Вмiст золи визначали за стандартною методикою (Cunniff, 1995). Загальн лщди екстрагували iз сиро! бiомаси модифшованим методом Блайа-Даяра (Manirakiza et al., 2001). Кiлькiсть за-гальних вуглеводв визначали за формулою: M = Mb -(Mcp + Mi + Ma), де M - маса загальних вуглеводiв (г), Mb -бiомаса (г), Mcp - маса сирого протешу (г), Ml - маса загальних лшщв (г), Ma - маса золи (г).
Продуктившсть визначали як загальну юльюсть оргащчнох речовини, утворену популящею клiтин штаму T. versicolor 353 на одиницю об'ему живильного середо-вища (Barna, 1997). Амнокислотний склад визначали за допомогою високоефективно! рщинно! хроматографи на хроматограф1 Agilent 1200 (Agilent technologies, USA) (Henderson et al., 2000; Jambor and Molnar-Perl, 2009a, 2009b). Жирнокислотний склад визначали за допомогою газово! хроматограф^' з мас-спектрометр1ею (GC/MS) Agilent 6890N/5973 inert. Метилов1 еф1ри жирних кислот отримували стандартним методом (Christie, 1989).
Дослвдження проводили у трьох повторностях. Дат виражен як середн значення ± похибка. Статистичний аналiз проводили за допомогою програм OriginPro 8.5.1 (Origin-Lab Corportion, USA), виб1рки поршнювали з використанням однофакторного дисперсшного аналiзу. Статистично достов1рною поршняно з контролем вважа-ли р1зницю P < 0,05.
Результата та ix обговорення
Аналiз основних компонент бюмаси мщелш T. versicolor 353, культивованого на середовищ 1з солями мщ в оргаМчнш i неоргащчнш форм1, свщчить про те, що цитрат i сульфат мiдi р1вною мрою впливають на кiлькiсть сирого протешу, загальних вуглеводав i зольшсть мщелш (табл. 1).
Таблиця 1
Вплив цитрату та сульфату мвд1 на ркт та бюх1м1чний склад м1цел1ю T. versicolor 353 у глибиннш культур1 на ГПД середовини
В обох випадках заф1ксовано збшьшення вмюту сирого протешу та золи у бюмаа T. versicolor 353 вщносно
контролю. За да цитрату та сульфату мщ зменшувалась кшьшсть загальних вуглеводав. Зростання вмюту сирого протешу та золи та зменшення кшькосп загальних вуглеводав зумовлен наявшстю у середовищ ютв мщ та не залежать вщ !'х форми (сульфатно!' чи цитратно!'). Внесення у середовище сульфату мщ шпбувало синтез загальних лшщв у бюмаа T. versicolor 353 на 32,6% вщносно контролю. Цитрат мщ не впливав на цей про-цес (табл. 1).
Рашше (Al-Maali, 2015) показано, що на середовищ 1з цитратом мщ загальний вихщ мщелш на одиницю об'ему живильного середовища (продуктившсть) був на 80% бшьшим, нiж у контрольному дослщ У випадку 1з сульфатом мщ продуктившсть за бюмасою збшьшу-валась на 49% вщносно контролю. Продуктивн1сть за окремими компонентами (сирий проте!н, загальт л1тди тощо) теж значно зростала (табл. 1).
За рахунок суттевого приросту бюмаси вих1д загальних вуглеводш на одиницю об'ему середовища за умов додавання цитрату мщ збшьшувався на 71,8% (табл. 1), а за присутносп сульфату мщ - на 42,7% вщносно контролю. Продуктившсть щодо бшка збшьшувалась на 94,0% (цитрат мщ) та на 63,1% (сульфат мщ) пор1вняно з контролем. Незважаючи на суттеве збшьшення бюмаси мщелш T. versicolor 353 на середовищ! 1з сульфатом мщ, вих1д загальних л!пщв на одиницю об'ему середовища був на тому самому ршш, що i в контрольному дослщ (табл. 1). На середовищ1 1з цитратом мщ продуктившсть щодо л!пщв зростала (за рахунок збшьшення бюмаси) на 57,4% вщносно контролю.
Подальш1 досл1дження продемонстрували, що суттеве збшьшення виходу сирого проте!ну не впливае на його якюн1 показники. Амшокислотний склад мщелш T. versicolor 353, культивованого на середовищах 1з цитратом або сульфатом мщ, був щентичним до його складу на контрольному середовищ1 (табл. 2).
Таблиця 2
Амшокислотний склад мщел1ю T. versicolor 353, культивованого на контрольному живильному середовищ! ГПД без мвд1
Амнокислота Частка вщ загально! суми амнокислот, %
Замiннi амнокислоти
L-аланiн 8,48 ± 0,15
L-аргiнiн 7,09 ± 0,27
L-аспарагiнова кислота 10,21 ± 0,12
2,38 ± 0,05
L-глшин 6,99 ± 0,11
L-глутамiнова кислота 7,45 ± 0,17
L-пролiн 7,18 ± 0,25
L-серин 10,61 ± 0,19
L-тирозин 3,02 ± 0,09
^замин ам1нокислоти
L-валiн 4,77 ± 0,09
L-iзолейцин 4,65 ± 0,20
L-лейцин 4,24 ± 0,23
L-лiзин 10,9 ± 0,24
L-метiонiн 0,21 ± 0,07
L-треонiн 6,75 ± 0,07
L-феншаланш 5,05 ± 0,11
Параметры Контроль Цитрат мщ, 4 мг/л Cu2+ Сульфат мщ, 4 мг/л Cu2+
Бюмаса г/л 4,8 ± 0,21 8,6 ± 0,19* 7,1 ± 0,06*
Прирют бюмаси, % до контролю - 79,9* 48,9*
Сирий проте!н, % бюмаси 17,6 ± 0,31 19,0 ± 0,22* 19,3 ± 0,32*
Загальт вуглеводи, % бюмаси 75,0 71,7* 72, 0*
Загальт лтди, % бюмаси 1,3 ± 0,11 1,1 ± 0,03 0,9 ± 0,06*
Зола, % бюмаси 6,1 ± 0,20 8,1 ± 0,28* 7,9 ± 0,21*
Прим1тка: * - достов1рна р1зниця з контрольним дослвдом за P < 0,05.
ЦД дат свДдчать, що вихДд незамДнних амДнокислот на одиницю використаного середовища збДльшуеться зД збДльшенням продуктивностД щодо сирого протешу (на 94,0% на середовищД Дз цитратом мвд, на 63,1% на середовищД Дз сульфатом мвд). ПДд час дослДджень жир-нокислотного складу мщелш T. versicolor 353 на контрольному середовищД ГПД без мвд ДдентифДковано 8 жирних кислот: пентодеканову (15:0), пальмДтинову (C16:0), пальмДтолешову (C16:1), маргаринову (C17:0), стеаринову (C18:0), олешову (C18:1), cis- i trans- форми лДнолево! (C18:2). Частка пальмДтиново!, олешово! та cis-форми лшолево! кислоти складае понад 90% загально! суми жирних кислот. У мщели, культивованому на середовищД Дз сульфатом мвд, не виявлено тДльки trans-форму лДнолево! кислоти, а на середовищД Дз цитратом мвд не виявлено пальмгтоолешово!, маргариново! та trans-форми лДнолево! кислоти (табл. 3).
Таблиця 3
Вплив цитрату та сульфату мвд1 на жирнокислотний склад м1цел1ю T. versicolor 353 у глибиннш культур1 на ГПД середовищ1
Прим1тка: * - достовДрна рДзниця з контрольним варДантом за P < 0,05.
ПевнД змДни стввДдношення основних жирних кислот вДдносно контрольного варДанта дослДду спостерДгали тДльки на середовищД Дз сульфатом мвд. ПорДвняно з контролем, кшькють cis-форми лДнолево! кислоти зменшилась на 7%, натомДсть зростала кДлькДсть олеГново! кислоти (табл. 3). Тобто сшввДдношення мДж полДненасиченими та мононенасиченими жирними кислотами зсувалося у бДк останнДх. На середовищД Дз цитратом мвд жодних змДн у кшькосп превалюючих жирних кислот порДвняно з контролем не спостерДгали.
РДзний вплив цитрату та сульфату мвд на накопи-чення загальних лшвдв та !х жирнокислотний склад можна пояснити роллю супероксиддисмутази у захистД полДненасичених кислот вДд окиснення супероксид-радикалом (Sejfula et al., 2006). Gralla et al. (1991) вказу-ють на те, що Дони мвд активують експресДю генДв супероксиддисмутази у грибних клДтинах.
Таким чином, цитрат мвд значно збДльшуе продук-тивнДсть за загальними лшДдами та суттево не впливае на !х жирнокислотний склад. Додавання до живильного середовища сульфату мвд зменшуе вДдсоткову частку загальних лшвдв у мщели T. versicolor 353 та змДнюе жирнокислотний склад.
Висновки
ОцДнено вплив цитрату та сульфату мвд на синтез ок-ремих компонентов бДомаси T. versicolor 353. Продук-тивнДсть синтезу сирого протешу, загальних вуглеводДв i загальних лшвдв штенсивтше збшьшуеться за дД! цитрату, нДж за дД! сульфату мвд Цитрат мвд сприяе збДль-шенню продуктивносп за сирим проте!ном i загальними лщдами та не впливае на !х якДсний (амДнокислотний та жирнокислотний) склад. Додавання до середовища сульфату мвд шпбуе синтез загальних лшвдв i зменшуе вмДст лДнолево! кислоти у бюмасД T. versicolor 353.
Подяка
Автори вдячнД д-ру бДол. наук професору В.Г. Кап-луненку з Укранського державного науково-дослДдного Днституту нанобютехнологш та ресурсозбереження при Державному агентствД резерву Укра!ни за надання цитрапв мвд використаних у цьому дослДдженД.
Б1бл1ограф1чн1 посилання
Al-Maali, G.A., 2015. The influence of metal citrates obtained by aquananotechnology on growth of the strains of medical macromycetes Ganoderma lucidum 1900 and Trametes versicolor 353. Ukrainian Botanical Journal 72(4), 393-397. Antonenko, L.A., 2013. Biotekhnolohiia otrymmannia biomasy vyshchykh bazydialnykh hrybiv rodu Coriolus [Biotechnology of biomass higher basidiomycetes of the genus Coriolus]. NUHT, Kyiv (in Ukrainian). Banci, L., 2013. Metallomics and the Cell. Springer, Dordrecht. Bandura, I.I., 2014. Udoskonalennja elementiv tehnologii' pro-myslovogo vyrobnyctva i'stivnyh grybiv rodu Pleurotus (Fr.) P. Kumm. [Improvement of technological elements for industrial production of edible mushroom Pleurotus (Fr.) P. Kumm.]. Edelveis, Kyiv (in Ukrainian). Barna, M.M., 1997. Botanika. Terminy. Poniattia. Personalii [Botany. Terms. Concepts. Personality]. Akademia, Kyiv (in Ukrainian).
Borysevych, V.B., Kaplunenko, V.H., 2010. Nanomaterialy v biolohii. Osnovy nanoveterynarii [Nanomaterials in biology. Fundamentals of nanoveterinary medicine]. Avicena, Kyiv (in Ukrainian).
Buchalo, A.S., Mytropolska, N.Y., Mykchaylova, O.B., 2011. Catalogue of the culture collection of mushrooms IBK. Alterpress, Kiev.
Cai, X., Pi, Y., Zhou, X., Tian, L., Qiao, S., Lin, J., 2010. Hepa-toma cell growth inhibition by inducing apoptosis with poly-saccharide isolated from Turkey tail medicinal mushroom, Trametes versicolor (L.: Fr.) Lloyd (Aphyllophoromy-cetideae). Int. J. Med. Mushrooms 12(3), 257-263. Christie, W.W., 1989. Gas chromatography and lipids: A practical guide. Oily Press Ltd, Ayr, Scotland. Cunniff, P., 1995. AOAC Official methods of analysis (16th
ed.). Association of Official Analytical Chemists, Arlighto. Fedotov, O.V., Chayka, A.V., 2015. Destrukcija ksenobiotykiv z vykorystannjam kul'tural'nogo fil'tratu ksylotrofiv [Destruction of xenobiotics by culture filtrate from xylotrophic Basidiomycetes]. Biological Bulletin of Bogdan Chmelnitskiy Melitopol State Pedagogical University 5(3), 55-72 (in Ukrainian). Gralla, E.B., Thiele, D.J., Silar, P., Valentine, J.S., 1991. ACE1, a copper-dependent transcription factor, activates expression of the yeast copper, zinc superoxide dismutase gene. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88(19), 8558-8562.
Жирна кислота Контроль Цитрат мщ, 4 мг/л Cu2+ Сульфат мщ, 4 мг/л Cu2+
Пентодеканова 0,97 ± 0,24 1,01 ± 0,20 0,84 ± 0,13
Пальмгтоолешова 1,32 ± 0,23 0,00* 0,40 ± 0,08*
ПальмДтинова 22,01 ± 1,45 24,41 ± 1,53 25,82 ± 1,99
Маргаринова 0,54 ± 0,17 0,00* 0,41 ± 0,10
cis-Лшолева 67,27 ± 2,56 67,78 ± 2,21 60,32 ± 2,02*
Олешова 3,36 ± 0,87 2,91 ± 0,48 7,46 ± 0,99*
trans-ЛДнолева 0,66 ± 0,41 0,00* 0,00*
Стеаринова 1,74 ± 0,10 1,35 ± 0,29 1,69 ± 0,19
Сума невизначених компонент® 2,13 2,54 3,06
Henderson, J.W., Ricker, R.D., Bidlingmeyer, B.A., Woodward, C., 2000. Rapid, accurate, sensitive, and reproducible HPLC analysis of amino. Agilent Technologies, Technical Note 5980-1193E.
Ivanova, T.S., Bisko, N.A., Barshteyn, V.J., Krupodorova, T.A., 2010. Biologichno-aktyvni rechovyny grybiv viddilu Basidiomycota [Biologically active substances of fungi Basidiomycota]. Problemy Harchuvannja 1(2), 42-47.
Jambor, A., Molnar-Perl, I., 2009a. Amino acid analysis by highperformance liquid chromatography after derivatization with 9-fluorenylmethyloxycarbonyl chloride. Literature overview and further study. J. Chromatogr. A 1216, 3064-3077.
Jambor, A., Molnar-Perl, I., 2009b. Quantitation of amino acids in plasma by high performance liquid chromatography: Simultaneous deproteinization and derivatization with 9-fluorenylmethyloxycarbonyl chloride. J. Chromatogr. A 1216, 6218-6223.
Kroneck, P.M.H., Sosa Torres M.E. (eds.), 2015. Sustaining life on planet earth: Metalloenzymes mastering dioxygen and other chewy gases. Springer International Publishing, Switzerland.
Kuan, Y.C., Wu, Y.J., Hung, C.L., Sheu, F., 2013. Trametes versicolor protein YZP activates regulatory B lymphocytes-gene identification through de novo assembly and function analysis in a murine acute colitis model. PLoS ONE 8(9), e72422.
Maehara, Y., Tsujitani, S., Saeki, H., Oki, E., Yoshinaga, K., Emi, Y., Baba, H., 2012. Biological mechanism and clinical effect of protein-bound polysaccharide K (Krestin®): Review of development and future perspectives. Surg. Today 42(1), 8-28.
Manirakiza, P., Covaci, A., Schepens, P., 2001. Comparative study on total lipid determination using soxhlet, roese-gottlieb, bligh and dyer, and modified bligh and dyer extraction methods. J. Food Compos. Anal. 14, 93-100.
Patel, S., Goyal, A., 2012. Recent developments in mushrooms as anti-cancer therapeutics: A review. 3 Biotech. 2(1), 1-15.
Sejfulla, R.D., Rozhkova, E.A., Kim, E.K., 2009. Antioksidanty [Antioxidants]. Jeksperimental'naja i Klinicheskaja Farma-kologija 72(3), 60-64.
Soden, D.M., Dobson, A.D., 2001. Differential regulation of laccase gene expression in Pleurotus sajor-caju. Microbiology 147(7), 1755-1763.
Standish, L.J., Wenner, C.A., Sweet, E.S., Bridge, C., Nelson, A., Martzen, M., Torkelson, C., 2008. Trametes versicolor mushroom immune therapy in breast cancer. J. Soc. Integr. Oncol. 6(3), 122-128.
Vasina, D.V., Mustafaev, O.N., Moiseenko, K.V., Sadovskaya, N.S., Glazunova, O.A., Tyurin, A.A., Koroleva, O.V., 2015. The Trametes hirsuta 072 laccase multigene family: Genes identification and transcriptional analysis under copper ions induction. Biochimie 116, 154-164.
Xiao, J.H., Chen, D.X., Wan, W.H., Hu, X.J., Qi, Y., Liang, Z.Q., 2006. Enhanced simultaneous production of mycelia and intracellular polysaccharide in submerged cultivation of Cordyceps jiangxiensis using desirability functions. Process Biochem. 41(8), 1887-1893.
Zhi-Ling, C., 2009. Effect of some trace elements and vitamins on contents of polysaccharide and acid of Ganoderma lucidum. Journal of Anhui Agricultural Sciences 5, 078.
Zong, A., Cao, H., Wang, F., 2012. Anticancer polysaccharides from natural resources: A review of recent research. Carbo-hydr. Polym. 90(4), 1395-1410.
Zou, X., 2005. Effects of Zn supplementation on the growth, amino acid composition, polysaccharide yields and anti-tumour activity of Agaricus brasiliensis. World J. Microbiol. Biotechnol. 21(3), 261-264.
Hadiümna do редкоnегlí 10.03.2016
