CC BY
45
связь СОДЕРЖАНИЯ ФИ1 у КРЫС ЛИНИИ WISTAR С ВЫЯВ] ФАКТОРОМ ПРЕДПОЧТЕНИЯ АЛКОГО! ПРИ СВОБОДНОМ ВЫБОРЕ «ЭТАНОЛ-ВОД)
УДК 577.151.121:616.092.9 Поступила 2.09.2016 г.
Л.В. Подорольская, к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории защитных систем i им. проф. Б.А. Кудряшова;
К.А. Никольская, д.б.н., ведущий научный сотрудник кафедры высшей нервной деятельности Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, 119991, Ленинские Горы,
Цель исследования — изучение уровня фибриногена в популяции крыс линии Wistar в зависимости от выявленн животных аномального признака — предпочтения этанола (алкоголя) при свободном выборе «вода-этанол».
Материалы и методы. Работа выполнена на 240 крысах-самцах линии Wistar с массой тела 250-350 г. Тестирование проводили в течение 7 дней по методике свободного выбора между 10% этанолом и водой. Были сформированы 3 группы животных: крысы, полностью отвергающие этанол (Вотв) — 50%; особи, предпочитающие этанол (Впр) — 24%; животные, потребляющие, но не предпочитающие этанол (Внпр) — 26%. В крови крыс всех групп определяли уровень фибриногена тромбиновым методом и активность процесса фибринолиза методом определения времени лизиса эуглобулиновой фракции плазмы крови (ВЛЭФ).
Результаты. Активность фибринолиза по методу ВЛЭФ значительно варьировала и была самой низкой в группе Впр (210±22 мин) и самой высокой в группе Вотв (142±14 мин). Распределение фибриногена по уровням показало, что у 52-67% крыс отмечались средние значения (3,3-5,6 г/л), подтверждая стабильность этого параметра у всех животных. Различия в сформированных группах отмечались в зонах малых и высоких концентраций фибриногена. Наибольшая разница наблюдалась между группами Вотв (4,1±0,4 г/л) и Впр (6,8±0,6 г/л).
Заключение. Несмотря на большой разброс уровней фибриногена в популяции крыс линии Wistar, ядро эначений во всех экспериментальных группах располагается в области средних величин (3,3-5,6 г/л). Различия касаются малых и высоких значений. У животных группы Впр установлен самый высокий уровень фибриногена. Сочетание высокого уровня фибриногена и низкого фибринолиза — признак скрытой патологии (предпочтение алкоголя) или ее начальной стадии.
Ключевые слова: фибриноген; фибринолиз; предпочтение этанола.
Как цитировать: Podorolskaya L.V., Nikolskaya K.A. Correlation between fibrinogen content and alcohol preference factor revealed in the population of wistar rats with free "ethanol-water" choice. Sovremennye tehnologii v medicine 2016; 8(4): 313-315.
English
Correlation Between Fibrinogen Content and Alcohol Preference Factor Revealed in the Population of Wistar Rats with Free "Ethanol-Water" Choice
L.V. Podorolskaya, PhD, Senior Researcher, Laboratory of Protective Blood Systems named after Professor B.A. Kudriashov;
K.A. Nikolskaya, DSc, Leading Researcher, Department of Higher Nervous Activity Lomonosov Moscow State University, 1/12 Leninskie Gory, Moscow, 119991, Russian Federation
The aim of the investigation was to study fibrinogen level in the population of Wistar rats depending on the revealed in some animals abnormal sign of ethanol (alcohol) preference in conditions of free "water-ethanol" choice.
Materials and Methods. The study was carried out on 240 male Wistar rats with body weight of 250-350 g. Testing was performed during 7 days using the method of free choice between 10% ethanol and water. The animals were divided into three groups: the rats completely rejecting ethanol (Vrej) — 50%; species preferring ethanol (Vpr) — 24%; animals consuming but not preferring ethanol (Vnpr) — 26%. Fibrinogen level was measured in the blood of rats from all groups using thrombin method and fibrinolytic activity was assessed by plasma euglobulin lysis time test (PELT).
Для контактов: Подорольская Лидия Васильевна, e-mail: tnserb@mail.ru
Results. Fibrinolytic activity, according to PELT method, varied significantly and was the lowest in group Vpr (210±22 min) and the highest in group Vrej (142±14 min). Fibrinogen distribution among the levels showed that in 52-67% of rats mean values (3.3-5.6 g/l) were noted proving the parameter stability in all the animals. The differences in the formed groups were in the zones of low and high fibrinogen concentration. The most essential difference was between groups Vrej (4.1±0.4 g/l) and Vpr (6.8±0.6 g/l).
Conclusion. In spite of the big range of fibrinogen values in the population of Wistar rats, the core of values in all test groups was formed in the area of mean values (3.3-5.6 g/l). The differences concerned low and high values. The animals from group Vpr were found to have the highest fibrinogen level. A combination of high fibrinogen level and low fibrinolysis is a sign of underlying pathology (alcohol preference) or its initial stage.
Key words: fibrinogen; fibrinolysis; ethanol preference.
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИЙ
Фибриноген — белок системы гемостаза, обладающий большой способностью к молекулярным модификациям, генетическим полиморфизмом, что является материальной основой вовлекаемости данного белка в различные физиологические и патологические процессы [1] и значительного колебания его уровня в крови в норме и при патологии. Общеизвестно участие фибриногена в процессах воспаления [2], канцерогенеза [3], развития сердечно-сосудистых [4] и почечных заболеваний [5] и др. Однако мало изучена взаимосвязь свойств фибриногена и склонности к алкоголизму [6], практически отсутствуют популяционные исследования с анализом данного фактора.
Цель исследования — изучение уровня фибриногена в популяции крыс линии Wistar в зависимости от выявленного у части животных аномального признака — предпочтения этанола при свободном выборе «вода-этанол».
Материалы и методы. Работа выполнена на крысах-самцах линии Wistar (п=240) массой тела 250-350 г Исследование полностью соответствует этическим принципам, установленным Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (принятой в Страсбурге 18.03.1986 г и подтвержденной в Страсбурге 15.06.2006 г) и одобрено Этическим комитетом Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова.
Тестирование на исходное отношение к этанолу проводилось в течение 7 дней по методике свободного выбора между 10% раствором этанола и водой. По показателю средней доли раствора этанола в общем объеме потребляемой за сутки жидкости (Ралк) крыс разделили на 3 группы: исходно отвергающих этанол (Вотв, Ралк <0,1); потребляющих, но не предпочитающих этанол (Внпр, 0,1<Ралк<0,5); предпочитающих этанол (Впр, Ралк >0,5). Кровь брали из яремной вены и определяли в ней биохимические показатели: содержание фибриногена тромбиновым методом Лазара в модификации Г.В. Андреенко и время лизиса эуглобулиновой фракции плазмы крови (ВЛЭФ) по Ниверовскому. Оба метода очень чувствительны к патологическим изменениям и широко употребимы как в клинических исследованиях, так и в эксперименте.
Результаты и обсуждение. По результатам определения предпочтения или непредпочтения алкоголя
животные разделились следующим образом: отвергающих (Вотв) оказалось 50%, предпочитающих (Впр) — 24%, непредпочитающих (Внпр) — 26%.
Определение фибринолитического параметра ВЛЭФ показало, что он также неоднороден: 40% крыс имели средние значения ВЛЭФ (60-100 мин), 37% — низкие (4-55 мин) и 23% — высокие (120-300 мин). Наличие фактора предпочтения алкоголя сопровождалось более высокими значениями ВЛЭФ (см. таблицу), т.е. появление аномального признака у части крыс в популяции нормальных животных произошло одновременно с увеличением значения показателя ВЛЭФ у таких животных, что означало торможение фибринолиза. Это является неблагоприятным для особей популяции фактором, ослабляющим противо-тромботическую, фибринолитическую защиту.
Фибриногену был присущ еще больший размах концентраций в популяции — 0,6-8,1 г/л и более высокий уровень в плазме в норме (5,2±0,6 г/л). Распределение фибриногена по уровням (низкий, средний, высокий) у животных 3 экспериментальных групп и общей популяции показывает (см. таблицу), что большинство крыс (52,5-67,1%) имели средние значения фибриногена (3,3-5,6 г/л), и это демонстрирует стабильность биомолекулярных превращений данного белка в популяции крыс Wistar. Однако в общей популяции довольно много животных (28,1%) имели высокий уровень фибриногена (5,7-8,1 г/л), отчасти объясняющий повышенные средние значения этого белка в популяции. Как видно, группы существенно различались в области малых и высоких значений фибриногена. Применяемый в работе функциональный метод определения фибриногена указывает на структурно-функциональные особенности его молекул как одну из возможных причин этих различий. Наибольшая разница наблюдалась между группами Вотв и Впр. У крыс, отвергающих этанол, высокий уровень фибриногена был всего у 10,2% особей, в то время как в группе предпочитающих — у 41,8%; наоборот, низкие значения фибриногена у крыс Вотв были в 22,3% случаев, а у Впр — в 5,7%.
Таким образом, присутствие фактора предпочтения алкоголя сопровождалось одновременным увеличением уровня фибриногена и, как указывалось ранее, подавлением фибринолиза (повышением значений ВЛЭФ), что является негативным сдвигом в функцио-
/////////////////////^^^^
314 СТМ J 2016 — ТОМ 8, №4 Л.В. Подорольская, К.А. Никольская
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
Распределение крыс линии Wistar с выявленным отношением к алкоголю в зависимости от уровня фибриногена, %
Уровень фибриногена Средняя ВЛЭФ, мин (M±m)
Группы низкий (0,6-3,2 г/л) средний (3,3-5,6 г/л) высокий (5,7-8,1 г/л) абсолютная величина, г/л (M±m)
Общая популяция 15,5 56,4 28,1 5,2±0,7 181 ±19
Внпр 12,2 61,5 26,3 4,9±0,5 172±17
Вотв 22,3 67,1 10,2 4,1 ±0,4 142±14
Впр 5,7; р=0,015 52,5; р=0,065 41,8; р=0,009 6,8±0,6; р=0,04 210±22; р=0,006
Примечание: р — статистическая значимость различий значений между группами Вотв и Впр.
нировании противосвертывающих механизмов и способствует предтромбозу. Предпочтение этанола — это ненужный, бесполезный для популяции феномен, он свидетельствует скорее всего о неблагополучии некоторой части животных, наличии скрытых аномальных процессов, приводящих к выбору этанола. С позиций медицины наиболее опасен рост значений фибриногена, особенно в группе животных Впр. Однако патологический сдвиг формирует, как правило, не одно, а кластер изменений. В таблице показан уровень фибриногена в связи, во-первых, с уровнем фибрино-лиза, во-вторых, в связи с отношением к алкоголю. Видно, что наиболее патогенной зоной является сочетание низкого фибринолиза (высокие значения ВЛЭФ) и высокого уровня фибриногена. Именно у таких животных и проявился аномальный признак — предпочтение этанола.
Заключение. Крысы линии Wistar характеризуются большим разбросом уровня фибриногена (0,6-8,1 г/л), однако в большинстве (57%) имеют усредненный уровень данного белка (3,3-5,6 г/л). Присутствие факта предпочтения этанола сопровождается наиболее высокими значениями фибриногена. Сочетание признаков предпочтения этанола и низкого фибринолиза — признак скрытой патологии (предпочтение алкоголя или ее начальной стадии.
Финансирование исследования и конфликт ин-
тересов. Исследование не финансировалось какими-либо источниками, и конфликты интересов, связанные с данным исследованием, отсутствуют
Литература
1. Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. Казань, 2000.
2. Szaba F.M., Smiley S.T. Roles for thrombin and fibrinogen in cytokine/chemokine production and macrophage adhesion in vivo. Blood 2002, 99(3): 1053-1059.
3. Wong Y., Lin H., Shoo N., Tan B., Song Q., Jio K., Cheng Y. The clinical significance of preoperative plasma fibrinogen level and platelet count in resectable scophageal cell carcinoma. World journal of surgical oncology 2015, 22(13): 157-159.
4. Mahmud E., Behnamfar O., Lin F., Reeves R., Patel M., Ang L. Elevated serum fibrinogen is associated with 12-month major adverse cardiovascular events following percutaneous coronary intervention. J Am Coll Cardiol 2016; 67(21): 25562557.
5. Подорольская Л.В., Андреенко Г.В., Полянцева Л.Р., Бумблите И.Д. Фибринолитическая активность мочи при хроническом гломерулонефрите и амилоидозе. Вопросы медицинской химии 1999; 2: 158-165.
6. Arranz S., Cliva-Blanch G., Valderas-Martinez P., Medina-Remon A., Lamuela-Raventos K.M., Estruch R. Wine beer, alocohol and polyphenols on cardiovascular dise cancer. Nutrients 2012, 4(7): 759-781.
